浙江省溫州市龍灣中學2025屆高考臨考沖刺生物試卷含解析

浙江省溫州市龍灣中學2025屆高考臨考沖刺生物試卷注意事項：1．答卷前，考生務必將自己的姓名、準考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應題目的答案標號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標號?；卮鸱沁x擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．在細胞的生命歷程中，會出現(xiàn)分裂、分化等現(xiàn)象。下列敘述錯誤的是（）A．細胞的有絲分裂對生物性狀的遺傳有貢獻B．細胞分化是細胞內(nèi)基因選擇性表達的結(jié)果C．某細胞可進行ATP的合成，說明該細胞已經(jīng)發(fā)生分化D．通過組織培養(yǎng)可將植物葉肉細胞培育成新的植株2．利用基因工程技術生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑，用于降解某種農(nóng)藥的殘留，基本流程如圖。下列敘述正確的是（）A．過程①的反應體系中需要加入逆轉(zhuǎn)錄酶和核糖核苷酸B．過程②需使用限制酶和DNA聚合酶，是基因工程的核心步驟C．過程③需要使用NaCl溶液制備感受態(tài)的大腸桿菌細胞D．過程④可利用DNA分子雜交技術鑒定CarE基因是否成功導入受體細胞3．新型冠狀病毒入侵到機體后，吞噬細胞與T細胞結(jié)合引起T細胞釋放白細胞介素-1。白細胞介素-1能刺激T細胞釋放白細胞介素-2。白細胞介素-2能刺激T細胞釋放更多的白細胞介素-2，也能促進效應T細胞的生成。下列相關敘述錯誤的是（）A．吞噬細胞與T細胞結(jié)合時，將病毒已暴露的抗原傳遞給T細胞B．白細胞介素-2刺激更多白細胞介素-2釋放的過程屬于正反饋調(diào)節(jié)C．上述過程屬于細胞免疫，機體清除該病毒不需要體液免疫的參與D．T細胞增殖分化形成的效應T細胞能識別并裂解感染病毒的細胞4．一個家庭中，父親正常，母親患血友病，婚后生了一個性染色體為XXY的正常兒子，產(chǎn)生這種變異最可能的親本和時間分別是A．父親、減數(shù)第二次分裂后期 B．母親、減數(shù)第二次分裂后期C．父親、減數(shù)第一次分裂后期 D．母親、減數(shù)第一次分裂后期5．如圖是植物激素生長素（IAA）和赤霉素（GA）對擬南芥根和莖生長的影響。據(jù)圖作出的分析，正確的是A．相對根而言，莖對IAA和GA更敏感B．IAA濃度為b時，根不生長C．IAA濃度大于c時，莖的生長受抑制D．僅IAA表現(xiàn)出兩重性，GA無兩重性6．尺蛾的體色（黑色和淺色）由一對等位基因控制。20世紀50年代以后，英國開始實行煤煙控制計劃，大氣環(huán)境污染得到了治理。下圖是1960年-1990年間地衣、黑化蛾及SO2的量變情況，據(jù)圖分析正確的是（）A．樹干上地衣數(shù)量的增加是地衣主動適應環(huán)境的結(jié)果B．黑化蛾種群內(nèi)基因頻率的改變在世代間具有連續(xù)性C．大氣中SO2含量的減少直接導致了黑化蛾比例的下降D．環(huán)境改變使控制蛾體色的基因頻率發(fā)生不定向的改變7．下列有關真核細胞結(jié)構與功能的敘述，存在可能的是（）A．沒有線粒體的細胞進行有氧呼吸B．沒有葉綠體的細胞進行光合作用C．沒有形成紡錘體的細胞完成有絲分裂D．沒有同源染色體的細胞進行有絲分裂8．（10分）2019年12月1日是第32個“世界艾滋病日”，我國宣傳活動主題是“社區(qū)動員同防艾，健康中國我行動”（英文主題為“Communitiesmakethedifference”）。下列相關敘述正確的是（）A．HIV病毒是能夠引起機體產(chǎn)生特異性免疫反應的物質(zhì)，因此屬于抗原B．HIV病毒破壞人體的免疫系統(tǒng)，因此艾滋病患者體內(nèi)檢測不到抗體C．HIV病毒首次侵入人體后，只發(fā)生特異性免疫，而不發(fā)生非特異性免疫D．當HIV感染后，人體的細胞免疫和體液免疫功能均下降二、非選擇題9．（10分）如圖是單克隆抗體制備過程示意圖。請回答下列有關問題。（1）動物細胞融合是依據(jù)____________原理將兩個或多個動物細胞融合形成一個細胞的過程。（2）單克隆抗體制備需要利用動物細胞融合與動物細胞培養(yǎng)技術。在體外培養(yǎng)動物細胞時，培養(yǎng)液中除了要加入促生長因子、無機鹽、微量元素、糖、氨基酸等必需的營養(yǎng)成分外，往往還需要特別加入____________等一些天然成分，同時在含____________混合氣體的無菌、恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。（3）圖中①操作的目的是____________。②過程常在化學誘導劑____________的誘導下完成，假設僅考慮細胞的兩兩融合，則可形成____________種類型的融合細胞。③過程中至少涉及兩次篩選：第一次是利用____________進行初步篩選，第二次是利用____________的方法，最終篩選出既能大量增殖，又能產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細胞。