DB32-T 4815-2024 淡水大型底棲無脊椎動物監(jiān)測技術(shù)規(guī)范

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)DB32/T4815—2024淡水大型底棲無脊椎動物監(jiān)測技術(shù)規(guī)范Technicalspecificationforfreshwaterbenthicmacroinvertebratemonitoring2024-07-08發(fā)布2024-08-08實(shí)施江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)發(fā)出布版Ⅰ前言 Ⅲ 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4試劑和材料 5儀器和設(shè)備 6監(jiān)測步驟 7質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 附錄A（規(guī)范性）采樣器及其適用條件和使用方法 附錄B（資料性）記錄表 附錄C（規(guī)范性）分樣挑揀方法 附錄D（規(guī)范性）物種分類鑒定基本要求 Ⅲ本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由江蘇省生態(tài)環(huán)境廳提出并歸口。本文件起草單位：江蘇省常州環(huán)境監(jiān)測中心、江蘇省環(huán)境監(jiān)測中心。1DB32/T4815—2024淡水大型底棲無脊椎動物監(jiān)測技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了淡水大型底棲無脊椎動物監(jiān)測的試劑和材料、儀器和設(shè)備、監(jiān)測步驟、質(zhì)量保證和質(zhì)量控制的要求。本文件適用于湖泊、水庫、河流等水體中淡水大型底棲無脊椎動物的監(jiān)測。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。HJ91.2地表水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ710.8生物多樣性觀測技術(shù)導(dǎo)則淡水底棲大型無脊椎動物3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1淡水大型底棲無脊椎動物freshwaterbenthicmacroinvertebrate生活史全部或至少一個時期棲息于內(nèi)陸淡水（包括流水與靜水）水體的水底表面或底部基質(zhì)中且個體不能通過425μm網(wǎng)篩的無脊椎動物，它們具有相對穩(wěn)定的生活環(huán)境，移動能力差。thropoda）、扁形動物（Platyhelminthes）、線形動物（Nematomorpha）、紐形動物（Nem3.2分類單元taxon物種分類工作中的客觀操作單位，有特定的名稱和分類特征，主要包括門（Phylum）、綱（Class）、目3.3密度density單位面積內(nèi)某分類單元或全部淡水大型底棲無脊椎動物的個體數(shù)量。注：單位為個每平方米（個/m2）。3.4生物量biomass單位面積內(nèi)某分類單元或全部淡水大型底棲無脊椎動物的濕重。注：其中軟體動物為帶殼濕重，單位為克每平方米（g/m2）。2DB32/T4815—20243.5可涉水河流wadeableriver在不借助工具的條件下，可徒步蹚水而行的河流。注：具體分為涉水可過河流和涉水不可過河流。其中，涉水可過河流具有水深較淺、河床穩(wěn)定、河道淤積程度較輕等特點(diǎn)，可徒步蹚水而過，如山地丘陵地區(qū)的溪流；涉水不可過河流具有沿岸帶水深較淺、河岸穩(wěn)定、岸坡平緩、淤積程度較輕等特點(diǎn)，但主河道水深較深或淤積嚴(yán)重，僅可沿岸蹚水而行，不可蹚水而過，如岸坡較平緩或漫灘較發(fā)育的自然河道。3.6不可涉水河流non?wadeableriver在不借助工具的條件下添加，不可蹚水而行的河流，具有水深較深、岸坡較陡等特點(diǎn)。注：如深U形河流、駁岸直立硬質(zhì)化的河流。