2025屆河北省邢臺(tái)市第七中學(xué)高三第二次調(diào)研生物試卷含解析

2025屆河北省邢臺(tái)市第七中學(xué)高三第二次調(diào)研生物試卷請(qǐng)考生注意：1．請(qǐng)用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請(qǐng)用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項(xiàng)》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列關(guān)于細(xì)胞分化、衰老、凋亡和癌變的相關(guān)敘述中正確的是（）A．細(xì)胞分化使細(xì)胞趨于專門化，從而提高各種細(xì)胞生理功能的效率B．細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死都是細(xì)胞的編程性死亡C．輻射以及有害物質(zhì)入侵會(huì)刺激細(xì)胞端粒DNA序列縮短一截，引起細(xì)胞衰老D．癌細(xì)胞的特征之一是細(xì)胞膜表面的各種蛋白質(zhì)減少，導(dǎo)致細(xì)胞黏著性降低，易擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移2．下列有關(guān)生物的敘述，正確的是（）A．發(fā)菜、乳酸菌都能進(jìn)行有絲分裂B．藍(lán)藻、硝化細(xì)菌都能利用CO2和H2O合成有機(jī)物C．藍(lán)球藻、酵母菌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上都附著有核糖體D．噬菌體、煙草花葉病毒都含有DNA和RNA3．下列有關(guān)細(xì)胞的物質(zhì)基礎(chǔ)和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)的敘述中，正確的是（）A．細(xì)胞中可以找到多糖與其他分子相結(jié)合的大分子B．向酶溶液中加入雙縮脲試劑，一定能產(chǎn)生紫色反應(yīng)C．核糖體能合成多種蛋白質(zhì)，溶酶體能合成多種水解酶D．原核細(xì)胞沒有線粒體，只能進(jìn)行無氧呼吸4．在細(xì)胞的生命歷程中，會(huì)出現(xiàn)分裂、分化等現(xiàn)象。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．細(xì)胞的有絲分裂對(duì)生物性狀的遺傳有貢獻(xiàn)B．細(xì)胞分化是細(xì)胞內(nèi)基因選擇性表達(dá)的結(jié)果C．某細(xì)胞可進(jìn)行ATP的合成，說明該細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生分化D．通過組織培養(yǎng)可將植物葉肉細(xì)胞培育成新的植株5．生物膜上的質(zhì)子泵（H+的載體蛋白）可分為三種：F—型質(zhì)子泵、P—型質(zhì)子泵和V—型質(zhì)子泵，前一種是生成ATP的質(zhì)子泵，后兩種是消耗ATP的質(zhì)子泵。下列關(guān)于H+跨膜運(yùn)輸?shù)臄⑹?，正確的是（）A．液泡膜通過V—型質(zhì)子泵吸收H+的方式是協(xié)助擴(kuò)散B．葉綠體類囊體膜上的質(zhì)子泵是P—型質(zhì)子泵C．F—型質(zhì)子泵為H+逆濃度梯度運(yùn)輸D．線粒體內(nèi)膜上的質(zhì)子泵是F—型質(zhì)子泵6．如下所示為某生態(tài)系統(tǒng)中的一條完整食物鏈。下列相關(guān)敘述正確的是（）草→蚜蟲→瓢蟲→小鳥A．該生態(tài)系統(tǒng)可能存在捕食小鳥的動(dòng)物B．該食物鏈中各生物的數(shù)量呈金字塔狀C．各營(yíng)養(yǎng)級(jí)同化的能量最終以熱能形式散失D．各營(yíng)養(yǎng)級(jí)之間的能量傳遞效率均相同二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的果酒、果醋、腐乳、泡菜極大地豐富了人們的飲食?；卮鹣铝袉栴}。（1）在葡萄酒自然發(fā)酵過程中，起主要作用的菌種來自___________。酵母菌液體培養(yǎng)時(shí)，若通入氧氣，可促進(jìn)___________；若進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，可促進(jìn)___________。（2）果醋發(fā)酵過程中．適宜的溫度為______℃。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌可以將乙醇作為底物，將___________（填乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程），從而實(shí)現(xiàn)醋酸發(fā)酵。該過程需在___________（填“有氧”或“無氧”）條件下進(jìn)行。（3）豆腐富含蛋白質(zhì)和脂肪，由于微生物的作用，腐乳中甘油、脂肪酸及小分子肽、氨基酸的含量增加，說明這些微生物能產(chǎn)生___________。（4）泡菜發(fā)酵中期，主要是___________（填微生物種類）進(jìn)行發(fā)酵，pH明顯下降，其他微生物的生長(zhǎng)受到抑制。