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獸醫(yī)微生物學緒論及第壹章細菌的形態(tài)與構(gòu)造1、微生物:是存在于自然界的壹大群體型微小、構(gòu)造簡樸、肉眼直接看不見,必須借助光學顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)仟倍,甚至數(shù)萬倍才能觀測到的微小生物。2、微生物的種類:三型八大類(三菌四體壹病毒)①真核細胞型微生物:細胞核有核膜和核仁,細胞器完整,如真菌。②原核細胞型微生物:僅有原始核,無核膜、核仁。細胞器很不完善。DNA和RNA同步存在。有細菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體。③非細胞型微生物:是最小的壹類微生物。無經(jīng)典的細胞構(gòu)造,只能在活細胞內(nèi)生長繁殖。核酸類型為DNA或RNA。病毒屬之。3、微生物的特點·體積小、面積大;·代謝能力強,代謝類型多;·生長繁殖快,輕易培養(yǎng);·易變異,適應(yīng)強;·種類多,分布廣。4、細菌的基本形態(tài)細菌按其外形,重要有:球菌、桿菌、螺旋狀菌。①球菌菌體呈球形或近似球形,根據(jù)細胞分裂的方向及分裂後的各子細胞的空間排列狀態(tài)不壹樣,可將球菌分為如下幾種:單球菌、雙球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌、葡萄球菌等。②桿菌桿菌是細菌中種類最多的類型,因菌種不壹樣,菌體細胞的長短、粗細等均有所差異。桿菌的形態(tài):短桿狀、長桿狀、棒桿狀、梭狀桿狀、月亮狀、竹節(jié)狀等;按桿菌細胞繁殖後的排列方式則有鏈狀、柵狀、“八”字狀等。③螺旋菌:弧菌、螺菌。5、科赫法則·特殊病原菌在同壹疾病中查見,健康者中不存在;·該病原菌能被分離培養(yǎng)得純種;·該純培養(yǎng)物接種至易感動物,能導(dǎo)致同樣病癥;·自試驗感染的動物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)。6、細菌的衰老型或退化型:指在不良環(huán)境或老齡期時,細菌會出現(xiàn)與正常形狀不壹樣樣的個體。若將其重新置于正常培養(yǎng)環(huán)境時可恢復(fù)正常狀態(tài)。7、細菌的多形性:指處在衰老型或退化型狀態(tài)的細菌雖然置于合適的環(huán)境中生長,其形狀也與正常的不壹致,如嗜血桿菌。8、菌落:單個細菌在合適的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部,通過壹段時間培養(yǎng)後,生長繁殖出數(shù)量巨大的菌體,形成肉眼可見、有壹定形態(tài)的群體??捎糜诩毦姆蛛x、純化、計數(shù)和鑒定。9、菌苔:各“菌落”互相連接形成壹片。10、細菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài)(VBNC):指細菌處在不良環(huán)境條件下,細胞縮成球形,用常規(guī)措施培養(yǎng)不能生長繁殖,但仍是活的壹種特殊存在形式,在壹定條件下可復(fù)蘇,并仍具毒性。11、細菌的構(gòu)造·基本構(gòu)造:細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、核體?!ぬ厥鈽?gòu)造:莢膜、S層、鞭毛、菌毛、芽胞。12、磷壁酸的功能·形成表面抗原決定簇的成分;·提高膜結(jié)合酶的能力(使細胞壁形成負電荷環(huán)境,以利于吸附鎂離子,維持酶活);·保證革蘭氏陽性致病菌(如A族鏈球菌)與其寄主間的黏連;·構(gòu)成噬菌體的吸附位點。13、細胞壁①格蘭陽性菌·肽聚糖·磷壁酸②革蘭陰性菌⑴脂多糖(LPS)構(gòu)成:·類脂A:無種屬特異性,內(nèi)毒素的重要毒性成分;·側(cè)鏈多糖:即菌體抗原,有種、型特異性;·關(guān)鍵多糖:有屬特異性。功能:·可以吸附Ca2+、Mg2+等陽離子;·為噬菌體提供特異性吸附受體。⑵外膜蛋白(OMP):包括微孔蛋白、脂蛋白。⑶周質(zhì)間隙14、細胞壁的功能·維持菌體外形和提高機械強度,保護細菌耐受低滲環(huán)境;·阻擋有害物質(zhì)進入菌體;·維持菌體內(nèi)外離子平衡;·參與細菌的正常分裂;·表面帶有多種抗原分子,可誘發(fā)機體的免疫應(yīng)答。15、細菌細胞膜不含膽固醇。16、擬核:細菌不具有成形的核,無核膜、核仁,遺傳物質(zhì)稱為擬核(核質(zhì))。