10．（14分）當病原體侵入人體后，能激活免疫細胞釋放炎癥細胞因子，引起炎癥反應。發(fā)生炎癥反應后，人體也可以通過穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)機制，緩解炎癥反應，部分機理如下圖。請回答：(1)炎癥細胞因子使神經(jīng)細胞興奮，興奮時神經(jīng)細胞膜內(nèi)變?yōu)開___電位，這是由于____造成的。(2)迷走神經(jīng)纖維B與脾神經(jīng)之間通過____(結(jié)構）聯(lián)系，在這一結(jié)構中完成的信號轉(zhuǎn)換過程是____。(3)在腎上腺皮質(zhì)激素的分級調(diào)節(jié)過程中，物質(zhì)a為____臨床用于抗炎癥治療的可的松是一種腎上腺皮質(zhì)激素類藥物，大量且長期使用，可能會導致____(器官)功能減退。(4)研究表明，通過植入生物電裝置刺激迷走神經(jīng)，可明顯緩解炎癥反應的癥狀。嘗試解釋這種治療的機理:____。11．（14分）酵母菌的蛋白質(zhì)可作為飼料蛋白的來源，有些酵母菌能以工業(yè)廢甲醇作為碳源，研究人員擬從土壤樣品中分離出可利用工業(yè)廢甲醇的酵母菌，這樣既能減少污染又可變廢為寶。下圖為主要操作流程示意圖?；卮鹣铝袉栴}：（1）配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的____，及時對培養(yǎng)基進行分裝，并進行高壓蒸汽滅菌：在加熱排除高壓鍋內(nèi)原有的____后，將高壓鍋密閉，繼續(xù)加熱，通常在____的條件下，維持15-30min，可達到良好的滅菌效果。（2）取步驟②中梯度稀釋后的適量液體加入無菌培養(yǎng)皿，然后將高壓蒸汽滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至____（25℃/50℃/80℃）左右時倒入培養(yǎng)皿混勻（步驟⑧），冷凝后將培養(yǎng)皿倒置，在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間。（3）挑取平板中長出的單菌落，按步驟④所示進行劃線純化，下列敘述合理的是____。a．為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b．挑取菌落時，應挑取多個菌落，分別測定酵母細胞中甲醇的含量c．劃線時不能劃破培養(yǎng)基表面，以確保能正常形成菌落d．第二區(qū)以后的劃線起始端要與上一區(qū)的劃線的末端相連接，最后一區(qū)的劃線末端不能與第一區(qū)的劃線相連（4）步驟⑤的培養(yǎng)中，應加入___作為碳源，并加入適量的氮源、無機鹽和水等成分。為監(jiān)測發(fā)酵罐中酵母菌活細胞的密度，取2mL發(fā)酵液稀釋1000倍后，加入等體積臺盼藍染液染色，用如圖所示的計數(shù)室規(guī)格為25x16型的血細胞計數(shù)板計數(shù)，要達到每毫升4x109個活酵母菌細胞的預期密度，理論上，圖中標號①～⑤五個中格里的呈____色的酵母菌細胞總數(shù)應不少于____個。12．瘦素是一種由脂肪組織合成并分泌的蛋白質(zhì)類激素，進入血液循環(huán)后參與糖、脂肪及能量代謝的調(diào)節(jié)，促使機體減少攝食，增加能量釋放，進而使體重減輕。研究發(fā)現(xiàn)高脂飲食引發(fā)的肥胖與小鼠體內(nèi)瘦素有關，科研人員對此展開了研究。（1）瘦素通過體液傳送的方式運輸至下丘腦，并與下丘腦神經(jīng)細胞膜上的________________結(jié)合產(chǎn)生信號，在________________形成飽腹感，從而抑制食欲。（2）蛋白酶P是下丘腦中影響瘦素信號作用的一種關鍵蛋白?？蒲腥藛T將野生型小鼠分為兩組，一組飼喂高脂飲食，一組飼喂正常飲食。一段時間后，測定下丘腦神經(jīng)組織中蛋白酶P的含量，結(jié)果如圖1所示。由實驗結(jié)果可知，高脂飲食導致小鼠下丘腦神經(jīng)組織中________________。（3）科研人員根據(jù)上述實驗結(jié)果，提出關于蛋白酶P影響瘦素信號作用的兩種假說機制如圖2所示。為驗證上述假說，請根據(jù)以下提供的實驗材料及部分思路，完善實驗。實驗材料：蛋白酶P基因敲除小鼠和野生型小鼠各若干只，高脂飲食，正常飲食。（要求與說明：飲食用量和次數(shù)按照小鼠正常水平，方式為飼喂；檢測指標為小鼠細胞膜上瘦素受體的含量，利用抗原-抗體雜交技術測定，具體檢測過程不做要求）A．實驗思路：①________________，等量的蛋白酶P基因敲除小鼠編號丙組；②________________；③在相同且適宜的條件下，飼喂一段時間；④________________。B．預測實驗結(jié)果：用柱形圖來表示假說二的實驗結(jié)果________________C．分析與討論：為使實驗結(jié)果更加嚴謹，還應進一步測定________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

