Y-120在制備抗無菌性炎癥藥物中的新用途

發(fā)明名稱:Y-120在制備抗無菌性炎癥藥物中的新用途發(fā)明人:XXX地址：XXXXXXXXXXXXXXXXX申請人:深圳XXXXX科技公司地址：XXXXXXXXXXXXXXXXX申請日:2007年XX月XX日摘要:本發(fā)明涉及Y-120在制藥領域的新用途，特別是在制備抗無菌性炎癥藥物中的應用。按照現(xiàn)有中、草藥提取工藝和方法把有效成份提取出來后制成口服劑、注射劑和外用劑型，主要用于治療無菌性炎癥疾病，如：頸椎病、腰椎病、肩周炎、網球肘、肌筋膜綜合癥、風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎等，效果顯著，安全可靠，無毒副作用。權利要求書1、Y-120在制備抗無菌性炎癥藥物中的新用途。2、按照權利要求1所述的這種Y-120的應用，其特征在于：將Y-120按照現(xiàn)有中、草藥提取工藝和方法把有效成份提取出來后制成口服劑、注射劑和外用劑型，所用的浸提劑可以是：乙醇、甲醇、丙二醇、丙酮、乙醚、甘油、氯仿，或其混合物、水、動植物油、釀造醋或無機醋，浸提包括冷浸和熱浸，制備的方法是將Y-120用浸提劑浸提、獲得提取液。3、按照權利要求1、2所述的Y-120的應用，其特征在于：用40—60％濃度的乙醇作浸提劑，將原料藥冷浸24小時以上。4、按照權利要求1、2所述的應用，Y-120及其提取物可以直接用于藥用，也可以與其它中草藥植物或其提取物配伍使用。5、按照權利要求1、2所述的Y-120的應用，其特征在于：可以治療的無菌性炎癥包括：頸椎病、腰椎病、肩周炎、網球肘、肌筋膜綜合癥、風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、四肢麻木肌寒骨冷、無菌性前列腺炎、多發(fā)性神經炎、神經性皮炎、腱鞘炎、腰肌勞損；由于無菌性炎癥引起的坐骨神經痛、足跟痛、偏頭痛、頑固骨痛；癌癥疼痛、支氣管哮喘，以及醫(yī)學界定義的病因為無菌性炎癥的其它疾病如骨軟骨炎，臀上皮損傷，閉合性損傷等。說明書Y-120在制備抗無菌性炎癥藥物中的新用途技術領域本發(fā)明涉及Y-120在制藥領域的新用途，特別是在制備抗無菌性炎癥藥物中的應用。技術背景醫(yī)學界把炎癥分為“細菌性炎癥”和“無菌性炎癥”兩大類，細菌性炎癥容易導致急性病癥的發(fā)作，所以普遍引起重視，大量的抗細菌性感染藥物如青霉素、碳青霉烯類抗生素作為有針對性的特效藥已被開發(fā)出來并陸續(xù)用于臨床，而無菌性炎癥卻沒有任何特效甚至確實能有效治療的藥物，所謂無菌性炎癥一般包括：頸椎病、腰椎病、肩周炎、網球肘、肌筋膜綜合癥、風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、四肢麻木肌寒勞損、陳舊跌打損傷、癌癥疼痛等病癥；現(xiàn)代醫(yī)學研究已證明，增生的骨刺常刺入周圍軟組織，出現(xiàn)炎性滲出、水腫、及代謝物的堆積，形成粘連，從而刺激神經感受器產生疼痛感，無菌性炎癥在肌肉、筋膜、韌帶、周圍神經叢、關節(jié)囊、血管壁形成的水腫和粘連壓迫脊髓、推動脈和神經根，導致頸腰椎病復雜癥狀難以消除，粘連及鈣化的韌帶、筋膜，與肌肉牽拉，是許多無菌性炎癥疾病如：頸腰椎病、肩周炎、肌筋膜綜合癥、骨關節(jié)炎等肌體功能障礙出現(xiàn)的原因，這些無菌性炎癥所引發(fā)的疾病雖多為慢性病，但仍在摧殘著全世界數(shù)十億人的健康。Y-120(英文名稱)廣泛分布在我國的XXXXXXXXXXXX等省市，據(jù)《XXXXXXX》(XXX等編著，XXXXX出版社出版，XXXX年第X版，第X頁。)記載，Y-120有XXXXXXXXX等功能。目前Y-120被應用于治療XXXX等疾病。但將Y-120在制備抗無菌性炎癥藥物中的應用，至今未見報道。發(fā)明內容經過本發(fā)明人的多年科研發(fā)現(xiàn)，Y-120藥理作用較強，抗炎、鎮(zhèn)痛以及治療其相關病癥的效果明顯，因此與無菌性炎癥有關的疾病都能治療或預防。本發(fā)明的目的在于提供一種Y-120的新用途，尤其是在制備抗無菌性炎癥的藥物或保健品中的應用。