微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用 專項訓(xùn)練-2025年高考生物一輪復(fù)習(xí)（新高考專用）

專題35微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

考點分布重點難點備考指南

理解掌握微生物各種分離原理和方法。

1.微生物的實驗室培養(yǎng)1.微生物的分離和培養(yǎng)

理解并掌握微生物數(shù)量測定的步驟和注

2.微生物的分離與計數(shù)2.某種微生物數(shù)量的測定

意事項。

3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用

掌握培養(yǎng)基的選擇方法。

考點一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

＜知識梳理：＞

1.培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。

一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。止匕外，還需要滿足微生物生長對pH,氧氣以及特殊

營養(yǎng)物質(zhì)的要求。

培養(yǎng)基按物理狀態(tài)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。按功能可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)

基。

2.無菌技術(shù)的目的是獲得純凈培養(yǎng)物。關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。常用方法有滅菌和消

毒。滅菌桶裝入待滅菌物品不要裝太擠的原因是避免妨礙蒸汽流通而影響滅菌效果。加熱滅

菌鍋時應(yīng)打開排氣閥，目的是排除鍋內(nèi)冷空氣,之后，才能關(guān)上排氣閥。

3.純化培養(yǎng)的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。菌落是由單個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可

見的子細(xì)胞群體。

平板劃線法分離純化大腸桿菌的步驟：

①接種：在裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中接種大腸桿菌，在搖床上“。。下振蕩培養(yǎng)12ho

②劃線分離：用接種坯在接種有大腸桿菌的三角瓶中沾取菌液一次，在固體培養(yǎng)基的平板上

連續(xù)劃線，蓋好培養(yǎng)皿。

③培養(yǎng)觀察：將培養(yǎng)皿倒置，放在紅。恒溫箱中培養(yǎng)12?24h后，可看到劃線的末端出

現(xiàn)不連續(xù)的單個菌落。

4.微生物的接種方法除平板劃線法和稀釋涂布平板法外,還包括斜面接種、穿刺接種等方法。

微生物接種的核心是防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度。

5.(1)平板冷凝后，要將平板倒置，原因是可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染；

避免培養(yǎng)基水分過快揮發(fā)。

(2)在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板不能用

來培養(yǎng)微生物，原因是空氣中的微生物可能在皿蓋和皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，可能會造成

污染。

(3)平板劃線法在做第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，原

因是劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使

細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。

＜考點精講二二

1.(1)制備牛肉膏蛋白豚固體培養(yǎng)基

-W]-I稱量|溶化|-I調(diào)P川一|滅菌|f|倒平板

(2)純化大腸桿菌的方法

①平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋

分散到培養(yǎng)基的表面。

②稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊

脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。

2.稀釋涂布平板法步驟

①系列稀釋操作：該操作常用在將細(xì)胞接種到培養(yǎng)基之前，通過液體稀釋的方法分散細(xì)胞，

隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散。

操作步驟：

9mL9mL9mL9mL9mL9mL

稀釋液稀釋液稀釋液稀釋液稀釋液稀釋液

②涂布平板操作步驟

篷J液(不超用涂布器將菌

涂布器浸在過0.1mL),液均勻地涂布

將沾有少量酒精

盛有酒精的滴加到培在培養(yǎng)基表面。

的涂布器在火焰

燒杯中養(yǎng)基表面涂布時可轉(zhuǎn)動

上引燃，待酒精

培養(yǎng)皿，使菌液

燃盡后，冷卻

分布均勻

3.選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較

項目選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基

制備方法培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品

依據(jù)某些微生物對某些物質(zhì)或環(huán)境條

原理產(chǎn)生特定的顏色或其他變化

件的嗜好或抗性而設(shè)計

用途從眾多微生物中分離出所需的微生物鑒別不同種類的微生物

4.消毒和滅菌的辨析

項目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍

煮沸消毒法日常用品

僅殺死物體表面或

較為溫和巴氏消毒法不耐高溫的液體

內(nèi)部的部分微生物

消毒的物理或用酒精擦拭雙

(不包括芽抱和抱

化學(xué)方法化學(xué)藥劑消毒法手、用氯氣消毒

子)