1、細胞有絲分裂的意義：由于染色體上有遺傳物質(zhì)DNA，因而在細胞的親代和子代之間保持了遺傳性狀的穩(wěn)定性。2、細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達。3、細胞全能性是指已經(jīng)分化的細胞仍具有發(fā)育成完整個體的潛能?！驹斀狻緼、細胞的有絲分裂可以將復制的遺傳物質(zhì)，平均地分配到兩個子細胞中去，對生物性狀的遺傳有貢獻，A正確；B、細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達，B正確；C、所有細胞都能合成ATP，因此某細胞可進行ATP的合成，不能說明該細胞已經(jīng)分化，C錯誤；D、由于植物細胞具有全能性，因此通過組織培養(yǎng)可將植物葉肉細胞培育成新的植株，D正確。故選C。2、D【解析】

分析圖解：圖中過程①表示利用mRNA通過反轉(zhuǎn)錄法合成相應的DNA；過程②表示構建基因表達載體（基因工程核心步驟）；過程③表示將目的基因?qū)胧荏w細胞；過程④表示通過篩選獲得工程菌?！驹斀狻緼、過程①表示通過反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶和脫氧核糖核苷酸，A錯誤；B、過程②需使用限制酶和DNA連接酶構建基因表達載體，是基因工程的核心步驟，B錯誤；C、過程③常用Ca2+處理大腸桿菌使其成為易于吸收DNA的感受態(tài)細胞，C錯誤；D、過程④可利用DNA分子雜交技術鑒定CarE基因是否成功導入受體細胞，D正確。故選D。3、C【解析】

