DB15T1056-2024香菇菌種制作技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.21CCSICS65.020.21CCSB30內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)DB15/T1056—2024代替DB15/T1056-2016香菇菌種制作技術(shù)規(guī)程Regulationofstrainmanufactureforlentinulaedodes2024-07-312024-07-312024-08-31內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB15/T1056—2024DB15/T1056—2024前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。DB15/TDB15/T1056-2016a)更改了母種培養(yǎng)基要求（見5.1，2016版5.1）；b)增加了母種容器要求（見5.2，2016版5.2）；c)增加了母種檢測要求（見5.4）；d)更改了母種培養(yǎng)要求（見5.6，2016版5.5）；e)更改了原種、栽培種培養(yǎng)基要求（見6.1.1，2016版6.1.1）；f)6.1.6，20166.1.6）；g)6.1.7，20166.1.7）；h)增加了瓶裝液體菌種檢驗(yàn)要求（見6.2.2.4）；i)更改了菌種罐液體菌種裝罐和滅菌要求（見6.2.3.1，2016版6.2.3.1）；j)7.1.17.1.27.1.17.1.2l)刪除了留樣要求（見2016版7.3）。本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧廳提出。本文件由內(nèi)需古自區(qū)果蔬標(biāo)準(zhǔn)化技木委會(huì)（SAM/TC25）歸口。l)刪除了留樣要求（見2016版7.3）。本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧廳提出。本文件由內(nèi)需古自區(qū)果蔬標(biāo)準(zhǔn)化技木委會(huì)（SAM/TC25）歸口。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：——2016年首次發(fā)布為DB15/T1056-2016；——本次為第一次修訂。IDB15/T1056—2024DB15/T1056—2024DB15/T1056—2024栽培種spawn稱為三級(jí)種。DB15/T1056—2024栽培種spawn稱為三級(jí)種。香菇菌種制作技術(shù)規(guī)程范圍本文件適用于香菇母種、原種和栽培種菌種制作要求。（NY/T1731食用菌菌種良好作業(yè)規(guī)范下列術(shù)語和定義適用于本文件。下列術(shù)語和定義適用于本文件。香菇lentinulaedodes（mphlotceaeLetinla菌種spawn通過生產(chǎn)試驗(yàn)驗(yàn)證具有特異性、均一性和穩(wěn)定性，豐產(chǎn)性好、抗性強(qiáng)的香菇菌株或品種，生長在適宜基質(zhì)上具結(jié)實(shí)性的菌絲培養(yǎng)物，包括母種、原種和栽培種。母種stockculture原種pre-culturespawn由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱為二級(jí)種。1固體菌種solidspawn液體菌種liquidspawn在液體培養(yǎng)基中，通過搖瓶震蕩培養(yǎng)或深層發(fā)酵技術(shù)快速獲得的大量的純雙核菌絲體。場地總體要求交通運(yùn)輸便利，地勢較高，通風(fēng)良好，有充足的水源和電源，排水通暢，遠(yuǎn)離污染源。廠房瓶）（NY/T1731生產(chǎn)設(shè)備菌種生產(chǎn)需要粉碎機(jī)、電子秤、攪拌機(jī)、裝袋（瓶）機(jī)、高壓滅菌鍋或常壓滅菌鍋、離子凈化器、超凈工作臺(tái)或接種箱、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)架、搖床、液體菌種灌（30L～250L）、冰箱、顯微鏡等設(shè)備。菌種生產(chǎn)設(shè)備條件符合NY/T1731規(guī)定。培養(yǎng)基200加水1200ml煮沸20min1000ml1010g1.51.5（MgSO4）0.5（KH2PO4）1g8g～10g，pH1200ml20min1000ml10105g、硫酸鎂（MgSO4）0.5g、磷酸二氫鉀（KH2PO4）1g、瓊脂粉8g～10g，pH自然；200600ml20min500ml100g600ml煮沸20min500ml10g10g1.8g（MgSO4）0.5gg8g～10g，pH2容器試管選用18mm×180mm或者20mm×200mm；培養(yǎng)皿選用直徑7cm～9cm玻璃培養(yǎng)皿或一次性塑料培養(yǎng)皿，三角瓶規(guī)格300ml～500ml。1/451121℃～122MPa～0.12MPa）25min。2/3培養(yǎng)基裝入300ml～500ml三角瓶至刻度的2/3處，用帶濾膜的封口膜封口后滅菌。培養(yǎng)皿用報(bào)紙包好，放入滅菌鍋。121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）恒溫滅菌25min。