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作業(yè)56核移植及細(xì)胞融合技術(shù)A組基礎(chǔ)達(dá)標(biāo)1.下列有關(guān)“多莉”克隆過程的敘述,正確的是()A.核移植操作前需對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)限制性培養(yǎng)B.可用紫外線破壞未受精卵細(xì)胞的細(xì)胞核,從而獲得去核卵細(xì)胞C.重組卵細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需定期用胰酶處理成細(xì)胞懸液進(jìn)行傳代培養(yǎng)D.需使用免疫抑制劑處理代孕的母羊,以避免對(duì)植入胚胎的免疫排斥反應(yīng)2.為提高克隆羊的成功率,不宜采用的措施是()A.核供體采用分裂能力強(qiáng)的細(xì)胞B.培養(yǎng)體細(xì)胞同步到G1期,再進(jìn)行核移植C.對(duì)卵細(xì)胞供體母羊注射激素進(jìn)行超數(shù)排卵D.將培養(yǎng)到囊胚期的胚胎移植到代孕母體的輸卵管中3.(2024浙江稽陽(yáng)聯(lián)誼學(xué)校聯(lián)考)下列有關(guān)生物技術(shù)與工程中所用技術(shù)操作與原理的敘述,錯(cuò)誤的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——應(yīng)用酶的專一性原理可對(duì)所需材料用胰蛋白酶進(jìn)行處理B.制備單克隆抗體——應(yīng)用細(xì)胞膜流動(dòng)性原理對(duì)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合C.PCR技術(shù)的退火(復(fù)性)——應(yīng)用堿基互補(bǔ)配對(duì)原理使引物結(jié)合在DNA模板鏈的5'端D.細(xì)胞核移植——細(xì)胞質(zhì)可調(diào)控細(xì)胞核基因表達(dá),選用卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)使重組細(xì)胞表現(xiàn)出全能性4.(2023浙江金麗衢十二校第二次聯(lián)考)β-hcg(人絨毛膜促性腺激素)是由滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白。利用細(xì)胞工程方法以β-hcg為抗原制備單克隆抗體。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.制備抗β-hcg單克隆抗體可以應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷B.聚乙二醇可以誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合C.小鼠注射β-hcg后,產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體D.制備抗β-hcg單克隆抗體,可以將雜交瘤細(xì)胞注射到動(dòng)物體內(nèi)5.(2024浙江湖州教學(xué)質(zhì)量檢測(cè))某研究小組欲制備單克隆抗體A,進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):抗原A刺激小鼠后分離B淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選獲得雜交瘤細(xì)胞后進(jìn)行體外培養(yǎng),獲得單克隆抗體A。下列敘述正確的是()A.從免疫小鼠的肝臟中分離得到B淋巴細(xì)胞B.可用仙臺(tái)病毒或70%乙醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合C.雜交瘤細(xì)胞的克隆培養(yǎng)不能在動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行D.篩選得到的雜交瘤細(xì)胞在傳代培養(yǎng)中可能發(fā)生染色體丟失現(xiàn)象6.(2023浙江溫州三模)下圖為克隆羊“多莉”的培育過程示意圖,甲~丁表示不同的綿羊,a、b表示操作過程。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.甲需超數(shù)排卵處理,乙的乳腺細(xì)胞核移植前需進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)限制性培養(yǎng)B.過程a采用電脈沖融合技術(shù),既能誘導(dǎo)細(xì)胞融合又能激活胚C.過程b也可以將8細(xì)胞胚在飼養(yǎng)層上培養(yǎng)到囊胚再移植到丙子宮內(nèi)D.丁克隆成功證明了細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用7.細(xì)胞融合技術(shù)有著廣泛應(yīng)用,下圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過程。據(jù)圖分析,下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.甲形成過程中,a和b需要通過細(xì)胞膜接觸完成識(shí)別和結(jié)合B.乙形成過程中培養(yǎng)液滲透壓略大于細(xì)胞質(zhì),有助于植物細(xì)胞酶解法去壁C.借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置D.若a和b分別為基因型AaBB、aaBb植株的花粉細(xì)胞,則去壁后兩兩融合可得到4種基因型細(xì)胞B組素能培優(yōu)8.(2023浙江名校新高考研究聯(lián)盟第三次聯(lián)考)從經(jīng)多次同種抗原免疫的小鼠脾臟中分離出脾細(xì)胞,稀釋后與骨髓瘤細(xì)胞等比例混合,加入聚乙二醇促融,再將分離出的細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng),可篩選出雜交瘤細(xì)胞。