2025屆廣東省東莞市南開實驗學校高考壓軸卷生物試卷含解析

2025屆廣東省東莞市南開實驗學校高考壓軸卷生物試卷注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．人體內(nèi)存在由非糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖的糖異生途徑，據(jù)報道，科學家已發(fā)現(xiàn)了參與糖異生的一種關鍵性酶——PEPCKI，其作用過程如下圖所示。下列有關敘述正確的是（）①細胞中PEPCKI濃度過低可能會導致糖尿病的發(fā)生②PEPCKI基因在細胞內(nèi)的活躍表達可能與胰高血糖素的作用有關③抑制PEPCKI乙酰化為治療和預防糖尿病提供可能④血糖濃度過高會抑制糖異生途徑的調(diào)節(jié)方式屬于負反饋調(diào)節(jié)A．①② B．②③ C．②④ D．③④2．真核細胞具有發(fā)達的膜結(jié)構(gòu)，由于膜結(jié)構(gòu)的存在，從而大大提高了細胞生理生化反應的效率。下列有關生物膜及跨膜運輸?shù)恼f法正確的是A．囊泡只能由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向高爾基體運輸B．膜蛋白的形成與核糖體有關，與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體無關C．低滲溶液中線粒體的內(nèi)膜先于外膜破裂D．載體蛋白具有選擇運輸功能是由其結(jié)構(gòu)決定的3．下列關于細胞結(jié)構(gòu)與組成成分的敘述，錯誤的是（）A．細胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和核膜含有的磷脂分子結(jié)構(gòu)相同，但蛋白質(zhì)不同B．鹽酸能使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與健那綠結(jié)合C．細胞核、線粒體和葉綠體中都含有DNA、RNA和蛋白質(zhì)D．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體既參與物質(zhì)加工，又參與物質(zhì)運輸4．某植物的抗性（R）對敏感（r）為顯性，如圖表示甲、乙兩個地區(qū)在T1和T2時間點，RR、Rr和rr的基因型頻率。下列敘述正確的是（）A．甲地區(qū)基因型頻率變化更大，T2時刻產(chǎn)生了新的物種B．T2時刻，乙地區(qū)該植物種群中R基因的頻率約為20%C．突變率不同是導致甲、乙地區(qū)基因型頻率不同的主要原因D．據(jù)圖可知，生物進化的實質(zhì)是種群基因型頻率的改變5．正常情況下，健康人體受到寒冷刺激時，血液內(nèi)（）A．促甲狀腺激素含量增多，甲狀腺激素含量增多B．促甲狀腺激素含量增多，甲狀腺激素含量減少C．促甲狀腺激素含量減少，甲狀腺激素含量增多D．促甲狀腺激素含量減少，甲狀腺激素含量減少6．在高等植物中乙烯的生物合成始于甲硫氨酸，在SAMS、ACS、ACO等酶的共同作用下生成乙烯，這些酶易受植物內(nèi)源激素和外界環(huán)境等多種因素調(diào)控。赤霉素可降低ACO的活性，脫落酸通過調(diào)控ACS誘導乙烯的合成，下列敘述錯誤的是（）A．乙烯可與雙縮脲試劑反應呈現(xiàn)紫色 B．赤霉素可抑制植物體內(nèi)乙烯的合成C．脫落酸可能影響ACS基因的表達過程 D．低溫通過影響酶的活性而抑制乙烯的合成7．艾滋病病毒（HIV）是一種球形的RNA病毒，蛋白質(zhì)外殼內(nèi)部有兩條相同的RNA鏈，HIV侵染人體細胞并繁殖新一代病毒的過程中會形成RNA-DNA雜交分子和雙鏈DNA這兩種中間體，此雙鏈DNA整合到宿主細胞的染色體DNA中，以它為模板合成mRNA和子代單鏈RNA，mRNA作模板合成病毒蛋白。據(jù)此分析下列敘述不正確的是（）A．合成RNA-DNA和雙鏈DNA分別需要逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶等多種酶B．以RNA為模板合成生物大分子的過程包括翻譯和逆轉(zhuǎn)錄C．以mRNA為模板合成的蛋白質(zhì)只有病毒蛋白質(zhì)外殼D．HIV的突變頻率較高其原因是RNA單鏈結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定8．（10分）如圖是有關真核細胞中某一基因的圖示，以下說法正確的是A．圖一所示過程需要圖三中分子的幫助，主要發(fā)生于細胞核中B．作用于圖一中①和③的酶的種類是相同的C．圖二所示過程所需原料是氨基酸D．把圖一中分子放在含14N的培養(yǎng)液中培養(yǎng)兩代，子代DNA中不含有15N的DNA占3/4二、非選擇題9．（10分）β-葡萄糖苷酶是一種存在于微生物中的可水解纖維素的酶，可用于生產(chǎn)燃料乙醇，也可作為洗滌劑的有效成分。某科研小組進行了β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株的分離、鑒定、提純產(chǎn)物等研究。已知七葉靈能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解，其水解產(chǎn)物七葉苷原能和Fe3+作用呈現(xiàn)棕黑色。