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

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文檔簡介
《動物細胞融合與單克隆抗體》教學設(shè)計
教材分析
1.教材的地位和作用
《動物細胞融合與單克隆抗體》是人教版普通高中課程標準實驗教科書生物選修3專題
二第2節(jié)動物細胞工程中第2小節(jié)的內(nèi)容,本課題的參考課時為1課時。由于細胞工程是建
立在細胞結(jié)構(gòu)、功能、生理等研究基礎(chǔ)上的新技術(shù),動物細胞融合又是細胞工程中基本技術(shù)
之一,所以第2小節(jié)教學內(nèi)容是在高中必修教材基礎(chǔ)上的深入和擴展,也是第1小節(jié)動物細
胞培養(yǎng)教學后的必然及延伸,是安排在學習了免疫、遺傳與基因工程的基礎(chǔ)上來進行教學的,
學生既有一定的知識基礎(chǔ),又能為后面的的教學奠定基礎(chǔ),尤其是為動物無性生殖的克隆技
術(shù)教學打下基礎(chǔ)。同時,生物技術(shù)中各個分支領(lǐng)域相互滲透、相互促進,細胞融合技術(shù)也不
例外,它在現(xiàn)代生物技術(shù)中具有一定的理論意義和經(jīng)濟意義。在整個選修課本中處于相當重
要的地位,也是培養(yǎng)學生科學研究能力的很好的載體,更是歷年高考的熱點。在2014年的
全國新課標1卷,第40題就考查了動物細胞融合與單克隆抗體。
2.重點和難點
重點:
1.舉例說出單克隆抗體的制備和應用。
2.掌握單克隆抗體的制備過程。
難點:
掌握單克隆抗體的制備過程。
學情分析
知識基礎(chǔ):知識上已對細胞結(jié)構(gòu)、生理、功能、植物體細胞雜交技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)等
知識有一定的認識,可以更好的切入課題。
學習能力:有一定的自學能力,合作探究能力,提出及解決問題的能力,對事物充滿探
究的熱情。因而通過多媒體教學,幫助學生更好接受知識。
針對策略:通過課前預習和多媒體引導,把學生的感性認識進一步上升到理性認識,注
重訓練學生自主學習能力、通過生生間、師生間評價提升學習能力,通過梅艷芳的歌曲《女
人花》導入課題,進一步理解動物細胞融合過程及單克隆抗體的制備過程,學會活學活用,
獨立解決與本節(jié)內(nèi)容有關(guān)的實際問題,例如如何利用生物導彈去治療癌癥。
教學目標
據(jù)高中生物課程的指導思想和新課程標準的提高生物科學素養(yǎng);面向全體學生;倡導
探究性學習;注重與現(xiàn)實生活的聯(lián)系的四個基本理念,本節(jié)教學的三維目標確定為:
1.知識與能力目標:
⑴掌握動物細胞融合與植物體細胞雜交的區(qū)別和聯(lián)系。
⑵掌握動物細胞融合和單克隆抗體制備的過程。
⑶了解單克隆抗體在醫(yī)學實踐中的應用,并說其應用實例。
2.過程與方法目標:
(1)讓學生運用動物細胞融合技術(shù),嘗試設(shè)計單克隆抗體的制備過程,指導學生掌握獲
取知識和探索生物科學的基本方法,發(fā)展學生的創(chuàng)造性能力。
3.情感目標:
(1)培養(yǎng)學生勇于探索,不斷創(chuàng)新的精神。
(2)使學生明確揭示人們對生命奧秘的探究方法,知識是不斷更新并向前發(fā)展的,從而認
識到學無止境,形成終生學習的意識。
教法分析
1.對于“動物細胞融合”的教學,采用自學一探討一歸納的方法,并通過與“植物體細
胞雜交”的比較,引導學生大膽推測二者的原理及方法基本相同,以培養(yǎng)知識遷移能力。
2.關(guān)于“單克隆抗體”的教學,教師采用層層設(shè)問式教學法。引導學生對難點逐個擊破,
深刻理解原理,同時精選例題,突破難點,并采用多媒體輔助教學。
教學課時:1課時,或1.5課時(依據(jù)學生接受能力而定)
課前準備多媒體課件
教學過程
過程教學內(nèi)容師生互動設(shè)計意圖
梅艷芳、沈讓大家聽梅艷芳的歌曲《女人花》,聽完之后說通過歌曲引
導語殿霞及很出是哪位歌手的歌,以及對梅艷芳的生平經(jīng)歷入,提高學生的
多藝術(shù)家進行講解,在40歲的時候梅艷芳因為宮頸癌而興趣。
均是因為失去生命,另外還有很多的藝術(shù)家都被癌癥無
癌癥而失情的奪取了生命。
去了生命。
一、動物細請同學們翻開課本,閱讀P52頁課本,填寫下培養(yǎng)學生的閱讀
胞融合面六個問題:能力及自主解決
1.也稱細胞雜交,是指在一定的條件下將問題的能力。
1.概念:個或個動物細胞融合成個細胞的過了解動物細胞融
程。合的概念。
新課2.原理:2.細胞膜具有_______________性。了解動物細胞融
學習合的原理、方法
3.誘導方3.物理法(如________________)、化學法(如和過程。
法:用_______________作為誘導劑)和生物法(如
用_______________作為誘導劑)。
4.過程:4.