下列相關(guān)敘述正確的是()A.選擇不能在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞用于細(xì)胞融合B.將分離出的脾細(xì)胞用涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)后再與瘤細(xì)胞混合C.促融后可加入大量無菌水以終止融合,再用離心法分離細(xì)胞D.篩選出的雜交瘤細(xì)胞均能產(chǎn)生并分泌與上述抗原相對(duì)應(yīng)的抗體9.如圖表示抗胃腺癌單克隆抗體(單抗)制備的基本過程,其中①②為操作過程。一般細(xì)胞的DNA合成有兩條途徑,而只具有一條途徑的骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT),在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,無法生長(zhǎng)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.獲取的B淋巴細(xì)胞具有多樣性致使篩選得到的雜交瘤細(xì)胞種類多樣B.兩兩融合的細(xì)胞具有DNA合成的兩條途徑,故都能在HAT培養(yǎng)液中生長(zhǎng)C.上述單克隆抗體制備技術(shù)的最大優(yōu)點(diǎn)取決于過程②的操作D.部分雜交瘤細(xì)胞不能合成抗體,可能原因是細(xì)胞融合導(dǎo)致相關(guān)的染色體丟失10.下圖為單克隆抗體的制備過程(圖中的抗原表位指抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán))。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.小鼠經(jīng)抗原多次免疫后取其脾臟獲取B淋巴細(xì)胞,1號(hào)試管內(nèi)可能含有多種B淋巴細(xì)胞B.骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制,因此細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶處理C.3號(hào)試管的雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量增殖又能合成和分泌特異性抗體D.雜交瘤細(xì)胞經(jīng)篩選并克隆化培養(yǎng)獲得的4種抗體都能與抗原特異性結(jié)合11.(2023浙江金華十校模擬)下圖為雜交瘤細(xì)胞的制備及初步篩選示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-),在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,無法生長(zhǎng)。免疫B細(xì)胞(HGPRT+)能在HAT篩選培養(yǎng)液中正常生長(zhǎng)。下列敘述正確的是()A.從HAT培養(yǎng)液中獲得的抗體即為單克隆抗體B.仙臺(tái)病毒處理可使細(xì)胞膜發(fā)生一定程度的損傷,進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞融合C.在HAT培養(yǎng)液中能長(zhǎng)期存活的細(xì)胞具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)D.多個(gè)B細(xì)胞融合形成的多聚細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中死亡的原因是不能合成DNA12.為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程?;卮鹣铝袉栴}。(1)分析上圖,研制抗病毒A的單克隆抗體涉及的生物技術(shù)主要有。(2)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是。
(3)以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟:取小鼠甲脾臟剪碎,用酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞,加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液。
(4)誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞形成融合細(xì)胞常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、電激以及等。
(5)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,需要進(jìn)行篩選。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是。
(6)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可采用的方法。
13.格列寧是一種治療癌癥的靶向藥物,此類靶向藥物可稱為“生物導(dǎo)彈”。利用單克隆抗體來診斷和治療癌癥可能會(huì)成為攻克癌癥的重要手段,以下為單克隆抗體制備流程圖:(1)若該圖中的單克隆抗體與藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”治療腸癌,則圖中特定抗原通常是。靶向藥物比普通的化療藥物療效高、毒副作用小是因?yàn)?/p>
。
(2)圖中誘導(dǎo)細(xì)胞融合時(shí)需要采用滅活病毒誘導(dǎo)法、聚乙二醇融合法或物理法等方法誘導(dǎo),雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是
。
(3)用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出融合的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行和,經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。
