2024年獸醫(yī)微生物學(xué)詳

獸醫(yī)微生物學(xué)緒論及第壹章細(xì)菌的形態(tài)與構(gòu)造1、微生物：是存在于自然界的壹大群體型微小、構(gòu)造簡(jiǎn)樸、肉眼直接看不見，必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)仟倍，甚至數(shù)萬倍才能觀測(cè)到的微小生物。2、微生物的種類：三型八大類（三菌四體壹病毒）①真核細(xì)胞型微生物：細(xì)胞核有核膜和核仁，細(xì)胞器完整，如真菌。②原核細(xì)胞型微生物：僅有原始核，無核膜、核仁。細(xì)胞器很不完善。DNA和RNA同步存在。有細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體。③非細(xì)胞型微生物：是最小的壹類微生物。無經(jīng)典的細(xì)胞構(gòu)造，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。核酸類型為DNA或RNA。病毒屬之。3、微生物的特點(diǎn)·體積小、面積大；·代謝能力強(qiáng)，代謝類型多；·生長(zhǎng)繁殖快，輕易培養(yǎng)；·易變異，適應(yīng)強(qiáng)；·種類多，分布廣。4、細(xì)菌的基本形態(tài)細(xì)菌按其外形，重要有：球菌、桿菌、螺旋狀菌。①球菌菌體呈球形或近似球形，根據(jù)細(xì)胞分裂的方向及分裂後的各子細(xì)胞的空間排列狀態(tài)不壹樣，可將球菌分為如下幾種：?jiǎn)吻蚓?、雙球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌、葡萄球菌等。②桿菌桿菌是細(xì)菌中種類最多的類型，因菌種不壹樣，菌體細(xì)胞的長(zhǎng)短、粗細(xì)等均有所差異。桿菌的形態(tài)：短桿狀、長(zhǎng)桿狀、棒桿狀、梭狀桿狀、月亮狀、竹節(jié)狀等；按桿菌細(xì)胞繁殖後的排列方式則有鏈狀、柵狀、“八”字狀等。③螺旋菌：弧菌、螺菌。5、科赫法則·特殊病原菌在同壹疾病中查見，健康者中不存在；·該病原菌能被分離培養(yǎng)得純種；·該純培養(yǎng)物接種至易感動(dòng)物，能導(dǎo)致同樣病癥；·自試驗(yàn)感染的動(dòng)物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)。6、細(xì)菌的衰老型或退化型：指在不良環(huán)境或老齡期時(shí)，細(xì)菌會(huì)出現(xiàn)與正常形狀不壹樣樣的個(gè)體。若將其重新置于正常培養(yǎng)環(huán)境時(shí)可恢復(fù)正常狀態(tài)。7、細(xì)菌的多形性：指處在衰老型或退化型狀態(tài)的細(xì)菌雖然置于合適的環(huán)境中生長(zhǎng)，其形狀也與正常的不壹致,如嗜血桿菌。8、菌落：?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)菌在合適的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部，通過壹段時(shí)間培養(yǎng)後，生長(zhǎng)繁殖出數(shù)量巨大的菌體，形成肉眼可見、有壹定形態(tài)的群體?？捎糜诩?xì)菌的分離、純化、計(jì)數(shù)和鑒定。9、菌苔：各“菌落”互相連接形成壹片。10、細(xì)菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài)（VBNC）：指細(xì)菌處在不良環(huán)境條件下,細(xì)胞縮成球形,用常規(guī)措施培養(yǎng)不能生長(zhǎng)繁殖,但仍是活的壹種特殊存在形式，在壹定條件下可復(fù)蘇,并仍具毒性。11、細(xì)菌的構(gòu)造·基本構(gòu)造：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核體?！ぬ厥鈽?gòu)造：莢膜、S層、鞭毛、菌毛、芽胞。12、磷壁酸的功能·形成表面抗原決定簇的成分；·提高膜結(jié)合酶的能力（使細(xì)胞壁形成負(fù)電荷環(huán)境，以利于吸附鎂離子，維持酶活）；·保證革蘭氏陽(yáng)性致病菌（如A族鏈球菌）與其寄主間的黏連；·構(gòu)成噬菌體的吸附位點(diǎn)。13、細(xì)胞壁①格蘭陽(yáng)性菌·肽聚糖·磷壁酸②革蘭陰性菌⑴脂多糖（LPS）構(gòu)成：·類脂A：無種屬特異性，內(nèi)毒素的重要毒性成分；·側(cè)鏈多糖：即菌體抗原，有種、型特異性；·關(guān)鍵多糖：有屬特異性。功能：·可以吸附Ca2+、Mg2+等陽(yáng)離子；·為噬菌體提供特異性吸附受體。⑵外膜蛋白（OMP）：包括微孔蛋白、脂蛋白。⑶周質(zhì)間隙14、細(xì)胞壁的功能·維持菌體外形和提高機(jī)械強(qiáng)度，保護(hù)細(xì)菌耐受低滲環(huán)境；·阻擋有害物質(zhì)進(jìn)入菌體；·維持菌體內(nèi)外離子平衡；·參與細(xì)菌的正常分裂；·表面帶有多種抗原分子，可誘發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答。15、細(xì)菌細(xì)胞膜不含膽固醇。16、擬核：細(xì)菌不具有成形的核，無核膜、核仁，遺傳物質(zhì)稱為擬核（核質(zhì)）。核質(zhì)由單壹密閉環(huán)狀DNA分子反復(fù)回旋卷曲盤繞構(gòu)成松散網(wǎng)狀構(gòu)造。