①細胞融合技術(shù)突破了
5.意義:培養(yǎng)學生交提取
方法的局限,使_______________成為可能。
信息能力。
②是研究___________
等的重要手段。
③利用雜交瘤技術(shù),學J了制造_________
開辟了新途徑。
6.比較植物體細胞雜交和動彩1細胞融合
比較
植物體細胞雜交動物細胞融合
項目
6.動物細
細胞膜的流動性
胞融合與原理
細胞的全能性
植物體細聯(lián)系舊知識,提
胞雜交的供一個比較的對
細胞用纖維素酶和果用胰蛋白酶或
比較:象,以此達到知
融合膠酶去除細胞壁膠原蛋白酶處
的方后誘導原生質(zhì)體理后誘導細胞識遷移的目的。
法融合融合
物理(離心、振動、物理、化學方法
誘導
電刺激)(同左)
方法
化學(聚乙二醇)
主要用于制備
用途獲得雜種植株
單克隆抗體
思考:
1.動物細胞融合時需要進行去壁處理嗎?為什
么?__________________________________?
思考與討2.植物體細胞雜交誘導原生質(zhì)體融合常用的方通過思考與
論:法有哪些?____________________________?討論,進一步提
高學生對知識點
3.動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎?還有
其他方法嗎?___________________________。的提煉和總結(jié)。
4.植物體細胞雜交應先進行原生質(zhì)體的融合再
進行組織培養(yǎng)形成完整的雜種個體,動物細胞
融合后能雜種動物個體嗎?
O
[例1]近幾年神舟飛船頻頻成功發(fā)射和著陸。
在飛船上,科學家進行了無人搭載的空間動物
細胞融合實驗。該實驗所依據(jù)的原理和促進細通過例題鞏固提
胞融合的方法分別是()升,檢查學生掌
例題鞏固:A.細胞的全能性、滅活病毒誘導融合握的情況。
B.細胞的全能性、電刺激融合
C.生物膜的流動性、滅活病毒誘導融合
D.生物膜的流動性、電刺激融合
【例2】只能使動物細胞融合的常用誘導方法
是()
A.PEGB.滅活的病毒
C.電刺激D.離心
【例3】動物細胞融合的目的中最重要的是
()
A.克服遠源雜交不親和
B.制備單克隆抗體
C.培育新物種
D.生產(chǎn)雜種細胞
二、單克隆二、單克隆抗體的制備
抗體的制【舊知回顧】回顧必修三的知
備:1.抗體是由_______細胞產(chǎn)生的,一個B淋巴細識,自然過渡到
胞(漿細胞)能分泌___________種抗體。單克隆抗體的制
舊知回顧:2.一種抗原侵入機體之后,引起機體免疫反應備的學習上。
產(chǎn)生一種抗體。
【探究新知】
探究新知根據(jù)閱讀課本
1.人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是
1.2.3P52-P53頁回答
探究新知的
2.這種方法的缺點是什么
L2.3個問題,學
3.________£能\否)用單個B淋巴細胞通過克生知道傳統(tǒng)獲得
隆形成的細胞群來產(chǎn)生單一類型的抗體。單克隆抗體的方
4.單克隆抗體的設(shè)計方案:法及缺點。
O
4.單克隆體驗科學技術(shù)是
給小鼠注射特定的____培養(yǎng)____細胞
11
抗體的設(shè)從____中分離B淋巴細胞_____細胞一個不斷發(fā)展的
1_I
誘導融合
計方案:III過程。
B細胞多種____骨髓瘤細胞
\1/進一步設(shè)計更加
1__培養(yǎng)基培養(yǎng)
雜交瘤細胞:既能迅速大量____,又能產(chǎn)生_____
5.設(shè)計單克隆1檢測合理的單克隆制
能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞
克隆抗體小鼠____培養(yǎng)____培養(yǎng)備的方案,使學
11
單克隆抗體(與血清中分離的常規(guī)抗體相比,具有_、____、____等特點)
的過程:生體驗到科學是
一個探究過程,
6.單克隆抗體的優(yōu)點:
6.單克隆科學研究需要創(chuàng)
O
抗體的優(yōu)新的意識和合作
7.單克隆抗體的應用:
點:精神。
A.作為診斷試劑:在臨床生化診斷、病理組織
定位、體內(nèi)腫瘤的定位等,與常規(guī)抗體相比,具
7.應用:有________、________、________、________特記憶單克隆抗體
點。的特點及應用。
B.用于治療疾病和運載藥物:主要用于癌癥治
療。找到治療癌癥的
C.生物導彈:抗癌細胞的單克隆抗體+放射性同新方法,從而了
位素+化學藥物或細胞毒素。(單克隆抗體:導解單克隆抗體的
向。準確找到癌細胞位置,原位殺死癌細胞。)應用,體驗科學、