體液免疫過程為：（1）除少數(shù)抗原可以直接刺激B細胞外，大多數(shù)抗原被吞噬細胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細胞將抗原呈遞給T細胞，再由T細胞呈遞給B細胞；（2）B細胞接受抗原刺激后，開始進行一系列的增殖、分化，形成記憶細胞和漿細胞；（3）漿細胞分泌抗體與相應的抗原特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應。細胞免疫過程為：（1）吞噬細胞攝取和處理抗原，并暴露出其抗原決定簇，然后將抗原呈遞給T細胞；（2）T細胞接受抗原刺激后增殖、分化形成記憶細胞和效應T細胞，同時T細胞能合成并分泌淋巴因子，增強免疫功能。（3）效應T細胞發(fā)揮效應?！驹斀狻緼、病毒侵入機體后，被吞噬細胞處理，使內(nèi)部的抗原暴露，被吞噬細胞處理的抗原傳遞給T細胞，A正確；B、T細胞釋放白細胞介素-2，白細胞介素-2能刺激T細胞釋放更多的白細胞介素-2，該過程屬于正反饋調(diào)節(jié)，B正確；C、病毒過寄生生活，當病毒入侵靶細胞后，機體需要通過細胞免疫裂解靶細胞，重新暴露出病毒，病毒和抗體結(jié)合，最終被吞噬細胞吞噬消化，需要體液免疫的參與，C錯誤；D、T細胞受抗原刺激后增殖分化形成的效應T細胞能識別病毒入侵的靶細胞，效應T細胞能與靶細胞特異性的結(jié)合，使得靶細胞裂解死亡而被清除，D正確。故選C?！军c睛】本題以新型冠狀病毒為素材，考查了特異性免疫的相關知識，要求考生能夠掌握體液免疫和細胞免疫的過程，明確細胞免疫發(fā)揮作用的機理。4、C【解析】

XXY形成的原因有兩個，即XX+Y或XY+X，前者是由于母親在減數(shù)第二次分裂后期，姐妹染色單體分開后未移向兩極所致，后者是由于父親在減數(shù)第一次分裂后期，X和Y未分離所致，據(jù)此答題?！驹斀狻垦巡∈前閄染色體隱性遺傳病（用B、b表示），父親正常，母親患血友病，生了一個性染色體為XXY的正常兒子，則這對夫婦的基因型為XBY×XbXb，兒子的基因型為XBX￣Y。根據(jù)親代的基因型可判斷，XB和Y兩條染色體均來自于父方，則X￣來自于母方，為Xb，因此可確定是父親產(chǎn)生了不正常的精子（XBY）所致，C正確。5、D【解析】

生長素、赤霉素均能促進莖段生長，IAA和GA具有協(xié)同作用。IAA的作用具有兩重性，低濃度促進生長，高濃度抑制生長，而根的敏感性大于莖；GA具有促進作用，沒有兩重性?！驹斀狻緼、對IAA而言，根的敏感度更高，A錯誤；B、IAA濃度為b時，對根的作用是既不促進也不抑制，表現(xiàn)為正常生長，B錯誤；C、IAA濃度大于c時，對莖的促進作用減弱，C錯誤；D、從圖中看出GA沒有表現(xiàn)為抑制作用，所以沒有兩重性，僅IAA表現(xiàn)出兩重性，D正確。故選D。【點睛】本題易錯點是區(qū)分生長素的促進和抑制作用，理解兩重性必須要體現(xiàn)為抑制作用。6、B【解析】

分析題圖可知，20世紀50年代后，英國開始實行控制計劃，大氣中二氧化硫的含量下降，二氧化硫降低后，樹干上地衣數(shù)量增加，黑化蛾容易被天敵發(fā)現(xiàn)捕食，因此黑化蛾頻率降低。【詳解】A、環(huán)境條件的改變對地衣進行了選擇，而不是地衣主動適應環(huán)境，A錯誤；B、遺傳物質(zhì)發(fā)生的變化是可以遺傳的，B正確；C、直接導致了黑化蛾比例的下降的是環(huán)境條件變好，污染減少，C錯誤；D、環(huán)境改變使控制蛾體色的基因頻率發(fā)生定向的改變，D錯誤。故選B。7、D【解析】