水源

灼燒滅菌法接種工具

殺死物體內(nèi)外所有玻璃器皿、金屬

強烈的理干熱滅菌法

滅菌的微生物，包括芽抱用具

化因素

和抱子培養(yǎng)基及容器的

高壓蒸汽滅菌法

滅菌

5.兩種純化方法的比較

項目平板劃線法稀釋涂布平板法

分離結(jié)果O

關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線①一系列的梯度稀釋②涂布平板操作

接種用具接種環(huán)涂布器

(1)接種環(huán)的灼燒：①第一次劃線前，(1)在進(jìn)行稀釋操作時,每支試管及其

避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染中的9mL水、移液管均需滅菌；操作

培養(yǎng)基；②再次劃線前，殺死上次劃線時，試管口和移液管應(yīng)在離酒精燈火

注意事項

結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃焰1?2cm處。

線的菌種直接來源于上次劃線的末端；(2)涂布平板時:①涂布器用體積分?jǐn)?shù)

③劃線結(jié)束后，殺死接種環(huán)上殘留的菌為70%的酒精消毒，取出時要讓多余

種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量

(2)接種環(huán)灼燒后，要冷卻后才能接觸酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃；

菌液，以免溫度太高殺死菌種。②不要將過熱的涂布器放在盛放酒精

(3)劃線時用力要大小適當(dāng)，防止用力的燒杯中，以免引燃其中的酒精；③

過大將培養(yǎng)基劃破酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管

頭不要接觸任何其他物體

優(yōu)點可以觀察菌落特征，對混合菌進(jìn)行分離可以計數(shù)，可以觀察菌落特征

操作較麻煩，平板不干燥效果不好，

缺點不能計數(shù)

容易蔓延

都要用到固體培養(yǎng)基；都需進(jìn)行無菌操作；都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落；

共同點

都可用于觀察菌落特征

典例1.高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選出了能高效

生產(chǎn)高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示。請據(jù)圖回答下列問題：

嗜熱菌樣品

酶

活

性

鑒

定

(1)I號培養(yǎng)基從物理狀態(tài)來看，屬于固體培養(yǎng)基，配制時要加入作為

凝固劑，從用途來看屬于選擇培養(yǎng)基，應(yīng)以作為唯一碳源。

(2)配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是()

A.計算、稱量、倒平板、溶化、滅菌

B.計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌

C.計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板

D.計算、稱量、滅菌、溶化、倒平板

(3)溶化時，燒杯中加入瓊脂后要不停地,防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對

培養(yǎng)基滅菌的方法一般為o

(4)過程①是,過程②所使用的接種方法是法。

(5)部分嗜熱菌在I號培養(yǎng)基上生長時可釋放分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍

形成透明圈，挑選相應(yīng)的菌落，接種到II號培養(yǎng)基進(jìn)一步分離純化后，再對菌種進(jìn)行

培養(yǎng)。

【答案】（1）瓊脂淀粉（2）C（3）攪拌高壓蒸汽滅菌（4）稀釋涂布平板（5）

淀粉酶擴大

【解析】（1）固體培養(yǎng)基中通常加入瓊脂作為凝固劑。本實驗的目的是獲得生產(chǎn)高溫淀粉

酶的嗜熱菌，故其選擇培養(yǎng)基中應(yīng)以淀粉作為唯一碳源。（2）配制固體培養(yǎng)基的基本步驟

是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。（3）配制培養(yǎng)基加熱溶化時，要注意加入瓊脂后要

不斷攪拌，防止瓊脂糊底。對培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法。（4）仔細(xì)觀察題圖

可知，過程①是菌液稀釋，過程②是采用涂布平板法接種。（5）能產(chǎn)生淀粉酶的部分細(xì)菌

能分解利用淀粉，其菌落周圍會出現(xiàn)透明圈，取這樣的菌落再分離純化可獲得相應(yīng)菌種，以

后可以對菌種進(jìn)行擴大培養(yǎng)用于生產(chǎn)。

典例2.鯨死亡后會沉入海底，俗稱“鯨落”?！蚌L落”后期會形成一個以厭氧菌和硫細(xì)菌

等為主體的生態(tài)系統(tǒng)。厭氧菌以“鯨落”肌肉中的脂肪為食，同時產(chǎn)生一些硫化氫等硫化物。

硫細(xì)菌將硫化物氧化成硫酸鹽，并以該過程中釋放的能量合成有機物。請回答相關(guān)問題：

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中一般都會含有水、無機鹽、氮源和碳源，培養(yǎng)“鯨落”群落中厭