降溫至（65±5）℃時(shí)，在超凈工作臺(tái)內(nèi)將三角瓶中的培養(yǎng)基分裝至培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基占培養(yǎng)皿高度的1/3～1/2。檢測抽取3%～5%滅菌后的試管和培養(yǎng)皿，在28℃下培養(yǎng)48h，無微生物長出為滅菌合格。接種超凈工作臺(tái)或接種箱內(nèi)紫外燈照射30min后吹風(fēng)，之后用75%酒精進(jìn)行表面消毒。接菌過程嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，接種后及時(shí)貼好標(biāo)簽并做好記錄。將3mm～5mm菌塊接種在培養(yǎng)皿或試管培養(yǎng)基的中部。培養(yǎng)皿用石臘膜密封。培養(yǎng)在通風(fēng)避光、22℃～26℃下培養(yǎng)。接種后每隔2d～3d檢驗(yàn)一次，剔除菌種未活、污染和生長不良的不合格培養(yǎng)物。菌絲長滿培養(yǎng)基表面即可使用。培養(yǎng)基糧食培養(yǎng)基：谷粒、麥?；蛴衩琢?9%，檸條粉、棉籽殼、木屑、玉米芯粉或豆秸粉9%，石膏1%、過磷酸鈣%，水分含量（60±2）%，石灰水調(diào)節(jié)pH6.0～pH6.6。6～6.6；檸條粉60%，玉米芯20%，麩子18%，石膏1%，過磷酸鈣1%，水分含量（60±2）%，石灰水調(diào)節(jié)pH值到6～6.6；3DB15/T1056—2024DB15/T1056—2024DB15/T1056—2024DB15/T1056—2024豆秸粉60%，玉米芯20%，麩子18%，石膏1%，過磷酸鈣1%，水分含量（60±2）%，石灰水調(diào)節(jié)pH值到6～6.6；硬雜木屑87%，麥麩12%，石膏1%，水分含量（60±2）%，石灰水調(diào)節(jié)pH值到6～6.6；硬雜木屑84%，麩皮12%，高粱殼3%，石膏1%，水分含量（60±2）%，石灰水調(diào)節(jié)pH值到6～6.6。容器1260.05）mm栽培種選用（15～17）cm×（33～35）cm×（0.04～0.05）mm的聚丙烯塑料袋。裝袋瓶）采用裝袋（瓶）機(jī)或人工進(jìn)行裝袋（瓶），人工裝袋（瓶）需用打孔器在袋口處打孔，孔直徑1cm～1.5cm8cm～12cm（）500g～600g（）4滅菌1℃122（.11Pa0.12P2h11122℃（0.11MPa～0.12MPa）下滅菌2.5h。常壓滅菌：在3h之內(nèi)使溫度升至100℃，恒溫保持100℃10h～12h。瓶瓶2cm～3cm1～215g。每批接種應(yīng)為單一品種，如中途換品種時(shí)采用75%酒精對(duì)超凈工作臺(tái)或接種箱及接種工具進(jìn)行表面擦拭消毒。培養(yǎng)通風(fēng)避光、22℃～27℃下培養(yǎng)。貯存原種和栽培種0℃～4℃下貯存，貯存期不超過50d。液體菌種生產(chǎn)培養(yǎng)基不加瓊脂，其他同5.1。裝瓶采用150ml～500ml三角瓶，培養(yǎng)基添加至刻度的2/3處，用帶濾膜的封口膜封口后滅菌。滅菌在121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）保持25min。4取3mm～5mm大小母種10～15塊接入30℃以下的液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度在23℃～25℃，130r/min～160r/min下振蕩培養(yǎng)6d～10d。檢驗(yàn)接種后第3天對(duì)三角瓶逐個(gè)進(jìn)行純度檢驗(yàn)，及時(shí)清理未活或污染的培養(yǎng)物。2/3121℃下滅菌40min30℃8～121～25℃，140r/min～180r/min，灌壓0.04MPa，下培養(yǎng)5d～7d。10ml～15ml。檢驗(yàn)7.1.1母種感官要求香菇母鐘感官要求見表1。檢驗(yàn)7.1.1母種感官要求香菇母鐘感官要求見表1。表1香菇母種感官要求7.1.2原種感官要求5項(xiàng)目要求容器完整、無損、潔凈棉塞或無棉蓋體干燥、整潔、松緊適度、能滿足透氣和過濾要求培養(yǎng)基灌入量為試管總?cè)莘e的1/4，培養(yǎng)皿高度的1/3~1/2菌種外觀菌絲生長量長滿斜面或培養(yǎng)皿菌絲體特征潔白、平整、無角變菌絲體分泌物無菌落邊緣整齊雜菌菌落無斜面背面外觀培養(yǎng)基不干縮，顏色均勻，無暗斑、無色素香菇原種感官要求見表2。表2香菇原種感官要求項(xiàng)目要求容器完整、無損、潔凈棉塞或無棉蓋體干燥、整潔、松緊適度、能滿足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基上表面距瓶（袋）口的距離（50±5）mm菌種外觀菌絲生長量長滿容器菌絲體特征潔白濃密、生長旺健、整齊培養(yǎng)物表面菌絲體生長均勻、無高溫抑制線培養(yǎng)基及菌絲體緊貼瓶壁、無干縮菌絲分泌物無或少量無色至棕黃色水珠雜菌菌落無子實(shí)體原基無3。表3香菇栽培種感官要求3。表3香菇栽培種感官要求7.1.4液體菌種感官要求。6項(xiàng)目要求容器完整、無損、潔凈棉塞或無棉蓋體干燥、整潔、松緊適度、能滿足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基上表面距瓶（袋）口的距離（50±5）mm菌種外觀菌絲生長量長滿容器菌絲體特征生長均勻、色澤