請回答：（1）為篩選出β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株，應到_____________環(huán)境中取樣，取樣后要在液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其目的是_________________。（2）選擇培養(yǎng)后要初步分離鑒定出目的菌株，請寫出實驗思路：___________________。（3）用接種針挑取棕黑色的菌落用_____________法進一步純化，進而篩選出高產(chǎn)菌株。（4）將高產(chǎn)菌株擴大培養(yǎng)，獲得發(fā)酵液，用___________法去除發(fā)酵液中分子量小的雜質(zhì)，再用_________法進一步純化，最終獲得純度較高的β-葡萄糖苷酶。（5）生產(chǎn)中為降低成本，β-葡萄糖苷酶最好采用________法固定，以便重復使用。10．（14分）人t-PA蛋白能高效溶解血纖維蛋白凝聚的血栓。用傳統(tǒng)基因工程生產(chǎn)的t-PA給心?；颊叽髣┝孔⑸鋮s會誘發(fā)顱內(nèi)出血，原因在于其與血纖維蛋白結(jié)合的特異性低，但若將其第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，就能顯著降低出血副作用。據(jù)此，科學家對人t-PA基因進行序列改造，再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達該突變基因，制造出了高性能的t-PA突變蛋白。（1）人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA。絲氨酸的密碼子為UCU，突變基因中對應該氨基酸密碼子的堿基序列應設計為______。（2）上述獲得突變目的基因的基本途徑是___。（3）如圖所示t-PA突變基因、質(zhì)粒，用__________限制酶切開該質(zhì)粒較好。（4）將相應的重組質(zhì)粒導入大腸桿菌中，含t-PA突變基因的細胞應具有的性狀是______。（5）上述生物工程技術是以_______為基礎的，首先通過________，再進行______，以滿足醫(yī)療需求的。11．（14分）家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力，科學家將人干擾素基因?qū)爰倚Q細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。請回答下列相關問題：（1）進行轉(zhuǎn)基因操作前，需將獲得的幼蠶組織先剪碎，并用_____________短時處理以便獲得單個細胞。（2）在培養(yǎng)獲得單個細胞時，為避免雜菌污染，除對培養(yǎng)液和用具進行無菌處理以外，還應在培養(yǎng)液中添加一定量的_____________。培養(yǎng)過程中，發(fā)現(xiàn)貼壁細胞分裂生長到相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，此現(xiàn)象稱為_______________。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以增大_____________，從而增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于氣體交換。（3）將干擾素基因?qū)肱囵B(yǎng)的家蠶細胞時，需要載體協(xié)助，而載體一般不選擇___________（填“噬菌體”或“昆蟲病毒”），原因是___________________________________。（4）若干擾素基因來自cDNA文庫，在構(gòu)建過程中______________（填“需要”或“不需要”）在目的基因的首端添加啟動子，原因是__________________________________。12．果蠅的灰體和黑檀體是一對相對性狀，由一對等位基因N、n控制；直剛毛和焦剛毛為一對相對性狀，受另一對等位基因M、m控制。現(xiàn)有灰體直剛毛雌果蠅與黑擅體焦剛毛雄果蠅雜交，F(xiàn)1全為灰體直剛毛；取F1某個體與某黑檀體焦剛毛個體雜交，F(xiàn)2雌雄果蠅均表現(xiàn)為灰體直剛毛：灰體焦剛毛：黑檀體直剛毛：黑檀體焦剛毛=1：1：1：1。請回答下列問題：（1）從題干中可以判斷____________________為顯性性狀。如果基因M、m只位于X染色體上，則題干中“F1某個體”與“某黑檀體焦剛毛個體”的性別應該分別是__________。（2）根據(jù)F2的表現(xiàn)型及比例可以推測基因，N/n與M/m在遺傳上遵循定律_______。（3）現(xiàn)已知基因N、n位于常染色體上，基因M、m位于X染色體上。請你從F2中選取表現(xiàn)型相同的個體，通過一次雜交實驗，驗證該結(jié)論，并寫出預期實驗結(jié)果。（注：不考慮基因位于X、Y染色體同源區(qū)段上）雜交組合：______________。預期結(jié)果：_______________________________________。（4）基因型為Nn的果蠅在形成配子時，若減數(shù)第一次分裂中期出現(xiàn)基因組成為NN的細胞，可能的原因有________________________________；若出現(xiàn)下圖所示細胞，最可能的原因是__________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