8．（10分）科研人員利用基因編輯技術(shù)刪除小鼠母本基因組的相關(guān)印記區(qū)域，培育出了由母本單倍體干細(xì)胞融合發(fā)育而來的孤雌生殖小鼠，為探索生殖奧秘作出了貢獻(xiàn)。過程見下圖：（1）上圖孤雌小鼠的獲得，用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)_________、_________、_________胚胎移植等生物技。（2）孤雌小鼠培育過程中需要用基因編輯技術(shù)刪除母本基因組的相關(guān)印記區(qū)域。為了檢測(cè)刪除是否成功，在分子水平需要應(yīng)用______________________________技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。（3）常用的基因編輯系統(tǒng)是crispr-cas9，其過程為：先讓一段RNA與特征DNA序列結(jié)合，由此引導(dǎo)Cas9酶對(duì)特征DNA序列切割。因?yàn)椤耙欢蜶NA”能與特征DNA序列_________，才能特異性結(jié)合。Cas9酶作用于特征DNA序列的____________________（填DNA分子的相關(guān)結(jié)構(gòu)）。（4）上圖中的“卵母細(xì)胞”應(yīng)處于________________（時(shí)期）。應(yīng)用卵母細(xì)胞培育孤雌小鼠容易成功，其原因是_______________________。并且由上述卵母細(xì)胞發(fā)育而來的胚胎能在代孕母鼠體內(nèi)存活的原因是____________。9．（10分）真核生物基因中通常有內(nèi)含子（位于編碼蛋白質(zhì)序列內(nèi)的非編碼DNA片段)，而原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列的機(jī)制。有人利用RT-PCR技術(shù)（mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA再進(jìn)行PCR擴(kuò)增)，獲得了牛的G基因，導(dǎo)入到大腸桿菌中，成功表達(dá)出G蛋白（一種免疫蛋白）。請(qǐng)回答下列問題：（1）RT-PCR過程需要的酶有_____________；在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)需要設(shè)計(jì)_________種引物。（2）RT-PCR的產(chǎn)物經(jīng)過BamHⅠ、EcoRⅠ雙酶切后，與經(jīng)過同樣雙酶切得到的PBV載體連接，該操作程序?qū)儆赺________，也是基因工程的核心步驟。與單一酶切相比，雙酶切具有的優(yōu)點(diǎn)是________________（答出兩點(diǎn)）。（3）若要檢測(cè)G基因是否翻譯出G蛋白，可采用的分子水平的檢測(cè)方法是_________________。（4）有人從牛的基因組文庫(kù)中獲得了G基因，同樣以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到G蛋白，其原因是________________。10．（10分）質(zhì)粒A和質(zhì)粒B各自有一個(gè)限制酶EcoRI和限制酶BamHI的識(shí)別位點(diǎn)，兩種酶切割DNA產(chǎn)生的黏性末端不同。限制酶EcoRI剪切位置旁邊的數(shù)字表示其與限制酶BamHI剪切部位之間的堿基對(duì)數(shù)(bp)。在含有質(zhì)粒A和B的混合溶液中加入限制酶EcoRI和BamHI，令其反應(yīng)充分；然后，向剪切產(chǎn)物中加入DNA連接酶進(jìn)行反應(yīng)，再將其產(chǎn)物導(dǎo)入大腸桿菌中。（實(shí)驗(yàn)中不考慮：無ori的質(zhì)粒；擁有兩個(gè)或以上ori的質(zhì)粒；兩個(gè)或以上質(zhì)粒同時(shí)進(jìn)入大腸桿菌；三個(gè)或以上DNA片段發(fā)生連接）請(qǐng)回答下列問題：（1）只擁有質(zhì)粒A的大腸桿菌________（填“可以”或“不可以”）在含有氨芐青霉素及乳糖作為唯一碳元素來源的培養(yǎng)基中生存？說明理由____________。（2）DNA連接酶進(jìn)行反應(yīng)后，存在________種大小不同的質(zhì)粒，有________種質(zhì)粒使大腸桿菌能夠在含有氨芐青霉素及乳糖作為唯一碳源的培養(yǎng)基中生存。（3）綠色熒光蛋白基因是標(biāo)記基因一種，標(biāo)記基因的功能是________。（4）質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌通常要用________處理，其作用是________。11．（15分）光合作用包括光反應(yīng)與暗反應(yīng)，光反應(yīng)又包括許多個(gè)反應(yīng)。如圖為光合作用的光反應(yīng)示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答相關(guān)問題。（1）由圖可知，PSⅠ和PSⅡ位于______，具有__________的功能。