17、莢膜①概念：某些細(xì)菌在其細(xì)胞壁外周產(chǎn)生的壹層包圍整個(gè)菌體、邊界清晰的黏液樣物質(zhì)，理化措施清除後并不影響細(xì)胞的生命活動(dòng)。②功能·抗吞噬作用：莢膜具有抵御宿主吞噬細(xì)胞的作用，因而莢膜是病原菌的重要毒力因子。·抗有害物質(zhì)的損傷作用：莢膜處在細(xì)胞的最外層，可保護(hù)菌體防止和減少受有害物質(zhì)的損傷?！I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的貯存場(chǎng)所與廢物排出。18、S層的功能·分子篩和離子通道；·屏障作用，保護(hù)細(xì)菌；·黏附宿主細(xì)胞；·重要的表面抗原。19、鞭毛的功能·是運(yùn)動(dòng)器官；·有抗原性；·與致病性有關(guān)。20、菌毛·與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)無關(guān)；·菌毛蛋白具有抗原性；·必須用電鏡觀測(cè)；·分壹般菌毛、性菌毛。21、細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型（細(xì)菌L型）：細(xì)胞壁受損後仍能生長(zhǎng)和分裂的細(xì)菌。在壹般環(huán)境中不耐受菌體內(nèi)的高滲透壓會(huì)漲破死亡，在高滲環(huán)境中仍可存活。革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁缺失後，原生質(zhì)僅被壹層細(xì)胞膜包住——原生質(zhì)體。革蘭陰性菌肽聚糖層受損後尚有外膜保護(hù)——原生質(zhì)球。將兩個(gè)不壹樣的原生質(zhì)體或原生質(zhì)球融合并再生成壹種細(xì)菌的技術(shù)，稱原生質(zhì)體融合技術(shù)。22、研究L-細(xì)菌的意義⑴診斷困難，由于L-細(xì)菌在壹般培養(yǎng)條件下不易成功，因此常誤診為非病原體感染；⑵對(duì)干擾細(xì)胞壁合成的藥物敏感性下降，如青霉素，多黏菌素等；⑶由于細(xì)胞壁的少或無，使抗原性下降，L-細(xì)菌的感染可逃避正常菌抗體的襲擊而長(zhǎng)期存在；⑷與慢性病和某些復(fù)發(fā)性疾病有關(guān)；用藥——導(dǎo)致L型——對(duì)藥不敏感——深入感染等⑸運(yùn)用L-細(xì)菌是進(jìn)行細(xì)菌的基礎(chǔ)研究。23、革蘭氏染色①原理G+菌：肽聚糖含量高，交聯(lián)度大，當(dāng)乙醇脫色時(shí)，肽聚糖因脫水而孔徑縮小，故結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被阻留在細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞仍呈紫色。G-菌：肽聚糖層薄，交聯(lián)松散，乙醇脫色不能使其構(gòu)造收縮，因其含脂量高，乙醇將脂溶解，縫隙加大，酒精將細(xì)胞脫色，呈無色，沙黃（石炭酸復(fù)紅）復(fù)染呈紅色。②措施細(xì)菌標(biāo)本固定、結(jié)晶紫初染、碘液媒染、生成結(jié)晶紫-碘復(fù)合物、95%酒精脫色、稀釋的復(fù)紅復(fù)染。③用途：細(xì)菌形態(tài)鑒定、菌種鑒定④意義：鑒別細(xì)菌，選擇抗菌藥物，研究細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性、對(duì)結(jié)晶紫的敏感性，細(xì)菌的等電點(diǎn)，指導(dǎo)臨床用藥。24、革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁成分比較革蘭氏陽(yáng)性菌革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁厚度層次與否含磷壁酸脂多糖對(duì)青霉素敏感性對(duì)溶菌酶敏感性厚（15～80nm）重要為1層肽聚糖層有無高高?。?0～15nm）2層，肽聚糖層和外膜層無有低或不敏感較低25、芽胞：某些革蘭陽(yáng)性菌在壹定環(huán)境條件下，在菌體內(nèi)部形成的壹種圓形或卵圓形的休眠體。芽胞形成後細(xì)菌即失去繁殖能力。①芽胞的構(gòu)造，由外向內(nèi)：外衣→外膜→皮質(zhì)→芽孢壁→內(nèi)膜→芯髓。②性質(zhì)：壹種細(xì)菌只形成壹種芽胞，壹種芽胞發(fā)芽也只生成壹種菌體，細(xì)菌數(shù)量并未增長(zhǎng)，因而芽胞不是細(xì)菌的繁殖方式。與芽胞相比，未形成芽胞而具有繁殖能力的菌體稱為繁殖體（營(yíng)養(yǎng)體）。③特點(diǎn)·對(duì)高溫、干燥、輻射、化學(xué)藥物有強(qiáng)大抵御力?！ず康?、壁厚而致密、通透性差、不易著色、折光性強(qiáng)。·芽胞內(nèi)新陳代謝幾乎停止，處在休眠狀態(tài)，但保持潛在萌發(fā)力?！げ皇欠敝称鞴伲挤N芽胞萌發(fā)只產(chǎn)生壹種營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的細(xì)胞。④意義·對(duì)外界不良環(huán)境有強(qiáng)大的抵御力，是細(xì)菌保留生命的壹種休眠構(gòu)造；·消毒的指標(biāo)是以殺滅芽胞為準(zhǔn)（121℃/30min，朊病毒除外）；·反恐怖戰(zhàn)爭(zhēng)需要。