核質(zhì)由單壹密閉環(huán)狀DNA分子反復(fù)回旋卷曲盤繞構(gòu)成松散網(wǎng)狀構(gòu)造。17、莢膜①概念:某些細菌在其細胞壁外周產(chǎn)生的壹層包圍整個菌體、邊界清晰的黏液樣物質(zhì),理化措施清除後并不影響細胞的生命活動。②功能·抗吞噬作用:莢膜具有抵御宿主吞噬細胞的作用,因而莢膜是病原菌的重要毒力因子?!た褂泻ξ镔|(zhì)的損傷作用:莢膜處在細胞的最外層,可保護菌體防止和減少受有害物質(zhì)的損傷。·營養(yǎng)物質(zhì)的貯存場所與廢物排出。18、S層的功能·分子篩和離子通道;·屏障作用,保護細菌;·黏附宿主細胞;·重要的表面抗原。19、鞭毛的功能·是運動器官;·有抗原性;·與致病性有關(guān)。20、菌毛·與細菌的運動無關(guān);·菌毛蛋白具有抗原性;·必須用電鏡觀測;·分壹般菌毛、性菌毛。21、細菌細胞壁缺陷型(細菌L型):細胞壁受損後仍能生長和分裂的細菌。在壹般環(huán)境中不耐受菌體內(nèi)的高滲透壓會漲破死亡,在高滲環(huán)境中仍可存活。革蘭陽性菌細胞壁缺失後,原生質(zhì)僅被壹層細胞膜包住——原生質(zhì)體。革蘭陰性菌肽聚糖層受損後尚有外膜保護——原生質(zhì)球。將兩個不壹樣的原生質(zhì)體或原生質(zhì)球融合并再生成壹種細菌的技術(shù),稱原生質(zhì)體融合技術(shù)。22、研究L-細菌的意義⑴診斷困難,由于L-細菌在壹般培養(yǎng)條件下不易成功,因此常誤診為非病原體感染;⑵對干擾細胞壁合成的藥物敏感性下降,如青霉素,多黏菌素等;⑶由于細胞壁的少或無,使抗原性下降,L-細菌的感染可逃避正常菌抗體的襲擊而長期存在;⑷與慢性病和某些復(fù)發(fā)性疾病有關(guān);用藥——導(dǎo)致L型——對藥不敏感——深入感染等⑸運用L-細菌是進行細菌的基礎(chǔ)研究。23、革蘭氏染色①原理G+菌:肽聚糖含量高,交聯(lián)度大,當乙醇脫色時,肽聚糖因脫水而孔徑縮小,故結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被阻留在細胞內(nèi),細胞仍呈紫色。G-菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其構(gòu)造收縮,因其含脂量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,酒精將細胞脫色,呈無色,沙黃(石炭酸復(fù)紅)復(fù)染呈紅色。②措施細菌標本固定、結(jié)晶紫初染、碘液媒染、生成結(jié)晶紫-碘復(fù)合物、95%酒精脫色、稀釋的復(fù)紅復(fù)染。③用途:細菌形態(tài)鑒定、菌種鑒定④意義:鑒別細菌,選擇抗菌藥物,研究細菌對抗生素的敏感性、對結(jié)晶紫的敏感性,細菌的等電點,指導(dǎo)臨床用藥。24、革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌細胞壁成分比較革蘭氏陽性菌革蘭氏陰性菌細胞壁厚度層次與否含磷壁酸脂多糖對青霉素敏感性對溶菌酶敏感性厚(15~80nm)重要為1層肽聚糖層有無高高?。?0~15nm)2層,肽聚糖層和外膜層無有低或不敏感較低25、芽胞:某些革蘭陽性菌在壹定環(huán)境條件下,在菌體內(nèi)部形成的壹種圓形或卵圓形的休眠體。芽胞形成後細菌即失去繁殖能力。①芽胞的構(gòu)造,由外向內(nèi):外衣→外膜→皮質(zhì)→芽孢壁→內(nèi)膜→芯髓。②性質(zhì):壹種細菌只形成壹種芽胞,壹種芽胞發(fā)芽也只生成壹種菌體,細菌數(shù)量并未增長,因而芽胞不是細菌的繁殖方式。與芽胞相比,未形成芽胞而具有繁殖能力的菌體稱為繁殖體(營養(yǎng)體)。③特點·對高溫、干燥、輻射、化學藥物有強大抵御力?!ず康汀⒈诤穸旅?、通透性差、不易著色、折光性強?!ぱ堪麅?nèi)新陳代謝幾乎停止,處在休眠狀態(tài),但保持潛在萌發(fā)力?!げ皇欠敝称鞴伲挤N芽胞萌發(fā)只產(chǎn)生壹種營養(yǎng)狀態(tài)的細胞。④意義·對外界不良環(huán)境有強大的抵御力,是細菌保留生命的壹種休眠構(gòu)造;·消毒的指標是以殺滅芽胞為準(121℃/30min,朊病毒除外);·反恐怖戰(zhàn)爭需要。第二章細菌的生理1、細菌與真核生物新陳代謝的重要區(qū)別·生長和繁殖速度快·運用多種化合物作為能源能力強·營養(yǎng)需求多種多樣·可運用超常流水線合成大分子物質(zhì)·能產(chǎn)生特殊物質(zhì)2、細菌物質(zhì)攝取方式①單純擴散(被動擴散)②增進擴散③積極運送④基團轉(zhuǎn)位需要載體蛋白和能量,有兩個突出特點:·轉(zhuǎn)運過程中物質(zhì)發(fā)生了化學變化;·重要存在于厭氧菌和兼性厭氧菌中。