據(jù)圖分析：PEPCKI是參與糖異生的一種關鍵性酶，血糖濃度升高，可促進PEPCKI乙?；瑥亩铀貾EPCKI的水解，使糖異生途徑受阻，從而減少血糖的來源?！驹斀狻竣貾EPCKI是參與糖異生的一種關鍵性酶，細胞中PEPCKI濃度過高會導致血糖濃度過高，可能會導致糖尿病發(fā)生，①錯誤；②胰高血糖素能使非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖，而PEPCKI能使糖異生為葡萄糖，所以PEPCKI基因在細胞內(nèi)的活躍表達可能與胰高血糖素的作用有關，②正確；③加快PEPCKI乙?；纱龠MPEPCKI的水解，使糖異生途徑受阻，可以為預防和治療糖尿病提供可能，③錯誤；④血糖濃度升高后通過促進PEPCKI乙酰化從而抑制糖異生作用，該過程屬于負反饋調(diào)節(jié)，④正確。綜上分析，C正確，ABD錯誤。故選C。2、D【解析】

分泌蛋白的形成過程中經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)加工的蛋白質(zhì)由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫落的小泡包裹，并移動到高爾基體后與高爾基體融合，經(jīng)過高爾基體的進一步加工后，由高爾基體脫落的囊泡包裹移動到細胞膜，并與細胞膜融合。所以內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體都能形成囊泡。線粒體的內(nèi)膜向內(nèi)折疊形成嵴，使內(nèi)膜的面積大于外膜的面積?！驹斀狻緼、核糖體能進行蛋白質(zhì)的合成、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體進行蛋白質(zhì)的加工，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體都能形成囊泡，A錯誤；B、膜蛋白的形成與核糖體有關，與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體也有關，B錯誤；C、低滲溶液中線粒體的內(nèi)膜后于外膜破裂，C錯誤；D、載體蛋白具有選擇運輸功能是由其結(jié)構(gòu)決定的，D正確。故選D?！军c睛】本題考查分泌蛋白的合成、生物膜系統(tǒng)和細胞核的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解能力，難度不大。3、B【解析】