第二章細(xì)菌的生理1、細(xì)菌與真核生物新陳代謝的重要區(qū)別·生長(zhǎng)和繁殖速度快·運(yùn)用多種化合物作為能源能力強(qiáng)·營(yíng)養(yǎng)需求多種多樣·可運(yùn)用超常流水線合成大分子物質(zhì)·能產(chǎn)生特殊物質(zhì)2、細(xì)菌物質(zhì)攝取方式①單純擴(kuò)散(被動(dòng)擴(kuò)散)②增進(jìn)擴(kuò)散③積極運(yùn)送④基團(tuán)轉(zhuǎn)位需要載體蛋白和能量，有兩個(gè)突出特點(diǎn)：·轉(zhuǎn)運(yùn)過程中物質(zhì)發(fā)生了化學(xué)變化；·重要存在于厭氧菌和兼性厭氧菌中。3、時(shí)代時(shí)間：壹種菌體分裂為兩個(gè)菌體所需的時(shí)間。4、生長(zhǎng)曲線：將細(xì)菌接種在液體培養(yǎng)基并置于合適溫度中，定期取樣檢查活菌數(shù)，可發(fā)現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)過程具有規(guī)律性。以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以活菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，可得壹條生長(zhǎng)曲線。5、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的四個(gè)時(shí)期①緩慢期：是細(xì)菌來到新環(huán)境的壹種適應(yīng)過程。特點(diǎn)：·代謝活躍，合成并積累所需酶系統(tǒng)；·RNA含量明顯增多，但DNA含量無變化；·細(xì)菌數(shù)不增長(zhǎng)。②對(duì)數(shù)期：細(xì)菌生長(zhǎng)迅速，以恒定速度進(jìn)行分裂繁殖，活菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)，到達(dá)頂峰，生長(zhǎng)曲線靠近壹條斜的直線。此時(shí)病原菌致病力最強(qiáng)，形態(tài)、染色特性及生理活性較經(jīng)典，對(duì)抗菌藥物的作用較敏感。OD=0.4～0.6認(rèn)為處在對(duì)數(shù)期。③穩(wěn)定期：因營(yíng)養(yǎng)的消耗、代謝產(chǎn)物的蓄積，細(xì)菌繁殖速度下降，死亡數(shù)逐漸上升，新繁殖的活菌數(shù)與死菌數(shù)大體平衡。細(xì)菌的形態(tài)及生理性狀常有變化，格蘭陽(yáng)性菌此時(shí)可染成陰性，毒素、抗生素、芽孢多此時(shí)產(chǎn)生。④衰亡期：死菌數(shù)超過活菌數(shù)，細(xì)菌的菌體變形或自溶，染色不經(jīng)典，難以進(jìn)行鑒定。6、培養(yǎng)基①概念：是人工配制的基質(zhì)，具有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基制成後，要經(jīng)滅菌處理。②營(yíng)養(yǎng)條件·基本營(yíng)養(yǎng)·氧氣：根據(jù)細(xì)菌對(duì)氧的需求，可分為需楊菌、厭氧菌及兼性厭氧菌·厭氧培養(yǎng)基：是為培養(yǎng)厭氧菌而設(shè)計(jì)的·溫度：根據(jù)細(xì)菌對(duì)溫度的適應(yīng)范圍，可將細(xì)菌分為嗜冷菌、嗜溫菌、嗜熱菌·酸堿度：多數(shù)病原菌的最適ph為7.2～7.6，鼻疽伯氏菌偏酸，霍亂弧菌偏堿7、培養(yǎng)基的分類①按營(yíng)養(yǎng)成分·基礎(chǔ)培養(yǎng)基：基本營(yíng)養(yǎng)成分·營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加某些其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如葡萄糖、血液、血清、生長(zhǎng)因子等②按狀態(tài)·固體培養(yǎng)基：1.5%～2%瓊脂，用于細(xì)菌分離純化·半固體培養(yǎng)基：0.5%瓊脂，作穿刺試驗(yàn)·液體培養(yǎng)：擴(kuò)增純培養(yǎng)的菌體③按功能·鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入特定底物，觀測(cè)細(xì)菌生長(zhǎng)後的分解底物，從而鑒別細(xì)菌?！みx擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，使克制壹類細(xì)菌生長(zhǎng)，而有助于另壹類細(xì)菌生長(zhǎng)，從而將後者選擇出來。麥康凱培養(yǎng)基內(nèi)含膽鹽，能克制革蘭陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)，大腸桿菌及沙門菌可生長(zhǎng)。·厭氧培養(yǎng)基：用于厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別。將壹般培養(yǎng)基放在無氧環(huán)境中培養(yǎng)，或者使培養(yǎng)基自身成為無氧環(huán)境。庖肉培養(yǎng)基是常用的厭氧培養(yǎng)基之壹，其中不含飽和脂肪酸和谷胱甘肽的肉渣起到了還原劑的作用。8、分離培養(yǎng)：將標(biāo)本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基表面，因劃線的分散作用，許多原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基表面散開。