C12多種腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片對(duì)食管癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后的研究

1/1C12多種腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片對(duì)食管癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后的研究C12多種腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片對(duì)食管癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后的研究C12多種腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片對(duì)食管癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后的研究nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;作者：

馮笑山，單探幽，高社干，曲智峰，王戰(zhàn)會(huì)，張洛，韓晶【關(guān)鍵詞】nbsp;腫瘤標(biāo)志物；蛋白芯片；食管癌；轉(zhuǎn)移；預(yù)后腫瘤標(biāo)志物（Tumormarker,TM）是指在惡性腫瘤的發(fā)生和增殖過(guò)程中，由腫瘤細(xì)胞的基因表達(dá)而合成分泌的或是由機(jī)體對(duì)腫瘤反應(yīng)而異常產(chǎn)生或升高的，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)[1]。

多種TM蛋白芯片（C12系統(tǒng)）技術(shù)是基于雙抗體夾心法的化學(xué)發(fā)光檢驗(yàn)技術(shù)，對(duì)TM進(jìn)行定量檢測(cè)[2]。

食管癌患者病情變化及預(yù)后的評(píng)估目前尚缺乏明確的指標(biāo)。

我們對(duì)113例食管癌患者進(jìn)行了檢測(cè)，并對(duì)其預(yù)后進(jìn)行了隨訪，現(xiàn)將其報(bào)道如下：

1資料與方法1.1標(biāo)本來(lái)源收集2003年4月~2004年6月河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院113例食管鱗癌患者血清。

平均年齡63.7歲，年齡范圍38～87歲。

男88例，女25例。

其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和（或）臟器轉(zhuǎn)移40例，無(wú)轉(zhuǎn)移73例。

隨訪2年，32例死亡，73例存活，失訪8例。

1.2儀器和試劑儀器為上海數(shù)康生物科技有限公司生產(chǎn)的HD2001A型生物芯片檢測(cè)儀，試劑為其生產(chǎn)的C12腫瘤診斷用蛋白芯片試劑盒。

1.3檢測(cè)方法nbsp;采集患者空腹不抗凝靜脈血2ml，分離血清，取待檢血清或倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品各100l，滴加到芯片分格內(nèi)，37℃孵育振蕩30min，棄去液體；用洗滌液洗滌芯片，37℃振蕩洗滌8min，共4次；加反應(yīng)液100l，37℃孵育振蕩30min，棄去液體；洗滌液洗滌芯片4次；在每個(gè)芯片膜表面加檢測(cè)液A和B混合液20l，靜置1min；用HD2001A生物芯片檢測(cè)儀對(duì)蛋白芯片成像、讀取數(shù)據(jù)、作標(biāo)準(zhǔn)曲線、分析打印結(jié)果。

1.4結(jié)果判讀各項(xiàng)目正常參考值為：

CA199lt;35U/ml，NSElt;13ng/ml，CEAlt;5ng/ml，CA242lt;20U/ml，F(xiàn)erlt;219ng/ml，HCGlt;3ng/ml，AFPlt;20ng/ml，nbsp;fPSAlt;1ng/ml，PSAlt;5ng/ml，CA125lt;35U/ml，HCGlt;75ng/ml，CA153lt;35U/ml。

檢測(cè)數(shù)值高于正常參考值為陽(yáng)性。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理統(tǒng)計(jì)軟件采用SPSS11.0版本，組間陽(yáng)性率比較用2檢驗(yàn)。

2結(jié)果2.1113例食管癌患者TM單項(xiàng)在轉(zhuǎn)移組和未轉(zhuǎn)移組的表達(dá)情況，見(jiàn)表1。

表1轉(zhuǎn)移組和未轉(zhuǎn)移組TM單項(xiàng)表達(dá)情況（略）2.2轉(zhuǎn)移組40例中25例檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，陽(yáng)性率為62.5%；未轉(zhuǎn)移組73例患者中5例陽(yáng)性，陽(yáng)性率為6.9%。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，2檢驗(yàn)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性率明顯高于未轉(zhuǎn)移組（Plt;0.001）。