4試劑和材料4.1本文件所用試劑均為符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純試劑、蒸餾水或同等純度的水。4.2甲醛溶液：φ（HCHO）=37%~40%。4.3甲醛溶液：φ（HCHO）≈5%。4.4無水乙醇：ρ（C2H5OH）=0.79g/mL。4.5乙醇溶液：φ（C2H5OH）=75%。4.6丙三醇。4.7加拿大樹膠。4.8普氏（Puris）膠：將8g阿拉伯膠和10mL蒸餾水加入燒杯中，并將其置于80℃恒溫水浴，用玻璃棒攪動，待膠溶后，依次加入30g水合氯醛、7mL甘油和3mL冰乙酸，繼續(xù)用玻璃棒攪拌均勻，最后以薄棉過濾即成。5儀器和設(shè)備5.1采樣器：根據(jù)生境條件選擇合適的采樣器，各采樣器規(guī)格及其適用條件見附錄A。5.2體視顯微鏡：物鏡變倍比≥5∶1，目鏡10×或15×。5.3生物顯微鏡：物鏡10×、20×、40×,目鏡10×或15×。5.4電子天平：最大稱量220g，分度值0.0001g；最大稱量500g，分度值0.001g；最大稱量3000g，分度值0.01g。5.5洗樣篩：篩網(wǎng)孔徑425μm，篩網(wǎng)材質(zhì)為鋼制、尼龍制或其他不易破損的材料。5.6洗樣盆。5.7便攜式冷藏箱。5.8塑料自封袋或廣口塑料瓶。5.9網(wǎng)格托盤：30cm×36cm，劃30個網(wǎng)格（每格6cm×6cm）。5.10搪瓷盤。5.11鑷子。5.12細(xì)口吸管。5.13標(biāo)本瓶或標(biāo)本盒：具蓋。5.14放大鏡。5.15培養(yǎng)皿。3DB32/T4815—20245.16吸水紙。5.17現(xiàn)場設(shè)備：手持式全球定位系統(tǒng)、卷尺、測距儀、計時器、照相機(jī)、記號筆、防水簽字筆等，直流潛水5.19生物實(shí)驗(yàn)室常用設(shè)備和器材。6監(jiān)測步驟6.1監(jiān)測流程大型底棲無脊椎動物監(jiān)測流程應(yīng)符合HJ710.8中科學(xué)性、可操作性、持續(xù)性、保護(hù)性、安全性及方法適用性等原則要求，監(jiān)測流程見圖1。圖1監(jiān)測流程圖6.2監(jiān)測方案制定6.2.1監(jiān)測點(diǎn)位的布設(shè)6.2.1.1根據(jù)監(jiān)測目的，結(jié)合水體及其周圍環(huán)境的自然生態(tài)條件和人類干擾的空間特性，布設(shè)有代表性的監(jiān)測點(diǎn)位。6.2.1.2湖泊和水庫可在沿岸帶、灣區(qū)、敞水區(qū)、河口區(qū)等區(qū)域，河流可在上游河段、中游河段、下游河段、支流匯入口上下游、排污口上下游、城鎮(zhèn)上下游等區(qū)域布設(shè)監(jiān)測點(diǎn)位。6.2.1.3不同規(guī)模湖泊、水庫和河流的監(jiān)測點(diǎn)位布設(shè)數(shù)量見表1，同時可結(jié)合實(shí)際，在前期摸底監(jiān)測的基礎(chǔ)上對點(diǎn)位進(jìn)行適當(dāng)優(yōu)化調(diào)整，以滿足實(shí)際需求。4DB32/T4815—2024表1不同規(guī)模水體監(jiān)測點(diǎn)位參考布設(shè)數(shù)量水體類型水體規(guī)模點(diǎn)位數(shù)量<50km23個~<10個50km2~<500km210個~<15個500km2~<1000km215個~<20個1000km2~<2000km220個~<30個≥2000km230個~50個河流—當(dāng)河流生境（不同底質(zhì)、水生植物和水文條件等）及沿線土地利用類型較單一時，按等距分段（涉水可過河流和涉水不可過河流每段分別不超過10km和50km當(dāng)河流生境或沿線土地利用類型存在明顯差異時，按主要差異因子的分布情況進(jìn)行分段（如土地利用類型差異較大時，可將河流劃分為林地段、農(nóng)田段、城市段等每段布設(shè)不少于2個監(jiān)測點(diǎn)位6.2.2采樣區(qū)域的設(shè)置6.2.2.1湖泊和水庫以既定監(jiān)測點(diǎn)位為中心，半徑100m的圓形范圍為湖泊和水庫的采樣區(qū)域，見圖2。圖2湖泊和水庫監(jiān)測點(diǎn)位和采樣區(qū)域空間關(guān)系示意圖6.2.2.2.1涉水可過河流以既定監(jiān)測點(diǎn)位為中心，上下游各50m范圍的河段為采樣區(qū)域。