（2）從物質(zhì)的變化角度分析，光反應(yīng)為暗反應(yīng)提供________和_______；從能量變化的角度分析，光反應(yīng)的能量變化是__________________。給某植物提供C18O2和H2O，釋放的氧氣中含有18O。氧氣中含有18O是由于___________，H218O又作為原料參與了光合作用。（3）光反應(yīng)涉及電子（e-）的一系列變化，電子（e-）的最初供體為_______。

（4）從圖中ATP的產(chǎn)生機(jī)制可以判斷膜內(nèi)H+濃度_____（填“大于”“等于”或“小于”）膜外濃度。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、A【解析】

1、衰老細(xì)胞的特征：（1）細(xì)胞內(nèi)水分減少，細(xì)胞萎縮，體積變小，但細(xì)胞核體積增大，染色質(zhì)固縮，染色加深；（2）細(xì)胞膜通透性功能改變，物質(zhì)運(yùn)輸功能降低；（3）細(xì)胞色素隨著細(xì)胞衰老逐漸累積；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度減慢，新陳代謝減慢。2、細(xì)胞凋亡是由基因決定的細(xì)胞自動(dòng)結(jié)束生命的過程.在成熟的生物體內(nèi)，細(xì)胞的自然更新、被病原體感染的細(xì)胞的清除，是通過細(xì)胞凋亡完成的。3、細(xì)胞癌變的根本原因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變，其中原癌基因負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，控制細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的過程，抑癌基因主要是阻止細(xì)胞不正常的增殖?！驹斀狻緼、細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因選擇性表達(dá)，從而使生物體中細(xì)胞趨向?qū)ｉT化，A正確；B、細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的編程性死亡，細(xì)胞壞死不是，B錯(cuò)誤；C、輻射以及有害物質(zhì)入侵會(huì)引起細(xì)胞壞死，C錯(cuò)誤；D、癌細(xì)胞膜上糖蛋白減少導(dǎo)致細(xì)胞黏著性降低，易擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移，D錯(cuò)誤。故選A。2、B【解析】

病毒、原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的比較原核細(xì)胞真核細(xì)胞病毒大小較小較大最小本質(zhì)區(qū)別無以核膜為界限的細(xì)胞核有以核膜為界限的真正的細(xì)胞核無細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)胞壁主要成分是肽聚糖植物：纖維素和果膠；真菌：幾丁質(zhì)；動(dòng)物細(xì)胞無細(xì)胞壁無細(xì)胞核有擬核，無核膜、核仁，DNA不與蛋白質(zhì)結(jié)合有核膜和核仁，DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成染色體無細(xì)胞質(zhì)僅有核糖體，無其他細(xì)胞器有核糖體線粒體等復(fù)雜的細(xì)胞器無遺傳物質(zhì)DNADNA或RNA舉例藍(lán)藻、細(xì)菌等真菌，動(dòng)、植物HIV、H1N1【詳解】A、發(fā)菜和乳酸菌都是原核生物通過二分裂增殖，A錯(cuò)誤；B、藍(lán)藻和硝化細(xì)菌都是自養(yǎng)生物，能夠利用CO2和H2O合成有機(jī)物，B正確；C、藍(lán)球藻是原核生物，只有核糖體這一種細(xì)胞器，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，C錯(cuò)誤；D、噬菌體是DNA病毒，煙草花葉病毒是RNA病毒，病毒只含有一種核酸，D錯(cuò)誤。故選B。3、A【解析】