本發(fā)明是這樣構成的：將所述的Y-120按照現(xiàn)有中、草藥提取工藝和方法把有效成份提取出來后制成口服劑、注射劑和外用劑型，所用的浸提劑可以是：乙醇、甲醇、丙二醇、丙酮、乙醚、甘油、氯仿，或其混合物、水、動植物油、釀造醋或無機醋，浸提包括冷浸和熱浸，制備的方法是將Y-120用浸提劑浸提、獲得提取液，Y-120及其提取物可以直接用于藥用，也可以與其它中草藥植物或其提取物配伍使用。當然，也可以按照下述方法制備：取Y-120藥材，分別以藥材4—12倍量的40—60％乙醇浸泡24小時以上，滲漉提取，重復一次，合并醇提液，回收乙醇至無醇味，在60℃減壓干燥，60℃減壓回收，得到干的浸膏，粉碎即得浸膏粉。用Y-120制備的抗無菌性炎癥藥物的用途，可以治療的無菌性炎癥包括：頸椎病、腰椎病、肩周炎、網球肘、肌筋膜綜合癥、風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、四肢麻木肌寒骨冷、無菌性前列腺炎、多發(fā)性神經炎、神經性皮炎、腰鞘炎、腰肌勞損；由于無菌性炎癥引起的坐骨神經痛、足跟痛、偏頭痛、頑固骨痛；癌癥疼痛、支氣管哮喘，以及醫(yī)學界定義的病因為無菌性炎癥的其它疾病如骨軟骨炎，臀上皮損傷，閉合性損傷等。具體實施方式下面以具體的實施例來說明本發(fā)明，下述實施例僅是對本發(fā)明的進一步說明和解釋，并不用來限制本發(fā)明。實施例1Y-120對二甲苯致小鼠耳殼炎癥的影響受試藥物：名稱：Y-12050%乙醇提取物性狀：棕褐色固體陽性對照藥：阿司匹林腸溶片（批號：041001，上海信誼百路達藥業(yè)有限公司）劑量設置：根據(jù)預實驗結果，取小鼠低劑量為240mg/kg，低、中、高劑量比為1：2：4，相應中、高劑量分別為480和960mg/kg。因此本實驗采用Y-120的劑量為240、480、960mg/kg。陽性對照阿司匹林腸溶片(上海信誼百路達藥業(yè)有限公司，批號：041001，25mg/片)口服，臨床推薦平均劑量為37.5mg/天/人,以60公斤體重計算，為0.625mg/kg/人，本實驗中小鼠劑量按體表面積折算，相當于7.5mg/kg，本實驗陽性對照藥阿司匹林腸溶片灌胃劑量為10mg/kg。劑量設計表組別給藥途徑劑量動物數(shù)(只)溶劑對照組灌胃10ml/kg10阿司匹林組灌胃10mg/kg10Y-120低劑量組灌胃240mg/kg10Y-120中劑量組灌胃480mg/kg10Y-120高劑量組灌胃960mg/kg10溶劑對照：溶劑對照按10ml/kg灌胃。給藥途經：灌胃。給藥次數(shù)：連續(xù)六日給藥，1次/日。動物種屬、品系：昆明種小鼠性別：雄性體重：20±2克數(shù)量：50只，隨機分成5組，每組10只。來源：上海斯萊克實驗動物有限公司等級：清潔級，許可證號：SCXK(滬)2004－0005飼養(yǎng)場所：上海第二軍醫(yī)大學藥學院動物房等級：清潔級，合格證號：醫(yī)動字第02－64號每組動物數(shù)：10只。試驗方法：取昆明種小鼠50只，隨機分為5個組，實驗前五天及實驗前30min按Table1-1給藥。30min后，將0.05ml二甲苯涂于小鼠右側耳殼兩面，左耳不涂作為對照，致炎后30min拉斷頸椎處死小鼠，沿耳廓基線剪下雙耳，用直徑6mm的打孔器沖下左耳及右耳同一部位的圓片，于分析天平上稱重，以左右兩耳片重量計算各組腫脹率，求腫脹抑制率，進行組間比較。公式為：腫脹率(%)=(右耳重量-左耳重量)/左耳重量×100%腫脹抑制率(%)=(給藥組腫脹率-模型組腫脹率)/模型組腫脹率×100%觀察指標及觀察時間：稱量打孔器取下的左右兩耳片重量，計算各組腫脹率，求腫脹抑制率。觀察時間為致炎后30分鐘。數(shù)據(jù)及統(tǒng)計學分析：實驗數(shù)據(jù)以xSD表示，用SPSS10.0軟件進行方差分析，作顯著性檢驗。試驗結果：實驗結果表明，Y-120的三個劑量組和阿司匹林組與溶劑組比較，對二甲苯所致小鼠耳殼腫脹有明顯抑制作用(P<0.05，或P<0.01)，Y-120的三個劑量組與阿司匹林組相比較均無顯著性差異。