氧菌的碳源必須是=要培養(yǎng)硫細(xì)菌，培養(yǎng)基中的成分需要特殊配制，主要體現(xiàn)在

，這種培養(yǎng)基可以用來專一性培養(yǎng)硫細(xì)菌，所以稱為培養(yǎng)基。

（2）在分離“鯨落”中的微生物時要制備固體培養(yǎng)基，在倒平板操作后，將平板倒置，這樣

做的目的是

（3）為了研究“鯨落”中含有微生物的情況，需將“鯨落”提取物加水稀釋，然后將稀釋水

樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，這種方法稱為o

下面所示的四種菌落分布情況中，不可能由該方法得到的是________=

（4）若想得到“鯨落”中某目標(biāo)菌種，可用平板劃線法進(jìn)行純化。若下圖甲是接種培養(yǎng)后的

菌落分布圖，對應(yīng)的平板劃線操作示意圖為。圖甲中的③更易獲得單菌落，判斷依

據(jù)是

【答案】(1)含碳有機物(或脂肪)碳源必須是含碳無機物(或碳酸鹽)，同時加入硫化物選

擇

(2)防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染；防止培養(yǎng)基水分蒸發(fā)過快

(3)稀釋涂布平板法D

(4)丙每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，最后一次劃線結(jié)束時更容易獲得單菌落

【解析】(1)厭氧菌以“鯨落”肌肉中的脂肪為食，屬于異養(yǎng)微生物，故培養(yǎng)“鯨落”群落

中厭氧菌的碳源必須是含碳有機物(或脂肪)。硫細(xì)菌將硫化物氧化成硫酸鹽，并以該過程中

釋放的能量合成有機物，即硫細(xì)菌為自養(yǎng)生物，所以要培養(yǎng)硫細(xì)菌，培養(yǎng)基中的成分需要特

殊配制，主要體現(xiàn)在碳源必須是含碳無機物(或碳酸鹽)，同時加入硫化物。這種人為提供有

利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時抑制或阻止其他微生物生長的培

養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。(3)使用涂布器涂布接種微生物的方法為稀釋涂布平板法。稀釋涂布平

板法接種的微生物會在培養(yǎng)基上形成均勻分布的菌落，而平板劃線法接種的微生物在劃線的

起始部分菌落連在一起生長，由圖可知，A、B、C均形成了均勻分布的單個菌落，屬于稀釋

涂布平板法接種的，而D中菌落是連在一起生長的，是通過平板劃線法接種的。

考點二微生物的篩選和計數(shù)

＜；知識梳理二＞

1.篩選菌株的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時

抑制或阻止其他微生物的生長。

2.微生物計數(shù)可以用活菌計數(shù)法(統(tǒng)計菌落數(shù)目)和顯微鏡直接計數(shù)法

3.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)

(1)分離原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成胭酶,這種物質(zhì)在把尿

素分解成無機物的過程中起到催化作用。

(2)統(tǒng)計菌落數(shù)目：統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目一般用稀釋涂布平板法。

(3)計算：根據(jù)公式“每克樣品中的菌落數(shù)=(C+V)XM[C代表某一稀釋度下平板上生長的

平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL),M代表稀釋倍數(shù)]”進(jìn)行計算

(4)分解尿素的細(xì)菌的鑒別

①方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌。

②原理：分解尿素的細(xì)菌可以產(chǎn)生JR酶，能把尿素分解成CO?和NL

③實驗現(xiàn)象及結(jié)論

培養(yǎng)基變紅：該種細(xì)菌能分解尿素。培養(yǎng)基不變紅：該種細(xì)菌不能分解尿素。

測定土壤中細(xì)菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細(xì)菌數(shù)目，選用的稀釋范圍丕回，分離不