(4)近年來,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)丁酸鈉對(duì)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體有一定的影響,某科研小組進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),結(jié)果如表所示:丁酸鈉對(duì)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體的影響丁酸鈉的濃度時(shí)間/h489614401∶3201∶6401∶12000.251∶3201∶12801∶25000.51∶1601∶25001∶25000.751∶3201∶3201∶640注:表中比值表示抗體效價(jià),比值越高表明越有利于抗體的產(chǎn)生。該實(shí)驗(yàn)過程中培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)瓶放在了含5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH,該實(shí)驗(yàn)的自變量為。
14.惡性腫瘤中一些癌細(xì)胞會(huì)從原發(fā)性腫瘤上脫落,形成循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTCs)。它們可單獨(dú)移動(dòng)或組成小團(tuán)抵達(dá)其他器官(如骨髓、肝臟、肺和大腦等),形成轉(zhuǎn)移瘤。傳統(tǒng)影像學(xué)診斷方式在發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移瘤形成時(shí)往往已延誤最佳治療時(shí)機(jī),目前可通過液體活檢來檢查血液中的CTCs及早診斷是否存在癌癥轉(zhuǎn)移(方法如下):(1)單克隆抗體的制備,研究人員比較了上皮組織細(xì)胞來源的CTCs與正常白細(xì)胞表面蛋白質(zhì)的一些差異(如表)。細(xì)胞表面抗原標(biāo)志物表達(dá)差異細(xì)胞類型CD45EpCAM白細(xì)胞+++-CTCs-+++單克隆抗體制備流程示意圖a.首先用CD45蛋白免疫小鼠,然后經(jīng)過圖中的①②③④等步驟,獲得大量單克隆抗體A,再用免疫小鼠,經(jīng)過相同步驟獲得單克隆抗體B。步驟①常常用與植物原生質(zhì)體融合不同的方法如,從而使細(xì)胞相互凝聚。
b.步驟②通常使用選擇培養(yǎng)基,主要目的是篩選出。
c.步驟③主要需要經(jīng)過的兩項(xiàng)操作,并經(jīng)多次篩選,最終獲得。
d.步驟④是大規(guī)模培養(yǎng),主要有兩種方式:。
(2)免疫磁珠分離:取待測(cè)人員少量血液(一般7.5mL即可)于采集管內(nèi),將與相連的磁珠加入采集管,外加磁場(chǎng)使磁珠定向移動(dòng)到指定區(qū)域并取出,排除非腫瘤細(xì)胞干擾(負(fù)性篩選);再將與相連的磁珠加入采集管,外加磁場(chǎng)使磁珠定向移動(dòng)到指定區(qū)域取出,收集CTCs(陽(yáng)性富集)。
(3)對(duì)收集到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)并做出診斷,若超出正常范圍,即可診斷發(fā)生癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移。
答案:1.B核移植前應(yīng)對(duì)核供體進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)限制性培養(yǎng),A項(xiàng)錯(cuò)誤;利用紫外線照射可以破壞細(xì)胞核,B項(xiàng)正確;重組卵細(xì)胞不需要進(jìn)行傳代,C項(xiàng)錯(cuò)誤;胚胎移植進(jìn)入子宮,不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),D項(xiàng)錯(cuò)誤。2.D核供體采用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,此時(shí)能保證細(xì)胞是二倍體核型,細(xì)胞的分裂能力強(qiáng),有利于提高克隆羊的成功率,A項(xiàng)不符合題意;體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞周期同步化培養(yǎng),將細(xì)胞培養(yǎng)至G1期(此時(shí)還沒進(jìn)行DNA復(fù)制),然后進(jìn)行核移植,有利于提高克隆羊的成功率,B項(xiàng)不符合題意;對(duì)卵細(xì)胞供體母羊注射促性腺激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理,可獲得更多的卵細(xì)胞,有利于提高克隆羊的成功率,C項(xiàng)不符合題意;將培養(yǎng)到囊胚期的胚胎移植到代孕母體的子宮中,D項(xiàng)符合題意。3.C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用胰蛋白酶處理細(xì)胞間的膠原蛋白使之分散開,應(yīng)用了酶的專一性,A項(xiàng)正確;制備單克隆抗體過程中需要進(jìn)行B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合,應(yīng)用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性,B項(xiàng)正確;PCR技術(shù)的退火(復(fù)性)過程,應(yīng)用堿基互補(bǔ)配對(duì)原理使引物結(jié)合在DNA模板鏈的3'端,子鏈的延伸方向?yàn)?'→3',C項(xiàng)錯(cuò)誤;細(xì)胞核移植一般選用去核卵細(xì)胞提供細(xì)胞質(zhì),因?yàn)槁鸭?xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可調(diào)控重組細(xì)胞的核基因表達(dá),D項(xiàng)正確。