參腸片治療潰瘍性結(jié)腸炎的實(shí)驗(yàn)研究

1/1參腸片治療潰瘍性結(jié)腸炎的實(shí)驗(yàn)研究參腸片治療潰瘍性結(jié)腸炎的實(shí)驗(yàn)研究【摘要】目的研究參腸片治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥理作用。

方法用冰醋酸對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（大鼠）造成急性潰瘍性結(jié)腸炎，將動(dòng)物隨機(jī)分為參腸片高中低三組、固腸止瀉丸組、模型組、空白組，除空白組外其余5組動(dòng)物分別用冰醋酸造成急性潰瘍性結(jié)腸炎模型，連續(xù)用藥8天后觀察大鼠腹瀉程度（糞便）評分,結(jié)腸潰瘍面潰瘍數(shù)和炎細(xì)胞數(shù)目。

結(jié)果參腸片0.32、0.16、0.08g/kg灌胃給藥，能改善大鼠腹瀉癥狀，降低醋酸型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸病變程度，減少結(jié)腸炎粘膜炎細(xì)胞數(shù)。

結(jié)論參腸片具有一定的治療潰瘍性結(jié)腸炎的作用。

【關(guān)鍵詞】參腸片潰瘍性結(jié)腸炎腹瀉炎癥參腸片是由苦參等中藥組成，具有清熱解毒，活血化瘀，燥濕斂瘡，止血生肌。

用于潰瘍性結(jié)腸炎活動(dòng)期之便下膿血、黏液、腹痛、腹瀉、里急后重等證。

潰瘍性結(jié)腸炎病機(jī)為濕熱蘊(yùn)結(jié)，腑氣壅阻，氣血凝滯，熱盛肉腐，大腸傳導(dǎo)失司，小腸清濁不分，故治療應(yīng)以清熱解毒，活血化瘀，燥濕斂瘡，生肌止血為法。

參腸片由苦參等組成。

方中苦參味苦，性寒，主入肺及大腸、小腸經(jīng)，能清熱燥濕，解毒斂瘡，沉降下行，故適用于濕熱蘊(yùn)結(jié)之下利膿血，《本草綱目》謂其能治腸風(fēng)瀉血，并熱??；《別錄》謂其除伏熱腸氵辟，療惡瘡。

為驗(yàn)證其藥理作用，我們做了如下藥理實(shí)驗(yàn)。

1材料與方法1.1動(dòng)物大鼠，SD種，普通級，體重150～190g，雌雄各半，由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。

動(dòng)物質(zhì)量合格證：

川實(shí)動(dòng)管質(zhì)第2004-11號。

1.2藥物參腸片，批號20050311,規(guī)格：

0.4g/片，相當(dāng)于生藥5g/片。

用法與用量：

口服，1次3片，1日2次。

固腸止瀉丸（原名結(jié)腸炎丸），為陜西中醫(yī)學(xué)院制藥廠，批號：

051015。

1.3儀器AO石蠟切片機(jī)：

美國AO公司制造。

Olympus-BX50型光學(xué)顯微鏡：

日本Olympus公司制造。

MIAS2000型計(jì)算機(jī)圖像工作系統(tǒng)：

四川大學(xué)智勝軟件股份有限公司。

1.4方法取180～220g雌性大鼠72只，大鼠禁食24小時(shí)，戊巴比妥鈉腹腔麻醉并作清潔灌腸，用直徑3mm的尼龍導(dǎo)管經(jīng)肛門插入結(jié)腸8cm處，注入5%冰乙酸溶液1m1。