3、時代時間:壹種菌體分裂為兩個菌體所需的時間。4、生長曲線:將細菌接種在液體培養(yǎng)基并置于合適溫度中,定期取樣檢查活菌數(shù),可發(fā)現(xiàn)細菌生長過程具有規(guī)律性。以時間為橫坐標,以活菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標,可得壹條生長曲線。5、細菌生長繁殖的四個時期①緩慢期:是細菌來到新環(huán)境的壹種適應(yīng)過程。特點:·代謝活躍,合成并積累所需酶系統(tǒng);·RNA含量明顯增多,但DNA含量無變化;·細菌數(shù)不增長。②對數(shù)期:細菌生長迅速,以恒定速度進行分裂繁殖,活菌數(shù)以幾何級數(shù)增長,到達頂峰,生長曲線靠近壹條斜的直線。此時病原菌致病力最強,形態(tài)、染色特性及生理活性較經(jīng)典,對抗菌藥物的作用較敏感。OD=0.4~0.6認為處在對數(shù)期。③穩(wěn)定期:因營養(yǎng)的消耗、代謝產(chǎn)物的蓄積,細菌繁殖速度下降,死亡數(shù)逐漸上升,新繁殖的活菌數(shù)與死菌數(shù)大體平衡。細菌的形態(tài)及生理性狀常有變化,格蘭陽性菌此時可染成陰性,毒素、抗生素、芽孢多此時產(chǎn)生。④衰亡期:死菌數(shù)超過活菌數(shù),細菌的菌體變形或自溶,染色不經(jīng)典,難以進行鑒定。6、培養(yǎng)基①概念:是人工配制的基質(zhì),具有細菌生長繁殖必需的營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基制成後,要經(jīng)滅菌處理。②營養(yǎng)條件·基本營養(yǎng)·氧氣:根據(jù)細菌對氧的需求,可分為需楊菌、厭氧菌及兼性厭氧菌·厭氧培養(yǎng)基:是為培養(yǎng)厭氧菌而設(shè)計的·溫度:根據(jù)細菌對溫度的適應(yīng)范圍,可將細菌分為嗜冷菌、嗜溫菌、嗜熱菌·酸堿度:多數(shù)病原菌的最適ph為7.2~7.6,鼻疽伯氏菌偏酸,霍亂弧菌偏堿7、培養(yǎng)基的分類①按營養(yǎng)成分·基礎(chǔ)培養(yǎng)基:基本營養(yǎng)成分·營養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加某些其他營養(yǎng)物質(zhì),如葡萄糖、血液、血清、生長因子等②按狀態(tài)·固體培養(yǎng)基:1.5%~2%瓊脂,用于細菌分離純化·半固體培養(yǎng)基:0.5%瓊脂,作穿刺試驗·液體培養(yǎng):擴增純培養(yǎng)的菌體③按功能·鑒別培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入特定底物,觀測細菌生長後的分解底物,從而鑒別細菌。·選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì),使克制壹類細菌生長,而有助于另壹類細菌生長,從而將後者選擇出來。麥康凱培養(yǎng)基內(nèi)含膽鹽,能克制革蘭陽性菌的生長,大腸桿菌及沙門菌可生長?!捬跖囵B(yǎng)基:用于厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別。將壹般培養(yǎng)基放在無氧環(huán)境中培養(yǎng),或者使培養(yǎng)基自身成為無氧環(huán)境。庖肉培養(yǎng)基是常用的厭氧培養(yǎng)基之壹,其中不含飽和脂肪酸和谷胱甘肽的肉渣起到了還原劑的作用。8、分離培養(yǎng):將標本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基表面,因劃線的分散作用,許多原混雜的細菌在固體培養(yǎng)基表面散開。9、液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象·渾濁:大多數(shù)細菌·沉淀:鏈狀生長的細菌·菌膜:專性需氧菌,如結(jié)核桿菌、枯草桿菌10、生化反應(yīng):細菌對糖、蛋白質(zhì)的分解能力不壹樣,代謝產(chǎn)物各異,運用生物化學措施鑒別不壹樣細菌稱為細菌的生化反應(yīng)。重要有氧化酶試驗、VP試驗、甲基紅試驗、吲哚試驗等。11、生物被膜:壹般生活在自然界中的細菌并非以游離的單個菌體形式存在,而是以群落形式出現(xiàn),這種群落的重要體現(xiàn)形式稱生物被膜。