9、液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象·渾濁：大多數(shù)細(xì)菌·沉淀：鏈狀生長(zhǎng)的細(xì)菌·菌膜：專性需氧菌，如結(jié)核桿菌、枯草桿菌10、生化反應(yīng)：細(xì)菌對(duì)糖、蛋白質(zhì)的分解能力不壹樣，代謝產(chǎn)物各異，運(yùn)用生物化學(xué)措施鑒別不壹樣細(xì)菌稱為細(xì)菌的生化反應(yīng)。重要有氧化酶試驗(yàn)、VP試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)等。11、生物被膜：壹般生活在自然界中的細(xì)菌并非以游離的單個(gè)菌體形式存在，而是以群落形式出現(xiàn)，這種群落的重要體現(xiàn)形式稱生物被膜。是壹種被自身產(chǎn)生的多聚基質(zhì)包裹著菌細(xì)胞的構(gòu)造群體，是細(xì)菌具有保護(hù)性的壹種生長(zhǎng)模式，其構(gòu)造中具有水和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的通道。12、生物膜的特性①生長(zhǎng)速度緩慢且不均壹。細(xì)菌生物膜是在不利環(huán)境下形成的，環(huán)境變化對(duì)其影響較小。在膜表面的細(xì)菌，由于營(yíng)養(yǎng)等原因，分裂較快，體積較大，內(nèi)層相反。②細(xì)菌毒力下降毒力強(qiáng)的細(xì)菌形成被膜菌後，壹般不會(huì)使動(dòng)物致死。③耐藥性提高④逃逸宿主的免疫監(jiān)視多糖膜能減少免疫細(xì)胞和免疫分子的趨化，使被膜菌與宿主長(zhǎng)期共存。13、密度感應(yīng)（QS）：多數(shù)細(xì)菌能合成并釋放壹種稱為自身誘導(dǎo)素(信息素)的信號(hào)分子，胞外信號(hào)分子濃度隨細(xì)菌密度的增長(zhǎng)而增長(zhǎng)，到達(dá)壹種臨界濃度時(shí)，信息素會(huì)啟動(dòng)菌體中有關(guān)基因的體現(xiàn)，調(diào)控細(xì)菌的生物行為，以適應(yīng)環(huán)境的變化，這壹現(xiàn)象稱群體感應(yīng)調(diào)整。14、微生物種群間的關(guān)系：互生、共生、拮抗、寄生。15、正常菌群與其宿主之間形成共生關(guān)系，詳細(xì)體現(xiàn)為營(yíng)養(yǎng)、免疫、生物拮抗三方面。16、菌膜?。貉乐苎住⒅卸?、壞死性筋膜炎、心內(nèi)膜炎。17、無特定病原體動(dòng)物（SPF）：指不存在某些特定的具有病原性或潛在病原性微生物的動(dòng)物。18、感受態(tài)：細(xì)胞生活周期中壹種特殊的生理狀態(tài)。第三章消毒與滅菌1、滅菌：指殺滅物體中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的措施。2、消毒：指殺滅物體中病原微生物的措施。只規(guī)定到達(dá)消除傳染性的目的，對(duì)非病原微生物及其芽胞、孢子并不規(guī)定所有殺死。3、防腐：指制止或克制微生物生長(zhǎng)繁殖的措施。4、無菌：指沒有活微生物的狀態(tài)。5、無菌操作：防止微生物進(jìn)入機(jī)體或局部環(huán)境的操作技術(shù)。6、物理消毒滅菌法：熱力滅菌法、輻射滅菌法、超聲波滅菌法、濾過滅菌法。7、熱力滅菌法：干熱滅菌、濕熱滅菌。①兩者比較同壹溫度下，濕熱滅菌效力比干熱滅菌大。原因：·濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固；·濕熱的穿透力比干熱大；·濕熱的蒸汽有潛熱存在。②干熱滅菌法·火焰滅菌法·熱空氣滅菌法干熱滅菌器合用于高溫下不損壞、不變質(zhì)的物品,如玻璃器皿、瓷器等。滅菌溫度需160℃維持2h。③濕熱滅菌法⑴煮沸滅菌⑵巴氏消毒法：以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌或特定微生物，而不致嚴(yán)重?fù)p害其營(yíng)養(yǎng)成分和風(fēng)味?！さ蜏鼐S持巴氏消毒法63～65℃/30min·高溫瞬時(shí)巴氏消毒法71～72℃/15s·超高溫巴氏消毒法132℃/1～2s⑶流通蒸汽滅菌法：是壹種常壓蒸汽消毒法，細(xì)菌繁殖體15～30min可殺滅，但芽胞不全被殺滅。⑷間歇滅菌法/丁達(dá)爾滅菌法（反復(fù)多次流通蒸汽）：用于不耐高溫的培養(yǎng)基，如雞蛋培養(yǎng)基、血清培養(yǎng)基、糖培養(yǎng)基的滅菌。⑸高壓蒸汽滅菌8、輻射滅菌法①非電離輻射·可見光線·曰光·紫外線波長(zhǎng)200～300nm部分有殺菌作用,試驗(yàn)室常用的紫外線殺菌燈紫外線波長(zhǎng)為253.7nm，用于：微生物試驗(yàn)室、無菌室、手術(shù)室的空氣消毒；不能用高溫或化學(xué)藥物消毒物品的表面消毒；誘變育種。·紅外線：紅外線烤箱·微波②電離輻射：α射線、β射線、γ射線、χ射線用途：忌熱物品的滅毒消菌、食品保藏和育種等方面。9、超聲波滅菌法目前超聲波重要用于裂解細(xì)胞，提取細(xì)胞組分。10、濾過除菌法：通過機(jī)械、物理阻留作用將液體或空氣中的細(xì)菌等微生物除去的措施，不能除去病毒、支原體以及細(xì)菌L型等微生物。11、消毒劑：用于殺滅病原微生物的化學(xué)藥物。①分類·使菌體蛋白質(zhì)變性或凝固，如酚類（高濃度）、醇類、重金屬鹽類（高濃度）、酸堿類；·損傷細(xì)菌細(xì)胞膜，如酚類（低濃度）、表面活性劑；·干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝，如某些氧化劑、重金屬鹽類（低濃度）；·變化核酸的功能，如染料。