1、生物膜的成分：脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和少量的糖類．磷脂構(gòu)成了細胞膜的基本骨架．蛋白質(zhì)分子有的鑲在磷脂雙分子層表面，有的部分或全部嵌入磷脂雙分子層中，有的橫跨整個磷脂雙分子層。2、“觀察DNA和RNA在細胞中的分布”實驗原理：①DNA主要分布于細胞核中，RNA主要分布于細胞質(zhì)中；②甲基綠和吡羅紅對DNA、RNA的親和力不同：利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色，可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布；③鹽酸（HCl）能夠改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，同時使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結(jié)合。3、分泌蛋白合成和分泌過程：附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體合成蛋白質(zhì)→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行粗加工→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“出芽”形成囊泡→高爾基體進行再加工形成成熟的蛋白質(zhì)→高爾基體“出芽”形成囊泡→細胞膜，整個過程還需要線粒體提供能量。【詳解】A、細胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和核膜都以磷脂雙分子層為基本支架，磷脂分子結(jié)構(gòu)相同，但三種膜的功能不同這與各種膜上所含蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量有關，A正確；B、鹽酸使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑（甲基綠）結(jié)合，B錯誤；C、細胞核、線粒體和葉綠體中都含有DNA、RNA和蛋白質(zhì)，C正確；D、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體都與蛋白質(zhì)的加工、運輸有關，D正確。故選B?！军c睛】本題需要考生識記生物膜的結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)是生命活動的承擔者，掌握分泌蛋白的合成過程。4、B【解析】

現(xiàn)代生物進化理論認為：生物進化的基本單位是種群，突變和基因重組為生物進化提供原材料，自然選擇通過定向改變種群基因頻率而使生物朝著一定的方向進化，隔離是新物種形成的必要條件，生殖隔離是新物種形成的標志，生物進化是共同進化，通過漫長的共同進化形成生物多樣性。【詳解】新物種形成的標志是產(chǎn)生生殖隔離，甲地區(qū)T2時間不一定產(chǎn)生生殖隔離，A錯誤；乙地區(qū)T2時刻，RR約為0.1，rr約為0.7，Rr約是0.2，因此R的基因頻率是（0.1+0.2÷2）×100%=20%，B正確；甲乙地區(qū)基因型頻率不同的主要原因是自然選擇，C錯誤；生物進化的實質(zhì)是種群基因頻率的改變，D錯誤?！军c睛】本題旨在考查理解現(xiàn)代生物進化理論內(nèi)容，并結(jié)合柱形圖進行推理、判斷。5、A【解析】

甲狀腺激素調(diào)節(jié)過程：下丘腦分泌促甲狀腺激素釋放激素，促使垂體分泌促甲狀腺激素。促甲狀腺激素隨血液運輸?shù)郊谞钕?，促使甲狀腺增加甲狀腺激素的合成和分泌。血液中甲狀腺激素含量增加到一定程度時，又反過來抑制下丘腦和垂體分泌相關激素，進而使甲狀腺激素分泌減少?！驹斀狻空Ｇ闆r下，健康人體受到寒冷刺激時，下丘腦分泌TRH促進垂體分泌促甲狀腺激素（TSH），TSH促進甲狀腺分泌甲狀腺激素，甲狀腺激素含量增多，綜上可知，促甲狀腺激素和甲狀腺激素含量都增多，A正確。故選A。6、A【解析】

五類植物激素的比較名稱合成部位存在較多的部位功能生長素幼嫩的芽、葉、發(fā)育中的種子集中在生長旺盛的部位既能促進生長，也能抑制生長；既能促進發(fā)芽，也能抑制發(fā)芽；既能防止落花落果，也能疏花蔬果赤霉素未成熟的種子、幼根和幼芽普遍存在于植物體內(nèi)①促進細胞伸長，從而引起植株增高②促進種子萌發(fā)和果實發(fā)育細胞分裂素主要是根尖細胞分裂的部位促進細胞分裂脫落酸根冠、萎蔫的葉片將要脫落的器官和組織中①抑制細胞分裂②促進葉和果實的衰老和脫落乙烯植物的各個部位成熟的果實中較多促進果實成熟【詳解】A、雙縮脲試劑鑒定的是蛋白質(zhì)，乙烯的化學本質(zhì)不是蛋白質(zhì)，A錯誤；B、赤霉素通過降低ACO的活性，從而可抑制乙烯的合成，B正確；C、脫落酸可調(diào)控ACS的合成，說明脫落酸可能影響了ACS基因的表達過程，C正確；D、低溫導致酶的活性下降，從而影響酶催化的化學反應，D正確。故選A。7、C【解析】