思考:技術(shù)、社會三者
1.為什么用小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融
間的關(guān)系。
合?
思考與討
—
論:通過思考與討論
進一步提升對知
2..融合后培養(yǎng)液中有幾種細胞融合的方式?
識的整合和理解
O能力。
3.兩次篩選的目的是什么?
【例4】用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體,
例題鞏固
下列實驗步驟中錯誤的是()
提升:
A.將抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的B
淋巴細胞通過例題進一步
B.用纖維素酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤鞏固提升。
細胞
C.用聚乙二醇作誘導劑,促使能產(chǎn)生抗體的B
淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合
D.篩選雜交瘤細胞,并從中選出能產(chǎn)生所需
抗體的細胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體
【例5】科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞
融合,得到雜交細胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單
克隆抗體,與骨髓瘤細胞融合的是()
A.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞
B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細胞
C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞
D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞
【例6】在單克隆抗體的制備過程中,骨髓瘤細
胞和B淋巴細胞融合后,要用特定的培養(yǎng)基篩
選出雜交瘤細胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活的
細胞是()
①B淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細
胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合
細胞⑤雜交瘤細胞
A.①②③④B.①③⑤
C.②④D.②③
【總結(jié)提升】
總結(jié)提升:
單克隆抗體制備過程的幾個問題分析:
1.對動物免疫的原因:B淋巴細胞要經(jīng)過免疫過
通過總結(jié)提升讓
程,即接觸抗原,增殖分化為有特異性免疫功
同學們對本節(jié)內(nèi)
能的B淋巴細胞,才能產(chǎn)生相應的抗體,所以,
容的重難點加深
與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞實際上是漿細
理解記憶。
胞。
2.在單克隆抗體的制備過程中,一般認為有兩
次篩選過程,第一次是篩選出雜交瘤細胞(用
選擇培養(yǎng)基),第二次是進一步篩選出能產(chǎn)生
人們所需要抗體的雜交瘤細胞。
3.雜交瘤細胞具備雙親的遺傳物質(zhì),不僅具有
漿細胞產(chǎn)生特異性抗體的能力,還具有骨髓瘤
細胞在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的能力,從而
可以克服單純B淋巴細胞不能無限增殖的缺點,
而大量生產(chǎn)單克隆抗體。
【實驗評價】
下面是某同學根據(jù)單克隆抗體技術(shù)的方法,設(shè)通過實驗評價,
計的生產(chǎn)破傷風桿菌抗體的實驗方案。指出不找到設(shè)計方案中
足之處。的不足,進一步
實驗評價:第一步:從一只小鼠體內(nèi)提取T淋巴細胞,然提煉知識。
后與骨髓瘤細胞誘導融合。
第二步:再用普通培養(yǎng)基進行篩選,在該培養(yǎng)通過課堂限時診
基上,未融合的親本細胞和融合的具有同種核斷,了解同學們
的細胞都會死去。的掌握情況,并
第三步:對上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞直通過高考題的做
接在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng),這樣從細胞培與講解,零距離