6.2.2.2.2涉水不可過河流和不可涉水河流當(dāng)河寬不超過200m時，以既定監(jiān)測點(diǎn)位為中心，上下游各500m范圍的河段為采樣區(qū)域，當(dāng)河寬為200m及以上時，以既定監(jiān)測點(diǎn)位為中心，上下游各1000m范圍的河段為采樣區(qū)域，見圖3。5DB32/T4815—2024圖3河流監(jiān)測點(diǎn)位和采樣區(qū)域空間關(guān)系示意圖6.2.3監(jiān)測頻次及時間6.2.3.1一年監(jiān)測2次，也可根據(jù)不同的監(jiān)測目的需要，調(diào)整監(jiān)測頻次，如按水期、季度或月等開展監(jiān)測。6.2.3.2一年監(jiān)測2次時，湖泊、水庫、涉水不可過河流和不可涉水河流宜選擇比較適宜生物生長、繁殖6.2.3.3按水期監(jiān)測時，可根據(jù)水文情況，分別在豐水期、平水期、枯水期開展監(jiān)測。6.2.3.5按季度或月開展監(jiān)測時，各季度或各月間的監(jiān)測時間間隔應(yīng)盡量保持一致。6.3監(jiān)測準(zhǔn)備6.3.1根據(jù)監(jiān)測點(diǎn)位及所在水體的實(shí)際情況制定具有較強(qiáng)可操作性的監(jiān)測工作計劃。6.3.2明確人員分工、監(jiān)測任務(wù)及時間進(jìn)度。6.3.3開展監(jiān)測前的技術(shù)培訓(xùn)和安全培訓(xùn)。6.3.4準(zhǔn)備大型底棲無脊椎動物監(jiān)測所需的儀器設(shè)備及試劑材料。6.4樣品采集6.4.1生境觀測及水質(zhì)監(jiān)測6.4.1.1到達(dá)監(jiān)測點(diǎn)位后，按6.2.2規(guī)定確定采樣區(qū)域。6.4.1.2采集樣品前應(yīng)觀測并記錄生境條件，拍攝典型生境照片。6.4.1.3如需同步監(jiān)測水質(zhì)指標(biāo)，應(yīng)符合HJ91.2的要求。6.4.2湖泊和水庫6.4.2.1根據(jù)采樣區(qū)域內(nèi)的生境類型（不同底質(zhì)、水生植物和水文條件等按附錄A要求，選擇相應(yīng)的采樣器（5.1）并按其使用方法開展樣品采集。6.4.2.2樣品采集覆蓋采樣區(qū)域內(nèi)的主要生境類型，每個監(jiān)測點(diǎn)位分別使用采泥器和三角拖網(wǎng)（當(dāng)可涉水采集樣品時，可使用手抄網(wǎng)）采集樣品，累計采樣面積不低于0.25m2和1.5m2。6.4.2.3樣品按不同采樣器分別混合，即一份為采泥器采集的樣品，另一份為三角拖網(wǎng)或手抄網(wǎng)采集的樣品（6.5~6.11也按不同采樣器對樣品分別進(jìn)行處理）。6DB32/T4815—20246.4.3涉水可過河流6.4.3.1根據(jù)水流方向，按逆流采樣原則，自下而上開展樣品采集。6.4.3.2按附錄A要求，使用相應(yīng)的采樣器（5.1）采集采樣區(qū)域內(nèi)的主要生境類型（不同底質(zhì)、水生植物和水文條件等）的樣品。6.4.3.3當(dāng)水深不大于30cm時，每個監(jiān)測點(diǎn)位分別使用索伯網(wǎng)和踢網(wǎng)或者索伯網(wǎng)和手抄網(wǎng)采集樣品；當(dāng)水深大于30cm時，使用手抄網(wǎng)采集樣品。6.4.3.4使用索伯網(wǎng)和踢網(wǎng)或者索伯網(wǎng)和手抄網(wǎng)時，每個監(jiān)測點(diǎn)位累計采樣面積不低于0.36m2和1m2，兩種采樣器采集的樣品混合處理；僅使用手抄網(wǎng)時，每個監(jiān)測點(diǎn)位累計采樣面積不低于1.5m2。6.4.4涉水不可過河流按照逆流采樣原則，按附錄A要求，使用手抄網(wǎng)采集采樣區(qū)域內(nèi)的主要生境類型（不同底質(zhì)、水生植物和水文條件等）的樣品，每個監(jiān)測點(diǎn)位累計采樣面積不低于1.5m2。6.4.5不可涉水河流6.4.5.1按照逆流采樣原則，按附錄A要求，使用采泥器和三角拖網(wǎng)或手抄網(wǎng)采集采樣區(qū)域內(nèi)的主要生境類型（不同底質(zhì)、水生植物和水文條件等）的樣品，每個監(jiān)測點(diǎn)位采泥器累計采樣面積不低于0.25m2，三角拖網(wǎng)或手抄網(wǎng)累計采樣面積不低于1.5m2。