A、細(xì)胞膜表面的多糖可以和蛋白質(zhì)結(jié)合形成糖蛋白，A正確；B、向化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)的酶溶液中加入雙縮脲試劑能產(chǎn)生紫色反應(yīng)，而向化學(xué)本質(zhì)是RNA的酶溶液中加入雙縮脲試劑不能產(chǎn)生紫色反應(yīng)，B錯(cuò)誤；C、核糖體能合成多種蛋白質(zhì)，而溶酶體不能合成多種水解酶，C錯(cuò)誤；D、原核細(xì)胞中的醋酸菌細(xì)胞沒有線粒體，但含有與有氧呼吸有關(guān)的酶，能進(jìn)行有氧呼吸，D錯(cuò)誤。故選A。4、C【解析】

1、細(xì)胞有絲分裂的意義：由于染色體上有遺傳物質(zhì)DNA，因而在細(xì)胞的親代和子代之間保持了遺傳性狀的穩(wěn)定性。2、細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。3、細(xì)胞全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。【詳解】A、細(xì)胞的有絲分裂可以將復(fù)制的遺傳物質(zhì)，平均地分配到兩個(gè)子細(xì)胞中去，對(duì)生物性狀的遺傳有貢獻(xiàn)，A正確；B、細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，B正確；C、所有細(xì)胞都能合成ATP，因此某細(xì)胞可進(jìn)行ATP的合成，不能說明該細(xì)胞已經(jīng)分化，C錯(cuò)誤；D、由于植物細(xì)胞具有全能性，因此通過組織培養(yǎng)可將植物葉肉細(xì)胞培育成新的植株，D正確。故選C。5、D【解析】

根據(jù)題意分析，“一種為生成ATP的F-型質(zhì)子泵，生成ATP的場(chǎng)所為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、類囊體薄膜、線粒體內(nèi)膜和線粒體基質(zhì)”，“兩種為消耗ATP的P-型質(zhì)子泵和V-型質(zhì)子泵，可見這兩種質(zhì)子泵為H+逆濃度梯度運(yùn)輸”。【詳解】A、根據(jù)以上分析可知，V—型質(zhì)子泵為H+逆濃度梯度運(yùn)輸，屬于主動(dòng)運(yùn)輸，A錯(cuò)誤；B、類囊體薄膜是生成ATP的場(chǎng)所之一，該膜上的質(zhì)子泵為F—型，B錯(cuò)誤；C、H+逆濃度梯度運(yùn)輸需要消耗ATP，而F—型質(zhì)子泵是一種能生成ATP的質(zhì)子泵，C錯(cuò)誤；D、線粒體內(nèi)膜是生成ATP的場(chǎng)所之一，該膜上的質(zhì)子泵為F—型，D正確。故選D。6、C【解析】

（1）生態(tài)系統(tǒng)中生物的能量最終來源是太陽，有機(jī)物的最終來源是綠色植物通過光合作用能制造有機(jī)物．生態(tài)系統(tǒng)中的生物部分包括生產(chǎn)者（綠色植物），消費(fèi)者（動(dòng)物），分解者（細(xì)菌和真菌等）；（2）食物鏈的起點(diǎn)的生產(chǎn)者，終點(diǎn)是不被其他動(dòng)物捕食的動(dòng)物，中間用箭頭表示?！驹斀狻緼、題干中指出這是一條完整的食物鏈，則小鳥是最高營(yíng)養(yǎng)級(jí)，沒有可以捕食小鳥的動(dòng)物，A錯(cuò)誤；B、一顆草上可能有多只蚜蟲，所以食物鏈中的數(shù)量不一定呈金字塔狀，B錯(cuò)誤；C、各營(yíng)養(yǎng)級(jí)同化的能量最終以熱能形式散失（包括自身呼吸作用、分解者的分解作用），C正確；D、各營(yíng)養(yǎng)級(jí)之間的能量傳遞效率不一定相同，D錯(cuò)誤。故選C。【點(diǎn)睛】本題需要考生識(shí)記食物鏈的結(jié)構(gòu)，理解能量傳遞的過程，特別是C選項(xiàng)中需要綜合分析。二、綜合題：本大題共4小題7、附著在葡萄皮上的野生型酵母菌有氧呼吸，菌體快速增殖無氧呼吸，產(chǎn)生乙醇（酒精）30~35乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿嵊醒踔久负偷鞍酌笇⒅竞偷鞍踪|(zhì)分解乳酸菌【解析】

毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解成甘油和氨基酸。在多種微生物的協(xié)同作用下，普通的豆腐轉(zhuǎn)變成風(fēng)味獨(dú)特的腐乳?！驹斀狻浚?）酒精發(fā)酵常用的菌種是酵母菌，在葡萄酒自然發(fā)酵過程中，起主要作用的菌種來自附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。酵母菌在有氧的條件下，進(jìn)行有氧呼吸；在缺氧的條件下，進(jìn)行酒精發(fā)酵，產(chǎn)生酒精。（2）果醋發(fā)酵適宜的溫度為30~35℃。在有氧的條件下，當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌可以將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，從而?shí)現(xiàn)醋酸發(fā)酵。（3）豆腐富含蛋白質(zhì)和脂肪，微生物可以產(chǎn)生脂肪酶和蛋白酶，可以將脂肪和蛋白質(zhì)分解，故腐乳中甘油、脂肪酸及小分子肽、氨基酸的含量增加。（4）泡菜發(fā)酵中期，主要是乳酸菌進(jìn)行發(fā)酵，pH明顯下降，其他微生物的生長(zhǎng)受到抑制?！军c(diǎn)睛】酒精發(fā)酵需要在無氧條件下進(jìn)行，醋酸發(fā)酵需要在有氧條件下進(jìn)行。8、基因工程動(dòng)物細(xì)胞核移植早期胚胎培養(yǎng)DNA分子雜交技術(shù)堿基互補(bǔ)配對(duì)磷酸二酯鍵MⅡ中期（減數(shù)第二次分裂中期）卵母細(xì)胞體積大，易操作；含促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)；卵母細(xì)胞所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富代孕母鼠子宮對(duì)外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)【解析】

1、孤雌生殖也稱單性生殖，即卵不經(jīng)過受精也能發(fā)育成正常的新個(gè)體的生殖方式。2、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；（2）哺乳動(dòng)物早期胚胎形成后，在一定時(shí)間內(nèi)不會(huì)與母體子宮建立組織上的聯(lián)系，而是出于游離狀態(tài)，為胚胎的收集提供了可能；（3）受體子宮不對(duì)外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能；（4）移植入受體的胚胎能與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但移入受體的供體胚胎的遺傳特性不會(huì)受到影響?！驹斀狻浚?）識(shí)圖分析可知，整個(gè)過程中用基因編輯技術(shù)刪除相關(guān)的基因印跡區(qū)域，該過程中使用的Cas9酶類似于限制酶的作用，因此屬于基因工程的操作，經(jīng)編輯后的細(xì)胞用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)成多個(gè)細(xì)胞或組織，利用核移植技術(shù)使卵母細(xì)胞與新核融合，體外培養(yǎng)胚胎至桑椹胚或囊胚后移植胚胎進(jìn)入代孕母鼠體內(nèi)。（2）驗(yàn)證基因是否刪除成功，需要利用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。（3）讓一段RNA與目標(biāo)特征DNA序列的堿基互補(bǔ)配對(duì)后兩者才能結(jié)合。Cas9酶與DNA的基因靶點(diǎn)結(jié)合時(shí)發(fā)生了構(gòu)象變化，酶功能區(qū)對(duì)靶標(biāo)DNA的反向鏈進(jìn)行定位切割DNA分子的磷酸二酯鍵，刪除基因。（4）傳統(tǒng)的細(xì)胞核移植技術(shù)中，受體卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂中期。因?yàn)槁涯讣?xì)胞體積大，易操作；含促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)；卵母細(xì)胞所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富。由于代孕母鼠子宮對(duì)外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，使得胚胎能在代孕母鼠體內(nèi)存活的生理基礎(chǔ)?！军c(diǎn)睛】本題以孤雌生殖小鼠的培養(yǎng)過程為背景，考查基因工程、核移植技術(shù)、胚胎移植等知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生掌握核移植的操作過程和選擇卵母細(xì)胞的原因，把握基因工程的操作過程和鑒定目的基因的方法，理解限制酶的作用部位，能夠依據(jù)該知識(shí)點(diǎn)把握題干中Cas9酶的作用，識(shí)記和理解胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)。9、逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶（熱穩(wěn)定的DNA聚合酶）2構(gòu)建基因表達(dá)載體防止目的基因（或載體）自身連接；防止目的基因與運(yùn)載體反向連接抗原—抗體雜交從基因組文庫(kù)獲取的G基因有內(nèi)含子，在大腸桿菌中，其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列不能被切除，無法表達(dá)出G蛋白【解析】