(Table1-2)Y-120對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響（xSD,n=10）組別劑量腫脹率(%)腫脹抑制率(%)溶劑對照組10ml/kg69.528.5-阿司匹林組10mg/kg39.722.1**42.8Y-120低劑量組240mg/kg42.930.0*38.3Y-120中劑量組480mg/kg34.524.0**50.5Y-120高劑量組960mg/kg31.028.8**55.4*P<0.05,**P<0.01與溶劑對照組比較實驗結論：二甲苯誘發(fā)小鼠耳殼水腫主要是某些炎癥介質如組織胺、緩激肽和纖維蛋白溶解酶的釋放，引起局部毛細血管通透性增加，炎癥細胞浸潤，造成耳部急性滲出性炎癥水腫．本實驗結果表明，Y-120的三個劑量組對二甲苯引起的耳殼腫脹有明顯的抑制作用，說明本藥對急性炎癥有顯著的抗炎作用。．實施例2Y-120對角叉菜膠致大鼠關節(jié)炎的影響受試藥物：名稱：Y-12050%乙醇提取物性狀：棕褐色固體陽性對照藥：阿司匹林腸溶片（批號：041001，上海信誼百路達藥業(yè)有限公司）劑量設置：根據(jù)預實驗結果，取大鼠低劑量為120mg/kg，低、中、高劑量比為1：2：4，相應中、高劑量分別為240和480mg/kg。因此本實驗采用Y-120的劑量為120、240、480mg/kg。陽性對照阿司匹林腸溶片(上海信誼百路達藥業(yè)有限公司，批號：041001，25mg/片)口服，臨床推薦平均劑量為37.5mg/天/人,以60公斤體重計算，為0.625mg/kg/人，本實驗中大鼠劑量按體表面積折算，相當于3.75mg/kg，本實驗陽性對照藥阿司匹林腸溶片灌胃劑量為5mg/kg。劑量設計組別給藥途徑劑量動物數(shù)(只)溶劑對照組灌胃10ml/kg10阿司匹林組灌胃5mg/kg10Y-120低劑量組灌胃120mg/kg10Y-120中劑量組灌胃240mg/kg10Y-120高劑量組灌胃480mg/kg10溶劑對照：溶劑對照按10ml/kg灌胃。給藥途經：灌胃。給藥次數(shù)：均單次給藥。動物種屬、品系：Wistar大鼠性別：雄性體重：220±20克數(shù)量：50只，隨機分成5組，每組10只。來源：上海斯萊克實驗動物有限公司等級：清潔級，許可證號：SCXK(滬)2004－0005飼養(yǎng)場所：上海第二軍醫(yī)大學藥學院動物房等級：清潔級，合格證號：醫(yī)動字第02－64號每組動物數(shù)：10只。試驗方法：取雄性Wistar大鼠50只，隨機分為5個組，禁食過夜，實驗前1h按Table2-1給藥。1h后，每只大鼠右后足跖健膜下注射1%角叉菜膠（滅菌生理鹽水配置）0.lml致炎，測量致炎前及致炎后1-5h的右踝關節(jié)周長，每小時測量一次，計算各組腫脹率，進行組間比較。公式為：腫脹率(%)=(致炎后周長-致炎前周長)/致炎前周長×100%觀察指標及觀察時間：測量大鼠右踝關節(jié)周長，計算腫脹率。觀察時間致炎前及致炎后1-5h，每小時測量一次。數(shù)據(jù)及統(tǒng)計學分析：實驗數(shù)據(jù)以xSD表示，用SPSS10.0軟件進行方差分析，作顯著性檢驗。試驗結果：實驗結果表明，Y-120的三個劑量組均能明顯抑制角叉菜膠引起的大鼠踝關節(jié)腫脹(P<0.01)，且有劑量依賴性趨勢，作用時間持續(xù)5h以上。(Table2-2)Y-120對大鼠角叉菜膠性關節(jié)炎踝關節(jié)腫脹的影響（xSD,n=10）組別劑量致炎后不同時間的腫脹率(%)1h2h3h4h5h溶劑對照組10ml/kg10.52.211.23.012.54.19.43.48.62.9阿司匹林組10mg/kg5.22.4**5.33.8**5.73.8**5.84.8*4.02.3**Y-120低劑量組120mg/kg8.14.36.43.8**6.63.0**7.54.25.03.0**Y-120中劑量組240mg/kg6.04.3**6.31.5**7.63.0**7.02.8*4.33.1**Y-120高劑量組480mg/kg5.02.6**3.23.2**6.72.1**3.43.4**3.42.3***P<0.05,**P<0.01與溶劑對照組比較實驗結論：角叉菜膠誘發(fā)大鼠關節(jié)腫脹模型是以血管通透性為主要改變的急性炎癥模型，該模型的特點是致炎局部PG合成增加，并與血管活性物質和激肽類一起誘發(fā)水腫，用于觀察藥物對急性炎癥過程的影響。