②影響消毒劑作用的原因·消毒劑的性質(zhì)、濃度和作用時(shí)間；·微生物的污染程度；·微生物的種類和數(shù)量；·環(huán)境中有機(jī)物；·溫度、濕度、酸堿度；·化學(xué)拮抗物。12、防腐劑：用于克制微生物生長(zhǎng)繁殖的化學(xué)藥物。13、抗生素：某些微生物代謝過程中產(chǎn)生的壹類能克制或殺死另某些微生物的物質(zhì)。14、細(xì)菌素：某種細(xì)菌產(chǎn)生的具有殺菌作用的蛋白質(zhì)，只作用于同種不壹樣菌株的細(xì)菌及親緣關(guān)系相近的細(xì)菌。食品防腐領(lǐng)域的應(yīng)用：細(xì)菌素Nisin已被60多種國(guó)家同意作為食品添加劑用于食品防腐。15、試驗(yàn)室生物安全的意義：防止病原微生物及其他有害生物或物質(zhì)傳入試驗(yàn)室；防止病原微生物等傳出試驗(yàn)室；試驗(yàn)人員的自身安全防護(hù)。第四章細(xì)菌的感染與致病機(jī)理1、感染：病原微生物在宿主體內(nèi)持續(xù)存在或增殖。2、發(fā)?。翰≡⑸锔腥踞?，對(duì)宿主導(dǎo)致明顯的損害。3、病原菌：導(dǎo)致機(jī)體發(fā)病的細(xì)菌。4、致病性：病原菌在壹定條件下，能在宿主體內(nèi)引起感染的能力稱致病性。致病性是細(xì)菌種的特性之壹。5、毒力：病原菌致病力的強(qiáng)弱程度，同壹細(xì)菌的不壹樣菌株，其毒力不壹樣，毒力是菌株的特性。6、基因水平柯赫法則·在致病菌株中檢出某些基因或其產(chǎn)物，而無毒力菌株中無；·有毒力菌株的某個(gè)基因被損壞，則菌株的毒力減弱或消除，或?qū)⒋嘶蚩寺〉綗o毒菌株內(nèi)，後者成為有毒力菌株；·將細(xì)菌接種動(dòng)物時(shí)，這個(gè)基因應(yīng)在感染的過程中體現(xiàn)；·在接種動(dòng)物檢測(cè)到這個(gè)基因產(chǎn)物的抗體，或產(chǎn)生免疫保護(hù)。7、半數(shù)致死量（LD50）：能使接種的試驗(yàn)動(dòng)物在感染後壹定期限內(nèi)死亡二分之壹所需的微生物量或毒素量。8、半數(shù)感染量（ID50）：某些病原微生物只能感染試驗(yàn)動(dòng)物、雞胚或細(xì)胞，但不引致死亡，用ID50表達(dá)其毒力。9、干擾或逃避宿主的防御機(jī)制①抗吞噬作用·不與吞噬細(xì)胞接觸（破壞，鏈球菌溶血素）·克制吞噬細(xì)胞的攝?。ㄇv膜、菌毛）·在吞噬細(xì)胞內(nèi)生存（沙門菌、李氏桿菌）·殺死或損傷吞噬細(xì)胞②抗體液免疫機(jī)制·抗原偽裝或抗原變異，金黃色葡萄球菌、SPA·分泌蛋白酶降解免疫球蛋白，嗜血桿菌分泌IgA蛋白酶·逃避補(bǔ)體，克制抗體產(chǎn)生，LPS、OMP、莢膜、S層③內(nèi)化作用：某些細(xì)菌粘附于細(xì)胞表面後，能進(jìn)入吞噬細(xì)胞或非吞噬細(xì)胞內(nèi)部的過程。意義：宿主細(xì)胞為進(jìn)入其內(nèi)的細(xì)菌提供了壹種增殖的小環(huán)境和呵護(hù)所，使細(xì)菌逃避宿主免疫機(jī)制。也可隨吞噬細(xì)胞的游走擴(kuò)散至其他部位，導(dǎo)致廣泛病變。10、外毒素①概念：某些病原菌在生長(zhǎng)繁殖過程中所產(chǎn)生的對(duì)宿主細(xì)胞有毒性的可溶性蛋白質(zhì)，大多數(shù)外毒素在菌體內(nèi)合成後必須分泌于胞外。②特性·毒性作用極強(qiáng)·有高度的特異性·不耐熱，多數(shù)在60～80℃經(jīng)10～80min即失去毒性·對(duì)宿主不致熱·抗原性強(qiáng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體③構(gòu)成·A亞單位：毒素的活性中心，決定毒素的毒性效應(yīng)·B亞單位：結(jié)合單位，協(xié)助A亞單位?？蓡为?dú)與細(xì)胞膜受體結(jié)合，從而阻斷完整毒素結(jié)合細(xì)胞。刺激機(jī)體產(chǎn)生對(duì)應(yīng)抗體，可作為良好的亞單位疫苗。11、抗毒素：外毒素刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體，可用于緊急治療和防止。12、類毒素：外毒素在0.4%甲醛溶液作用下，通過壹段時(shí)間可以脫毒，但仍保留原有抗原性，稱為類毒素。13、內(nèi)毒素①概念：指革蘭陰性菌外膜中的脂多糖（LPS）成分，細(xì)菌在死亡後破裂或用人工措施裂解菌體後才釋放。②特性·毒性弱，很少致死·致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐·耐熱·抗原性較弱，免疫應(yīng)答局限性以中和毒性③構(gòu)成·多糖側(cè)鏈·關(guān)鍵多糖·類脂A：重要的毒性成分（保守）④檢測(cè)·鱟試驗(yàn)：鱟變形細(xì)胞溶解物14、內(nèi)毒素與外毒素的比較種類內(nèi)毒素外毒素來源革蘭陰性菌革蘭陽(yáng)性菌及部分陰性菌存在部位細(xì)胞壁成分、細(xì)菌裂解後釋放活菌分泌或細(xì)菌溶解後散出化學(xué)成分脂多糖蛋白質(zhì)穩(wěn)定性好，160℃/2～4h破壞差，60～80℃/30min破壞毒性作用較弱，多種內(nèi)毒素作用大體相似，起休克，發(fā)熱強(qiáng)，對(duì)機(jī)體組織器官有選擇性，引起特殊臨床體現(xiàn)抗原性弱，能刺激機(jī)體形成抗體，但無中和作用，甲醛處理後不能形成類毒素強(qiáng)，能刺激機(jī)體形成抗毒素，經(jīng)甲醛脫毒後能形成類毒素15、機(jī)會(huì)致病菌：正常菌群與宿主之間，正常菌群之間，通過營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)、代謝產(chǎn)物的互相制約等原因，維持著良好的生存平衡。