1、中心法則：（1）遺傳信息可以從DNA流向DNA，即DNA的復制；（2）遺傳信息可以從DNA流向RNA，進而流向蛋白質(zhì)，即遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯。后來中心法則又補充了遺傳信息從RNA流向RNA以及從RNA流向DNA兩條途徑。2、HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒?！驹斀狻緼、合成RNA-DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；合成雙鏈DNA需要DNA聚合酶的催化，A正確；B、HIV侵染細胞后，以mRNA作模板合成病毒蛋白的過程為翻譯過程，以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄過程，B正確；C、以mRNA為模板合成的蛋白質(zhì)包括病毒蛋白質(zhì)外殼和逆轉(zhuǎn)錄酶等，C錯誤；D、HIV的突變頻率較高其原因是RNA單鏈結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，D正確。故選C。【點睛】本題考查中心法則及其發(fā)展，要求考生識記中心法則的主要內(nèi)容及后人對其進行的補充和完善；識記和理解HIV侵染人體細胞后遺傳信息的傳遞過程，能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項。8、C【解析】

A、分析圖一：圖一表示含有15N標記的DNA雙鏈，其中①為磷酸二酯鍵，②為胸腺嘧啶脫氧核苷酸，③為氫鍵；分析圖二：圖二表示翻譯過程，其中④為mRNA，⑤⑥⑦為肽鏈，⑧為核糖體；分析圖三：圖二表示tRNA，m為氨基酸，UGC為反密碼子，圖一所示過程為DNA復制，不需要圖三中tRNA分子的幫助，A錯誤；B、圖一中作用于圖一中①磷酸二酯鍵的酶是限制酶，作用于③氫鍵的酶是解旋酶，B錯誤；C、圖二所示過程表示翻譯，所需原料是氨基酸，C正確；D、把圖一中分子放在含14N的培養(yǎng)液中培養(yǎng)兩代，子代DNA共有4個，含有15N的DNA有2個，不含有15N的DNA有2個，子代DNA中不含有15N的DNA占1/2，D錯誤。故選C?！军c睛】本題需要學生能正常識圖，并識記DNA分子復制的過程及特點；識記遺傳信息轉(zhuǎn)錄和翻譯的場所、過程、條件及產(chǎn)物，能結(jié)合圖中信息準確判斷各選項。二、非選擇題9、富含纖維素增加產(chǎn)β-葡萄糖苷酶菌株的濃度配制含基本成分的培養(yǎng)基，加入七葉靈、Fe3+，用稀釋涂布平板法接種并在適宜條件下培養(yǎng)，粽黑色圈大的菌落即為目標菌落平板劃線透析法凝膠色譜法化學結(jié)合或物理吸附【解析】