無絲分裂是真核細胞的分裂方式，分裂的過程中沒有出現(xiàn)紡錘絲和染色體的變化。線粒體是細胞進行有氧呼吸的主要場所，是細胞的“動力車間”。葉綠體是綠色植物進行光合作用的主要場所，是植物細胞的“養(yǎng)料制造車間”?！驹斀狻緼、真核細胞中沒有線粒體的只進行無氧呼吸，如蛔蟲細胞等，A錯誤；B、沒有葉綠體的真核細胞不能進行光合作用，B錯誤；C、沒有紡錘體形成的真核細胞進行的是無絲分裂，C錯誤；D、沒有同源染色體的真核細胞也能進行有絲分裂，如未受精的卵細胞發(fā)育成雄峰，D正確。故選D。8、D【解析】

（1）病原體是指引起傳染病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物。（2）免疫分為特異性免疫和非特異性免疫。（3）艾滋病的傳播途徑主要有：性傳播、靜脈注射吸毒（與他人共用被感染者使用過的、未經(jīng)消毒的注射工具，是一種非常重要的HIV傳播途徑）、母嬰傳播（在懷孕、生產(chǎn)和母乳喂養(yǎng)過程中，感染HIV的母親可能會傳播給胎兒及嬰兒）、血液及血制品傳播（輸入被HIV污染的血液及其血液制品）等。【詳解】A、HIV病毒是能夠引起機體產(chǎn)生特異性免疫反應的生物，屬于病原體，A錯誤；B、感染HIV病毒也能發(fā)生體液免疫，故艾滋病患者體內(nèi)能檢測到抗體，B錯誤；C、HIV病毒首次侵入人體后，即發(fā)生特異性免疫，也發(fā)生非特異性免疫，C錯誤；D、當HIV感染后，T細胞受損，人體的細胞免疫和體液免疫功能均下降，D正確。故選D。二、非選擇題9、細胞膜的流動性（動物）血清、血漿95%空氣和5%CO2刺激機體產(chǎn)生特異性B淋巴細胞聚乙二醇（或PEG）3選擇性培養(yǎng)基專一性抗體檢測【解析】

單克隆抗體制備的過程：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體?！驹斀狻浚?）動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性。（2）動物細胞體外培養(yǎng)的培養(yǎng)液除包含無機鹽、促生長因子、糖、氨基酸等必需的營養(yǎng)成分，還需要加入動物血清、血漿等天然成分；同時在含95%空氣和5%的無菌、恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。（3）圖中①操作是注射特定的抗原，目的是刺激小鼠產(chǎn)生特異性B淋巴細胞。促進動物細胞融合過程常用的化學誘導劑是聚乙二醇，僅考慮兩個細胞的融合，則可形成B細胞+B細胞、骨髓瘤細胞+骨髓瘤細胞、B細胞+骨髓瘤細胞3種類型的融合細胞。第一次篩選利用的是選擇培養(yǎng)基，篩選出雜交瘤細胞，第二次篩選是利用專一性抗體檢測的方法，做專一性抗體陽性檢測實驗，最終篩選出既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞?！军c睛】本題以單克隆抗體的制備圖解為載體，考查了多項生物工程技術，具有一定的綜合性?？忌R記動物細胞融合的方法；識記單克隆抗體制備的步驟；識記動物細胞培養(yǎng)的條件和特點。10、正Na+內(nèi)流突觸電信號→化學信號→電信號促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素下丘腦和垂體電刺激迷走神經(jīng)使其興奮，引起脾神經(jīng)興奮并釋放去甲腎上腺素，促進T細胞分泌乙酰膽堿，進而抑制巨噬細胞分泌炎癥細胞因子，以減緩炎癥癥狀【解析】

