醫(yī)藥工業(yè)潔凈室的測定

醫(yī)藥工業(yè)潔凈室的測定驗證通常是由安裝確認、運行確認、性能確認組成的，其中儀器儀表的校正應歸屬于安裝確認，性能確認是作最后的判斷。在生產(chǎn)或工藝驗證上，性能確認是檢驗該工藝過程的最終目的。在生產(chǎn)環(huán)境驗證上、性能確認是對HVAC系統(tǒng)是否能達到規(guī)定的潔凈度做出判斷；我們將性能確認稱作為“潔凈度測定”。醫(yī)藥工業(yè)潔凈室的潔凈度包括懸浮粒子和活微生物兩個方面，因此潔凈度的測定主要進行懸浮粒子和活微生物的測定。1、懸浮粒子測定懸浮粒子的測定可參見國家醫(yī)藥管理局頒發(fā)的行業(yè)標準《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)懸浮粒子的測試方法》（以下簡稱為《粒子測試方法》，其基本內(nèi)容如下：（1）懸浮粒子的測定方法主要有顯微鏡法及自動粒子計數(shù)法。①顯微鏡法：顯微鏡法是用抽氣泵抽取潔凈室內(nèi)的空氣，把在測定用的濾膜表面上捕集到的粒徑中大于5μm的粒子，按懸浮狀態(tài)連續(xù)計數(shù)的方法測定。用顯微鏡法測定的直徑為粒子的最大直徑。②自動粒子計數(shù)法：自動粒子計數(shù)法是把潔凈室中粒徑大于05μm的粒子，按懸浮狀態(tài)連續(xù)計數(shù)的方法測定。在自動粒子計數(shù)法中規(guī)定懸浮粒子的粒徑等于標準散射量的球的相當直徑。自動粒子計數(shù)器為了經(jīng)常保持其特性，需定期用聚苯已烯膠乳進行脈沖校正及流量校正。（2）懸浮粒子潔凈度監(jiān)測的采樣點數(shù)目及其布置應根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及工藝關(guān)鍵操作區(qū)設置。一般高效過濾器裝在末端（天花板）的HVAC系統(tǒng)及在層流罩下只需在工作區(qū)（離地07～1m處）設置測點即可；而高效過濾器裝在空調(diào)器內(nèi)的及亞高效過濾器（效率為≥95%）的HVAC系統(tǒng)除在工作區(qū)設置測點外，還需在每個送風口處（離開風口約03m）設置測點。（3）懸浮粒子潔凈度測定的最小采樣量和最少采樣點數(shù)目參見《粒子測試方法》的規(guī)定，國外某些公司做法見表2.（4）懸浮粒子潔凈度級別的結(jié)果評定參見《粒子測試方法》的兩個條件。2、活微生物測定活微生物測定的目的是確定浮游的生物微粒濃度和生物微粒沉降密度，以此來判斷潔凈室是否達到規(guī)定的潔凈度。因此活微生物的測定有浮游菌和沉降菌兩種測定方法。細菌通常看不見，將它們采集或沉降到培養(yǎng)基中培養(yǎng)。細菌培養(yǎng)時，由一個或幾個細菌繁殖而成的一細菌團稱為CFU（菌落形成單元數(shù)），亦稱菌落數(shù)。浮游菌用計數(shù)CFU/L或CFU/m3表示，沉降菌用沉降濃度CFU/皿、min表示。我國《GMP》采用了與歐州共同體GMP一樣的浮游菌標準（CFU/m3）。由于我國用于檢測浮游菌濃度的儀器還不普遍,許多企業(yè)還是采用沉隆菌的測試方法,所以這兩種方法并存,浮游菌與沉降菌的關(guān)系存在著以下近似公式：Ng=NVSFt式中：Ng-在f面積上的細菌沉降數(shù)（CFU）；N-空氣中的浮游菌濃度（CFU/cm2）；f-沉降面積（cm2）；VS-含菌粒子沉降速度（cm/s）；T-沉降時間（S）。（1）浮游菌的測定浮游菌的測定可以參見國家醫(yī)藥管理局即將頒發(fā)的待業(yè)標準《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)中浮游菌的測試方法》（以下簡稱《浮游菌的測試方法》），基本內(nèi)容如下：A、浮游菌的測定是通過收集懸浮在空氣中的生物性微粒子，通過專門的培養(yǎng)基，在適應的生長條件下，讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境中單位體積空氣中菌落數(shù)的多少。B、浮游菌測定需有專門的采樣器、真空抽氣泵等設備，浮游菌采樣器常用撞擊法中的狹縫式采樣器。