在壹定條件下這種平衡關(guān)系被打破，本來不致病的正常菌群中的細(xì)菌可成為致病菌，此類細(xì)菌稱機(jī)會(huì)性致病菌。16、細(xì)菌毒力減弱措施·長(zhǎng)時(shí)間在體外持續(xù)培養(yǎng)傳代·在高于最適生長(zhǎng)溫度條件下培養(yǎng)·在具有特殊化學(xué)物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)·在特殊氣體條件下培養(yǎng)·通過非易感動(dòng)物·通過基因工程的措施17、細(xì)菌毒力增強(qiáng)的措施：回歸易感動(dòng)物。第五章細(xì)菌的遺傳變異1、細(xì)菌的遺傳：指親代細(xì)菌與子代細(xì)菌的相似性，它使細(xì)菌的性狀保持相對(duì)穩(wěn)定，是多種細(xì)菌存在的根據(jù)。2、細(xì)菌的變異：指親代與子代及子代細(xì)菌之間的不相似性，細(xì)菌得以發(fā)展進(jìn)化。3、細(xì)菌常見的變異現(xiàn)象·形態(tài)和構(gòu)造變異·菌落形態(tài)變異·抗原變異·抗性變異·代謝變異·毒力變異4、質(zhì)粒：細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì)，編碼細(xì)菌多種重要的生物學(xué)形狀?！?yán)緊型復(fù)制·按轉(zhuǎn)移的特性，可分為接合性質(zhì)粒、非接合性質(zhì)粒·自殺性質(zhì)?！ご┧筝d體：指具有兩個(gè)親緣關(guān)系不壹樣的復(fù)制子，能在兩種不壹樣的生物中復(fù)制。5、轉(zhuǎn)位因子：是細(xì)菌基因組中能變化自身位置的壹類獨(dú)特的DNA片段。6、毒力島（PAI）：指病原菌的某個(gè)或某些毒力基因群，分子構(gòu)造與功能有別于細(xì)菌染色體，但位于細(xì)菌染色體之內(nèi)。7、基因突變：指生物細(xì)胞遺傳物質(zhì)DNA分子構(gòu)造忽然發(fā)生了穩(wěn)定的可遺傳變化。是生物進(jìn)化的壹種重要原因。8、基因轉(zhuǎn)移：外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌進(jìn)入受體菌細(xì)胞內(nèi)的過程。重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在壹起?；蜣D(zhuǎn)移和重組的重要方式：轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、原生質(zhì)融合等。9、轉(zhuǎn)化：供體菌游離的DNA片段直接進(jìn)入受體菌，使受體菌獲得新的性狀。10、轉(zhuǎn)導(dǎo)①概念：以溫和噬菌體為媒介，把供體菌的DNA小片段攜帶到受體菌中，通過互換與整合，使受體菌獲得供體菌的部分遺傳性狀。②類型：普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)（任何）、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)（特定，λ）·普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)：被裝入的DNA片段可以是供體菌染色體上的任何部分。(完全轉(zhuǎn)導(dǎo)，流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo))·局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)：為噬菌體所介導(dǎo)的供體菌染色體上個(gè)別特定基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)。（特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)）12、接合：是兩個(gè)完整的細(xì)菌細(xì)胞通過性菌毛直接接觸，由供體細(xì)菌將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移給受體細(xì)菌的過程。第六章細(xì)菌的分類與命名1、古細(xì)菌無肽聚糖。2、微生物分類的最基本單元是種，另壹方面是屬。3、菌株：是不壹樣來源的某壹細(xì)菌的純培養(yǎng)物。4、細(xì)菌的命名根據(jù)“國(guó)際細(xì)菌命名法規(guī)”的規(guī)定，學(xué)名用拉丁文，遵照“雙名法”。每種細(xì)菌的拉丁文名稱由屬名和種名兩部分構(gòu)成，屬名第壹種字母大寫，其他均小寫。5、細(xì)菌分類采用老式的雙歧檢索條目分類法。6、目前公認(rèn)的細(xì)菌分類體系是《伯吉系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》。7、《國(guó)際系統(tǒng)與演化微生物學(xué)雜質(zhì)》是細(xì)菌分類命名的世界公認(rèn)的權(quán)威期刊。8、國(guó)際公認(rèn)的菌種保藏權(quán)威機(jī)構(gòu)是美國(guó)經(jīng)典培養(yǎng)物保藏中心（ATCC）。第二拾壹章病毒的構(gòu)造1、病毒子：壹種形態(tài)和構(gòu)造上完整的病毒顆粒。