是壹種被自身產(chǎn)生的多聚基質(zhì)包裹著菌細胞的構(gòu)造群體,是細菌具有保護性的壹種生長模式,其構(gòu)造中具有水和營養(yǎng)物質(zhì)的通道。12、生物膜的特性①生長速度緩慢且不均壹。細菌生物膜是在不利環(huán)境下形成的,環(huán)境變化對其影響較小。在膜表面的細菌,由于營養(yǎng)等原因,分裂較快,體積較大,內(nèi)層相反。②細菌毒力下降毒力強的細菌形成被膜菌後,壹般不會使動物致死。③耐藥性提高④逃逸宿主的免疫監(jiān)視多糖膜能減少免疫細胞和免疫分子的趨化,使被膜菌與宿主長期共存。13、密度感應(yīng)(QS):多數(shù)細菌能合成并釋放壹種稱為自身誘導(dǎo)素(信息素)的信號分子,胞外信號分子濃度隨細菌密度的增長而增長,到達壹種臨界濃度時,信息素會啟動菌體中有關(guān)基因的體現(xiàn),調(diào)控細菌的生物行為,以適應(yīng)環(huán)境的變化,這壹現(xiàn)象稱群體感應(yīng)調(diào)整。14、微生物種群間的關(guān)系:互生、共生、拮抗、寄生。15、正常菌群與其宿主之間形成共生關(guān)系,詳細體現(xiàn)為營養(yǎng)、免疫、生物拮抗三方面。16、菌膜?。貉乐苎?、中耳炎、壞死性筋膜炎、心內(nèi)膜炎。17、無特定病原體動物(SPF):指不存在某些特定的具有病原性或潛在病原性微生物的動物。18、感受態(tài):細胞生活周期中壹種特殊的生理狀態(tài)。第三章消毒與滅菌1、滅菌:指殺滅物體中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的措施。2、消毒:指殺滅物體中病原微生物的措施。只規(guī)定到達消除傳染性的目的,對非病原微生物及其芽胞、孢子并不規(guī)定所有殺死。3、防腐:指制止或克制微生物生長繁殖的措施。4、無菌:指沒有活微生物的狀態(tài)。5、無菌操作:防止微生物進入機體或局部環(huán)境的操作技術(shù)。6、物理消毒滅菌法:熱力滅菌法、輻射滅菌法、超聲波滅菌法、濾過滅菌法。7、熱力滅菌法:干熱滅菌、濕熱滅菌。①兩者比較同壹溫度下,濕熱滅菌效力比干熱滅菌大。原因:·濕熱中細菌菌體蛋白較易凝固;·濕熱的穿透力比干熱大;·濕熱的蒸汽有潛熱存在。②干熱滅菌法·火焰滅菌法·熱空氣滅菌法干熱滅菌器合用于高溫下不損壞、不變質(zhì)的物品,如玻璃器皿、瓷器等。滅菌溫度需160℃維持2h。③濕熱滅菌法⑴煮沸滅菌⑵巴氏消毒法:以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌或特定微生物,而不致嚴重損害其營養(yǎng)成分和風味?!さ蜏鼐S持巴氏消毒法63~65℃/30min·高溫瞬時巴氏消毒法71~72℃/15s·超高溫巴氏消毒法132℃/1~2s⑶流通蒸汽滅菌法:是壹種常壓蒸汽消毒法,細菌繁殖體15~30min可殺滅,但芽胞不全被殺滅。⑷間歇滅菌法/丁達爾滅菌法(反復(fù)多次流通蒸汽):用于不耐高溫的培養(yǎng)基,如雞蛋培養(yǎng)基、血清培養(yǎng)基、糖培養(yǎng)基的滅菌。⑸高壓蒸汽滅菌8、輻射滅菌法①非電離輻射·可見光線·曰光·紫外線波長200~300nm部分有殺菌作用,試驗室常用的紫外線殺菌燈紫外線波長為253.7nm,用于:微生物試驗室、無菌室、手術(shù)室的空氣消毒;不能用高溫或化學藥物消毒物品的表面消毒;誘變育種?!ぜt外線:紅外線烤箱·微波②電離輻射:α射線、β射線、γ射線、χ射線用途:忌熱物品的滅毒消菌、食品保藏和育種等方面。9、超聲波滅菌法目前超聲波重要用于裂解細胞,提取細胞組分。10、濾過除菌法:通過機械、物理阻留作用將液體或空氣中的細菌等微生物除去的措施,不能除去病毒、支原體以及細菌L型等微生物。11、消毒劑:用于殺滅病原微生物的化學藥物。①分類·使菌體蛋白質(zhì)變性或凝固,如酚類(高濃度)、醇類、重金屬鹽類(高濃度)、酸堿類;·損傷細菌細胞膜,如酚類(低濃度)、表面活性劑;·干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝,如某些氧化劑、重金屬鹽類(低濃度);·變化核酸的功能,如染料。②影響消毒劑作用的原因·消毒劑的性質(zhì)、濃度和作用時間;·微生物的污染程度;·微生物的種類和數(shù)量;·環(huán)境中有機物;·溫度、濕度、酸堿度;·化學拮抗物。12、防腐劑:用于克制微生物生長繁殖的化學藥物。13、抗生素:某些微生物代謝過程中產(chǎn)生的壹類能克制或殺死另某些微生物的物質(zhì)。