本實驗證明Y-120的三個劑量組對角叉菜膠誘發(fā)大鼠踝關節(jié)腫脹均具有明顯抑制作用，特別是中、高劑量組在致炎后1-5小時均具有明顯的抗炎作用，說明本藥對急性炎癥有顯著的抗炎作用。實施例3Y-120對佐劑致大鼠關節(jié)炎的影響受試藥物：名稱：Y-12050%乙醇提取物性狀：棕褐色固體陽性對照藥：阿司匹林腸溶片（批號：041001，上海信誼百路達藥業(yè)有限公司）劑量設置：根據(jù)預實驗結果，取大鼠低劑量為120mg/kg，低、中、高劑量比為1：2：4，相應中、高劑量分別為240和480mg/kg。因此本實驗采用Y-120的劑量為120、240、480mg/kg。陽性對照阿司匹林腸溶片(上海信誼百路達藥業(yè)有限公司，批號：041001，25mg/片)口服，臨床推薦平均劑量為37.5mg/天/人,以60公斤體重計算，為0.625mg/kg/人，本實驗中大鼠劑量按體表面積折算，相當于3.75mg/kg，本實驗陽性對照藥阿司匹林腸溶片灌胃劑量為5mg/kg。劑量設計組別給藥途徑劑量動物數(shù)(只)溶劑對照組灌胃10ml/kg10阿司匹林組灌胃5mg/kg10Y-120低劑量組灌胃120mg/kg10Y-120中劑量組灌胃240mg/kg10Y-120高劑量組灌胃480mg/kg10溶劑對照：溶劑對照按10ml/kg灌胃。給藥途經：灌胃。給藥次數(shù)：預防性實驗從致炎當日開始預防給藥，連續(xù)給藥至第12日，1次/日；治療性實驗從致炎后第7日開始灌胃給藥，連續(xù)給藥至第21日，1次/日。動物種屬、品系：Wistar大鼠性別：雄性體重：170±20克數(shù)量：100只，隨機分成10組，每組10只，預防性和治療性實驗各5組。來源：上海斯萊克實驗動物有限公司等級：清潔級，許可證號：SCXK(滬)2004－0005飼養(yǎng)場所：上海第二軍醫(yī)大學藥學院動物房等級：清潔級，合格證號：醫(yī)動字第02－64號每組動物數(shù)：10只。試驗方法：1．對佐劑性關節(jié)炎的預防作用取雄性Wistar大鼠50只，隨機分為5個組，測量大鼠右后足踝關節(jié)圓周長，按Table3-1給藥。1h后每只大鼠右后足跖皮下注射注射完全Freund's佐劑0.1m1致炎，此后每天給藥1次，連續(xù)12d，并測量致炎后18h，3d、6d、9d、12d大鼠右踝關節(jié)圓周長，計算各組腫脹率，進行組間比較。公式為：腫脹率(%)=(致炎后周長-致炎前周長)/致炎前周長×100%2．對佐劑性關節(jié)炎的治療作用取雄性Wistar大鼠50只，隨機分為5個組，測量大鼠右后足踝關節(jié)圓周長，每只大鼠右后足跖皮下注射注射完全Freund's佐劑0.1m1致炎，致炎后第7d開始按Table3-1灌胃給藥，并測量致炎后第6d、9d、12d、15d、18d、21d大鼠右踝關節(jié)圓周長，計算各組腫脹率，進行組間比較。公式為：腫脹率(%)=(致炎后周長-致炎前周長)/致炎前周長×100%觀察指標及觀察時間：測量大鼠右踝關節(jié)周長，計算腫脹率。觀察時間預防性實驗為致炎前及致炎后18h，3d、6d、9d、12d；治療性實驗為致炎前及致炎后6d、9d、12d、15d、18d、21d。數(shù)據(jù)及統(tǒng)計學分析：實驗數(shù)據(jù)以xSD表示，用SPSS10.0軟件進行方差分析，作顯著性檢驗。試驗結果：實驗結果表明，在預防性和治療性實驗中，Y-120的三個劑量組均能明顯抑制Freund's佐劑引起的大鼠踝關節(jié)腫脹(P<0.05，或P<0.01)，且呈劑量依賴性。