6.4.5.2樣品按不同采樣器分別混合，即一份為采泥器采集的樣品，另一份為三角拖網(wǎng)或手抄網(wǎng)采集的樣品（6.5~6.11也按不同采樣器對樣品分別進(jìn)行處理）。6.5樣品篩洗6.5.1將每個監(jiān)測點(diǎn)位的樣品經(jīng)洗樣篩（5.5）篩洗，直至過篩后的出水澄清。揀出洗樣篩（5.5）內(nèi)較大的雜物，如葉片、植物殘枝、石塊、塑料袋等，將附著在其表面的動物個體沖洗入洗樣篩（5.5）后丟棄。6.5.2當(dāng)樣品中含有較多沙粒、砂石和石塊時，可將樣品放入洗樣盆（5.6）內(nèi)沖水進(jìn)行浮洗分離，將上層泥水混合物倒入洗樣篩（5.5如此重復(fù)3次~5次。肉眼檢查洗樣盆（5.6）內(nèi)剩余殘渣，將遺留的動物個體挑揀放入洗樣篩（5.5）內(nèi)，確認(rèn)無遺留后丟棄。6.5.3當(dāng)具備條件時，可在現(xiàn)場按6.8的要求開展樣品挑揀，否則將樣品按6.6要求封裝保存后，運(yùn)送回駐地或?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行處理。6.6樣品封裝和保存6.6.1將樣品篩洗后的剩余物全部裝入塑料自封袋或廣口塑料瓶（5.8）內(nèi)，并檢查洗樣篩（5.5確保無動物個體遺留。貼上標(biāo)簽，注明監(jiān)測點(diǎn)位名稱、樣品采集日期、采集人員以及樣品唯一性標(biāo)識碼等信息。6.6.2當(dāng)某個點(diǎn)位的樣品需分裝多個塑料自封袋或廣口塑料瓶（5.8）時，標(biāo)明樣品編號及總數(shù)；必要時，可在塑料自封袋或廣口塑料瓶（5.8）內(nèi)放入相同信息的標(biāo)簽。封好袋口或蓋緊瓶蓋，填寫現(xiàn)場采樣記錄6.6.3樣品整理、清點(diǎn)、核對無誤后，置于便攜式冷藏箱（5.7）并運(yùn)送回實(shí)驗(yàn)室處理。6.6.4若樣品中的動物樣本無法及時挑揀（冷藏保存一般不宜超過24h，室溫保存一般不宜超過5h則在塑料自封袋或廣口塑料瓶（5.8）中加入適量的無水乙醇（4.4）或甲醛溶液（4.2）進(jìn)行固定，以防樣品腐爛。固定保存時間一般不超過2周。6.6.5徹底沖洗并仔細(xì)檢查采樣器（5.1避免樣品遺漏，造成交叉干擾。7DB32/T4815—20246.7樣品前處理6.7.1將現(xiàn)場采回的樣品，按6.5要求使用自來水再次篩洗，直至出水完全澄清。若樣品中已添加了無水乙醇（4.4）或甲醛溶液（4.2則將樣品在水中浸泡15min左右，洗脫固定液并使動物樣本充分吸水。6.7.2若某個點(diǎn)位的樣品分裝了多個塑料自封袋或廣口塑料瓶（5.8）時，將其合并處理，并在篩洗過程中保持水流速度較緩，輕輕攪動，混合均勻。6.8樣品挑揀6.8.1動物樣本的挑揀應(yīng)包括已死亡但未腐爛分解的個體，不應(yīng)包括空殼。6.8.2檢查并確保用于樣品挑揀的工具均無動物樣本殘留，避免交叉干擾。6.8.3將經(jīng)過6.7處理的樣品放入搪瓷盤（5.10）中，首先通過肉眼觀察，使用鑷子（5.11）挑揀出個體相對較大的動物樣本，再使用鑷子（5.11）或細(xì)口吸管（5.12）挑揀出個體相對較小的動物樣本，當(dāng)肉眼視力無6.8.4挑揀出的動物樣本放置于合適大小的標(biāo)本瓶或標(biāo)本盒（5.13）中。6.8.5當(dāng)某些種類的個體數(shù)量極大且難以挑盡時，則將全部樣品充分拌勻后，選擇二分法（C.1）或網(wǎng)格法（C.2）對樣品中的這些種類進(jìn)行分樣挑揀，其余種類的動物個體仍全部挑揀。6.8.6當(dāng)樣品中殘渣較多且動物個體密度較低時，累計挑揀時間達(dá)4h仍無法完成，則停止挑揀，記錄已挑揀樣品比例。6.8.7除6.8.5、6.8.6情況外，樣品中的動物個體應(yīng)全部挑揀。6.8.8當(dāng)日的挑揀工作出現(xiàn)中斷時，將待挑揀樣品冷藏保存，保存時間不宜超過24h。6.8.9挑揀過程中，若發(fā)現(xiàn)小個體樣本、偶見物種樣本或暫時難以辨認(rèn)的樣本時，單獨(dú)保存，并予以記錄。