2.3隨訪發(fā)現(xiàn)30例檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性患者中14例死亡，失訪3例，死亡率為51.9%；83例檢測(cè)結(jié)果陰性患者中18例死亡，失訪5例，死亡率為23.1%，見(jiàn)表2，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，2檢驗(yàn)結(jié)果顯示P=0.005（Ｐl(wèi)t;0.01），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2TM陽(yáng)性組患者死亡率與陰性組患者死亡率比較（略）2.4檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果顯示，7例患者血清TMnbsp;3項(xiàng)以上陽(yáng)性，隨訪兩年死亡6例，1例患者病情危重，正接受治療，死亡率為85.7%（6/7）。

3討論食管癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，對(duì)其臨床分期及預(yù)后的正確判斷是臨床醫(yī)師采取合理治療方案的重要依據(jù)。

自20世紀(jì)60~70年代發(fā)現(xiàn)甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）并在臨床上得到應(yīng)用以來(lái)，TM檢測(cè)已經(jīng)成為常規(guī)的腫瘤檢測(cè)手段之一，為腫瘤的診斷和療效觀察起到一定的作用。

目前腫瘤標(biāo)記物的種類已達(dá)百余種，但至今仍沒(méi)有一種理想的標(biāo)志物可用于臨床上作為食管癌轉(zhuǎn)移和預(yù)后判斷的指標(biāo)[3]。

單一標(biāo)志物檢測(cè)始終存在著特異性不強(qiáng)、陽(yáng)性率較低等不足[4]。

C12系統(tǒng)為近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù)，具有高通量、高靈敏度、高特異性和微量化的優(yōu)點(diǎn)[5]，作為腫瘤診斷的一種方法廣泛應(yīng)用于臨床，與單一TM相比對(duì)腫瘤診斷的敏感性和特異度均明顯提高。

本實(shí)驗(yàn)采用的C12系統(tǒng)對(duì)113例食管癌患者進(jìn)行轉(zhuǎn)移及預(yù)后研究，檢測(cè)結(jié)果顯示：

轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性率為62.5%，明顯高于未轉(zhuǎn)移組6.9%。

隨訪結(jié)果顯示：

標(biāo)志物陽(yáng)性患者的2年死亡率為51.9%，明顯高于標(biāo)志物陰性患者23.1%。

提示TM聯(lián)合檢測(cè)在食管癌的轉(zhuǎn)移及其預(yù)后的評(píng)估具有重要意義，可以作為臨床判斷食管癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后評(píng)估的方法。

可以為臨床醫(yī)師不同階段腫瘤患者治療方案的選擇及預(yù)后的判定提供線索。

并且TM陽(yáng)性的數(shù)目與患者的預(yù)后密切相關(guān)，陽(yáng)性數(shù)目越多死亡率越高，三項(xiàng)以上TM陽(yáng)性患者的兩年死亡率高達(dá)85.7%。

本研究還發(fā)現(xiàn)食管癌患者未轉(zhuǎn)移組患者（大部分為臨床分期較早的I、II期患者）的陽(yáng)性率為6.9%，初步證實(shí)了C12系統(tǒng)對(duì)早期食管癌的敏感性很低，不能作為食管癌早期診斷的指標(biāo)。

【參考文獻(xiàn)】nbsp;［1］陳燕.腫瘤標(biāo)志物臨床應(yīng)用原則[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床,2006,7(1):13.[2]楊琴,于本章,許靜.多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片技術(shù)臨床應(yīng)用價(jià)值探討[J].上海預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2005,17(6):282.[3]沈華,楊霞,付佩芬.多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)在食管癌早期診斷中的價(jià)值[J].醫(yī)學(xué)臨床研究,2005,22(2):186188.[4]KayabaH.Tumormarkers:essentialdiagnostictoolsforradiologists[J].NipponLgakuHoshasenGakkaiZasshi,2003,63(4):133139.[5]EggelingF,DaviesH,LomasL,etal.