間隔2天，重復(fù)進(jìn)行，連續(xù)4次。

從造模第8天起，大鼠開始灌胃：

正常對照組和模型組灌胃給予l0mL/kg蒸餾水；陽性藥組灌胃固腸止瀉丸2g（丸重）/kg（濃度為0.2g（丸重）/ml，給藥容量為1ml/100g體重，（臨床用藥劑量8倍），參腸片高、中、低劑量組分別灌胃參腸內(nèi)容物0.32、0.16、0.08g（片重）/kg（相當(dāng)于生藥4、2、1g/kg），［濃度分別為0.032、0.016、0.008g（片重）/ml，或者相當(dāng)于生藥0.4、0.2、0.1g/ml，給藥容量均為1ml/100g體重，分別為臨床擬用量的8倍、4倍、2倍］。

每日1次，連續(xù)2周。

每日觀察大鼠精神狀態(tài)、活動(dòng)；大鼠腹瀉程度（糞便）評分；結(jié)腸粘膜潰瘍程度評分；結(jié)腸粘膜組織病理形態(tài)學(xué)觀察；結(jié)腸粘膜炎細(xì)胞觀測：

用MIAS2000型計(jì)算機(jī)圖象工作系統(tǒng)測量炎細(xì)胞的數(shù)量、面積、平均光密度、積分光密度和平均黑度。

1.5數(shù)據(jù)處理各組數(shù)據(jù)均用s表示，采用spss10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。

兩組間比較用Dunnettt檢驗(yàn)。

2結(jié)果2.1試驗(yàn)結(jié)果2.2改善主要癥狀作用用乙酸溶液結(jié)腸內(nèi)注入形成潰瘍性結(jié)腸炎造模結(jié)束（第8天）后，各組動(dòng)物都出現(xiàn)食量下降，精神萎糜、活動(dòng)減少、毛發(fā)色澤暗淡。

另外，糞便稀溏或粘液稀溏，肛周皮毛被稀便沾染。

上述癥狀以造模完成后的第1周內(nèi)（造模第8～15天內(nèi)）最為明顯，經(jīng)用參腸片高、中、低三種劑量灌胃治療后大鼠一般狀況及消化道癥狀逐漸好轉(zhuǎn)，用藥治療組主要癥狀明顯輕于模型對照組。

2.2止瀉作用用乙酸溶液結(jié)腸內(nèi)注入形成急性潰瘍性結(jié)腸炎造模結(jié)束（即造模第8天）后，在連續(xù)5天內(nèi)每天給藥后將各組大鼠單只放入小鼠盒內(nèi)3小時(shí)，觀察各只大鼠的糞便形狀質(zhì)地，連續(xù)觀察5天。

根據(jù)下列標(biāo)準(zhǔn)劃分等級評分：

糞便等級（分）評為：

0級（分）：

正常糞便；1級（分）：

軟糞便；2級（分）：

非定型軟糞便；3級（分）：

非定型水樣糞便；4級（分）松散和水樣糞便。

結(jié)果見表1。

表1參腸片對大鼠急性潰瘍性結(jié)腸炎的止瀉作用（略）注：

與模型對照組比較，*Plt;0.05，**Plt;0.01從表1可見，用乙酸溶液結(jié)腸內(nèi)注入形成急性潰瘍性結(jié)腸炎造模結(jié)束（即造模第8天）后，各組動(dòng)物都出現(xiàn)明顯的腹瀉，呈現(xiàn)糞便稀溏或粘液稀溏，肛周皮毛被稀便沾染。

上述癥狀以造模完成后的第1周內(nèi)（即造模第8～15天內(nèi)）最為明顯。

經(jīng)用參腸片高、中、低三種劑量［0.32、0.16、0.08g（片重）/kg，相當(dāng)于生藥4、2、1g/kg灌胃治療后，大鼠一般狀況及消化道癥狀逐漸好轉(zhuǎn)。

其中參腸片高劑量和中劑量兩種劑量治療4天從后，情況明顯好于空白對照組（模型對照組），P均lt;0.05～0.01。

經(jīng)比較，參腸片高劑量的對急性潰瘍性結(jié)腸炎腹瀉的療效（止瀉作用），優(yōu)于固腸止瀉丸（陽性對照藥物）高劑量的療效（止瀉作用）。

2.3修復(fù)潰瘍作用由成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院病理科進(jìn)行病理檢測。