6.8.10根據(jù)樣品挑揀情況，填寫大型底棲無脊椎動物樣品挑揀及固定記錄表（見表B.2）相關(guān)內(nèi)容。6.9樣品固定6.9.1軟體動物和水生昆蟲樣本先用甲醛溶液（4.3）固定，2d~3d后將甲醛溶液倒出并加入乙醇溶液6.9.2水棲寡毛類和其他動物先放入培養(yǎng)皿（5.15）中，加少量水，并緩緩滴加數(shù)滴乙醇溶液（4.5）將其麻固定。6.9.3在野外或遠(yuǎn)途采集樣品過程中，當(dāng)不具備6.9.1和6.9.2的固定條件時，可直接用乙醇溶液（4.5）對動物樣本進(jìn)行固定。6.9.4固定液應(yīng)完全浸沒動物樣本，并于首次加入固定液后的2d~3d更換一次。6.9.5在標(biāo)本瓶或標(biāo)本盒（5.13）外貼上標(biāo)簽，注明監(jiān)測點(diǎn)位名稱、樣品固定日期、樣品處理人員、樣品挑揀比例等相關(guān)信息，當(dāng)某個點(diǎn)位的動物樣本需分裝多個標(biāo)本瓶或標(biāo)本盒（5.13）時，標(biāo)明樣本編號及分裝總數(shù)；必要時，可在標(biāo)本瓶或標(biāo)本盒（5.13）內(nèi)放入相同信息的標(biāo)簽。填寫大型底棲無脊椎動物樣品挑揀及固定記錄表（見表B.2）相關(guān)內(nèi)容。6.9.6將倒出的乙醇溶液和甲醛溶液等固定液存放至專用的廢液桶，按危險廢物處理。6.10樣品分析6.10.1物種鑒定形態(tài)學(xué)觀察。若存在卵、蛹等且可以被鑒定的，標(biāo)明其生命階段。8DB32/T4815—20246.10.1.2使用生物顯微鏡（5.3）對搖蚊幼蟲、寡毛綱等類群中的一些較小個體動物樣本進(jìn)行觀察時，滴加1滴~2滴丙三醇（4.6增加透光性，輔助觀察分類特征。6.10.1.3按附錄D要求對物種進(jìn)行鑒定，也可依據(jù)監(jiān)測工作目標(biāo)的實(shí)際需求，將其鑒定到盡可能低的分類單元。6.10.1.4鑒定完成后，將個體完整、分類特征明顯的動物樣本單獨(dú)存放，添加乙醇溶液（4.5）進(jìn)行固定。需進(jìn)一步觀察、研究或尚有異議的物種，用加拿大樹膠（4.7）或普氏膠（4.8）制作典型分類特征部位的封片，保存待研究。6.10.1.5對于一些不能確認(rèn)的物種，可拍攝典型特征照片或提供動物樣本，邀請專家指導(dǎo)鑒定；對于樣品中完整個體較少且鑒定過程會造成不可逆破壞的樣本（如需制片觀察的搖蚊幼蟲盡可能多地拍攝典型特征照片，以備復(fù)核和長期保存。6.10.1.6有條件的實(shí)驗(yàn)室可借助分子生物學(xué)技術(shù)輔助鑒定。6.10.1.7當(dāng)發(fā)現(xiàn)外來入侵物種時，單獨(dú)保存并記錄其種類、密度和生物量等信息。6.10.2.1每個監(jiān)測點(diǎn)位的物種按6.10.1要求鑒定，并一一對應(yīng)統(tǒng)計個體數(shù)。6.10.2.2若遇不完整的動物個體，只以頭部計數(shù)，其中節(jié)肢動物只統(tǒng)計包含頭節(jié)和胸節(jié)的個體，不統(tǒng)計零散的腹部、附肢等。6.10.3.1按動物樣本的個體大小選擇相應(yīng)量程及分度值的電子天平（5.4對每個監(jiān)測點(diǎn)位的物種進(jìn)行分類稱重。6.10.3.2去除待稱重個體樣本附著的雜物，使用吸水紙（5.16）吸干表面水分。吸干軟體動物等外套腔內(nèi)的水分，并帶殼稱重。6.10.3.4填寫大型底棲無脊椎動物分析記錄表（見表B.3）。6.11標(biāo)本保存6.11.1經(jīng)鑒定、計數(shù)和稱重完成后的動物標(biāo)本，使用乙醇溶液（4.5）或甲醛溶液（4.3）進(jìn)行固定，按種類分類存放，貼上標(biāo)簽，注明中文學(xué)名、拉丁名、監(jiān)測點(diǎn)位名稱、采集日期、固定液以及鑒定人員等信息，填寫大型底棲無脊椎動物標(biāo)本保存記錄表（見表B.4）。6.11.2對較典型的標(biāo)本拍攝特征圖片并單獨(dú)固定保存。6.11.3動物標(biāo)本一般保存1年或至任務(wù)完成為止。6.11.4有條件的實(shí)驗(yàn)室可長期保存動物標(biāo)本，每半年檢查固定液和標(biāo)簽信息1次~2次。