人體的調(diào)節(jié)系統(tǒng)分為神經(jīng)調(diào)節(jié)和激素調(diào)節(jié)。神經(jīng)調(diào)節(jié)通過電信號傳導，在神經(jīng)纖維之間傳遞時需要經(jīng)過突觸，經(jīng)過突觸時會經(jīng)歷電信號→化學信號→電信號的轉(zhuǎn)化；激素調(diào)節(jié)則主要由下丘腦作為內(nèi)分泌系統(tǒng)的中樞進行主要操控。人體的大部分生命活動是由神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)共同控制的?！驹斀狻浚?）興奮時，神經(jīng)細胞外的Na+離子大量內(nèi)流，形成動作電位，使神經(jīng)細胞膜內(nèi)變?yōu)檎娢?；?）神經(jīng)纖維之間通過突觸連接，神經(jīng)纖維之間的信號轉(zhuǎn)遞在經(jīng)過突觸時會經(jīng)歷電信號→化學信號→電信號的轉(zhuǎn)化；（3）根據(jù)題圖分析，物質(zhì)a由下丘腦分泌作用于垂體使垂體分泌激素b作用于腎上腺，則物質(zhì)a為促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素；人體的激素調(diào)節(jié)主要是負反饋調(diào)節(jié)，大量長期使用腎上腺皮質(zhì)激素類藥物，會長期影響下丘腦和垂體上的腎上腺皮質(zhì)激素受體，導致其功能減退；（4）結(jié)合題圖分析，植入生物電裝置刺激迷走神經(jīng)能夠間接刺激腎上腺分泌腎上腺皮質(zhì)激素和T細胞分泌乙酰膽堿，進而抑制巨噬細胞分泌炎癥細胞因子，從而減緩炎癥癥狀?！军c睛】本題的關鍵是理解題圖中“（—）”符號表示的抑制作用。圖中左側(cè)的免疫細胞可表示脾臟中的巨噬細胞。腎上腺皮質(zhì)激素與乙酰膽堿均作用與巨噬細胞以抑制其分泌炎癥細胞因子。同時還需要注意區(qū)分下丘腦分泌的促XX激素釋放激素和垂體釋放的促XX激素，其受體細胞不同，促XX激素釋放激素的受體為垂體細胞，促XX激素的受體細胞則是對應腺體。11、pH冷空氣（壓力為）100kPa、（溫度為）121℃50℃a、c、d工業(yè)廢甲醇無40【解析】

1、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。2、分析題圖：①稱量土樣，里面含有需要分離的酵母菌；②表示梯度稀釋和涂布平板；③④表示平板劃線法，進行純化培養(yǎng)；⑤表示擴大培養(yǎng)，獲得更多的酵母菌?！驹斀狻浚?）配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準確稱量、溶化，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，及時對培養(yǎng)基進行分裝，高壓蒸汽滅菌。在加熱排除高壓鍋內(nèi)原有的冷空氣后，將高壓鍋密閉，繼續(xù)加熱，通常在（壓力為）100kPa、（溫度為）121℃的條件下，維持15-30min，可達到良好的滅菌效果。（2）倒平板需要將培養(yǎng)基冷卻至50℃進行。（3）a、接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌，做到無菌操作，a正確；b、挑取菌落時，應挑取多個菌落，分別測定培養(yǎng)液中，而不是細胞內(nèi)甲醇的含量，b錯誤；c、劃線時應避免劃破培養(yǎng)基表面，否則大量酵母菌聚集，不能形成正常菌落，c正確；d、第二區(qū)域以后的劃線區(qū)域的菌種來源于上一區(qū)域的末端，所以第二區(qū)以后的劃線起始端要與上一區(qū)的劃線的末端相連接，并且最后一區(qū)的劃線末端不能與第一區(qū)的劃線相連，d正確，以便于分離菌落。故選acd。（4）本實驗的目的是分離出可利用工業(yè)廢甲醇的酵母菌，所以應該以甲醇作為碳源，活細胞膜具有選擇透過性，經(jīng)等體積臺盼藍染液染色，無色細胞才計數(shù)；為監(jiān)測酵母的活細胞密度，將發(fā)酵液稀釋1000倍后，經(jīng)等體積臺盼藍染液染色，用25×16型血細胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細胞數(shù)，達到每毫升4×109個活細胞的預期密度，則n÷80×400÷（0.1×103）×2000=4×109，則5個中方格中無色酵母菌不少于40?！军c睛】本題主要考查對食用菌菌種擴大培養(yǎng)并保存的過程中涉及的培養(yǎng)基配制、滅菌及菌種轉(zhuǎn)移和保藏的一些基礎知識，考生需注意歸納總結(jié)，才能減少