養(yǎng)液中就可以提出破傷風桿菌單克隆抗體。接觸高考,提高
學生對本節(jié)知識
的重視性。
課堂限【課堂限時診斷】
時診斷:1.單克隆抗體是指()
A.單個骨髓瘤細胞增殖產(chǎn)生的抗體
B.單個B細胞增殖產(chǎn)生的抗體
C.單個雜交瘤細胞增殖產(chǎn)生的高度單一的抗體
D.單個抗體通過克隆化,產(chǎn)生大量抗體
2.關(guān)于動物細胞融合的說法,不正確的是()
A.動物細胞融合也稱細胞雜交,是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的
過程
B.動物細胞融合后形成的具有兩個動物細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交細胞
C.常用的誘導動物細胞融合的方法有:聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線
照射等
D.細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使遠緣雜交成為可能
3.用a表示骨髓瘤細胞,b表示漿細胞,則細胞融合過程中前兩次篩選的目的分
別為()
A.a、aa>ab>bb、bfa、aa>ab—ab培養(yǎng)
B.a、aa、ab、bb、bfab、bb、b-ab培養(yǎng)
C.a、aa、ab、bb>b—ab—產(chǎn)生特定抗體的ab培養(yǎng)
D.a、aa、ab、bb>bfaa->能無限增殖的aa培養(yǎng)
4.研究單克隆抗體治療癌癥的思路是()
A.利用單克隆抗體特異性地對抗癌細胞
B.以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細胞
C.抗癌物質(zhì)在克隆細胞中大量合成
D.單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細胞結(jié)合
二、非選擇題
(2014全國新課標1)40.[生物一選修3:現(xiàn)代生物科技專題](15分)
某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、丫和Z),每只小鼠免疫5
次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清
最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示:
血
清32000
§28000
524000
彳介
1120000
16000
12000
8000
4000
0
若要制備雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目為40條),
并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目為60)按一定比例加入試
管中,再加入聚乙二醇誘導劑融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A
抗體的雜交瘤細胞。
回答下列問題:
(1)制備融合所需的B淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到
16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過次免疫后才能有符合要求的。達到要
求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細胞的是
小鼠,理由是________________________________________。
(2)細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞
外,可能還有______________________________________,體系中出現(xiàn)多種類型
細胞的原因是______________________________________。
(3)雜交瘤細胞中有_____個細胞核,染色體數(shù)目最多是___________條。
(4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因
是___________________O
【課后復習作業(yè)】《自主學習指導課程》P98:Tl、T2、T6,P99:Tl、T2、T6
我的困惑與收獲:
教師寄語:偉大的成績和辛勤勞動是成正比例的,有一分勞動就有一
分收獲,日積月累,從少到多,奇跡就可以創(chuàng)造出來!