6.12結(jié)果計算與表示6.12.1密度計算6.12.1.1根據(jù)6.10的分析結(jié)果，按式（1）計算大型底棲無脊椎動物各分類單元的密度。Di=di/(AcA)…………（1）式中：Di——分類單元i的密度，單位為個每平方米（個/m2di——樣品計數(shù)所得分類單元i的個體數(shù)量，單位為個；9DB32/T4815—2024Ac——樣品的挑揀比例，以分?jǐn)?shù)表示；A——現(xiàn)場樣品采集面積，單位為平方米（m2）。6.12.1.2基于某種采樣器，監(jiān)測點(diǎn)位的淡水大型底棲無脊椎動物密度計算見式（2）?！?）式中：D——基于某種采樣器的監(jiān)測點(diǎn)位大型底棲無脊椎動物密度，單位為個每平方米（個/m2N——基于某種采樣器的監(jiān)測點(diǎn)位大型底棲無脊椎動物物種數(shù)。6.12.1.3各監(jiān)測點(diǎn)位的淡水大型底棲無脊椎動物密度計算結(jié)果可修約至一位小數(shù)。6.12.2生物量計算6.12.2.1根據(jù)6.10的分析結(jié)果，按式（3）計算大型底棲無脊椎動物各分類單元的生物量。Bi=bi/(AcA)…………（3）式中：Bi——分類單元i的生物量，單位為克每平方米（g/m2bi——樣品稱重所得分類單元i的重量，單位為克（g）。6.12.2.2基于某種采樣器，監(jiān)測點(diǎn)位的淡水大型底棲無脊椎動物生物量計算見式（4）。…………（4）式中：B——基于某種采樣器的監(jiān)測點(diǎn)位大型底棲無脊椎動物生物量，單位為克每平方米（g/m2）。6.12.2.3各監(jiān)測點(diǎn)位的淡水大型底棲無脊椎動物生物量計算結(jié)果可修約至兩位小數(shù)。6.12.3不同采樣器的結(jié)果合并6.12.3.1分類單元名錄以不同采樣器采集結(jié)果的并集計。6.12.3.2對于使用采泥器和三角拖網(wǎng)（或手抄網(wǎng)）進(jìn)行樣品采集的湖泊、水庫和不可涉水河流，當(dāng)某分類單元在不同采樣器采集的樣品中均有出現(xiàn)時，個體較大（大型蚌類）、移動能力較強(qiáng)（十足目、蜻蜓目、半翅目和鞘翅目等）的分類單元的密度和生物量以三角拖網(wǎng)或手抄網(wǎng)采集的結(jié)果計，其余以采泥器結(jié)果計。6.12.4結(jié)果匯總按6.12.3匯總各監(jiān)測點(diǎn)位的大型底棲無脊椎動物分類單元名錄及其對應(yīng)的密度和生物量，填寫監(jiān)7質(zhì)量保證和質(zhì)量控制7.1人員基本要求7.1.1現(xiàn)場采樣和實(shí)驗(yàn)室分析人員、復(fù)核人員及負(fù)責(zé)人應(yīng)定期參加專題培訓(xùn)并獲得授權(quán)。7.1.2質(zhì)量監(jiān)督人員應(yīng)熟悉淡水大型底棲無脊椎動物系統(tǒng)分類且從事淡水大型底棲無脊椎動物監(jiān)測工作不低于5年。7.1.3復(fù)核人員應(yīng)分別對現(xiàn)場采樣記錄、樣品挑揀及固定記錄、分析記錄、標(biāo)本保存記錄和監(jiān)測結(jié)果匯總記錄開展校核并簽字確認(rèn)。7.1.4現(xiàn)場負(fù)責(zé)人對樣品采集、樣品篩洗、樣品封裝和保存等過程進(jìn)行監(jiān)督和審核。7.1.5實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人對樣品前處理、樣品挑揀、樣品固定、樣品分析、標(biāo)本保存等過程進(jìn)行監(jiān)督和審核。DB32/T4815—20247.2樣品采集7.2.1制定合理的采樣計劃，使用手持式全球定位系統(tǒng)準(zhǔn)確定位監(jiān)測點(diǎn)位并用符合質(zhì)量要求的設(shè)備進(jìn)行樣品采集。7.2.2為實(shí)現(xiàn)采樣代表性和效率的平衡，可在樣品采集前開展前期摸底監(jiān)測，確定物種累積與采樣面積的關(guān)系，以選擇最佳采樣面積。7.3樣品挑揀7.3.1質(zhì)量監(jiān)督人員應(yīng)在樣品挑揀完畢后立即開展抽樣檢查。7.3.2抽取約10%已挑揀后的剩余殘渣重新挑揀。7.3.3若重新挑揀出的動物個體數(shù)不超過該樣品已挑揀出動物個體數(shù)的10%，且未發(fā)現(xiàn)新的分類單元，則該樣品挑揀合格，否則，應(yīng)進(jìn)行第二次抽檢，若仍不合格，則該樣品應(yīng)重新挑揀。