2025屆云南省重點(diǎn)中學(xué)高考生物二模試卷含解析

2025屆云南省重點(diǎn)中學(xué)高考生物二模試卷注意事項(xiàng)1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項(xiàng)的方框涂滿、涂黑；如需改動(dòng)，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．某男同學(xué)患有某種單基因遺傳病，對其家系的其他成員進(jìn)行調(diào)查，結(jié)果記錄如下：祖父祖母姑姑外祖父外祖母舅舅父親母親妹妹----++---（“+”代表患者，“-”代表正常。父親及妹妹無該病致病基因）下列有關(guān)分析，錯(cuò)誤的是（）A．該遺傳病有可能是常染色體隱性遺傳病B．該同學(xué)的致病基因不可能來自于外祖父C．該遺傳病在人群中男性患者多于女性D．若妹妹與患該病的男性結(jié)婚，子女不患該病2．下列相關(guān)實(shí)驗(yàn)中涉及“分離”的敘述錯(cuò)誤的是（）A．植物細(xì)胞質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)中，滴加蔗糖溶液的目的是使原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離B．綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，色素分離是因其在層析液中溶解度不同C．植物根尖細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中，可以觀察到姐妹染色單體彼此分離的變化過程D．T2噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，離心的目的是把噬菌體的蛋白質(zhì)外殼和被侵染的細(xì)菌分離開來3．下列關(guān)于泡菜中亞硝酸鹽含量測定的操作順序正確的是①配制溶液②制備樣品處理液③制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液④比色A．③②①④ B．②③④① C．①③②④ D．③①②④4．下列有關(guān)細(xì)胞呼吸原理的應(yīng)用分析有錯(cuò)誤的是（）A．種在湖邊的玉米，長期被水淹，生長不好，其原因是細(xì)胞有氧呼吸受阻B．植物不能長期忍受無氧呼吸，其原因是無氧呼吸產(chǎn)生的乳酸對細(xì)胞有毒害作用C．人體成熟紅細(xì)胞只能進(jìn)行無氧呼吸，分解葡萄糖，產(chǎn)生乳酸，而獲取能量D．人劇烈運(yùn)動(dòng)后，會(huì)感到肌肉酸痛，是因?yàn)榧〖?xì)胞無氧呼吸產(chǎn)生的乳酸積累導(dǎo)致5．某同學(xué)將一定量的某種動(dòng)物的提取液（A）注射到實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)，注射后若干天，未見小鼠出現(xiàn)明顯的異常表現(xiàn)。將小鼠分成兩組，一組注射少量的A，小鼠很快發(fā)生了呼吸困難等癥狀；另一組注射生理鹽水，未見小鼠有異常表現(xiàn)。對實(shí)驗(yàn)小鼠在第二次注射A后的表現(xiàn)，下列解釋合理的是A．提取液中含有胰島素，導(dǎo)致小鼠血糖濃度降低B．提取液中含有乙酰膽堿，使小鼠骨骼肌活動(dòng)減弱C．提取液中含有過敏原，引起小鼠發(fā)生了過敏反應(yīng)D．提取液中含有呼吸抑制劑，可快速作用于小鼠呼吸系統(tǒng)6．下列符合現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的敘述是（）A．物種的形成可以不經(jīng)過隔離B．生物進(jìn)化過程的實(shí)質(zhì)在于有利變異的保存C．基因突變產(chǎn)生的有利變異決定生物進(jìn)化的方向D．自然選擇通過作用于個(gè)體而影響種群的基因頻率7．某表現(xiàn)型正常的女性，其父親患紅綠色盲。收集該女性體內(nèi)的若干細(xì)胞，將其細(xì)胞內(nèi)的色盲基因進(jìn)行熒光標(biāo)記，在顯微鏡下觀察。假設(shè)無基因突變和交叉互換發(fā)生，下列敘述正確的是（）A．有絲分裂后期的細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)色盲基因，且位于兩條染色體上B．有絲分裂中期的細(xì)胞內(nèi)有4個(gè)色盲基因，此時(shí)可觀察到細(xì)胞內(nèi)有46條染色體C．卵細(xì)胞內(nèi)有1個(gè)或0個(gè)色盲基因，卵細(xì)胞中的色盲基因只能遺傳給女兒D．次級卵母細(xì)胞至少含2個(gè)色盲基因，且核DNA數(shù)目一定是初級卵母細(xì)胞的一半8．（10分）下列關(guān)于胰島素合成與分泌過程的敘述中，正確的是（）A．mRNA進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)的方式與胰島素分泌的方式相同B．囊泡從高爾基體向細(xì)胞膜移動(dòng)是主動(dòng)運(yùn)輸過程C．向胰島B細(xì)胞中注入3H標(biāo)記的亮氨酸，放射性首先出現(xiàn)在高爾基體D．胰島B細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體膜成分基本相但成分基本相同二、非選擇題9．