2、病毒的特點(diǎn)⑴形體微小，能通過細(xì)菌濾器，在電子顯微鏡下才能觀測(cè)；⑵沒有細(xì)胞構(gòu)造；⑶每種病毒只含壹種核酸，DNA或RNA；⑷既無產(chǎn)能酶系，也無蛋白質(zhì)和核酸合成酶系，只能運(yùn)用宿主活細(xì)胞內(nèi)現(xiàn)成代謝系統(tǒng)合成自身的核酸和蛋白質(zhì)成分；⑸對(duì)抗生素不敏感，對(duì)干擾素敏感；⑹以復(fù)制方式繁殖。3、痘病毒最大，圓環(huán)病毒最小。4、動(dòng)物病毒中螺旋對(duì)稱的病毒均屬有囊膜的單股RNA病毒。5、除痘病毒外，所有脊椎動(dòng)物DNA病毒均為20面體。6、病毒的化學(xué)構(gòu)成：核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、碳水化合物、其他構(gòu)成。7、核酸的特點(diǎn)⑴病毒只含壹種核酸。構(gòu)成病毒體的芯髓；⑵核酸類型多樣化；⑶分子量小，基因組構(gòu)造簡(jiǎn)樸，所含基因組數(shù)目少；⑷病毒基因組核酸復(fù)制多樣化；⑸病毒核酸更輕易受宿主細(xì)胞的影響而發(fā)生基因突變和重組；⑹有些病毒清除囊膜和衣殼，裸露的DNA或RNA也能感染細(xì)胞，這種核酸稱傳染性核酸。8、感染性核酸具有條件·病毒核酸能作為mRNA或能運(yùn)用宿主細(xì)胞的RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄病毒的mRNA；·病毒核酸不分節(jié)段。9、將mRNA的堿基序列作為原則，與其相似的稱正股，與其互補(bǔ)的稱負(fù)股。某些病毒（布尼病毒、砂粒病毒）部分為正負(fù)鏈，稱為雙向。10、核酸可分單股或雙股、線狀或環(huán)狀、分節(jié)段或不分節(jié)段。11、擬病毒又稱類類病毒,衛(wèi)星RNAs。指壹類包裹在真病毒粒子中的缺陷類病毒。擬病毒極其微小，僅由裸露的RNA（300～400個(gè)核苷酸）或DNA構(gòu)成。是壹種環(huán)狀單鏈RNA。被侵染的植物病毒被稱為輔助病毒，擬病毒必須通過輔助病毒才能復(fù)制。12、蛋白質(zhì)①構(gòu)造蛋白：指構(gòu)成壹種形態(tài)成熟的、有感染性的病毒顆粒所必需的蛋白質(zhì)。是構(gòu)成病毒衣殼的所有成分和囊膜的重要成分。②非構(gòu)造蛋白：指由病毒基因組編碼，在病毒復(fù)制或基因體現(xiàn)調(diào)控過程中具有壹定功能，但不結(jié)合于病毒顆粒中的蛋白質(zhì)。③蛋白質(zhì)功能·保護(hù)病毒核酸，使其免受核酸酶或其他理化原因的破壞；·參與病毒感染細(xì)胞的過程，決定病毒對(duì)宿主細(xì)胞的親嗜性；·抗原性：誘導(dǎo)特異性抗體、致敏淋巴細(xì)胞。13、脂類、糖類·重要存在于囊膜中，脂溶劑可清除囊膜，使病毒喪失活性；·來自宿主細(xì)胞，與囊膜病毒的吸附和穿入宿主細(xì)胞的作用有關(guān)。14、病毒的命名要由公認(rèn)的國(guó)際專家小組負(fù)責(zé)不用拉丁文雙名法，而用英文或英語(yǔ)化的拉丁文，只用單名，目、科、屬分別用拉丁文後綴“-virales”、“-viridae”及“-virus”。15、類病毒：沒有蛋白質(zhì)外殼的病毒，由環(huán)狀RNA分子構(gòu)成,在植物中發(fā)現(xiàn)。16、擬病毒：指壹類包裹在真病毒粒子中的缺陷類病毒。17、感染性核酸：是由病毒質(zhì)?；蚋腥炯?xì)胞中分離出的具感染性的核酸。18、朊病毒：只含傳染性蛋白，無核酸。第二拾二章病毒的復(fù)制1、復(fù)制：病毒在活細(xì)胞內(nèi)，以其基由于模板，在酶的作用下，分別合成病毒基因及蛋白質(zhì)，再組裝成完整的病毒顆粒。2、復(fù)制周期：從病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞開始，通過基因組復(fù)制和病毒蛋白合成，到釋放子代病毒的全過程。3、病毒的復(fù)制周期：吸附和穿入、脫殼、生物合成、組裝和釋放。4、隱蔽期：病毒侵入易感細(xì)胞後的短時(shí)間內(nèi)完全消失，細(xì)胞內(nèi)也找不到。該感染的病毒顆粒，直到新的病毒子出現(xiàn)為止，這壹段時(shí)間稱為病毒復(fù)制的隱蔽期。生物合成階段，病毒處在隱蔽期。5、感染比：在壹種系統(tǒng)中，感染病毒細(xì)胞數(shù)與細(xì)胞總數(shù)之比。6、病毒的壹步生長(zhǎng)曲線：在幾乎100%感染比體系中，壹種病毒幾乎同步感染所有細(xì)胞，并進(jìn)行病毒復(fù)制。這種同步復(fù)制繪制出的病毒生長(zhǎng)曲線，稱病毒的壹步生長(zhǎng)曲線。7、某些病毒能凝集紅細(xì)胞，稱為病毒的血凝作用。8、病毒的特異抗體可克制其血凝作用，稱為血凝克制作用。9、血吸附是壹種特殊形式的血凝作用，是將紅細(xì)胞吸附于病毒感染的宿主細(xì)胞表面。10、根據(jù)病毒基因組怎樣轉(zhuǎn)錄稱mRNA、怎樣指令合成蛋白質(zhì)，病毒的生物合成過程可基本歸于6大類：雙股DNA病毒、單股DNA病毒、單正股RNA病毒、單負(fù)股RNA病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、雙股RNA病毒。11、病毒的mRNA是多順反子。第二拾三章病毒的遺傳與進(jìn)化1、突變：指基因組中核酸堿基次序上的化學(xué)變化，可以是壹種核苷酸的變化，也可以是成百上仟個(gè)核苷酸的缺失或易位。2、答復(fù)突變（第二位點(diǎn)突變或基因內(nèi)校正）：突變體通過第二次突變又完全或部分地恢復(fù)為本來的基因型和體現(xiàn)型。