7.4樣品分析7.4.1實(shí)驗(yàn)室需建立并統(tǒng)一淡水大型底棲無脊椎動物系統(tǒng)分類學(xué)檢索資料、圖譜及參考標(biāo)本。7.4.2若需委托分類學(xué)專家對標(biāo)本進(jìn)行鑒定時，應(yīng)做好信息記錄，包括鑒定人姓名、所在單位、日期等。7.4.3具備條件的實(shí)驗(yàn)室，可選擇約10%已完成分析的樣品，開展實(shí)驗(yàn)室內(nèi)人員比對、實(shí)驗(yàn)室間比對或者與分類學(xué)專家比對。依據(jù)雙方鑒定和計數(shù)結(jié)果，計算物種分類差異百分比PTD和計數(shù)差異百分比PDE，如PTD≤15%且PDE≤5%，物種分類鑒定計數(shù)合格。否則，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)組織比對人員圍繞分析結(jié)果開展討論，查找原因。式中：PTD——物種分類差異百分比；C——比對分析結(jié)果中，物種分類一致的數(shù)量，單位為個；N——比對分析結(jié)果中，物種較多一方數(shù)量，單位為個。7.4.5計數(shù)差異百分比按公式（6）計算。PDE=×100%…………（6）式中：PDE——計數(shù)差異百分比；1——比對計數(shù)結(jié)果1，單位為個；2——比對計數(shù)結(jié)果2，單位為個。DB32/T4815—2024（規(guī)范性）采樣器及其適用條件和使用方法大型底棲無脊椎動物樣品采樣器及其適用條件和使用方法見表A.1。表A.1采樣器及其適用條件和使用方法采樣器規(guī)格適用條件使用方法示例圖片底質(zhì)類型水體類型彼得森采泥器開口面積淤泥，泥沙等軟質(zhì)底質(zhì)生境打開閉合夾雙頁，掛好兩側(cè)提鉤；緩慢放至水底，采泥器觸底后繼續(xù)放繩，抖脫兩側(cè)提鉤；輕輕向上拉緊提繩使閉合夾雙頁慢慢閉合采集底質(zhì)，手感提繩變沉后，雙頁即閉合完成；將采泥器拉出水面、置于桶或盆內(nèi)，打開閉合夾雙頁獲取采得的底質(zhì)?？寺‥kman）采泥器開口面積拉起閉合夾拉繩，固定在拉繩固定器上；緩慢放至水底，采泥器觸底后，將使錘沿不銹鋼纜或尼龍繩釋放落下；等待使錘落下片刻即閉合夾閉合（落下的使錘擊中彈簧釋放管后，閉合夾拉繩會從拉繩固定器上脫落，閉合夾彈簧會使閉合夾閉合將采泥器拉出水面、置于桶或盆內(nèi)，打開閉合夾拉繩獲取采得的底質(zhì)范維恩（VanVeen）采泥器開口面積打開閉合夾雙側(cè)連接桿，掛上掛鉤；緩慢放至水放；緩慢拉緊提繩，閉合夾就會慢慢關(guān)閉，手感提繩變沉后，雙頁即閉合完成；將采泥器拉出水面、置于桶或盆內(nèi)，打開閉合夾雙側(cè)連接桿獲取采得的底質(zhì)網(wǎng)框邊長30cm×石塊等涉水可過河流將網(wǎng)開口面向水流方向，用鐵鍬將網(wǎng)框范圍內(nèi)的泥砂、植物根墊、枯枝落葉等均裝進(jìn)索伯網(wǎng)；如有石塊等較大的基質(zhì)，則將其表面生物洗進(jìn)索伯網(wǎng)后棄去；反復(fù)沖洗紗網(wǎng)袋將所有生物沖進(jìn)底部收集區(qū)中三角拖網(wǎng)網(wǎng)框邊長30cm×30cm×淤泥，泥沙等軟質(zhì)底質(zhì)生境；硬質(zhì)底質(zhì)生境；草型生境等湖泊和水庫不可涉水的可涉水河流當(dāng)使用船采集樣品時，選擇三角拖網(wǎng)采集樣品。在船靜止?fàn)顟B(tài)下拋入水中，沉底后拉緊拖繩，在水底緩慢拖行，累計拖拽距離一般為10m~15m。其中，淤積較為嚴(yán)重的點(diǎn)可以適當(dāng)縮短拖拽距離約為5m，以硬質(zhì)底為主的點(diǎn)可以適當(dāng)延長拖拽距離至20m~30m。當(dāng)流速較快時，需配重錘，避免拖網(wǎng)上浮DB32/T4815—2024表A.1采樣器及其適用條件和使用方法（續(xù)）采樣器規(guī)格適用條件使用方法示例圖片底質(zhì)類型水體類型D型/直角手抄網(wǎng)網(wǎng)框底邊長徑425μm淤泥，泥沙等軟質(zhì)底質(zhì)生境；硬質(zhì)底質(zhì)生境；草型生境等湖泊和水庫可涉水的采涉水河流品。