同微生物采用的稀釋度不同。

4.在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌的原因是由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富

含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對較高，從這種土樣中獲得目的微生物的概率要

高于普通環(huán)境。

1.兩種微生物計數(shù)方法的比較

間接計數(shù)法直接計數(shù)法

項目

（稀釋涂布平板法）（顯微鏡計數(shù)法）

當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基

表面生長的一個菌落，來源于樣品利用特定細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計數(shù)

原理稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品

板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中中微生物的數(shù)量

大約含有多少活菌

c每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)：每小格內(nèi)平

公式每克樣品中的菌落數(shù)=7XM

均細(xì)菌數(shù)X400義10“X稀釋倍數(shù)

當(dāng)兩個或多個菌體連在一起時，平

缺點不能區(qū)分細(xì)胞死活

板上觀察到的只是一個菌落

結(jié)果比實際值偏小比實際值偏大

注：細(xì)菌的數(shù)目還可以通過濾膜法來測定。

2.微生物的篩選與鑒別方法

⑴微生物的篩選方法

單菌落利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物

挑取法菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物

選擇培

利用選擇培養(yǎng)基對微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物

養(yǎng)法

鑒定培

利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物

養(yǎng)法

（2）微生物的鑒別方法

根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、

菌落特征鑒別法

隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別

如培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種微生物后，培養(yǎng)基

指示劑鑒別法

變紅說明該種微生物能夠分解尿素

如利用剛果紅染色法，根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌

染色鑒別法

為中心的透明圈來鑒別分解纖維素的微生物

3.微生物的分離與計數(shù)實驗中對照組和重復(fù)組的設(shè)置及作用

（1）兩種對照組的設(shè)置及作用

①判斷培養(yǎng)基中“是否有雜菌污染”，需將未接種的培養(yǎng)基同時進(jìn)行培養(yǎng)。

②判斷選擇培養(yǎng)基“是否具有篩選作用”，需設(shè)置牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進(jìn)行接種后培養(yǎng)，觀

察兩種培養(yǎng)基上菌落數(shù)目，進(jìn)行對比得出結(jié)論。

⑵重復(fù)組的設(shè)置及作用：為排除偶然因素對實驗結(jié)果的干擾，在每一稀釋度下宜設(shè)置至少

3個平板作重復(fù)組，選擇菌落數(shù)均在30?300且數(shù)目相差不大的三個平板，用“平均值”代

入計數(shù)公式予以計算菌落數(shù)。

典例1.（2020?吉林長春實驗中學(xué)期末）科學(xué)家從羊等食草動物胃中篩選纖維素分解菌，并

對其降解纖維素的能力進(jìn)行了研究。請回答下列問題：

（1）若科學(xué)家在____________平板上，發(fā)現(xiàn)以某種菌的菌落為中心的透明圈，則表明此種菌

為纖維素分解菌。

（2）在纖維素分解菌的培養(yǎng)過程中應(yīng)保持恒溫箱中的溫度約為（填“4℃”“20℃”

或“35℃”）?？茖W(xué)家采用稀釋涂布平板法分離、純化纖維素分解菌。在實驗前，需要使用

法對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌；在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培

養(yǎng)了一段時間，目的是o

（3）在接種的過程中，需要使用（填“接種環(huán)”或“涂布器”）進(jìn)行接種。科學(xué)家欲

將篩選得到的纖維素分解菌進(jìn)行大量培養(yǎng)，應(yīng)選用（填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基，

并以為唯一碳源，配制此培養(yǎng)基時，（填“能”或“不能”）使用牛肉膏作

為氮源。

【答案】（1）纖維素剛果紅培養(yǎng)基（2）35℃高壓蒸汽滅菌檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合

格（3）涂布器液體纖維素不能

【解析】（1）用纖維素剛果紅培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為

中心的透明圈。（2）4℃、20℃、35℃三個溫度中，35℃最接近纖維素分解菌的生活環(huán)境

一羊胃的溫度，故培養(yǎng)過程中應(yīng)保持恒溫培養(yǎng)箱中的溫度約為35培養(yǎng)基滅菌一般用

高壓蒸汽滅菌法。在接種之前，要隨機選取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間，這樣

做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。（3）科學(xué)家采用稀釋涂布平板法分離、純化纖維

