TCSBM 0050.2-2024 創(chuàng)面修復(fù)材料有效性評(píng)價(jià) 第2部分：水不溶性材料體外浸提液評(píng)價(jià)方法

T/CSBMT/CSBM0050.2—2024創(chuàng)面修復(fù)材料有效性評(píng)價(jià)EffectivenessevaluationofwoundrepairmaterialsPart2:Invitroextractsevaluationmethodforwaterinsolublematerials中國(guó)生物材料學(xué)會(huì)發(fā)布I 3 5本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起本文件起草單位：杭州英健生物科技有限公司、中國(guó)食品藥品檢定1本文件規(guī)定了水不溶性創(chuàng)面修復(fù)材料體外評(píng)價(jià)的浸提液制備、細(xì)胞增殖試驗(yàn)和細(xì)胞遷2規(guī)范性引用文件GB/T16886.12—2023醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第12部分：樣品制備與參照T/CSBM0050.1創(chuàng)面修復(fù)材料有效性評(píng)價(jià)第1部分：水溶性材料體外評(píng)價(jià)T/CSBM0050.1界定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文b)浸提時(shí)間：24h±2h或48h±2h或72h±2h；5細(xì)胞增殖試驗(yàn)5.2.1器具25.2.2試劑和耗材5.2.3細(xì)胞系5.2.3.2對(duì)于用于不同部位的修復(fù)材料選擇合適的細(xì)胞系，如用于皮膚的修復(fù)材料可用皮膚細(xì)胞，用5.3.1試驗(yàn)樣品含10％FBSDMEM低糖培養(yǎng)基，37℃、120r/min搖床5.3.3空白對(duì)照將在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期內(nèi)的細(xì)胞按照1×105個(gè)/mL的細(xì)胞密度加入到96孔板內(nèi)，每孔10細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后棄去舊培養(yǎng)基，按照表1規(guī)定加入對(duì)照組和試驗(yàn)組溶液。于24h、48h和72h分別觀察細(xì)胞增殖情況，棄去孔內(nèi)液體，加入CCK-8溶液，放入培養(yǎng)箱內(nèi)孵育3h。孵育結(jié)束使用酶標(biāo)儀測(cè)量3450nm的吸光度值，按照式（1）計(jì)算細(xì)胞增殖率，評(píng)估試驗(yàn)樣品溶液不同濃度對(duì)細(xì)胞的增殖作用，并CCK-8法1=×100%·································································(1)P1——細(xì)胞增殖率，%;采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法評(píng)價(jià)試驗(yàn)結(jié)果，并對(duì)空白對(duì)照組、試驗(yàn)組和/或陽(yáng)性對(duì)照品組各組結(jié)果進(jìn)行綜合分則認(rèn)為該材料具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的效果，否則材b)若陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照沒有顯著性差異（p＞），6細(xì)胞遷移試驗(yàn)4T/CSBM0050.2k)細(xì)胞T75培養(yǎng)瓶；觀察時(shí)間陽(yáng)性對(duì)照組細(xì)胞系顯微鏡觀察拍攝圖片5究[J].北京生物醫(yī)學(xué)工程,2022,41(ofAlginate-BasedGastric