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2025屆江蘇省南京十三中、中華中學(xué)高三第二次聯(lián)考生物試卷注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫(xiě)清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2.選擇題必須使用2B鉛筆填涂;非選擇題必須使用0.5毫米黑色字跡的簽字筆書(shū)寫(xiě),字體工整、筆跡清楚。3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書(shū)寫(xiě)的答案無(wú)效;在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。4.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.人體內(nèi)含有多種多樣的蛋白質(zhì),每種蛋白質(zhì)()A.都含有20種氨基酸B.都具有一定的空間結(jié)構(gòu)C.都能催化特定的生物化學(xué)反應(yīng)D.都能在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用2.研究人員以HCl溶液和淀粉酶為實(shí)驗(yàn)材料,探究它們對(duì)蛋白質(zhì)和淀粉的催化水解作用,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示(同種底物起始量相同,在反應(yīng)相同時(shí)間后測(cè)得底物剩余量)。有關(guān)分析錯(cuò)誤的是()A.物質(zhì)1、2分別為蛋白質(zhì)和淀粉B.圖甲、圖乙實(shí)驗(yàn)所用催化劑分別是HCl溶液和淀粉酶C.該實(shí)驗(yàn)可證明酶具有專(zhuān)一性和高效性D.該實(shí)驗(yàn)可證明淀粉酶具有降低活化能的作用3.為臨床檢測(cè)腫瘤壞死因子(TNF-α),利用“噬菌體展示技術(shù)”獲得TNF-α抗體,需要獲得TNF-α抗體的基因片段,插入到噬菌體基因組中,經(jīng)過(guò)篩選得到能正確表達(dá)TNF-α抗體的噬菌體,進(jìn)行大量擴(kuò)增。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.將TNF-α抗體的基因片段與噬菌體DNA重組需用限制酶和DNA連接酶B.在細(xì)菌體內(nèi),噬菌體以自身氨基酸為原料合成TNF-α抗體C.TNF-α抗體隨子代噬菌體的重新組裝而展示在噬菌體表面D.噬菌體通過(guò)侵染細(xì)菌繁殖,增殖速度快,更容易快速獲得抗體4.下列關(guān)于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的有幾項(xiàng)()①在“脂肪的鑒定”實(shí)驗(yàn)中,體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液的作用是溶解組織中的脂肪②在“觀察紫色洋蔥鱗片葉細(xì)胞質(zhì)壁分離與復(fù)原”實(shí)驗(yàn)中,原生質(zhì)層的形態(tài)和位置變化為因變量,該實(shí)驗(yàn)不存在對(duì)照③探究溫度對(duì)酶活性影響的實(shí)驗(yàn),可選用新鮮的肝臟研磨液和H2O2溶液④小鼠吸入18O2,則在其尿液中可檢測(cè)到H218O,呼出的CO2可能含有18O⑤鑒定DNA時(shí),將溶解的粗提產(chǎn)物與二苯胺混合后進(jìn)行沸水浴可看到紫色反應(yīng)A.無(wú)正確項(xiàng) B.只有一項(xiàng)正確C.有兩項(xiàng)正確 D.有三項(xiàng)正確5.如圖為某家族兩種遺傳病系譜圖,其中有一種遺傳病為紅綠色盲,甲病基因用A、a表示,乙病基因用B、b表示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.甲病為常染色體顯性遺傳病B.若Ⅲ5為正常女性,基因型是aaXBXb或aaXBXBC.Ⅲ1與正常男性結(jié)婚,子女患病的可能性是1/4D.若Ⅲ5為XXY型紅綠色盲個(gè)體,最可能由Ⅱ3減數(shù)第一次分裂后期染色體分配異常引起的6.下列各項(xiàng)中,幼苗將向光彎曲生長(zhǎng)的是()A. B.C. D.二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)回答下列(一)、(二)小題:(一)回答以菊花莖段為材料進(jìn)行組織培養(yǎng)的有關(guān)問(wèn)題:(1)在配制MS培養(yǎng)基時(shí),通常先將各種藥品配制成濃度為配方5~10倍的__________,這樣配制的主要優(yōu)點(diǎn)是__________(A.便于低溫保存B.延長(zhǎng)使用時(shí)間C.降低稱(chēng)量誤差D.減少雜菌污染)。從培養(yǎng)基的作用看,在MS培養(yǎng)基中定量添加BA和NAA后的培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。(2)從自然界中獲取的菊花莖段,須先用70%乙醇等進(jìn)行消毒,最后用__________進(jìn)行清洗。將莖段插入培養(yǎng)基的過(guò)程須在______中的酒精燈火焰旁進(jìn)行,以保證無(wú)菌環(huán)境。