素分解菌，故需要使用涂布器進(jìn)行接種。

典例2.（2020?四川樂山市調(diào)研）尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，經(jīng)微生物分解后能更好地被

植物利用。某生物興趣小組試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計實驗并成功

篩選到能高效分解尿素的細(xì)菌（目的菌）-培養(yǎng)基成分如下表所示。

KH2P。4Na2HP04MgS04?7H20葡萄糖尿素瓊脂

1.4g2.1g0.2g10g1g15g

將表中物質(zhì)溶解后，用蒸儲水定容到100mLo實驗過程如圖所示:

回答下列問題:

（1）該培養(yǎng)基為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型包括

（答出兩點即可）。能篩選出目的菌的原因是____________________________________________

（2）圖中將細(xì)菌接種到固體培養(yǎng)基上時，采用的方法是o初步篩選出來的菌

種還需要進(jìn)一步的鑒定：在培養(yǎng)基中加入指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若

指示劑變成_______色，則可說明該菌種能夠分解尿素。

（3）在實驗中，下列材料或用具需要滅菌的是（填序號），需要消毒的是（填序

號）。

①培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿

②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管

③實驗操作者的雙手

（4）實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行處理后，才能倒掉。

【答案】（1）碳源、氮源（無機鹽、水）該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源（2）稀釋涂布平板法酚

紅紅（3）①②③（4）滅菌

【解析】（1）該培養(yǎng)基為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型包括碳源、氮源、

無機鹽、水。能篩選出目的菌的原因是該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源。（2）圖中將細(xì)菌接種到

固體培養(yǎng)基上時，采用的方法是稀釋涂布平板法。尿素分解菌可以用酚紅指示劑進(jìn)行鑒定，

原因是其體內(nèi)產(chǎn)生的JR酶能夠催化尿素分解為氨，使酚紅指示劑變成紅色。（3）培養(yǎng)細(xì)菌的

培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿、玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管都需要進(jìn)行滅菌處理；實驗操作者的雙手需

要進(jìn)行消毒。（4）為避免污染環(huán)境，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉。

＜：真題速遞：＞

1.（2023?北京?統(tǒng)考高考真題）高中生物學(xué)實驗中，下列實驗操作能達(dá)成所述目標(biāo)的是（）

A.用高濃度蔗糖溶液處理成熟植物細(xì)胞觀察質(zhì)壁分離

B.向泡菜壇蓋邊沿的水槽中注滿水形成內(nèi)部無菌環(huán)境

C.在目標(biāo)個體集中分布的區(qū)域劃定樣方調(diào)查種群密度

D.對外植體進(jìn)行消毒以杜絕接種過程中的微生物污染

【答案】A

【解析】A、成熟的植物細(xì)胞有中央大液泡，用高濃度蔗糖溶液處理，細(xì)胞會失水，成熟植

物細(xì)胞能發(fā)生質(zhì)壁分離，因此用高濃度蔗糖溶液處理成熟植物細(xì)胞觀察質(zhì)壁分離，A正確；

B、向泡菜壇蓋邊沿的水槽中注滿水形成內(nèi)部無氧環(huán)境，不能創(chuàng)造無菌環(huán)境，B錯誤；

C、在用樣方法調(diào)查種群密度時，應(yīng)該做到隨機取樣，而不是在目標(biāo)個體集中分布的區(qū)域劃

定樣方調(diào)查種群密度，C錯誤；

D、對外植體進(jìn)行消毒可以減少外植體攜帶的微生物，但不能杜絕接種過程中的微生物污染,

D錯誤。

故選Ao

2.（2020?山東，20）野生型大腸桿菌可以在基本培養(yǎng)基上生長，發(fā)生基因突變產(chǎn)生的氨基酸

依賴型菌株需要在基本培養(yǎng)基上補充相應(yīng)氨基酸才能生長。將甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨

酸依賴型菌株N單獨接種在基本培養(yǎng)基上時，均不會產(chǎn)生菌落。某同學(xué)實驗過程中發(fā)現(xiàn)，將

M、N菌株混合培養(yǎng)一段時間，充分稀釋后再涂布到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后出現(xiàn)許多由單個