（10分）為了提高水稻的抗倒伏能力，科研人員從其他植物中得到矮桿基因C（圖1），將其與質(zhì)粒（圖2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入水稻中。根據(jù)基因工程的有關(guān)知識，回答下列問題：（1）用__________構(gòu)建重組質(zhì)粒；一般使用__________將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌。（2）用含C基因的農(nóng)桿菌侵染水稻的__________，將C基因?qū)爰?xì)胞；在培養(yǎng)基中添加__________，篩選被轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞；要得到相應(yīng)的水稻植株，要利用__________。（3）用__________檢測C基因是否整合到染色體上；此外，還需要在個(gè)體水平上進(jìn)行檢測。如果檢測顯示C基因整合到染色體上，但水稻并沒有矮化，請分析可能的原因：__________；__________。（至少答兩點(diǎn)）10．（14分）科學(xué)家利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育了OsPHDI（水稻內(nèi)原本也存在該基因>過量表達(dá)的水稻植株，以提高水稻的抗逆性（如抗干旱、抗高鹽）?；卮鹣铝袉栴}：（l）為了驗(yàn)證OsPHDI基因的表達(dá)是否受逆境誘導(dǎo)，實(shí)驗(yàn)組需要給兩葉期水稻設(shè)置_______條件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示_______，說明OsPHDI基因的表達(dá)受逆境誘導(dǎo)。（2）為了培育OsPHDI基因過量表達(dá)植株進(jìn)行如下操作：①利用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得大量OsPHDI基因，該操作的前提是_______。②將OsPHDI基因與含有GFP（綠色熒光蛋白基因）的載體結(jié)合，此處GFP的作用是_______。③常用_______法將表達(dá)載體導(dǎo)入水稻細(xì)胞；若受體細(xì)胞中出現(xiàn)綠色熒光，能否說明OsPHDI基因已成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，并說出理由______________。④最后利用_______技術(shù)培育出完整的抗逆性植株，該技術(shù)利用的生物學(xué)原理是______________11．（14分）我國科學(xué)家從長白豬胎兒皮膚中分離出成纖維細(xì)胞，通過體外培養(yǎng)，然后將水母熒光蛋白基因?qū)氤衫w維細(xì)胞，并培育出轉(zhuǎn)基因克隆豬。請回答下列問題。（1）科學(xué)家依據(jù)_______原理，應(yīng)用PCR技術(shù)______水母熒光蛋白基因。（2）為確保水母熒光蛋白基因在成纖維細(xì)胞中表達(dá)，須在水母熒光蛋白基因的______添加啟動(dòng)子。（3）體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時(shí)，會(huì)出現(xiàn)接觸_________________現(xiàn)象，為解決該問題，可用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理，然后繼續(xù)_______________。（4）科學(xué)家將水母熒光蛋白基因?qū)氤衫w維細(xì)胞，但其不能直接發(fā)育成豬。請以轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞為材料，設(shè)計(jì)培育轉(zhuǎn)基因克隆豬的一種簡要思路___________________________________________________。12．某課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，讓青蒿素合成過程的某一關(guān)鍵酶基因fps在野生青蒿素中過量表達(dá)，其過程如圖所示：回答下列問題：（1）酶1和酶2分別是______________、___________________。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至90~95℃，目的是破壞了DNA分子中的___________鍵。在構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒的過程中，需將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的_______________中。（2）檢驗(yàn)?zāi)康幕蚴欠裾系角噍锼鼗蚪M，可以將放射性同位素標(biāo)記的_________________做成分子探針與青蒿素基因組DNA雜交。理論上，與野生型相比，該探針與轉(zhuǎn)基因青蒿素DNA形成的雜交帶的量____________（填“較多”或“較少”）。（3）據(jù)圖分析，農(nóng)桿菌的作用是______________________。判斷該課題組的研究目的是否達(dá)到，必須檢測轉(zhuǎn)基因青蒿素植株中的______________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