(3)從帶芽的莖段上長(zhǎng)出叢狀苗____________(填“需要”或“不需要”)經(jīng)歷脫分化,長(zhǎng)出的叢狀苗需__________后,再轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。(4)實(shí)驗(yàn)中選用BA和NAA而不用植物中存在的天然激素的原因是_____________________。(二)腺病毒能引起人呼吸系統(tǒng)不適等癥狀,但致死率低。研究發(fā)現(xiàn)該病毒可作為基因工程的載體。陳薇等科學(xué)家研發(fā)了以人5型腺病毒(Ad5)為載體的重組新冠疫苗,這是國(guó)內(nèi)第一個(gè)進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的新冠疫苗。腺病毒載體疫苗生產(chǎn)過(guò)程示意圖如下:回答下列問(wèn)題:(1)在制備人腎上皮細(xì)胞系(293細(xì)胞)時(shí),發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)一段時(shí)間,細(xì)胞鋪滿(mǎn)培養(yǎng)瓶后不再分裂,這種現(xiàn)象稱(chēng)為_(kāi)_________。出現(xiàn)此現(xiàn)象后,需用__________處理,得到細(xì)胞懸液,再進(jìn)行__________培養(yǎng),以獲得更多的293細(xì)胞。(2)新冠病毒為RNA病毒,其遺傳物質(zhì)不能直接拼接到質(zhì)粒上,因此在制備以上疫苗時(shí)需先通過(guò)___________過(guò)程獲得相應(yīng)的DNA。構(gòu)建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒,可使用雙酶切法,使之產(chǎn)生__________的粘性末端,以提高目的基因與質(zhì)粒重組的成功率。據(jù)圖可知需將___________導(dǎo)入293細(xì)胞,從而獲得轉(zhuǎn)基因腺病毒。(3)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因腺病毒攜帶的目的基因是否在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá),可檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)是否含有相應(yīng)的__________或抗原分子,若檢測(cè)抗原分子可用__________技術(shù)獲得特異性探針。8.(10分)A、轉(zhuǎn)基因草莓中有能表達(dá)乙肝病毒表面抗原的基因,由此可獲得用來(lái)預(yù)防乙肝的一種新型疫苗,其培育過(guò)程如圖所示(①至④代表過(guò)程,A至C代表結(jié)構(gòu)或細(xì)胞):(1)圖中①過(guò)程用到的酶是____,所形成的B叫做______。(2)②過(guò)程常用____處理農(nóng)桿菌,使之成為_(kāi)____細(xì)胞,利于完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。(3)圖中③過(guò)程需要用到的激素是__________________________。(4)在分子水平上,可采用______的方法來(lái)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因草莓果實(shí)提取液中有無(wú)相應(yīng)的抗原。B、野生馬鈴薯品種的植株具有較強(qiáng)的抗病、抗蟲(chóng)、抗鹽堿、抗寒能力,但塊莖不能食用。俄、德、芬蘭專(zhuān)家共同做實(shí)驗(yàn)研究,用野生馬鈴薯與馬鈴薯的體細(xì)胞進(jìn)行雜交,培育出了生活能力強(qiáng)的雜交系馬鈴薯。(1)專(zhuān)家在實(shí)驗(yàn)中,需用到的酶主要有__________________和____________________等。(2)專(zhuān)家在實(shí)驗(yàn)中,用于誘導(dǎo)融合使用的化學(xué)試劑是____________________。(3)對(duì)于農(nóng)民,種植雜交系馬鈴薯除可獲得較高的收成外,還有什么優(yōu)點(diǎn)?(要求寫(xiě)出兩點(diǎn))_____________________________________________________________________________________9.(10分)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身免疫病,致殘性強(qiáng)。研究表明,該病的病理改變與腫瘤壞死因子-α(TNF-α)密切相關(guān),而一種人鼠嵌合的抗TNF-α單克隆抗體能有效治療RA。下圖為該單克隆抗體制備過(guò)程示意圖。(1)圖中的抗原A是______________,常用的促融劑是_______________。細(xì)胞融合完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞。體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是________________。