14、細菌素:某種細菌產(chǎn)生的具有殺菌作用的蛋白質(zhì),只作用于同種不壹樣菌株的細菌及親緣關(guān)系相近的細菌。食品防腐領(lǐng)域的應(yīng)用:細菌素Nisin已被60多種國家同意作為食品添加劑用于食品防腐。15、試驗室生物安全的意義:防止病原微生物及其他有害生物或物質(zhì)傳入試驗室;防止病原微生物等傳出試驗室;試驗人員的自身安全防護。第四章細菌的感染與致病機理1、感染:病原微生物在宿主體內(nèi)持續(xù)存在或增殖。2、發(fā)?。翰≡⑸锔腥踞幔瑢λ拗鲗?dǎo)致明顯的損害。3、病原菌:導(dǎo)致機體發(fā)病的細菌。4、致病性:病原菌在壹定條件下,能在宿主體內(nèi)引起感染的能力稱致病性。致病性是細菌種的特性之壹。5、毒力:病原菌致病力的強弱程度,同壹細菌的不壹樣菌株,其毒力不壹樣,毒力是菌株的特性。6、基因水平柯赫法則·在致病菌株中檢出某些基因或其產(chǎn)物,而無毒力菌株中無;·有毒力菌株的某個基因被損壞,則菌株的毒力減弱或消除,或?qū)⒋嘶蚩寺〉綗o毒菌株內(nèi),後者成為有毒力菌株;·將細菌接種動物時,這個基因應(yīng)在感染的過程中體現(xiàn);·在接種動物檢測到這個基因產(chǎn)物的抗體,或產(chǎn)生免疫保護。7、半數(shù)致死量(LD50):能使接種的試驗動物在感染後壹定期限內(nèi)死亡二分之壹所需的微生物量或毒素量。8、半數(shù)感染量(ID50):某些病原微生物只能感染試驗動物、雞胚或細胞,但不引致死亡,用ID50表達其毒力。9、干擾或逃避宿主的防御機制①抗吞噬作用·不與吞噬細胞接觸(破壞,鏈球菌溶血素)·克制吞噬細胞的攝取(莢膜、菌毛)·在吞噬細胞內(nèi)生存(沙門菌、李氏桿菌)·殺死或損傷吞噬細胞②抗體液免疫機制·抗原偽裝或抗原變異,金黃色葡萄球菌、SPA·分泌蛋白酶降解免疫球蛋白,嗜血桿菌分泌IgA蛋白酶·逃避補體,克制抗體產(chǎn)生,LPS、OMP、莢膜、S層③內(nèi)化作用:某些細菌粘附于細胞表面後,能進入吞噬細胞或非吞噬細胞內(nèi)部的過程。意義:宿主細胞為進入其內(nèi)的細菌提供了壹種增殖的小環(huán)境和呵護所,使細菌逃避宿主免疫機制。也可隨吞噬細胞的游走擴散至其他部位,導(dǎo)致廣泛病變。10、外毒素①概念:某些病原菌在生長繁殖過程中所產(chǎn)生的對宿主細胞有毒性的可溶性蛋白質(zhì),大多數(shù)外毒素在菌體內(nèi)合成後必須分泌于胞外。②特性·毒性作用極強·有高度的特異性·不耐熱,多數(shù)在60~80℃經(jīng)10~80min即失去毒性·對宿主不致熱·抗原性強,刺激機體產(chǎn)生中和抗體③構(gòu)成·A亞單位:毒素的活性中心,決定毒素的毒性效應(yīng)·B亞單位:結(jié)合單位,協(xié)助A亞單位??蓡为毰c細胞膜受體結(jié)合,從而阻斷完整毒素結(jié)合細胞。刺激機體產(chǎn)生對應(yīng)抗體,可作為良好的亞單位疫苗。11、抗毒素:外毒素刺激機體產(chǎn)生特異性抗體,可用于緊急治療和防止。12、類毒素:外毒素在0.4%甲醛溶液作用下,通過壹段時間可以脫毒,但仍保留原有抗原性,稱為類毒素。13、內(nèi)毒素①概念:指革蘭陰性菌外膜中的脂多糖(LPS)成分,細菌在死亡後破裂或用人工措施裂解菌體後才釋放。②特性·毒性弱,很少致死·致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐·耐熱·抗原性較弱,免疫應(yīng)答局限性以中和毒性③構(gòu)成·多糖側(cè)鏈·關(guān)鍵多糖·類脂A:重要的毒性成分(保守)④檢測·鱟試驗:鱟變形細胞溶解物14、內(nèi)毒素與外毒素的比較種類內(nèi)毒素外毒素來源革蘭陰性菌革蘭陽性菌及部分陰性菌存在部位細胞壁成分、細菌裂解後釋放活菌分泌或細菌溶解後散出化學成分脂多糖蛋白質(zhì)穩(wěn)定性好,160℃/2~4h破壞差,60~80℃/30min破壞毒性作用較弱,多種內(nèi)毒素作用大體相似,起休克,發(fā)熱強,對機體組織器官有選擇性,引起特殊臨床體現(xiàn)抗原性弱,能刺激機體形成抗體,但無中和作用,甲醛處理後不能形成類毒素強,能刺激機體形成抗毒素,經(jīng)甲醛脫毒後能形成類毒素15、機會致病菌:正常菌群與宿主之間,正常菌群之間,通過營養(yǎng)競爭、代謝產(chǎn)物的互相制約等原因,維持著良好的生存平衡。在壹定條件下這種平衡關(guān)系被打破,本來不致病的正常菌群中的細菌可成為致病菌,此類細菌稱機會性致病菌。