C、采用的浮游菌采樣器必須要有流量計和定時器，并嚴格按儀器說明書的要求定期進行校驗和操作。D、浮游菌測定的采樣點及數(shù)目與懸浮粒子測定相同，即在同懸浮粒子相同的測定點采樣。E、浮游菌潔凈度測定的最小采樣量和最少采樣點數(shù)目參見《浮游菌測試方法》的規(guī)定。國外某些做法見表3。F、浮游菌潔凈度的結(jié)果評定參見《浮游菌測試方法》的規(guī)定。（2）沉降菌的測定沉降菌是用暴露法收集降落在培養(yǎng)皿中的活生物性粒子，然后加以培養(yǎng)，繁殖后加以計數(shù)得到的，其沉降濃度表示CFU/皿、min。此外用擦試方法收集培養(yǎng)的建筑物表面（墻面、地板、天花板等）以及操作人員衣著上的細菌亦屬于沉降菌測試的內(nèi)容。沉降菌的測定可參見國家醫(yī)藥管理局即將頒發(fā)的行業(yè)標準《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)中沉降菌的測試方法》（以下簡稱《沉降菌測試方法》），其基本內(nèi)容如下：A、沉降菌測定的設備主要是φ90150玻璃培養(yǎng)皿和各種培養(yǎng)基（常用普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基）。B、沉降菌測定其培養(yǎng)皿應布置在有代表性的地方和氣流擾動最小的地方，其最少采樣點數(shù)目見表4。C、采樣方法及培養(yǎng)：將培養(yǎng)皿按要求放置后，打開平皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露30分鐘后，將平皿蓋蓋上，然后在30～35℃的條件下（可用恒溫培養(yǎng)箱）培養(yǎng)48小時后計數(shù)。D、結(jié)果計算；ΣmiM=————N式中：M-平均菌落數(shù)(CFU)；Mi-1，2，3，……n號平皿菌落數(shù)；n-平皿總數(shù)。表4最少采樣點數(shù)目面積潔凈度級別m210010000100000<102~323104222082240164210040103200802064001604013100040010032200080020063注：表中的面積，對于單向流潔凈室，是指送風面積；對于亂流潔凈實是指房間的面積。在滿足最少測點數(shù)的同時，還要滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，如表2-8所示。不論面積大小，作為一個被測對象，都應該滿足這個要求.表2-8最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級別所需90mm培養(yǎng)皿數(shù)（以沉降05h計）100141000021000002F、結(jié)果評定，見表2-9。表2-9沉降菌合格界限潔凈度級別沉降菌落數(shù)(CFU/皿)10010000100000平均〈1平均〈3平均〈10（一）表2-1國內(nèi)及國外環(huán)境驗證時某些做法對最小采樣點數(shù)目的規(guī)定（二）懸浮粒子浮游菌驗證測定時的采樣量最少采樣量表凈化級別懸浮粒子浮游菌工作區(qū)送風口工作區(qū)送風口每個采樣點lft3采樣量的數(shù)目每點采樣量m3100102210015221001522（三）、懸浮粒子和浮游菌結(jié)果判斷表2-2國內(nèi)與國外環(huán)境驗證時某些做法的評價標準潔凈度級別《懸浮粒子測試方法》國外某些驗證時做法《浮游菌測試方法》懸浮粒子數(shù)p/m3/（p/ft3）總懸浮粒子數(shù)平均值p/m3/（p/ft3）總浮游菌濃度均值CFU/3平浮游菌濃度平均值CFU/3>05μm>05μm>05μmCFU/3驗證日常監(jiān)測100<3500(<100)0875(25)<112100<35000(<10000)<2000(<57)87500(2500)2220100<3500000100000<20000(<570)875000(25000)20201000(1)此表為動態(tài)時的評定標準.(2)靜態(tài)測試標準