(2)HAT培養(yǎng)基的作用是經(jīng)選擇性培養(yǎng)篩選出雜交瘤細(xì)胞,之后還需要進(jìn)行__________培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。最后獲得的雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的原因是___________________。(3)單克隆抗體的特點(diǎn)是__________________。單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和____________技術(shù)。(4)單克隆抗體主要的用途有:_______________________________(至少答兩點(diǎn))。10.(10分)抑郁癥是近年來(lái)高發(fā)的一種精神疾病。研究表明,抑郁癥與去甲腎上腺素(NE)減少有關(guān)。NE是一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì),主要由交感節(jié)后神經(jīng)元和腦內(nèi)腎上腺素能神經(jīng)末梢合成和分泌;NE也是一種激素,由腎上腺髓質(zhì)合成和分泌。結(jié)合圖示回答下列相關(guān)問(wèn)題。(1)NE作為神經(jīng)遞質(zhì)和激素,都是調(diào)節(jié)生命活動(dòng)的____________,激素調(diào)節(jié)與神經(jīng)調(diào)節(jié)在作用途徑上的區(qū)別是____________。(2)據(jù)圖分析,突觸前神經(jīng)元興奮引起Ca2+內(nèi)流從而____________(填“促進(jìn)”或“抑制”)NE的釋放。NE釋放后的去向有____________和被突觸前膜再攝取。當(dāng)NE被突觸前膜攝取后,會(huì)抑制突觸前神經(jīng)元釋放NE,該調(diào)節(jié)機(jī)制為_(kāi)___________。(3)據(jù)圖分析,雜環(huán)類(lèi)抗抑郁劑治療抑郁癥的機(jī)理是____________。11.(15分)種群密度是種群最基本的數(shù)量特征,而豐富度是群落中物種數(shù)目的多少,請(qǐng)回答種群密度和豐富度的調(diào)查相關(guān)問(wèn)題。(1)在調(diào)查分布范圍較小、個(gè)體較大的種群時(shí),可以逐個(gè)計(jì)數(shù);在多數(shù)情況下,逐個(gè)計(jì)數(shù)非常困難,需要采取估算的方法。若要調(diào)查一塊農(nóng)田中農(nóng)作物植株上蚜蟲(chóng)的種群密度可采用____法,此法取樣的關(guān)鍵是____;若要調(diào)查一塊農(nóng)田中某種鼠的種群密度可采用____法,鼠被捕獲一次以后更難捕捉到,由此推測(cè)該調(diào)查結(jié)果與真實(shí)結(jié)果相比____(偏大/相等/偏?。蝗粢{(diào)查農(nóng)田中某種趨光性昆蟲(chóng)的種群密度可用_______法。(2)若要調(diào)查農(nóng)田土壤中小動(dòng)物類(lèi)群的豐富度,常用____的方法,豐富度的統(tǒng)計(jì)方法通常有兩種:____和目測(cè)估計(jì)法,而樣方法常用的取樣方法有:等距取樣法和五點(diǎn)取樣法。(3)將酵母菌接種到裝有10ml液體培養(yǎng)基的試管中,培養(yǎng)一段時(shí)間后,若要測(cè)定培養(yǎng)液中的菌體數(shù),可在顯微鏡下用_______直接計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)后發(fā)現(xiàn),試管中該種菌的總數(shù)達(dá)到a時(shí),種群數(shù)量不再增加。由此可知,該種群增長(zhǎng)曲線為S型,且種群數(shù)量為時(shí)_______,種群增長(zhǎng)速度最快。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、B【解析】
蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸,氨基酸通過(guò)脫水縮合(氨基和羧基形成肽鍵)形成多肽鏈,多肽鏈再進(jìn)一步折疊形成有空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)大分子。蛋白質(zhì)因?yàn)榘被岬姆N類(lèi)數(shù)目排列順序以及和蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)而呈現(xiàn)多種結(jié)構(gòu),進(jìn)而具有多種功能。【詳解】A、絕大多數(shù)蛋白質(zhì)都含有20種氨基酸,A錯(cuò)誤;B、蛋白質(zhì)都具有一定的空間結(jié)構(gòu),B正確;C、有一部分蛋白質(zhì)是酶,但不是所有的蛋白質(zhì)都是酶,酶有催化作用,因此不是所有的蛋白質(zhì)都有催化作用,C錯(cuò)誤;D、有些蛋白質(zhì)如消化酶,是在細(xì)胞外(如消化道內(nèi))發(fā)揮作用,D錯(cuò)誤。故選B。2、D【解析】
酶的特性:
(1)高效性:酶的催化效率大約是無(wú)機(jī)催化劑的107~1013倍。
(2)專(zhuān)一性:每一種酶只能催化一種或一類(lèi)化學(xué)反應(yīng)。