(Table3-2)Y-120對大鼠對佐劑性關節(jié)炎的預防作用（xSD,n=10）組別劑量致炎后不同時間的腫脹率(%)18h3d6d9d12d溶劑對照組10ml/kg19.43.520.95.618.74.419.74.618.53.4阿司匹林組10mg/kg16.23.9*13.93.1**14.82.9*12.13.0**13.44.7**Y-120低劑量組120mg/kg17.33.718.94.418.73.815.73.9*16.64.2Y-120中劑量組240mg/kg16.23.2*16.62.2*16.43.412.92.0**14.92.7*Y-120高劑量組480mg/kg15.73.3*16.82.1*13.43.0**12.64.2**11.93.5***P<0.05,**P<0.01與溶劑對照組比較Y-120對大鼠對佐劑性關節(jié)炎的治療作用（xSD,n=10）組別劑量致炎后不同時間的腫脹率(%)6d9d12d15d18d21d24d溶劑對照組10ml/kg19.63.518.62.119.33.917.42.116.02.316.22.715.22.5阿司匹林組10mg/kg19.02.216.72.3*15.43.4*12.73.5**12.04.0**12.03.6**11.33.0**Y-120低劑量組120mg/kg19.43.617.51.618.03.915.23.814.03.414.02.5*14.42.9Y-120中劑量組240mg/kg19.63.516.13.9*17.53.914.24.4*13.33.6*13.34.4*12.34.6*Y-120高劑量組480mg/kg19.22.015.73.7*14.34.6**12.93.6**11.73.3**12.02.6**11.73.1***P<0.05,**P<0.01與溶劑對照組比較實驗結論：大鼠佐劑性關節(jié)炎模型是一種免疫劑刺激形成的免疫亢進性關節(jié)炎癥，與人類類風濕性關節(jié)炎的形成和表現(xiàn)有很多類似之處，原發(fā)病變主要是局部急性炎癥反應。本實驗中Y-120的三個劑量組在預防和治療性實驗中均能明顯抑制Freund's佐劑引起的大鼠踝關節(jié)腫脹，說明本藥對大鼠佐劑關節(jié)炎原發(fā)病變的炎癥反應具有較好的預防和治療作用。實施例4Y-120對醋酸所致小鼠扭體反應的影響受試藥物：名稱：Y-12050%乙醇提取物性狀：棕褐色固體陽性對照藥：阿司匹林腸溶片（批號：041001，上海信誼百路達藥業(yè)有限公司）劑量設置：根據(jù)預實驗結果，取小鼠低劑量為240mg/kg，低、中、高劑量比為1：2：4，相應中、高劑量分別為480和960mg/kg。因此本實驗采用Y-120的劑量為240、480、960mg/kg。陽性對照阿司匹林腸溶片(上海信誼百路達藥業(yè)有限公司，批號：041001，25mg/片)口服，臨床推薦平均劑量為37.5mg/天/人,以60公斤體重計算，為0.625mg/kg/人，本實驗小鼠劑量按體表面積折算，相當于7.5mg/kg，本實驗陽性對照藥阿司匹林腸溶片灌胃劑量為10mg/kg。劑量設計組別給藥途徑劑量動物數(shù)(只)溶劑對照組灌胃10ml/kg10阿司匹林組灌胃10mg/kg10Y-120低劑量組灌胃240mg/kg10Y-120中劑量組灌胃480mg/kg10Y-120高劑量組灌胃960mg/kg10溶劑對照：溶劑對照按10ml/kg灌胃。給藥途經：灌胃。給藥次數(shù)：連續(xù)六日給藥，1次/日。動物種屬、品系：昆明種小鼠性別：雌雄各半體重：22±2克數(shù)量：50只，隨機分成5組，每組10只。來源：上海斯萊克實驗動物有限公司等級：清潔級，許可證號：SCXK(滬)2004－0005飼養(yǎng)場所：上海第二軍醫(yī)大學藥學院動物房等級：清潔級，合格證號：醫(yī)動字第02－64號每組動物數(shù)：10只。試驗方法：取昆明種小鼠50只，隨機分為5個組，實驗前五天及實驗前30min按Table4-1給藥。最后一次給藥30min后，均腹腔注射0.7%冰醋酸10ml/kg，5min后觀察記錄10min內各組小鼠扭體反應次數(shù)，并計算藥物對扭體反應次數(shù)的抑制百分率，進行組間比較。