16、細菌毒力減弱措施·長時間在體外持續(xù)培養(yǎng)傳代·在高于最適生長溫度條件下培養(yǎng)·在具有特殊化學物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)·在特殊氣體條件下培養(yǎng)·通過非易感動物·通過基因工程的措施17、細菌毒力增強的措施:回歸易感動物。第五章細菌的遺傳變異1、細菌的遺傳:指親代細菌與子代細菌的相似性,它使細菌的性狀保持相對穩(wěn)定,是多種細菌存在的根據(jù)。2、細菌的變異:指親代與子代及子代細菌之間的不相似性,細菌得以發(fā)展進化。3、細菌常見的變異現(xiàn)象·形態(tài)和構(gòu)造變異·菌落形態(tài)變異·抗原變異·抗性變異·代謝變異·毒力變異4、質(zhì)粒:細菌染色體外的遺傳物質(zhì),編碼細菌多種重要的生物學形狀。·嚴緊型復(fù)制·按轉(zhuǎn)移的特性,可分為接合性質(zhì)粒、非接合性質(zhì)?!ぷ詺⑿再|(zhì)?!ご┧筝d體:指具有兩個親緣關(guān)系不壹樣的復(fù)制子,能在兩種不壹樣的生物中復(fù)制。5、轉(zhuǎn)位因子:是細菌基因組中能變化自身位置的壹類獨特的DNA片段。6、毒力島(PAI):指病原菌的某個或某些毒力基因群,分子構(gòu)造與功能有別于細菌染色體,但位于細菌染色體之內(nèi)。7、基因突變:指生物細胞遺傳物質(zhì)DNA分子構(gòu)造忽然發(fā)生了穩(wěn)定的可遺傳變化。是生物進化的壹種重要原因。8、基因轉(zhuǎn)移:外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌進入受體菌細胞內(nèi)的過程。重組:轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在壹起。基因轉(zhuǎn)移和重組的重要方式:轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、原生質(zhì)融合等。9、轉(zhuǎn)化:供體菌游離的DNA片段直接進入受體菌,使受體菌獲得新的性狀。10、轉(zhuǎn)導(dǎo)①概念:以溫和噬菌體為媒介,把供體菌的DNA小片段攜帶到受體菌中,通過互換與整合,使受體菌獲得供體菌的部分遺傳性狀。②類型:普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(任何)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(特定,λ)·普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo):被裝入的DNA片段可以是供體菌染色體上的任何部分。(完全轉(zhuǎn)導(dǎo),流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo))·局限性轉(zhuǎn)導(dǎo):為噬菌體所介導(dǎo)的供體菌染色體上個別特定基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)。(特異性轉(zhuǎn)導(dǎo))12、接合:是兩個完整的細菌細胞通過性菌毛直接接觸,由供體細菌將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移給受體細菌的過程。第六章細菌的分類與命名1、古細菌無肽聚糖。2、微生物分類的最基本單元是種,另壹方面是屬。3、菌株:是不壹樣來源的某壹細菌的純培養(yǎng)物。4、細菌的命名根據(jù)“國際細菌命名法規(guī)”的規(guī)定,學名用拉丁文,遵照“雙名法”。每種細菌的拉丁文名稱由屬名和種名兩部分構(gòu)成,屬名第壹種字母大寫,其他均小寫。5、細菌分類采用老式的雙歧檢索條目分類法。6、目前公認的細菌分類體系是《伯吉系統(tǒng)細菌學手冊》。7、《國際系統(tǒng)與演化微生物學雜質(zhì)》是細菌分類命名的世界公認的權(quán)威期刊。8、國際公認的菌種保藏權(quán)威機構(gòu)是美國經(jīng)典培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)。第二拾壹章病毒的構(gòu)造1、病毒子:壹種形態(tài)和構(gòu)造上完整的病毒顆粒。2、病毒的特點⑴形體微小,能通過細菌濾器,在電子顯微鏡下才能觀測;⑵沒有細胞構(gòu)造;⑶每種病毒只含壹種核酸,DNA或RNA;⑷既無產(chǎn)能酶系,也無蛋白質(zhì)和核酸合成酶系,只能運用宿主活細胞內(nèi)現(xiàn)成代謝系統(tǒng)合成自身的核酸和蛋白質(zhì)成分;⑸對抗生素不敏感,對干擾素敏感;⑹以復(fù)制方式繁殖。