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15TechnicalcodeofgermplasI本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAM/TC11呼倫貝爾羊種質(zhì)資源冷凍保存技術(shù)規(guī)程DB15/T1769綿羊冷凍精液DB15/T3401奶綿羊胚胎冷凍解凍技術(shù)3.13.2BSA:牛血清白蛋白(BovineSerumAlbumiCOCs:卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體(Cumulus-OocyteCompleFBS:胎牛血清(FetalBovineSerOPS:開放式拉長細(xì)管(OpenPulled2PBS:磷酸鹽緩沖液(PhosphatTS:玻璃化解凍液(ThawingSoluVS:玻璃化冷凍液(VitrifiedSolutio5.2標(biāo)記5.3精液要求5.6裝管5.7冷凍利用程序冷凍儀,在4℃~-35℃溫區(qū),設(shè)置6℃/min的降溫速率;在-35℃~-100℃的溫區(qū),將液氮倒入深度50cm以上的泡沫箱預(yù)冷10min,細(xì)管鋪放在支架后放入泡沫箱,支架平面5.8貯存5.9解凍取出凍精細(xì)管,室溫空氣浴5s,然后放置于4036.3試劑與溶液6.4冷凍將0.25mL細(xì)管加熱變軟后拉成為管壁內(nèi)徑為0.2mm,管壁厚0.02mm的OPS管,冷卻后用手術(shù)刀片將卵母細(xì)胞在VS1液中平衡30s,再移入VS2液中平衡不超過25s,將多枚卵母細(xì)胞及少量VS2吸入6.5解凍7.2胚胎選擇選擇1、2級桑葚胚至擴(kuò)張囊胚,胚胎質(zhì)量鑒定按照NY/T1674的規(guī)47.3溶液配置7,4標(biāo)記7.5胚胎回收7.6洗滌7.8冷凍7.9貯存7.10解凍5A.1精液冷凍保存溶液配方見表A.1。A.2卵母細(xì)胞冷凍保存溶液配方見表A.2。mPBS液含有0.3
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