小結(jié):本節(jié)教學,通過梅艷芳的歌曲《女人花》引入,提高學生的興趣,同時利用
多媒體課件等直觀教學手段,刺激學生多種感官活動,充分調(diào)動學生的積極性,
通過植物細胞的雜交與動物細胞的融合比較歸納,讓學生在推理、判斷中培養(yǎng)良
好的思維習慣和對知識的遷移能力,較好的完成了教學任務(wù)。
板書設(shè)一、動物細胞的融合1原理:2.獨特方法3.植物體細胞雜交與動物細胞融合的比
計:較
二、單克隆抗體1、設(shè)計方案2、制備過程(雜交瘤制備技術(shù))3、優(yōu)點及應用
三、課堂限時診斷:零距離接觸高考
板書設(shè)計
2.2.2動物細胞融合與單克隆抗體
一、動物細胞的融合
原理:
獨特方法:
植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較:
二、單克隆抗體的制備
設(shè)計方案:
制備過程:
優(yōu)點及應用:
三、課堂限時診斷(零距離接觸高考)
課后反思
本節(jié)教學,通過梅艷芳的歌曲《女人花》引入,提高學生的興趣,同時利用多媒體課
件等直觀教學手段,刺激學生多種感官活動,充分調(diào)動學生的視聽器官,通過植物細胞的雜
交與動物細胞的融合比較歸納,讓學生在推理、判斷中培養(yǎng)良好的思維習慣和對知識的遷移
能力。加之多媒體直觀教學,把抽象的文字變成動態(tài)的流程圖,降低了學習的難度。最后,
教師的補充、點評與總結(jié)一方面統(tǒng)一了認識,給學生一個較為正確的可供參考的觀點,較好
的解決了教學中的重點與難點。這樣在課堂教學過程中通過師生互動、生生互動,讓課堂充
滿了活力,新課改理念得到了落實。當然在教學過程中,我還存在著很多的不足,需要我認
真的反思在以后的教學中加以改正:1、在教學過程中,整節(jié)課的節(jié)奏沒有把握好,課程進
行的比較快,語速較快,留給學生思考的時間太少了,影響了教學效果。2、小組的合作與
探究這一環(huán)節(jié)不太突出,學生應更多地參與到課堂活動中來。3、在實際教學過程中,主觀
的想引導學生探究問題,思考問題,得出結(jié)論,而事實上學生回答問題答不到點子上,我就
匆匆的把答案公布了,沒有真正做好引導工作。
《動物細胞融合與單克隆抗體》學情分析
知識基礎(chǔ):知識上已對細胞結(jié)構(gòu)、生理、功能、植物體細胞雜交技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)等
知識有一定的認識,可以更好的切入課題。
學習能力:有一定的自學能力,合作探究能力,提出及解決問題的能力,對事物充滿探
究的熱情。因而通過多媒體教學,幫助學生更好接受知識。
針對策略:通過課前預習和多媒體引導,把學生的感性認識進一步上升到理性認識,注
重訓練學生自主學習能力、通過生生間、師生間評價提升學習能力,通過梅艷芳的歌曲《女
人花》作為導入課題,進一步理解動物細胞融合過程及單克隆抗體的制備過程,學會活學活
用,獨立解決與本節(jié)內(nèi)容有關(guān)的實際問題,例如如何利用生物導彈去治療癌癥。
《動物細胞融合與單克隆抗體》效果分析
本課通過多媒體輔助教學,采用自學一探討一歸納的方式,通過生生討論,教師點撥,
讓學生感受自學一探討一歸納方式的方法,訓練嚴密的思維能力,提高學生的知識遷移能力。
在教學中還鍛煉了學生的自主學習能力,有助于學生能力的提高。這些都體現(xiàn)了新課程標準
的特點。但是會出現(xiàn)生生討論效率低的情況,在今后的教學中應加強對學生學習方面的指導,
提高學生的學習效率。
《動物細胞融合與單克隆抗體》教材分析
1.教材的地位和作用
《動物細胞融合與單克隆抗體》是人教版普通高中課程標準實驗教科書生物選修3專題