(3)作用條件較溫和:高溫、過(guò)酸、過(guò)堿都會(huì)使酶的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞,使酶永久失活;在低溫下,酶的活性降低,但不會(huì)失活?!驹斀狻緼、圖乙中,物質(zhì)1沒(méi)有水解,物質(zhì)2水解,說(shuō)明使用的催化劑具有專(zhuān)一性,因此可以確定圖乙利用的催化劑是淀粉酶,則圖中物質(zhì)2是淀粉,物質(zhì)1是蛋白質(zhì),A正確;
B、鹽酸水解有機(jī)物沒(méi)有專(zhuān)一性,并結(jié)合A項(xiàng)分析可知,圖甲、圖乙實(shí)驗(yàn)所用催化劑分別是HCl溶液和淀粉酶,B正確;
C、圖乙中利用了淀粉酶,但只能將淀粉水解,因此能夠體現(xiàn)酶的專(zhuān)一性;圖甲中利用的HCl溶液,與圖乙比較,催化淀粉水解的速度慢,因此可以體現(xiàn)酶的高效性,C正確;
D、該實(shí)驗(yàn)不能證明淀粉酶具有降低活化能的作用,D錯(cuò)誤。
故選D。3、B【解析】
本題考查與基因工程相關(guān)的知識(shí),基因工程的基本操作程序是:目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)氲绞荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定?!驹斀狻繉NF-α抗體的基因片段與噬菌體DNA重組需用限制酶和DNA連接酶,A正確;在細(xì)菌體內(nèi),噬菌體以細(xì)菌的氨基酸為原料合成TNF-α抗體,B錯(cuò)誤;因?yàn)槭删w由DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成,DNA在內(nèi)部,外面包裹著蛋白質(zhì),所以TNF-α抗體隨子代噬菌體的重新組裝而展示在噬菌體表面,C正確;噬菌體通過(guò)侵染細(xì)菌繁殖,增殖速度快,更容易快速獲得抗體,D正確。綜上所述因此選B。【點(diǎn)睛】熟悉基因工程的基本操作程序及噬菌體的結(jié)構(gòu)和生活習(xí)性是解題的關(guān)鍵。4、B【解析】
滲透作用發(fā)生的條件:具有半透膜;半透膜兩側(cè)具有濃度差;探究pH對(duì)酶活性時(shí),自變量應(yīng)該是不同的pH;探究溫度對(duì)酶活性的影響時(shí),自變量應(yīng)該是不同的溫度;二苯胺可與DNA在水浴條件下反應(yīng)呈藍(lán)色。【詳解】①在“脂肪的鑒定”實(shí)驗(yàn)中,體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液的作用是洗去浮色,①錯(cuò)誤;
②在“觀察紫色洋蔥鱗片葉細(xì)胞質(zhì)壁分離與復(fù)原”實(shí)驗(yàn)中,原生質(zhì)層的形態(tài)和位置變化為因變量,該實(shí)驗(yàn)可與未發(fā)生質(zhì)壁分離前的原生質(zhì)層的形態(tài)和位置形成對(duì)照,②錯(cuò)誤;③由于H2O2溶液不穩(wěn)定,在高溫條件下易分解,因此不能用作探究溫度對(duì)酶活性的影響實(shí)驗(yàn)的材料,③錯(cuò)誤;④小鼠吸入18O2,氧氣參與有氧呼吸的第三階段可以進(jìn)入水中,水再參與有氧呼吸的第二階段可以進(jìn)入二氧化碳中,故可以在其尿液中可檢測(cè)到,呼出的CO2可能含有18O,④正確;⑤用二苯胺試劑鑒定DNA時(shí),在沸水浴條件下溶液呈藍(lán)色,⑤錯(cuò)誤。只有一項(xiàng)正確,B正確,ACD錯(cuò)誤。故選B。【點(diǎn)睛】本題考查探究影響教材基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),對(duì)于此類(lèi)試題,需要考生注意的細(xì)節(jié)較多,如實(shí)驗(yàn)的取材是否合適、實(shí)驗(yàn)選用的鑒定試劑是否合理、實(shí)驗(yàn)條件控制是否得當(dāng)及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理等,這需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累。5、D【解析】
分析系譜圖可知,Ⅱ-1和Ⅱ-2都患甲病,但子代有正常的女兒,說(shuō)明該病為顯性遺傳,父親患病,女兒不患病,說(shuō)明基因不在X染色體上,而在常染色體上。兩病中有一種病為紅綠色盲,即伴性遺傳,所以乙病為伴性遺傳,Ⅱ-3和Ⅱ-4都不患乙病,子代有患乙病的兒子,說(shuō)明乙病為伴X隱性遺傳。據(jù)此答題?!驹斀狻緼、根據(jù)上述分析可知,甲病為常染色體顯性遺傳病,A正確;B、Ⅲ-4患有乙病,若Ⅲ-5為正常女性,則Ⅱ-3基因型為AaXBXb,Ⅱ-4基因型為aaXBY,所以Ⅲ-5為正常女性的基因型為aaXBXb或aaXBXB,B正確;C、Ⅲ-1正常,父親患乙病,則Ⅲ-1基因型為aaXBXb,則Ⅲ-1與正常男性(aaXBY)結(jié)婚,子女患?。╝aXbY)的可能性是1/4,C正確;D、Ⅱ-3基因型為AaXBXb,Ⅱ-4基因型為aaXBY,若Ⅲ-5為XXY型紅綠色盲個(gè)體,即基因型為XbXbY,應(yīng)為母方減數(shù)第二次后期Xb的姐妹染色體沒(méi)有分離,形成了XbXb的異常卵細(xì)胞,與含Y的精子受精后形成的XbXbY個(gè)體,D錯(cuò)誤。