3、痘病毒最大,圓環(huán)病毒最小。4、動物病毒中螺旋對稱的病毒均屬有囊膜的單股RNA病毒。5、除痘病毒外,所有脊椎動物DNA病毒均為20面體。6、病毒的化學構(gòu)成:核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、碳水化合物、其他構(gòu)成。7、核酸的特點⑴病毒只含壹種核酸。構(gòu)成病毒體的芯髓;⑵核酸類型多樣化;⑶分子量小,基因組構(gòu)造簡樸,所含基因組數(shù)目少;⑷病毒基因組核酸復(fù)制多樣化;⑸病毒核酸更輕易受宿主細胞的影響而發(fā)生基因突變和重組;⑹有些病毒清除囊膜和衣殼,裸露的DNA或RNA也能感染細胞,這種核酸稱傳染性核酸。8、感染性核酸具有條件·病毒核酸能作為mRNA或能運用宿主細胞的RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄病毒的mRNA;·病毒核酸不分節(jié)段。9、將mRNA的堿基序列作為原則,與其相似的稱正股,與其互補的稱負股。某些病毒(布尼病毒、砂粒病毒)部分為正負鏈,稱為雙向。10、核酸可分單股或雙股、線狀或環(huán)狀、分節(jié)段或不分節(jié)段。11、擬病毒又稱類類病毒,衛(wèi)星RNAs。指壹類包裹在真病毒粒子中的缺陷類病毒。擬病毒極其微小,僅由裸露的RNA(300~400個核苷酸)或DNA構(gòu)成。是壹種環(huán)狀單鏈RNA。被侵染的植物病毒被稱為輔助病毒,擬病毒必須通過輔助病毒才能復(fù)制。12、蛋白質(zhì)①構(gòu)造蛋白:指構(gòu)成壹種形態(tài)成熟的、有感染性的病毒顆粒所必需的蛋白質(zhì)。是構(gòu)成病毒衣殼的所有成分和囊膜的重要成分。②非構(gòu)造蛋白:指由病毒基因組編碼,在病毒復(fù)制或基因體現(xiàn)調(diào)控過程中具有壹定功能,但不結(jié)合于病毒顆粒中的蛋白質(zhì)。③蛋白質(zhì)功能·保護病毒核酸,使其免受核酸酶或其他理化原因的破壞;·參與病毒感染細胞的過程,決定病毒對宿主細胞的親嗜性;·抗原性:誘導(dǎo)特異性抗體、致敏淋巴細胞。13、脂類、糖類·重要存在于囊膜中,脂溶劑可清除囊膜,使病毒喪失活性;·來自宿主細胞,與囊膜病毒的吸附和穿入宿主細胞的作用有關(guān)。14、病毒的命名要由公認的國際專家小組負責不用拉丁文雙名法,而用英文或英語化的拉丁文,只用單名,目、科、屬分別用拉丁文後綴“-virales”、“-viridae”及“-virus”。15、類病毒:沒有蛋白質(zhì)外殼的病毒,由環(huán)狀RNA分子構(gòu)成,在植物中發(fā)現(xiàn)。16、擬病毒:指壹類包裹在真病毒粒子中的缺陷類病毒。17、感染性核酸:是由病毒質(zhì)粒或感染細胞中分離出的具感染性的核酸。18、朊病毒:只含傳染性蛋白,無核酸。第二拾二章病毒的復(fù)制1、復(fù)制:病毒在活細胞內(nèi),以其基由于模板,在酶的作用下,分別合成病毒基因及蛋白質(zhì),再組裝成完整的病毒顆粒。2、復(fù)制周期:從病毒進入宿主細胞開始,通過基因組復(fù)制和病毒蛋白合成,到釋放子代病毒的全過程。3、病毒的復(fù)制周期:吸附和穿入、脫殼、生物合成、組裝和釋放。4、隱蔽期:病毒侵入易感細胞後的短時間內(nèi)完全消失,細胞內(nèi)也找不到。該感染的病毒顆粒,直到新的病毒子出現(xiàn)為止,這壹段時間稱為病毒復(fù)制的隱蔽期。生物合成階段,病毒處在隱蔽期。5、感染比:在壹種系統(tǒng)中,感染病毒細胞數(shù)與細胞總數(shù)之比。6、病毒的壹步生長曲線:在幾乎100%感染比體系中,壹種病毒幾乎同步感染所有細胞,并進行病毒復(fù)制。這種同步復(fù)制繪制出的病毒生長曲線,稱病毒的壹步生長曲線。7、某些病毒能凝集紅細胞,稱為病毒的血凝作用。8、病毒的特異抗體可克制其血凝作用,稱為血凝克制作用。9、血吸附是壹種特殊形式的血凝作用,是將紅細胞吸附于病毒感染的宿主細胞表面。10、根據(jù)病毒基因組怎樣轉(zhuǎn)錄稱mRNA、怎樣指令合成蛋白質(zhì),病毒的生物合成過程可基本歸于6大類:雙股DNA病毒、單股DNA病毒、單正股RNA病毒、單負股RNA病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、雙股RNA病毒。11、病毒的mRNA是多順反子。