二第2節(jié)動物細胞工程中第2小節(jié)的內(nèi)容,本課題的參考課時為1課時。由于細胞工程是建
立在細胞結(jié)構(gòu)、功能、生理等研究基礎(chǔ)上的新技術(shù),動物細胞融合又是細胞工程中基本技術(shù)
之一,所以第2小節(jié)教學內(nèi)容是在高中必修教材基礎(chǔ)上的深入和擴展,也是第1小節(jié)動物細
胞培養(yǎng)教學后的必然及延伸,是安排在學習了免疫、遺傳與基因工程的基礎(chǔ)上來進行教學的,
學生既有一定的知識基礎(chǔ),又能為后面的的教學奠定基礎(chǔ),尤其是為動物無性生殖的克隆技
術(shù)教學打下基礎(chǔ)。同時,生物技術(shù)中各個分支領(lǐng)域相互滲透、相互促進,細胞融合技術(shù)也不
例外,它在現(xiàn)代生物技術(shù)中具有一定的理論意義和經(jīng)濟意義。在整個選修課本中處于相當重
要的地位,也是培養(yǎng)學生科學研究能力的很好的載體,更是歷年高考的熱點。在2014年的
全國新課標1卷,第40題就考查了動物細胞融合與單克隆抗體。
3.重點和難點
教學重點:
1)舉例說出單克隆抗體的制備和應用。
2)掌握單克隆抗體的制備過程。
教學難點:
1)掌握單克隆抗體的制備過程。
2.2.2動物細胞融合與單克隆抗體學案
【課標預覽】
1.知識與能力目標:
⑴掌握動物細胞融合與植物體細胞雜交的區(qū)別和聯(lián)系。
⑵掌握動物細胞融合和單克隆抗體制備的過程。
⑶了解單克隆抗體在醫(yī)學實踐中的應用,并說其應用實例。
2.過程與方法目標:
(1)讓學生運用動物細胞融合技術(shù),嘗試設(shè)計單克隆抗體的制備過程,指導學生掌握獲
取知識和探索生物科學的基本方法,發(fā)展學生的創(chuàng)造性能力。
3.情感目標:
(1)培養(yǎng)學生勇于探索,不斷創(chuàng)新的精神。
(2)使學生明確揭示人們對生命奧秘的探究方法,知識是不斷更新并向前發(fā)展的,從而認
識到學無止境,形成終生學習的意識。
重點:
1.舉例說出單克隆抗體的制備和應用。
2.掌握單克隆抗體的制備過程。
難點:
掌握單克隆抗體的制備過程。
【知識梳理】
一、動物細胞融合
1.概念:也稱細胞雜交,是指在一定的條件下將個或個動物細胞融合成個細胞
的過程。
2.原理:細胞膜具有性。
3.誘導方法:物理法(如)、化學法(如用作為誘導劑)
和生物法(如用作為誘導劑)。
4.過程:。
5.意義:
①細胞融合技術(shù)突破了方法的局限,使成為可能。
②是研究等的重要手段。
③利用雜交瘤技術(shù),為了制造開辟了新途徑。
6.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較:
比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合
細胞膜的流動性
原理—
細胞的全能性
細胞融合的用纖維素酶和果膠酶去除細胞用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理后
方法壁后誘導原生質(zhì)體融合誘導細胞融合
物理、化學方法
物理(離心、振動、電刺激)
誘導方法(同左)
化學(聚乙二醇)
用途獲得雜種植株主要用于制備單克隆抗體
思考:
1.動物細胞融合時需要進行去壁處理嗎?為什
么?0
2.植物體細胞雜交誘導原生質(zhì)體融合常用的方法有哪
些??
3.動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎?還有其他方法
嗎??
4.植物體細胞雜交應先進行原生質(zhì)體的融合再進行組織培養(yǎng)形成完整的雜種個體,動物細胞
融合后能形成雜種動物個體嗎??