故選D?!军c(diǎn)睛】本題考查常見(jiàn)的人類(lèi)遺傳病的相關(guān)知識(shí)點(diǎn),遺傳圖譜的分析是解題的關(guān)鍵。意在考查學(xué)生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解與掌握程度,培養(yǎng)學(xué)生分析圖表和解決問(wèn)題的能力。6、C【解析】圖中幼苗沒(méi)有尖端,不能產(chǎn)生生長(zhǎng)素,所以幼苗不生長(zhǎng),A錯(cuò)誤;圖中幼苗尖端不能感受光刺激,表現(xiàn)為直立生長(zhǎng),B錯(cuò)誤;圖中幼苗的尖端可以感受單側(cè)光的刺激,所以表現(xiàn)為向光生長(zhǎng),C正確;圖中幼苗沒(méi)有感受光刺激的尖端,但是有含有生長(zhǎng)素的瓊脂塊,所以幼苗表現(xiàn)為直立生長(zhǎng),D錯(cuò)誤。【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是根據(jù)有無(wú)尖端或者生長(zhǎng)素判斷植物是否生長(zhǎng),有無(wú)單側(cè)光和尖端判斷植物是否彎曲生長(zhǎng)。二、綜合題:本大題共4小題7、母液C發(fā)芽(生芽)無(wú)菌水超凈臺(tái)不需要分株BA和NAA是人工合成激素,植物沒(méi)有相關(guān)分解酶,作用時(shí)間長(zhǎng),效果明顯接觸抑制胰蛋白酶?jìng)鞔孓D(zhuǎn)錄不同重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒mRNA單克隆抗體制備【解析】
1、植物組織培養(yǎng)的過(guò)程:離體的植物組織、器官或細(xì)胞(外植體)脫分化形成愈傷組織,再分化形成胚狀體,最后長(zhǎng)出完整植株(新植體)。2、植物組織培養(yǎng)的條件:①細(xì)胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等);②一定的營(yíng)養(yǎng)(無(wú)機(jī)、有機(jī)成分)和植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類(lèi)和比例,特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要,被稱(chēng)為“激素杠桿”。3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程:取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。4、基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成;(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等;(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法;(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù).個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚ㄒ唬?)MS培養(yǎng)基由大量元素、微量元素和有機(jī)成分組成,也可將大量元素、微量元素和有機(jī)成分分別配制成濃度為配方的5~10倍的母液,用時(shí)稀釋?zhuān)@樣配制的主要優(yōu)點(diǎn)是降低稱(chēng)量誤差(即C)。MS培養(yǎng)基中定量添加BA和NAA后的培養(yǎng)基屬于發(fā)芽培養(yǎng)基,MS培養(yǎng)基中定量添加NAA后的培養(yǎng)基屬于生根培養(yǎng)基。(2)從自然界中獲取的菊花莖段,須先用70%乙醇等進(jìn)行消毒,再放入5%次氯酸鈉溶液浸泡,然后用另一5%次氯酸鈉溶液浸泡,最后在超凈臺(tái)中用無(wú)菌水清洗,將莖的切斷培養(yǎng)在生芽培養(yǎng)基中。(3)從帶芽的莖段上長(zhǎng)出叢狀苗不需要經(jīng)歷脫分化,長(zhǎng)出的叢狀苗需要分株后,再轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。(4)實(shí)驗(yàn)中使用的是人工合成的BA和NAA,是由于植物沒(méi)有相關(guān)分解酶,作用時(shí)間長(zhǎng),效果明顯。(二)(1)細(xì)胞鋪滿(mǎn)瓶壁時(shí),會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,此時(shí)需要胰蛋白酶處理,得到細(xì)胞懸液,再進(jìn)行傳代培養(yǎng),已獲得更多的細(xì)胞。(2)新冠病毒是單鏈的RNA病毒,而質(zhì)粒是雙鏈的DNA,因此需要將RNA通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到相應(yīng)的DNA才能拼接到質(zhì)粒上。構(gòu)建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒,使用雙酶切法產(chǎn)生不同的粘性末端,這樣可以避免目的基因和質(zhì)粒自身連接以及目的基因和質(zhì)粒反向連接,提高目的基因與質(zhì)粒重組的成功率。