4.C制備抗β-hcg單克隆抗體可以應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷,廣泛運(yùn)用于早孕的診斷,快速方便,A項(xiàng)正確;誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有物理法、化學(xué)法(常用聚乙二醇)和滅活的病毒誘導(dǎo),B項(xiàng)正確;單克隆抗體是指由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體,C項(xiàng)錯(cuò)誤;制備抗β-hcg單克隆抗體,可以將雜交瘤細(xì)胞注射到動(dòng)物體內(nèi),屬于體內(nèi)培養(yǎng),成本低,D項(xiàng)正確。5.D制備單克隆抗體所用的B淋巴細(xì)胞是從免疫小鼠的脾臟中分離得到的,A項(xiàng)錯(cuò)誤;雜交瘤細(xì)胞的獲得可利用聚乙二醇或滅活的病毒誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合實(shí)現(xiàn),B項(xiàng)錯(cuò)誤;雜交瘤細(xì)胞的克隆培養(yǎng)可在體內(nèi)或體外進(jìn)行,即將最終獲得的雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注入小鼠腹腔中均可以獲得單克隆抗體,C項(xiàng)錯(cuò)誤;由于雜交瘤細(xì)胞是不同細(xì)胞融合獲得的,因此,篩選得到的雜交瘤細(xì)胞在傳代培養(yǎng)中可能會(huì)發(fā)生染色體丟失現(xiàn)象,進(jìn)而可能會(huì)影響單克隆抗體的生產(chǎn),D項(xiàng)正確。6.C甲提供去核卵母細(xì)胞,所以需要進(jìn)行超數(shù)排卵處理,核移植前需要對(duì)核供體細(xì)胞進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)限制性培養(yǎng),以利于細(xì)胞核的一系列變化和細(xì)胞融合后基因表達(dá)的分子開關(guān)的啟動(dòng),A項(xiàng)正確;過程a為核移植的過程,可以采用電脈沖融合技術(shù),既能誘導(dǎo)細(xì)胞融合又能激活胚,B項(xiàng)正確;8細(xì)胞胚在飼養(yǎng)層上培養(yǎng),保持不分化狀態(tài),C項(xiàng)錯(cuò)誤;丁克隆成功證明了細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用,D項(xiàng)正確。7.D甲是有性雜交產(chǎn)生的后代,其形成過程中a和b需要通過細(xì)胞膜接觸完成識(shí)別和結(jié)合,A項(xiàng)正確;乙是植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的后代,該過程培養(yǎng)液滲透壓略大于細(xì)胞質(zhì),有助于植物細(xì)胞酶解法去壁,防止原生質(zhì)體在低滲溶液中吸水漲破,B項(xiàng)正確;將單克隆抗體與藥物結(jié)合,借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置,C項(xiàng)正確;若a和b分別為基因型AaBB、aaBb植株的花粉細(xì)胞,AaBB能產(chǎn)生AB、aB兩種花粉,aaBb能產(chǎn)生aB、ab兩種花粉,去壁兩兩融合可以得到AABB、aaBB、aabb、AaBB、AaBb、aaBb共6種基因型的細(xì)胞,D項(xiàng)錯(cuò)誤。8.A在HAT培養(yǎng)基上未融合的細(xì)胞(包括骨髓瘤細(xì)胞和B細(xì)胞)和同種融合的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有融合后的雜交瘤細(xì)胞能存活,故選擇不能在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞用于后續(xù)的細(xì)胞融合,A項(xiàng)正確;稀釋涂布平板法用于微生物計(jì)數(shù),不能用于動(dòng)物細(xì)胞的計(jì)數(shù),因?yàn)椴荒苄纬删?B項(xiàng)錯(cuò)誤;動(dòng)物細(xì)胞無細(xì)胞壁,若加入無菌水會(huì)使其吸水破裂,導(dǎo)致制備過程失敗,C項(xiàng)錯(cuò)誤;篩選出的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖,也能產(chǎn)生特異性抗體,但不一定都能產(chǎn)生并分泌與上述抗原相對(duì)應(yīng)的抗體,還需要對(duì)篩選出的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行鑒定,D項(xiàng)錯(cuò)誤。9.BB淋巴細(xì)胞具有多樣性,導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞種類多樣,A項(xiàng)正確;兩兩融合的細(xì)胞包括B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞雖然能無限增殖,但缺乏次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,B淋巴細(xì)胞雖然有次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但不能無限增殖,所以在HAT篩選培養(yǎng)液中,兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞都無法生長(zhǎng),只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng),且骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞也只有DNA合成的一條途徑,B項(xiàng)錯(cuò)誤;過程②的操作是篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,因此上述單克隆抗體制備技術(shù)的最大優(yōu)點(diǎn)取決于過程②的操作,C項(xiàng)正確;雜交瘤細(xì)胞染色體丟失可能導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生變異,從而導(dǎo)致部分雜交瘤細(xì)胞不能合成抗體,D項(xiàng)正確。