【例1】近幾年神舟飛船頻頻成功發(fā)射和著陸。在飛船上,科學家進行了無人搭載的空間動
物細胞融合實驗。該實驗所依據(jù)的原理和促進細胞融合的方法分別是()
A.細胞的全能性、滅活病毒誘導融合B.細胞的全能性、電刺激融合
C.生物膜的流動性、滅活病毒誘導融合D.生物膜的流動性、電刺激融合
【例2】只能使動物細胞融合的常用誘導方法是()
A.PEGB.滅活的病毒C.電刺激D.離心
【例3】動物細胞融合的目的中最重要的是()
A.克服遠源雜交不親和B.制備單克隆抗體
C.培育新物種D.生產(chǎn)雜種細胞
二、單克隆抗體的制備
【舊知回顧】
1.抗體是由細胞產(chǎn)生的,一個B淋巴細胞(漿細胞)能分泌種抗體。
2.一種抗原侵入機體之后,引起機體免疫反應產(chǎn)生一種抗體。
【探究新知】
1.人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是=
2.這種方法的缺點是什么o
3.______L能\否)用單個B淋巴細胞通過克隆形成的細胞群來產(chǎn)生單一類型的抗體。
4.單克隆抗體的設(shè)計方案:-
5.單克隆抗體的制備過程:
給小鼠注射特定的培養(yǎng)細胞
II
從中分離B淋巴細胞細胞
I誘導融合
廠I-
B細胞多種_______骨髓瘤細胞
\V/
I培養(yǎng)基培養(yǎng)
雜交瘤細胞:既能迅速大量_______,又能產(chǎn)生________
克?。蹤z測
能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞
小鼠培養(yǎng)培養(yǎng)
II
單克隆抗體(與血清中分離的常規(guī)抗體相比,具有、、等特點)
6.單克隆抗體的優(yōu)點:o
7.單克隆抗體的應用:
A.作為診斷試劑:在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定位等,與常規(guī)抗體相比,
具有
、、、特點。
B.用于治療疾病和運載藥物:主要用于癌癥治療。
C.生物導彈:抗癌細胞的單克隆抗體+放射性同位素+化學藥物或細胞毒素。(單克隆抗體:
導向。準確找到癌細胞位置,原位殺死癌細胞。)
思考:
1.為什么用小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合?
2.融合后培養(yǎng)液中有幾種細胞融合的方式?
3.兩次篩選的目的是什么?
【例4】用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體,下列實驗步驟中錯誤的是()
A.將抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞
B.用纖維素酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞
C.用聚乙二醇作誘導劑,促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合
D.篩選雜交瘤細胞,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體
【例5】科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合,得到雜交細胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的
單克
隆抗體,與骨髓瘤細胞融合的是()
A.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細胞
C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞
【例6】在單克隆抗體的制備過程中,骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合后,要用特定的培養(yǎng)基
篩選出雜交瘤細胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活的細胞是()
①B淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融
合細胞⑤雜交瘤細胞
A.①②③④B.①③⑤C.②④D.②③
【總結(jié)提升】
單克隆抗體制備過程的幾個問題分析:
L對動物免疫的原因:B淋巴細胞要經(jīng)過免疫過程,即接觸抗原,增殖分化為有特異性免疫
功能的B淋巴細胞,才能產(chǎn)生相應的抗體,所以,與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞實際上是
漿細胞。
2.在單克隆抗體的制備過程中,一般認為有兩次篩選過程,第一次是篩選出雜交瘤細胞(用
選擇培養(yǎng)基),第二次是進一步篩選出能產(chǎn)生人們所需要抗體的雜交瘤細胞。
3.雜交瘤細胞具備雙親的遺傳物質(zhì),不僅具有漿細胞產(chǎn)生特異性抗體的能力,還具有骨髓瘤
細胞在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的能力,從而可以克服單純B淋巴細胞不能無限增殖的缺點,
而大量生產(chǎn)單克隆抗體。
【實驗評價】
下面是某同學根據(jù)單克隆抗體技術(shù)的方法,設(shè)計的生產(chǎn)破傷風桿菌抗體的實驗方案。指出不
足之處。
第一步:從一只小鼠體內(nèi)提取T淋巴細胞,然后與骨髓瘤細胞誘導融合。
第二步:再用普通培養(yǎng)基進行篩選,在該培養(yǎng)基上,未融合的親本細胞和融合的具有同種核
的細胞都會死去。
第三步:對上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞直接在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng),這樣從細胞培
養(yǎng)液中就可以提出破傷風桿菌單克隆抗體。
【課堂限時診斷】
1.單克隆抗體是指()
A.單個骨髓瘤細胞增殖產(chǎn)生的抗體B.單個B細胞增殖產(chǎn)生的抗體
C.單個雜交瘤細胞增殖產(chǎn)生的高度單一的抗體D.單個抗體通過克隆化,產(chǎn)生大量抗體
2.關(guān)于動物細胞融合的說法,不正確的是()
A.動物細胞融合也稱細胞雜
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