細(xì)菌形成的菌落，將這些菌落分別接種到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后均有菌落出現(xiàn)。該同學(xué)對這

些菌落出現(xiàn)原因的分析，不合理的是（）

A.操作過程中出現(xiàn)雜菌污染

B.M、N菌株互為對方提供所缺失的氨基酸

C.混合培養(yǎng)過程中，菌株獲得了對方的遺傳物質(zhì)

D.混合培養(yǎng)過程中，菌株中己突變的基因再次發(fā)生突變

【答案】B

【解析】據(jù)題意可知，甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨酸依賴型菌株N單獨培養(yǎng)時均不會在基

本培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落，兩者混合培養(yǎng)一段時間后，再接種在基本培養(yǎng)基中卻出現(xiàn)菌落，除了

操作過程中出現(xiàn)雜菌污染，雜菌在基本培養(yǎng)基上生長形成菌落的原因以外，還可能的原因是

菌株獲得了對方的遺傳物質(zhì)，或菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變，使突變菌株能產(chǎn)生所需

的氨基酸，而變成了非依賴型菌株，從而能在基本培養(yǎng)基上生長形成菌落，A、C、D項正確；

M、N菌株混合培養(yǎng)一段時間，稀釋涂布到基本培養(yǎng)基上后，培養(yǎng)出現(xiàn)的菌落是由單個細(xì)菌

形成的，菌落中不可能有M、N菌株同時存在而互為對方提供所缺失的氨基酸，故B項錯誤。

3.（2020?浙江7月選考）下列關(guān)于微生物培養(yǎng)及利用的敘述，錯誤的是（）

A.利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物

B.配制培養(yǎng)基時應(yīng)根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pH

C.酵母菌不能直接利用糯米淀粉發(fā)酵得到糯米酒

D.適宜濃度的酒精可使醋酸菌活化

【答案】A

【解析】以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，讓能利用尿素的微生物生長，其他

微生物不能生長，但不能迅速殺死其他微生物，A項錯誤；不同微生物生長的適宜pH不同,

如培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的PH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或微堿性，

B項正確；酵母菌釀酒時直接利用的物質(zhì)是葡萄糖，因此酵母菌不能直接利用糯米淀粉發(fā)酵

得到糯米酒，C項正確；醋酸發(fā)酵時，適宜濃度的酒精可使醋酸菌活化，較高濃度的酒精會

抑制醋酸菌的活化，D項正確。

4.（2023?山東?高考真題）平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是（）

A.不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)

B.平板涂布時涂布器使用前必須進(jìn)行消毒

C.接種后未長出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄

D.利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成JR酶的微生物

【答案】D

【解析】A、不含氮源的平板可用于固氮菌的培養(yǎng)，A錯誤；

B、平板涂布時涂布器使用前必須浸在酒精中，然后在火焰上灼燒滅菌，這種操作屬于滅菌,

不屬于消毒，B錯誤；

C、使用后的培養(yǎng)基即使未長出菌落也要在丟棄前進(jìn)行滅菌處理，不能直接丟棄，以免污染

環(huán)境，C錯誤；

D、麻酶可以催化尿素分解，在以尿素為唯一氮源的平板上，能合成版酶的微生物可以分解

尿素獲得氮源而進(jìn)行生長繁殖，但是不能合成版酶的微生物因缺乏氮源而無法生長，因此以

尿素為唯一氮源的平板能分離出合成JR酶的微生物，D正確。

故選Do

5.（2020?全國I,37）某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污

染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的

細(xì)菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S,乙的組分為無

機鹽、水、S和Y。

回答下列問題:

⑴實驗時，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)

基中的Y物質(zhì)是o甲、乙培養(yǎng)基均屬于培養(yǎng)基。

（2）實驗中初步估測搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2Xl（fj/mL,若要在每個平板上涂布100uL

稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液

稀釋倍。

（3）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反

而下降，其原因可能是（答出］點即

可）。

（4）若要測定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請寫出主要實驗步驟：

（5）上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長提供4類

營養(yǎng)物質(zhì)，即_____________________________