公式為：抑制率(%)=(給藥組扭體次數(shù)-溶劑對照組扭體次數(shù))/溶劑對照組扭體次數(shù)×100%觀察指標及觀察時間：10min內各組小鼠扭體反應次數(shù)。觀察時間為腹腔注射0.7%冰醋酸后5min。數(shù)據(jù)及統(tǒng)計學分析：實驗數(shù)據(jù)以xSD表示，用SPSS10.0軟件進行方差分析，作顯著性檢驗。試驗結果：Y-120的三個劑量組均對醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應有非常顯著的鎮(zhèn)痛作用，與對照組比較，有非常顯著的差異（P<0.01），低、中、高劑量組的抑制率分別為42.8%、45.3%和59.3%。(Table4-2)Y-120對醋酸引起小鼠扭體反應的影響（xSD,n=10）組別劑量10min內扭體次數(shù)抑制率(%)溶劑對照組10ml/kg43.012.3-阿司匹林組10mg/kg26.95.4**37.4Y-120低劑量組240mg/kg24.68.4**42.8Y-120中劑量組480mg/kg23.53.4**45.3Y-120高劑量組960mg/kg17.54.2**59.3**P<0.01與溶劑對照組比較實驗結論：扭體法是研究藥物鎮(zhèn)痛作用較為常用的方法。腹腔注射冰醋酸后，醋酸中電離出的微量H+可引起腹腔深部大面積較持久的疼痛刺激(內臟痛)，致使小鼠產生扭體反應。Y-120能非常顯著減少由醋酸引起小鼠扭體反應次數(shù)，表明Y-120具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。實施例5Y-120對醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性增高的影響受試藥物：名稱：Y-12050%乙醇提取物性狀：棕褐色固體陽性對照藥：阿司匹林腸溶片（批號：041001，上海信誼百路達藥業(yè)有限公司）劑量設置：根據(jù)預實驗結果，取小鼠低劑量為240mg/kg，低、中、高劑量比為1：2：4，相應中、高劑量分別為480和960mg/kg。因此本實驗采用Y-120的劑量為240、480、960mg/kg。陽性對照阿司匹林腸溶片(上海信誼百路達藥業(yè)有限公司，批號：041001，25mg/片)口服，臨床推薦平均劑量為37.5mg/天/人,以60公斤體重計算，為0.625mg/kg/人，本實驗中小鼠劑量按體表面積折算，相當于7.5mg/kg，本實驗陽性對照藥阿司匹林腸溶片灌胃劑量為10mg/kg。劑量設計表組別給藥途徑劑量動物數(shù)(只)溶劑對照組灌胃10ml/kg10阿司匹林組灌胃10mg/kg10Y-120低劑量組灌胃240mg/kg10Y-120中劑量組灌胃480mg/kg10Y-120高劑量組灌胃960mg/kg10溶劑對照：溶劑對照按10ml/kg灌胃。給藥途經：灌胃。給藥次數(shù)：連續(xù)七日給藥，1次/日。動物種屬、品系：昆明種小鼠性別：雌雄各半體重：20±2克數(shù)量：50只，隨機分成5組，每組10只。來源：上海斯萊克實驗動物有限公司等級：清潔級，許可證號：SCXK(滬)2004－0005飼養(yǎng)場所：上海第二軍醫(yī)大學藥學院動物房等級：清潔級，合格證號：醫(yī)動字第02－64號每組動物數(shù)：10只。試驗方法：取昆明種小鼠50只，隨機分為5個組，實驗前六天及實驗前30min按Table5-1給藥。30min后，尾靜脈注射0.5％伊文思藍溶液0.1ml/10g，隨后立即腹腔注射0.7％醋酸生理鹽水溶液0.2ml/只，20min后脫頸椎處死動物，剪開腹腔，用10ml生理鹽水分多次洗滌腹腔，吸取腹腔液，1500r/min離心10min，取上清液于751分光光度計590nm波長下比色測定OD值，計算抑制率，進行統(tǒng)計學處理，進行組間比較。公式為：抑制率(%)=(給藥組OD值-溶劑對照組OD值)/溶劑對照組OD值×100%觀察指標及觀察時間：590nm波長下比色測定腹腔液上清OD值，計算抑制率。觀察時間為腹腔注射0.7％醋酸生理鹽水溶液后20分鐘。