分析題文描述可知：本題綜合考查學(xué)生對(duì)基因工程的基本操作程序，特別是基因表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因的檢測(cè)與鑒定等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。【詳解】（1）RT-PCR過程，首先是以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，此時(shí)需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與催化；其次是將cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，在擴(kuò)增過程中不開Taq酶（熱穩(wěn)定的DNA聚合酶）的催化。在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)需要設(shè)計(jì)2種引物，以便分別與兩條DNA模板鏈結(jié)合。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是實(shí)施基因工程的第二步，也是基因工程的核心步驟。與單一酶切相比，雙酶切具有的優(yōu)點(diǎn)是：防止目的基因或載體自身連接；防止目的基因與載體反向連接。（3）若要檢測(cè)G基因是否翻譯出G蛋白，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)。（4）真核生物基因中通常有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒有內(nèi)含子；牛為真核生物，大腸桿菌屬于原核生物；原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列的機(jī)制?？梢姡瑥呐５幕蚪M文庫(kù)中獲得的G基因有內(nèi)含子，在大腸桿菌中，其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列不能被切除，無法表達(dá)出G蛋白，因此以大腸桿菌作為受體細(xì)胞時(shí)未能得到G蛋白?！军c(diǎn)睛】本題的難點(diǎn)在于對(duì)（4）題的解答，其關(guān)鍵在于從題意中提取有效信息，即真核生物基因中通常有內(nèi)含子，原核生物基因中沒有內(nèi)含子，原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列的機(jī)制。在此基礎(chǔ)上，從牛和大腸桿菌的基因結(jié)構(gòu)入手，分析從牛的基因組文庫(kù)中獲得的G基因，將其導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中卻未能得到G蛋白的原因。10、可以質(zhì)粒A含有氨芐青霉素抗性基因，使大腸桿菌能夠在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生存，還含有半乳糖苷酶基因，使大腸桿菌合成半乳糖苷酶，并水解乳糖獲得能量和碳源42供重組DNA的選擇和鑒定Ca2+使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)【解析】

由圖可知，質(zhì)粒A含有氨芐青霉素抗性基因和半乳糖苷酶基因，用EcoRI和BamHI酶切后，形成2000bp（含amp）和1000bp(含lac)兩段；質(zhì)粒B含氨芐青霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因和綠色熒光蛋白基因，用EcoRI和BamHI酶切后，形成3000bp（含amp、gfp）和2500bp(含tet)兩段。由題干“兩種酶切割DNA產(chǎn)生的黏性末端不同”可知，酶切后質(zhì)粒自身兩端不能連接?！驹斀狻浚?）由質(zhì)粒A圖可知，只擁有質(zhì)粒A的大腸桿菌可以在含有氨芐青霉素及乳糖作為唯一碳元素來源的培養(yǎng)基中生存，因?yàn)橘|(zhì)粒A含有氨芐青霉素抗性基因，使大腸桿菌能夠在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生存，還含有半乳糖苷酶基因，使大腸桿菌能合成半乳糖苷酶，并水解乳糖獲得能量和碳源。（2）DNA連接酶進(jìn)行反應(yīng)后，由于實(shí)驗(yàn)中不考慮：無ori的質(zhì)粒；擁有兩個(gè)或以上ori的質(zhì)粒；兩個(gè)或以上質(zhì)粒同時(shí)進(jìn)入大腸桿菌；三個(gè)或以上DNA片段發(fā)生連接，因此可存在4種大小不同的質(zhì)粒，即質(zhì)粒A兩個(gè)片段連接3000bp（2000bp+1000bp）、質(zhì)粒A含ori的片段和質(zhì)粒B不含ori的片段連接4500bp(2000bp+2500bp)、質(zhì)粒A不含ori的片段和質(zhì)粒B含ori的片段連接4000bp(1000bp+3000bp)、質(zhì)粒B兩個(gè)片段連接5500bp(3000bp+2500bp)，有2種質(zhì)粒使大腸桿菌能夠在含有氨芐青霉素及乳糖作為唯一碳