取大鼠距肛門7cm處結(jié)腸段1cm組織標(biāo)本，放入FAA液內(nèi)浸泡固定48小時(shí)后，經(jīng)逐級酒精脫水，二甲苯透明，浸蠟、石蠟包埋，常規(guī)切片4m，HE染色。

在光鏡410倍視野下觀察結(jié)腸粘膜潰瘍大小，凡是超過1個(gè)視野者，定義為潰瘍gt;3mm，在1個(gè)視野者定義為潰瘍lt;3mm。

結(jié)果見表2。

表2參腸片對大鼠急性潰瘍性結(jié)腸炎結(jié)腸粘膜潰瘍程度的影響（略）注：

與空白對照組比較，*Plt;0.05，**Plt;0.01從表2可見，參腸片高、中、低三種劑量［0.32、0.16、0.08g（片重）/kg，相當(dāng)于生藥4、2、1g/kg］對乙酸溶液結(jié)腸內(nèi)注入形成的大鼠急性潰瘍性結(jié)腸炎模型治療后，均具有顯著的治療性修復(fù)潰瘍的作用，表現(xiàn)在可使?jié)兠娲?gt;3mm)的潰瘍數(shù)量比空白對照組（模型對照組）顯著減少，P均lt;0.05～0.01。

同樣，陽性對照藥物固腸止瀉丸高劑量亦具有顯著的治療性修復(fù)作用。

在光鏡下見各組大鼠結(jié)腸粘膜面均有多少不等、大小不一的潰瘍存在。

模型對照組（空白對照組）結(jié)腸粘膜潰瘍面積大，累積粘膜下層，甚至達(dá)肌層；壞死及炎細(xì)胞浸潤明顯，肉芽組織較少。

腸參結(jié)腸定位片和固腸止瀉丸各用藥組大鼠結(jié)腸粘膜潰瘍有不同程度變小，累及的部位變淺，多數(shù)累及粘膜下層，壞死及炎細(xì)胞浸潤減輕。

2.4對結(jié)腸炎粘膜炎細(xì)胞數(shù)的減少作用由成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院病理科進(jìn)行病理檢測。

對結(jié)腸粘膜炎細(xì)胞的檢測方法的步驟：

（1）試驗(yàn)結(jié)束，放血處死大鼠，在距肛門7cm處取結(jié)腸段1cm放入FAA液中固定，石蠟包埋，常規(guī)切片4m，H.E染色，作光鏡檢查；（2）在410倍視野觀察全片，找出潰瘍之所在；（3)在2010倍視野下選擇炎細(xì)胞浸潤最明顯的區(qū)域5個(gè)視野，使用MIAS2000型計(jì)算機(jī)圖象工作系統(tǒng)測量炎細(xì)胞的數(shù)量、面積、平均光密度、積分光密度及平均黑度。

結(jié)果見表3。

表3腸參結(jié)腸定位片對乙酸誘發(fā)的大鼠急性潰瘍性結(jié)腸炎模型結(jié)腸粘膜炎細(xì)胞的影響（略）注：

（1）與模型對照組比較，*Plt;0.05,**Plt;0.01,（2）括號內(nèi)的百分率為與模型對照組比較的降低百分率從表3可見，腸參結(jié)腸定位片三種劑量和陽性對照藥物固腸止瀉丸高劑量對乙酸誘發(fā)的大鼠急性潰瘍性結(jié)腸炎模型結(jié)腸粘膜的炎癥病理性變化具有顯著的治療改善作用。