使手抄網(wǎng)底的直邊緊貼底質(zhì)，迎向水流方向移動手抄網(wǎng)一定距離，采集點(diǎn)位附近所有底質(zhì)類型，累計掃過底質(zhì)的距離為3m~5m踢網(wǎng)底邊長1m，網(wǎng)孔徑石塊等涉水可過河流迎向水流方向布置踢網(wǎng)，以石頭將其底邊壓實(shí)，于上游不斷踢動不同生境底質(zhì)，累計采集時間一般為15minDB32/T4815—2024圖A.2改良型彼得森（Peterson）采泥器DB32/T4815—2024DB32/T4815—2024圖A.6三角拖網(wǎng)圖A.7D型手抄網(wǎng)DB32/T4815—2024圖A.8直角手抄網(wǎng)圖A.9踢網(wǎng)（資料性） 記錄表B.1現(xiàn)場采樣記錄表大型底棲無脊椎動物樣品現(xiàn)場采樣記錄見表B.1。表B.1現(xiàn)場采樣記錄表大型底棲無脊椎動物現(xiàn)場采樣記錄表點(diǎn)位編號：點(diǎn)位名稱：采樣日期：年月日采樣時間：監(jiān)測點(diǎn)位所在水體類型：○湖泊○水庫○涉水可過河流○涉水不可過河流○不可涉水河流現(xiàn)場采樣示意圖：生境觀測：生境類型采樣區(qū)域底質(zhì)水流ⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡ硬質(zhì)靜水○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○淤泥緩流○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○細(xì)沙急流○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○碎石湍流○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○水草生長情況藻類水華情況其他樣品采集：采樣器1面積/m2采樣器2面積/m2采樣器（設(shè)備編號①彼得森采泥器(),②?？寺赡嗥?),③范維恩采泥器(),④索伯網(wǎng)(),⑤三角拖網(wǎng)(),⑥D(zhuǎn)型手抄網(wǎng)(),⑦直角手抄網(wǎng)(),⑧踢網(wǎng)()樣品封裝與保存：樣品名稱：樣品標(biāo)識碼：樣品是否分裝○是，分裝數(shù)量：○否樣品保存條件：○常溫保存○冷藏保存○添加固定液(□無水乙醇（終濃度約75%□甲醛溶液（終濃度約5%備注：簡要記錄采樣當(dāng)天及前一周的天氣以及其他現(xiàn)場情況。采樣人員：復(fù)核人員：現(xiàn)場負(fù)責(zé)人：B2樣品挑揀及固定記錄表大型底棲無脊椎B2樣品挑揀及固定記錄表大型底棲無脊椎動物樣品挑揀及固定記錄見表B2。表B2樣品挑揀及固定記錄表固定記錄動物樣本固定添加量mL審核人員：審核人員：固定液及更換情況單獨(dú)保存樣本○是，○是，○否○是，○是，○否分裝數(shù)量 / / / // / / / //樣品挑揀及是否分樣○否○否大型底棲無脊椎動物○是○是挑揀人員：復(fù)核人員：日期及時間月日月日保存條件○常溫保存○冷藏保存○添加固定液○常溫保存○冷藏保存○添加固定液采樣日期及起始保存時間月日月日樣品名稱及樣品標(biāo)識碼編號備注DB32/T4815—2024B.3分析記錄表大型底棲無脊椎動物樣品分析記錄見表B.3。表B.3分析記錄表大型底棲無脊椎動物樣品分析記錄表樣品名稱：樣品標(biāo)識碼：采樣器：采樣面積：m2體視顯微鏡編號：生物顯微鏡編號：電子天平編號：編號類群中文學(xué)名拉丁名數(shù)量個重量g分析結(jié)果密度個/m2生物量g/m2123456789101112131415⑩腹足綱Gastropoda；?雙殼綱Bivalvia；?線蟲動物門Nematoda；?線形動物門Nematomorpha；?扁形動物門Platy?helminthes；?紐形動物門Nemertea；?其他（注明類群名稱）。該樣品的物種數(shù)：密度：個/m2生物量：g/m2備注：B4標(biāo)本保存記錄表大型底棲無脊椎B4標(biāo)本保存記錄表大型底棲無脊椎動物標(biāo)本保存記錄見表B4。表B4標(biāo)本保存記錄表大型底棲無脊椎動物標(biāo)本保存記錄表保存信息保存人員備注：