第二拾三章病毒的遺傳與進化1、突變:指基因組中核酸堿基次序上的化學變化,可以是壹種核苷酸的變化,也可以是成百上仟個核苷酸的缺失或易位。2、答復(fù)突變(第二位點突變或基因內(nèi)校正):突變體通過第二次突變又完全或部分地恢復(fù)為本來的基因型和體現(xiàn)型。由于它的體現(xiàn)型效應(yīng)被基因組第2位點的突變克制,因此又稱克制突變。3、缺損型干擾(DI)突變株:是壹種缺失突變的產(chǎn)物。自身不能復(fù)制,在親本野生株作為輔助病毒存在時才能復(fù)制,但又干擾親本病毒的復(fù)制,導(dǎo)致後者數(shù)量減少。4、DI突變株特點⑴含正常的衣殼蛋白質(zhì)⑵只含正常基因組的壹部分⑶只在正常同源病毒同步存在時繁殖,這時同源病毒成為輔助病毒⑷特異性干擾同源病毒的繁殖,經(jīng)持續(xù)傳代後,DI顆粒增多5、表型變異·毒力變異·抗原性變異(抗體逃逸變異株)·空斑變異(空斑變異株)·條件致死性突變株6、DNA病毒復(fù)制具校正功能,RNA復(fù)制缺乏校正機制,病毒RNA復(fù)制的錯誤率遠高于病毒DNA。7、分子內(nèi)重組:將兩個有親緣關(guān)系但生物學性狀不壹樣的毒株感染同壹宿主細胞,可發(fā)生核酸水平上的互換,產(chǎn)生兼有兩親本特性的子代,稱重組。8、重配:對于分節(jié)段的RNA病毒,通過互換RNA節(jié)段而進行的重組稱重配。9、賠償作用:指在感染的細胞中,病毒蛋白之間由于互相作用的成果,拯救了壹種或兩種病毒或增長了病毒的產(chǎn)量。10、表型混合①概念:兩種病毒混合感染後,壹種病毒的基因組偶爾裝入另壹病毒的衣殼內(nèi),或裝入兩個病毒成分構(gòu)成的衣殼內(nèi),發(fā)生表型混合。②特點·兩株病毒混合感染時,裝配過程發(fā)生錯誤形成;·重要體現(xiàn)為耐藥性,抗原性等變化,基因并未變化,變化的生物學形狀不能遺傳。11、基因型混合:指兩種病毒的核酸偶爾混合裝在同壹病毒衣殼內(nèi),或兩種病毒的核衣殼偶爾包在壹種囊膜內(nèi),但它們的核酸都未重組合,因此沒有遺傳性。第二拾四章病毒與細胞間的互相作用1、病毒是嚴格的細胞內(nèi)寄生微生物,培養(yǎng)病毒必須用細胞。根據(jù)病毒的不壹樣選用敏感動物(動物接種)、雞胚(雞胚接種)或離體細胞進行分離培養(yǎng)(細胞培養(yǎng))。2、動物接種的優(yōu)缺陷①長處:不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備、技術(shù)簡樸、易成功②缺陷:個體差異大、價格昂貴、數(shù)量有限、需要隔離畜舍3、雞胚接種的優(yōu)缺陷①長處:技術(shù)簡樸、來源充沛、價格低廉、數(shù)量可大、不需特殊設(shè)備②缺陷:諸多病毒不能適應(yīng)(重要是哺乳動物的病毒)4、細胞培養(yǎng):指運用機械、酶或化學措施使動物組織或傳代細胞分散成單個乃至2~4個細胞團懸液進行培養(yǎng)。①長處⑴每個細胞生理特性基本壹致,對病毒易感性相等⑵無個體差異,精確性和反復(fù)性好⑶可嚴格執(zhí)行無菌操作⑷細胞培養(yǎng)自身就能顯示病毒的生長特性⑸應(yīng)用空斑技術(shù)可進行病毒的克隆化②細胞的類型根據(jù)細胞來源、染色體特性及傳代次數(shù),可分為三種類型:⑴原代細胞:動物組織經(jīng)胰蛋白酶消化處理,使細胞分散而得到的細胞。⑵二倍體細胞株:將長成單層的原代細胞消化分散成單個細胞,繼續(xù)培養(yǎng)傳代,其染色體數(shù)與原代細胞同樣,保持其二倍染色體數(shù)目的細胞,稱為二倍體細胞。⑶傳代細胞系:能在體外持續(xù)增殖傳代的細胞,大多數(shù)由癌細胞或二倍體細胞突變而成。5、細胞培養(yǎng)的措施⑴靜置培養(yǎng):試驗室常用,細胞懸液裝瓶,5%CO2溫箱靜置培養(yǎng),細胞沉降并貼附在玻面上生長分裂,最終長成單層。⑵旋轉(zhuǎn)培養(yǎng):大規(guī)模生產(chǎn)疫苗,細胞在玻瓶內(nèi)生長時,玻瓶不停緩慢旋轉(zhuǎn),細胞貼附于玻瓶四面,長成單層。⑶懸浮培養(yǎng)⑷微載體培養(yǎng)6、細胞病變效應(yīng)(CPE):由病毒感染導(dǎo)致的細胞損傷,在光學顯微鏡下觀測。⑴細胞圓縮,如痘病毒和呼腸孤病毒等;⑵細胞聚合,如腺病毒;⑶細胞融合形成合胞體,如副粘病毒和皰疹病毒;⑷有些病毒能形成包涵體。7、合胞體:病毒感染後導(dǎo)致感染細胞及相鄰細胞細胞膜融合的產(chǎn)物,體現(xiàn)為若干細胞的相鄰
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