具體表現(xiàn)為與模型對照組比較，腸參結(jié)腸定位片高、中、低三種劑量［0.32、0.16、0.08g（片重）/kg，相當(dāng)于生藥4、2、1g/kg］可使炎細(xì)胞總數(shù)分別降低65.71%（Plt;0.01）、31.99%（Plt;0.05）、48.24%（Plt;0.01）；使炎細(xì)胞面積總和分別降低93.43%、83.35%、85.22%，，P均lt;0.01；使炎細(xì)胞平均光密度總和分別降低70.92%、50.86%、58.63%，P均lt;0.01；使炎細(xì)胞積分光密度總和分別降低92.98%、85.45%、86.25%，P均lt;0.01；使炎細(xì)胞平均黑度總和分別降低57.96%（Plt;0.01）、40.80%（Plt;0.01）、32.79%（Plt;0.05）。

陽性對照藥物固腸止瀉丸高劑量也使炎細(xì)胞總數(shù)、炎細(xì)胞面積總和、炎細(xì)胞平均光密度總和、炎細(xì)胞積分光密度總和以及炎細(xì)胞平均黑度總和分別比模型對照組降低49.54%、88.24%、60.89%、88.88%、32.65%，Plt;0.05～0.01。

經(jīng)比較分析，對乙酸誘發(fā)的大鼠急性潰瘍性結(jié)腸炎模型結(jié)腸粘膜的炎癥病理性變化的治療作用（改善作用），腸參結(jié)腸定位片高劑量和陽性對照藥物固腸止瀉丸高劑量在臨床應(yīng)用劑量的相同倍數(shù)劑量（均為臨床應(yīng)用劑量的8倍）時(shí)，腸參結(jié)腸定位片的療效顯著優(yōu)于（或強(qiáng)于）固腸止瀉丸。

主要表現(xiàn)在腸參結(jié)腸定位片與固腸止瀉丸組比較，腸參結(jié)腸定位片組的炎細(xì)胞總數(shù)、炎細(xì)胞面積總和、炎細(xì)胞平均光密度總和、炎細(xì)胞積分光密度總和以及炎細(xì)胞平均黑度總和，又比固腸止瀉丸組分別降低了32.05%（Pgt;0.05）、44.14%（Plt;0.05）、25.66%（Pgt;0.05）、36.89%（Plt;0.05）和37.57%（Plt;0.05）。

3討論潰瘍性結(jié)腸炎又稱為非特異性潰瘍性結(jié)腸炎［1、2］，是一種原因不明的主要發(fā)生在結(jié)腸粘膜層的炎癥性腸病，以潰瘍糜爛為主，主要累及直腸、乙狀結(jié)腸粘膜，向上擴(kuò)展可至左半、右半結(jié)腸，甚至全結(jié)腸和回腸末端。

本病多見于青、中年，其主要的臨床表現(xiàn)有血性粘液便、腹痛、腹瀉、里急后重等［3～5］。

本病可發(fā)生嚴(yán)重的并發(fā)癥。

結(jié)腸炎中醫(yī)應(yīng)屬于泄駕、腸癖、休息痢等范疇。

益以補(bǔ)腎陽健脾為本。

參腸片配方來源于臨床，經(jīng)過幾代人30余年來對上百例潰瘍性結(jié)腸炎病人治療觀察后總結(jié)遴選出來的精髓配方，具有較扎實(shí)的臨床和科研基礎(chǔ)。

該制劑有明顯的消炎、抗菌、止瀉、止血作用,并能促進(jìn)組織細(xì)胞生長代謝，加速病變粘膜炎性充血水腫、潰瘍出血糜爛的消退，加快組織的修復(fù)，尤其對潰瘍出血糜爛癥狀明顯的病人效果更佳。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示參腸片對醋酸型大鼠潰瘍性結(jié)腸炎有較好治療作用。

【參考文獻(xiàn)】［１］張振書.潰瘍性結(jié)腸炎.見：

許國銘，李石主編.現(xiàn)代消化病學(xué)［M］.北京:人民軍醫(yī)出版社,1999.911～921.［2］全國慢性非感染性腸道疾病學(xué)術(shù)研討會(huì).潰瘍性結(jié)腸炎的診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)［