1.尋找目的菌株的原理是需要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應的環(huán)境中去尋找。2.固定化酶和固定化細胞技術是指利用物理或化學方法，將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術，包括包埋法、化學結(jié)合法和物理吸附法。3.凝膠色譜法也稱為分配色譜法，是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。當相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動的速度較慢，而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)，無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動的速度較快，相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子得以分離?！驹斀狻浚?）實驗目的是要篩選出β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株，而β-葡萄糖苷酶是一種存在于微生物中的可水解纖維素的酶，據(jù)此可知要找到目的菌需要到富含纖維素的環(huán)境中取樣，取樣后，為了增加產(chǎn)β-葡萄糖苷酶菌株的濃度，要將樣品菌在液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)。（2）題意顯示七葉靈能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解，其水解產(chǎn)物七葉苷原能和Fe3+作用呈現(xiàn)棕黑色，若要初步分離鑒定出目的菌株，需要在鑒定培養(yǎng)基中加入七葉靈（能在β-葡萄糖苷酶作用下分解）、Fe3+（與七葉靈的水解產(chǎn)物發(fā)生顏色反應），為得到單菌落需用稀釋涂布平板法接種，然后置于適宜條件下培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基中呈現(xiàn)棕黑色的菌落即為目的菌。（3）用接種針挑取棕黑色的菌落，然后用平板劃線法接種，置于適宜條件下進一步純化培養(yǎng)，進而篩選出高產(chǎn)菌株。（4）將高產(chǎn)菌株擴大培養(yǎng)，獲得發(fā)酵液，因為透析袋允許小分子自由出入，而不能讓大分子透過，故用透析法處理之后，發(fā)酵液中分子量小的雜質(zhì)就能夠被除去，再用凝膠色譜法進一步純化，最終獲得純度較高的β-葡萄糖苷酶。（5）生產(chǎn)中為降低成本，β-葡萄糖苷酶最好采用化學結(jié)合或物理吸附法固定，以便重復使用，同時也能與產(chǎn)物有效的分離?！军c睛】熟知相關的基礎知識是解答本題的關鍵！能夠從題目中找到關鍵信息解答本題中篩選目的菌的原理是解答本題的另一關鍵！10、AGA從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的基因脫氧核苷酸序列Xmal、Bg/II新霉素抗性且呈白色蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關系基因修飾或基因合成對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造或制造新的蛋白質(zhì)【解析】

本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的相關知識?；蚬こ痰幕静僮鞑襟E：獲取目的基因→構(gòu)建基因表達載體→導入受體細胞→得到轉(zhuǎn)基因生物→目的基因檢測與鑒定。蛋白質(zhì)工程可以通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進行改造，或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。【詳解】（1）人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA，根據(jù)轉(zhuǎn)錄過程堿基互補配對原則，絲氨酸的密碼子為UCU，則其模板鏈編碼序列為AGA，要將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，故需將編碼序列變?yōu)锳GA；（2）蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列（基因），以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑；（3）由于目的基因的兩端的堿基序列分別是CCGG、CTAG，所以應用XmaI和BgII兩種限制酶切割，以便于把目的基因連接到質(zhì)粒pCLY11上；（4）由圖1可知，將連接好的DNA分子導入大腸桿菌中，由于限制酶切割質(zhì)粒破壞了mlacZ基因，所以含t-PA突變基因重組DNA分子的細胞應具有的表型是新霉素抗性且呈白色；（5）蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求?！军c睛】本題綜合性較強，難度較大。理清轉(zhuǎn)錄中堿基互補配對原則及基因工程的核心步驟即基因表達載體的構(gòu)建是解題的關鍵。需要注意的是：蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。11、胰蛋白酶抗生素接觸抑制細胞貼壁生長的附著面積噬菌體噬菌體的宿主細胞是細菌，而不是家蠶細胞需要cDNA文庫中的基因是由mRNA反轉(zhuǎn)錄而來的，基因中無啟動子【解析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）進行轉(zhuǎn)基因操作前，要想獲得單個動物細胞，需將獲得的動物組織先剪碎，并用胰蛋白酶短時處理。

（2）在培養(yǎng)獲得的單個細胞時，為避免雜菌污染，除對培養(yǎng)液和用具進行無菌處理以外，還應在培養(yǎng)液中添加一定的抗生素。培養(yǎng)細胞過程中，發(fā)現(xiàn)貼壁細胞分裂生長到相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，此現(xiàn)象稱為接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以增大細胞貼壁生長的附著面積，從而增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于氣體交換。

（3）將干擾素基因?qū)肱囵B(yǎng)的家蠶細胞時，需要載體協(xié)助，由于噬菌體的宿主細胞是細菌而不是家蠶，因此將干擾素基因?qū)肱囵B(yǎng)的家蠶細胞時，運載體一