數(shù)據(jù)及統(tǒng)計學分析：實驗數(shù)據(jù)以xSD表示，用SPSS10.0軟件進行方差分析，作顯著性檢驗。試驗結果：實驗結果表明，Y-120的三個劑量組和阿司匹林組與溶劑組比較，對醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性增高有明顯抑制作用(P<0.05，或P<0.01)，Y-120低、中、高劑量組的抑制率分別為24.9%、33.8%和46.2%，這三個劑量組與阿司匹林組相比較均無顯著性差異。(Table5-2)Y-120對醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性增加的影響（xSD,n=10）組別劑量OD值抑制率(%)溶劑對照組10ml/kg0.2250.046-阿司匹林組10mg/kg0.1350.078**40.0Y-120低劑量組240mg/kg0.1690.051*24.9Y-120中劑量組480mg/kg0.1490.049**33.8Y-120高劑量組960mg/kg0.1210.064**46.2*P<0.05,**P<0.01與溶劑對照組比較實驗結論：炎癥是機體對組織損傷或致病因子侵入所發(fā)生的以防御為主的反應，早期炎癥主要以毛細血管擴張、通透性增加而引起炎性滲出和炎性腫脹為特征。本試驗表明Y-120在醋酸誘發(fā)小鼠腹腔毛細血管通透性增高的實驗中表現(xiàn)了明顯的抑制作用，推測其可能通過抑制毛細血管的擴張，降低通透性，使?jié)B出減少以達到抗炎作用。實施例6Y-120對大鼠棉球肉芽腫的影響受試藥物：名稱：Y-12050%乙醇提取物性狀：棕褐色固體陽性對照藥：阿司匹林腸溶片（批號：041001，上海信誼百路達藥業(yè)有限公司）劑量設置：根據(jù)預實驗結果，取大鼠低劑量為120mg/kg，低、中、高劑量比為1：2：4，相應中、高劑量分別為240和480mg/kg。因此本實驗采用Y-120的劑量為120、240、480mg/kg。陽性對照阿司匹林腸溶片(上海信誼百路達藥業(yè)有限公司，批號：041001，25mg/片)口服，臨床推薦平均劑量為37.5mg/天/人,以60公斤體重計算，為0.625mg/kg/人，本實驗中大鼠劑量按體表面積折算，相當于3.75mg/kg，本實驗陽性對照藥阿司匹林腸溶片灌胃劑量為5mg/kg。劑量設計組別給藥途徑劑量動物數(shù)(只)溶劑對照組灌胃10ml/kg10阿司匹林組灌胃5mg/kg10Y-120低劑量組灌胃120mg/kg10Y-120中劑量組灌胃240mg/kg10Y-120高劑量組灌胃480mg/kg10溶劑對照：溶劑對照按10ml/kg灌胃。給藥途經：灌胃。給藥次數(shù)：連續(xù)七日給藥，1次/日。動物種屬、品系：Wistar大鼠性別：雄性體重：160±20克數(shù)量：50只，隨機分成5組，每組10只。來源：上海斯萊克實驗動物有限公司等級：清潔級，許可證號：SCXK(滬)2004－0005飼養(yǎng)場所：上海第二軍醫(yī)大學藥學院動物房等級：清潔級，合格證號：醫(yī)動字第02－64號每組動物數(shù)：10只。試驗方法：取雄性Wistar大鼠50只，隨機分為5個組，各組大鼠乙醚麻醉，剪毛后無菌條件下切開下腹部正中皮膚，切口長1cm，止血鉗擴充皮下組織，向雙側腹股溝皮下植入10mg無菌干燥棉球，縫合切口，術后當日灌胃給藥，每天1次，連續(xù)7天，第8天頸椎脫臼處死大鼠，將棉球連同周圍結締組織一起取出，剔除脂肪組織，稱濕重，置60℃烘干，稱干重，減去原棉球凈重，即為肉芽腫凈重，按mg/100g體重表示，計算抑制率(％)，進行組間比較。公式為：肉芽腫凈濕重=(棉球肉芽腫總濕重-原棉球凈重)/大鼠體重×100肉芽腫凈干重=(棉球肉芽腫總干重-原棉球凈重)/大鼠體重×100濕重抑制率(%)=(給藥組肉芽腫凈濕重-溶劑對照組肉芽腫凈濕重)/溶劑對照組肉芽腫凈濕重×100%干重抑制率(%)=(給藥組肉芽腫凈干重-溶劑對照組肉芽腫凈干重)/溶劑對照組肉芽腫凈干重×100%觀察指標及觀察時間：測量棉球肉芽腫濕重和干重，計算抑制率。觀察時間為植入無菌干燥棉球后第八天。