由于它的體現(xiàn)型效應(yīng)被基因組第2位點(diǎn)的突變克制，因此又稱克制突變。3、缺損型干擾(DI)突變株：是壹種缺失突變的產(chǎn)物。自身不能復(fù)制,在親本野生株作為輔助病毒存在時(shí)才能復(fù)制,但又干擾親本病毒的復(fù)制,導(dǎo)致後者數(shù)量減少。4、DI突變株特點(diǎn)⑴含正常的衣殼蛋白質(zhì)⑵只含正?；蚪M的壹部分⑶只在正常同源病毒同步存在時(shí)繁殖,這時(shí)同源病毒成為輔助病毒⑷特異性干擾同源病毒的繁殖,經(jīng)持續(xù)傳代後,DI顆粒增多5、表型變異·毒力變異·抗原性變異（抗體逃逸變異株）·空斑變異（空斑變異株）·條件致死性突變株6、DNA病毒復(fù)制具校正功能，RNA復(fù)制缺乏校正機(jī)制，病毒RNA復(fù)制的錯(cuò)誤率遠(yuǎn)高于病毒DNA。7、分子內(nèi)重組：將兩個(gè)有親緣關(guān)系但生物學(xué)性狀不壹樣的毒株感染同壹宿主細(xì)胞，可發(fā)生核酸水平上的互換，產(chǎn)生兼有兩親本特性的子代，稱重組。8、重配：對(duì)于分節(jié)段的RNA病毒，通過互換RNA節(jié)段而進(jìn)行的重組稱重配。9、賠償作用：指在感染的細(xì)胞中，病毒蛋白之間由于互相作用的成果，拯救了壹種或兩種病毒或增長(zhǎng)了病毒的產(chǎn)量。10、表型混合①概念：兩種病毒混合感染後，壹種病毒的基因組偶爾裝入另壹病毒的衣殼內(nèi)，或裝入兩個(gè)病毒成分構(gòu)成的衣殼內(nèi)，發(fā)生表型混合。②特點(diǎn)·兩株病毒混合感染時(shí)，裝配過程發(fā)生錯(cuò)誤形成；·重要體現(xiàn)為耐藥性，抗原性等變化，基因并未變化，變化的生物學(xué)形狀不能遺傳。11、基因型混合：指兩種病毒的核酸偶爾混合裝在同壹病毒衣殼內(nèi)，或兩種病毒的核衣殼偶爾包在壹種囊膜內(nèi)，但它們的核酸都未重組合，因此沒有遺傳性。第二拾四章病毒與細(xì)胞間的互相作用1、病毒是嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生微生物，培養(yǎng)病毒必須用細(xì)胞。根據(jù)病毒的不壹樣選用敏感動(dòng)物（動(dòng)物接種）、雞胚（雞胚接種）或離體細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)（細(xì)胞培養(yǎng)）。2、動(dòng)物接種的優(yōu)缺陷①長(zhǎng)處：不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備、技術(shù)簡(jiǎn)樸、易成功②缺陷：個(gè)體差異大、價(jià)格昂貴、數(shù)量有限、需要隔離畜舍3、雞胚接種的優(yōu)缺陷①長(zhǎng)處：技術(shù)簡(jiǎn)樸、來源充沛、價(jià)格低廉、數(shù)量可大、不需特殊設(shè)備②缺陷：諸多病毒不能適應(yīng)(重要是哺乳動(dòng)物的病毒)4、細(xì)胞培養(yǎng)：指運(yùn)用機(jī)械、酶或化學(xué)措施使動(dòng)物組織或傳代細(xì)胞分散成單個(gè)乃至2～4個(gè)細(xì)胞團(tuán)懸液進(jìn)行培養(yǎng)。①長(zhǎng)處⑴每個(gè)細(xì)胞生理特性基本壹致，對(duì)病毒易感性相等⑵無個(gè)體差異，精確性和反復(fù)性好⑶可嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作⑷細(xì)胞培養(yǎng)自身就能顯示病毒的生長(zhǎng)特性⑸應(yīng)用空斑技術(shù)可進(jìn)行病毒的克隆化②細(xì)胞的類型根據(jù)細(xì)胞來源、染色體特性及傳代次數(shù)，可分為三種類型：⑴原代細(xì)胞：動(dòng)物組織經(jīng)胰蛋白酶消化處理，使細(xì)胞分散而得到的細(xì)胞。⑵二倍體細(xì)胞株：將長(zhǎng)成單層的原代細(xì)胞消化分散成單個(gè)細(xì)胞，繼續(xù)培養(yǎng)傳代，其染色體數(shù)與原代細(xì)胞同樣，保持其二倍染色體數(shù)目的細(xì)胞，稱為二倍體細(xì)胞。⑶傳代細(xì)胞系：能在體外持續(xù)增殖傳代的細(xì)胞，大多數(shù)由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而成。5、細(xì)胞培養(yǎng)的措施⑴靜置培養(yǎng)：試驗(yàn)室常用，細(xì)胞懸液裝瓶，5%CO2溫箱靜置培養(yǎng)，細(xì)胞沉降并貼附在玻面上生長(zhǎng)分裂，最終長(zhǎng)成單層。⑵旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)：大規(guī)模生產(chǎn)疫苗，細(xì)胞在玻瓶?jī)?nèi)生長(zhǎng)時(shí)，玻瓶不停緩慢旋轉(zhuǎn)，細(xì)胞貼附于玻瓶四面，長(zhǎng)成單層。⑶懸浮培養(yǎng)⑷微載體培養(yǎng)6、細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)：由病毒感染導(dǎo)致的細(xì)胞損傷，在光學(xué)顯微鏡下觀測(cè)。⑴細(xì)胞圓縮，如痘病毒和呼腸孤病毒等；⑵細(xì)胞聚合，如腺病毒；⑶細(xì)胞融合形成合胞體，如副粘病毒和皰疹病毒；⑷有些病毒能形成包涵體。7、合胞體：病毒感染後導(dǎo)致感染細(xì)胞及相鄰細(xì)胞細(xì)胞膜融合的產(chǎn)物，體現(xiàn)為若干細(xì)胞的相鄰