10.B由于抗原上有多種抗原表位,不同的抗原表位可以結(jié)合不同的B淋巴細(xì)胞,因此1號(hào)試管內(nèi)可能含有多種B淋巴細(xì)胞,A項(xiàng)正確;普通的體細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象,而骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖,不會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象,B項(xiàng)錯(cuò)誤;3號(hào)試管的雜交瘤細(xì)胞是特定的抗原表位刺激產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的,既能迅速大量增殖又能合成和分泌特異性抗體,C項(xiàng)正確;雜交瘤細(xì)胞經(jīng)篩選并克隆化培養(yǎng)獲得的4種抗體,在抗原上都存在相應(yīng)的抗原表位,因此4種抗體都能與抗原特異性結(jié)合,D項(xiàng)正確。11.B在HAT培養(yǎng)液中篩選出來的是雜交瘤細(xì)胞,可能有多種類型,因此后續(xù)還需要對(duì)這些雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行專一抗體檢測(cè),進(jìn)而篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,可見從HAT培養(yǎng)液中獲得的抗體不是單克隆抗體,A項(xiàng)錯(cuò)誤;仙臺(tái)病毒處理可使細(xì)胞膜發(fā)生一定程度的損傷,進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞融合,B項(xiàng)正確;在HAT培養(yǎng)液中能長(zhǎng)期存活的細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞,這些細(xì)胞可能產(chǎn)生多種類型的抗體,因而不具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn),C項(xiàng)錯(cuò)誤;多個(gè)B細(xì)胞融合形成的多聚細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中死亡的原因是不能無限增殖,D項(xiàng)錯(cuò)誤。12.答案(1)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(2)誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞(3)胰蛋白(4)滅活的病毒(5)抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性(或抗原與抗體的特異性結(jié)合)(6)將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖(或?qū)㈦s交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng))解析(1)分析圖示可知,制備單克隆抗體涉及的生物技術(shù)主要有動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。(2)實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A,讓小鼠甲產(chǎn)生特異性免疫,誘導(dǎo)小鼠甲體內(nèi)產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞。(3)以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟:取小鼠甲脾臟剪碎,要想分散動(dòng)物細(xì)胞,根據(jù)酶的專一性,需要用胰蛋白酶處理,破壞細(xì)胞之間的聯(lián)系,使其分散成單個(gè)細(xì)胞。(4)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、電激以及滅活的病毒等。(5)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,需要進(jìn)行篩選。圖中篩選2含多次篩選,該過程用到抗原-抗體雜交,篩選原理是抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性。(6)要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可采用小鼠體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)液中培養(yǎng)兩種方法,即將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖或?qū)㈦s交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)。13.答案(1)腸癌細(xì)胞膜表面的蛋白質(zhì)既不損傷正常細(xì)胞,又減少了用藥劑量(2)既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體(3)克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)(4)丁酸鈉的
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