數(shù)據(jù)及統(tǒng)計學分析：實驗數(shù)據(jù)以xSD表示，用SPSS10.0軟件進行方差分析，作顯著性檢驗。試驗結果：實驗結果表明，Y-120的中劑量和高劑量組均能明顯減輕棉球誘導的大鼠肉芽腫的重量(P<0.05，或P<0.01)，濕重抑制率分別為7.2%和14.6%，干重抑制率分別為10.2%和16.8%。(Table6-2)Y-120對大鼠棉球肉芽腫的影響（xSD,n=10）組別劑量肉芽腫凈濕重(mg/100g)濕重抑制率(%)肉芽腫凈干重(mg/100g)干重抑制率(%)溶劑對照組10ml/kg120.18.8-24.41.9阿司匹林組10mg/kg105.411.7**12.221.81.7**10.7Y-120低劑量組240mg/kg118.712.71.223.82.62.5Y-120中劑量組480mg/kg111.58.6*7.221.92.4*10.2Y-120高劑量組960mg/kg102.617.8**14.620.33.8**16.8*P<0.05,**P<0.01與溶劑對照組比較實驗結論：大鼠棉球肉芽腫模型是以肉芽組織增生為特點的亞急性炎癥模型，棉球植入大鼠體內引起結締組織增生，這種肉芽增生與臨床上某些炎癥后期病理改變相似，用于評定藥物抗結締組織增殖作用。本實驗中Y-120的中劑量和高劑量組對大鼠棉球肉芽腫均有明顯抑制作用，說明本藥對慢性炎癥有明顯的抗炎作用。實施例7Y-120對小鼠碳粒廓清功能的影響受試藥物：名稱：Y-12050%乙醇提取物性狀：棕褐色固體陽性對照藥：強的松（批號：050401，上海信誼藥業(yè)有限公司）劑量設置：根據(jù)預實驗結果，取小鼠低劑量為240mg/kg，低、中、高劑量比為1：2：4，相應中、高劑量分別為480和960mg/kg。因此本實驗采用Y-120的劑量為240、480、960mg/kg。陽性對照強的松(上海信誼藥業(yè)有限公司，批號：050401，5mg/片)口服，臨床推薦平均劑量為35mg/天/人,以60公斤體重計算，為0.583mg/kg/人，本實驗中小鼠劑量按體表面積折算，相當于7mg/kg，本實驗陽性對照藥強的松灌胃劑量為10mg/kg。劑量設計表組別給藥途徑劑量動物數(shù)(只)溶劑對照組灌胃10ml/kg10強的松組灌胃10mg/kg10Y-120低劑量組灌胃240mg/kg10Y-120中劑量組灌胃480mg/kg10Y-120高劑量組灌胃960mg/kg10溶劑對照：溶劑對照按10ml/kg灌胃。給藥途經：灌胃。給藥次數(shù)：連續(xù)十日給藥，1次/日。動物種屬、品系：昆明種小鼠性別：雌雄各半體重：20±2克數(shù)量：50只，隨機分成5組，每組10只。來源：上海斯萊克實驗動物有限公司等級：清潔級，許可證號：SCXK(滬)2004－0005飼養(yǎng)場所：上海第二軍醫(yī)大學藥學院動物房等級：清潔級，合格證號：醫(yī)動字第02－64號每組動物數(shù)：10只。試驗方法：取昆明種小鼠50只，隨機分為5個組，實驗前九天及實驗前30min按Table7-1給藥。30min后，每鼠尾靜脈注射印度墨汁（北京西中化工廠生產）0.05ml/10g體重，于2(t2)和10(t10)分鐘后，分別從眼眶靜脈取血20μl,加到2ml、0.1%Na2CO3溶液中搖勻，用751型分光光度計在680nm下比色，測光密度（以下分別用OD2和OD10來表示2分鐘和10分鐘所取血樣的光密度），按下式計算廓清指數(shù)K值。廓清指數(shù)K=（lgOD2-lgOD10）/(t10-t2)=lg(OD2/OD10)/8K值經體重及肝脾重換算后，得吞噬指數(shù)α值：吞噬指數(shù)α=體重/肝脾重*K1/3以X±SD來表示給藥組與對照組的K值和α值,進行組間比較。觀察指標及觀察時間：測定兩個時間點血樣的OD值，稱量體重及肝脾重，計算廓清指數(shù)K值和吞噬指數(shù)α值。觀察時間為注射印度墨汁后2分鐘和10分鐘。數(shù)據(jù)及統(tǒng)計學分析：實驗數(shù)據(jù)以xSD表示，用SPSS10.0軟件進行方差分析，作顯著性檢驗。試驗結