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15TechnicalcodeofgermplasI本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分:標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由內蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標準化技術委員會(SAM/TC11呼倫貝爾羊種質資源冷凍保存技術規(guī)程DB15/T1769綿羊冷凍精液DB15/T3401奶綿羊胚胎冷凍解凍技術3.13.2BSA:牛血清白蛋白(BovineSerumAlbumiCOCs:卵丘卵母細胞復合體(Cumulus-OocyteCompleFBS:胎牛血清(FetalBovineSerOPS:開放式拉長細管(OpenPulled2PBS:磷酸鹽緩沖液(PhosphatTS:玻璃化解凍液(ThawingSoluVS:玻璃化冷凍液(VitrifiedSolutio5.2標記5.3精液要求5.6裝管5.7冷凍利用程序冷凍儀,在4℃~-35℃溫區(qū),設置6℃/min的降溫速率;在-35℃~-100℃的溫區(qū),將液氮倒入深度50cm以上的泡沫箱預冷10min,細管鋪放在支架后放入泡沫箱,支架平面5.8貯存5.9解凍取出凍精細管,室溫空氣浴5s,然后放置于4036.3試劑與溶液6.4冷凍將0.25mL細管加熱變軟后拉成為管壁內徑為0.2mm,管壁厚0.02mm的OPS管,冷卻后用手術刀片將卵母細胞在VS1液中平衡30s,再移入VS2液中平衡不超過25s,將多枚卵母細胞及少量VS2吸入6.5解凍7.2胚胎選擇選擇1、2級桑葚胚至擴張囊胚,胚胎質量鑒定按照NY/T1674的規(guī)47.3溶液配置7,4標記7.5胚胎回收7.6洗滌7.8冷凍7.9貯存7.10解凍5A.1精液冷凍保存溶液配方見表A.1。A.2卵母細胞冷凍保存溶液配方見表A.2。mPBS液含有0.3
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