據(jù)圖可知需將重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞293細(xì)胞內(nèi)。(3)基因的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過(guò)程,因此檢測(cè)目的基因是否在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá),可檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)是否含有相應(yīng)的mRNA或抗原分子,檢測(cè)抗原分子的方法是抗原-抗體雜交法,可用單克隆抗體制備技術(shù)獲得特異性探針?!军c(diǎn)睛】本題考查植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和基因工程的基本操作程序等相關(guān)知識(shí),要求考生能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng),屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。8、DNA連接酶基因表達(dá)載體(重組質(zhì)粒)CaCl2溶液(或Ca2+)感受態(tài)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素抗原—抗體雜交纖維素酶果膠酶聚乙二醇(PEG)可少施農(nóng)藥;可在鹽堿地區(qū)種植【解析】
分析題圖:①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程;②將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法);③④表示植物組織培養(yǎng)過(guò)程,其中③是脫分化過(guò)程、④是再分化過(guò)程。圖中A是目的基因、B是基因表達(dá)載體(由啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等部分構(gòu)成)、C是愈傷組織。【詳解】A、(1)圖解中A表示具有黏性末端的目的基因,它與質(zhì)粒(上有切口,表示已被限制酶切割)結(jié)合形成重組質(zhì)粒B的過(guò)程中,需用到DNA連接酶連接;形成的B叫做基因表達(dá)載體(重組質(zhì)粒)。(2)圖中②過(guò)程是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌,由于受體細(xì)胞是細(xì)菌,所以常用Ca2+處理細(xì)胞,使其處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),稱(chēng)為感受態(tài)細(xì)胞,以完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。(3)③是脫分化形成愈傷組織,需要激素:生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。(4)在檢查轉(zhuǎn)基因草莓果實(shí)提取液中有無(wú)相應(yīng)抗原,應(yīng)用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè),如出現(xiàn)雜交帶,表明已出現(xiàn)相應(yīng)產(chǎn)物。B、(1)專(zhuān)家在實(shí)驗(yàn)中用到的是植物體細(xì)胞雜交技術(shù),需要纖維素酶和果膠酶。(2)植物細(xì)胞融合中誘導(dǎo)融合的化學(xué)試劑是聚乙二醇(PEG)。(3)野生馬鈴薯品種的植株具有較強(qiáng)的抗病、抗蟲(chóng)、抗鹽堿、抗寒能力,所以可少施農(nóng)藥;可在鹽堿地區(qū)種植。?!军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交等知識(shí),意在考查能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。9、腫瘤壞死因子-α(或TNF-α)聚乙二醇(PEG)細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%克隆化培養(yǎng)每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)作為診斷試劑、用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物【解析】
單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備,雜交瘤抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體,又能無(wú)限增殖。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對(duì)一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。題圖分析,單抗制備過(guò)程為:將特定的抗原注射小鼠→篩選出產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞→誘導(dǎo)細(xì)胞融合→用HAT培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞→篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞→大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。單克隆抗體典型優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ),是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑,也可用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物,主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的。【詳解】(1)要制備抗TNF-a單克隆抗體需要給小鼠注射腫瘤壞死因子a(TNF-a),即圖中的抗原A。常用物理或化學(xué)方法促融,最常用的化學(xué)促融劑是聚乙二醇(PEG),細(xì)胞融合完成后,由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%,所以細(xì)胞融合完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞。
(2)HAT培養(yǎng)基的作用是選擇性培養(yǎng)篩選出雜交瘤細(xì)胞,在抗體檢測(cè)之前需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng),以增加雜交瘤細(xì)胞數(shù)量。經(jīng)多次篩選,就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的原因是每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。(3)單克隆抗體典型優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ),單克隆抗體技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的應(yīng)用之一。故單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。(4)單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑,也可用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物,主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的。【點(diǎn)睛】熟知單克隆抗體制備流程中各階段的原理和要點(diǎn)是解答本題的關(guān)鍵!熟知單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)及其應(yīng)用是解答本題的另一關(guān)鍵!10、信息分子激素調(diào)節(jié)通過(guò)體液將激素運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞,而神經(jīng)調(diào)節(jié)通過(guò)反射弧調(diào)節(jié)促進(jìn)被水解、與突觸后膜上的受體結(jié)合(負(fù))反饋調(diào)節(jié)雜環(huán)類(lèi)抗抑郁劑抑制NE的再攝取,使突觸間隙中的NE含量升高,從而治療抑郁癥【解析】
1、根據(jù)圖分析,神經(jīng)系統(tǒng)可通過(guò)突觸前膜釋放神經(jīng)遞質(zhì),直接調(diào)節(jié)免疫器官或免疫細(xì)胞的活動(dòng),還可通過(guò)有關(guān)激素間接調(diào)節(jié)免疫器官或免疫細(xì)胞的活動(dòng),在此過(guò)程中信息分子神經(jīng)遞質(zhì)、激素等參與動(dòng)物細(xì)胞間的信息交流。2、突觸遞特征:?jiǎn)蜗騻鲗?dǎo)。即只能由一個(gè)神經(jīng)元的軸突傳導(dǎo)給另一個(gè)神經(jīng)元的細(xì)胞體或樹(shù)突,而不能向相反的方向傳導(dǎo),這是因?yàn)樯窠?jīng)遞質(zhì)只存在于突觸小體中,只能由突觸前膜釋放,通過(guò)突觸間隙,作用于突觸后膜,引起突觸后膜發(fā)生興奮性或抑制性的變化,從而引起下一個(gè)神經(jīng)元的興奮或抑制。【詳解】(1)神經(jīng)遞質(zhì)和激素都是信息分子,激素調(diào)節(jié)的途徑是通過(guò)體液將激素運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞并與靶細(xì)胞結(jié)合發(fā)揮作用,而神經(jīng)調(diào)節(jié)的途徑是反射弧。(2)從圖示分析,突觸前神經(jīng)元興奮引起內(nèi)流,激活突觸小泡上的受體,使突觸小泡與突觸前膜融合,從而促進(jìn)釋放NE。突觸前膜釋放的NE的去向:被水解、與突觸后膜上的受體結(jié)合和被突觸前膜再攝取。NE釋放后被突觸前膜回收,會(huì)抑制NE的釋放,該調(diào)節(jié)方式為負(fù)反饋調(diào)節(jié)。(3)抑郁癥與NE
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