該男子的父母均不患病，但兒子生病，即“無中生有為隱性”，說明該病是隱性遺傳病，但根據(jù)該男性患者的家系，不能確定該遺傳病的遺傳方式，可能是常染色體隱性遺傳病，也可能是伴X染色體隱性遺傳病?！驹斀狻緼、由以上分析可知該病是隱性遺傳病，由于父親及妹妹無該病致病基因，因此，該遺傳病一定是伴X隱性遺傳病，A錯(cuò)誤；B、由于該病是X染色體隱性遺傳病，母親的致病基因不可能來自外祖父，B正確；C、由于該遺傳病是X染色體上的隱性遺傳病，該遺傳病在人群中男性患者多于女性，C正確；D、由于妹妹無該病致病基因，若妹妹與患該病的男性結(jié)婚，子女不患該病，D正確。故選A?！军c(diǎn)睛】本題考查遺傳定律的應(yīng)用，對于此類試題，關(guān)鍵是能利用口訣及相關(guān)條件準(zhǔn)確判斷遺傳病的遺傳方式。遺傳病遺傳方式的判斷口訣為：“無中生有為隱性，隱性看女病，女病男正非伴性”；“有中生無為顯性，顯性看男病，男病女正非伴性”。2、C【解析】

1.分離色素原理:各色素隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同，從而分離色素。2.把成熟的植物細(xì)胞放置在某些對細(xì)胞無毒害的物質(zhì)溶液中，當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí)，細(xì)胞液中的水分子就透過原生質(zhì)層進(jìn)入到外界溶液中，使原生質(zhì)層和細(xì)胞壁都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大，當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí)，原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁逐漸分離開來，也就是逐漸發(fā)生了質(zhì)壁分離。3.T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)步驟:分別用35S或32P標(biāo)記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌→在攪拌器中攪拌，離心，檢測上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)?！驹斀狻緼、植物細(xì)胞質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)中，滴加蔗糖溶液的目的是使原生質(zhì)體失水，從而使原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離，A正確；B、綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，色素分離是因其在層析液中溶解度不同，導(dǎo)致不同色素在濾紙上“爬升”的速度不同，從而使色素分離，B正確；C、植物根尖細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中，觀察的植物細(xì)胞已經(jīng)經(jīng)過解離死亡，無法觀察到姐妹染色單體彼此分離的變化過程，C錯(cuò)誤；D、T2噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，離心的目的是把噬菌體的蛋白質(zhì)外殼和被侵染的細(xì)菌分離開來，用于檢測元素放射性的分布，D正確；故選C3、C【解析】

測定亞硝酸鹽含量的操作步驟是：配制溶液，制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液，制備樣品處理液，比色等幾個(gè)步驟?！驹斀狻坑煞治隹芍?，亞硝酸鹽含量的測定的一般步驟是配制溶液→制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液→制備樣品處理液→比色。

故選C?！军c(diǎn)睛】本題旨在考查學(xué)生對亞硝酸鹽含量檢測的一般步驟的熟練識記。4、B【解析】

大多數(shù)高等植物無氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳，高等植物某些部位的無氧呼吸產(chǎn)物是乳酸，如馬鈴薯塊莖、甜菜塊根、玉米胚。高等動(dòng)物無氧呼吸的產(chǎn)物全部是乳酸?！驹斀狻緼、湖邊的玉米長期被水淹，導(dǎo)致根部供氧不足，有氧呼吸受到阻礙，進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，酒精對根有毒害作用，A正確；B、大多數(shù)植物無氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳，不是乳酸，B錯(cuò)誤；C、人體成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和復(fù)雜的細(xì)胞器，因此沒有有氧呼吸的場所線粒體，只能進(jìn)行無氧呼吸，C正確；D、人在劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)肌肉細(xì)胞有氧呼吸供能不足，會(huì)通過無氧呼吸補(bǔ)充能量的供應(yīng)，無氧呼吸的產(chǎn)物是乳酸，D正確。故選B?！军c(diǎn)睛】本題主要考查無氧呼吸類型，答題關(guān)鍵在于區(qū)分不同生物無氧呼吸產(chǎn)物。5、C【解析】

AC、一定量的某種動(dòng)物的提取液（A）注射到實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)，注射后若干天，未見小鼠出現(xiàn)明顯的異常表現(xiàn)。分組后一組再注射少量的A，小鼠表現(xiàn)為呼吸困難等癥狀，另一組注射生理鹽水，未見小鼠有異常表現(xiàn)，說明提取液中含有過敏原，引起小鼠發(fā)生過敏反應(yīng)，而不是胰島素作用的結(jié)果，A錯(cuò)誤、C正確；B、呼吸中樞位于腦干中，而不是神經(jīng)遞質(zhì)的作用，B錯(cuò)誤；D、呼吸抑制劑是作用于細(xì)胞呼吸，而不是作用于小鼠呼吸系統(tǒng)，D錯(cuò)誤。故選C?！军c(diǎn)睛】對于過敏反應(yīng)的考查，要求考生掌握過敏反應(yīng)是再次接觸相同過敏原時(shí)。機(jī)體才會(huì)發(fā)生過敏反應(yīng)是解題的關(guān)鍵。6、D【解析】

新物種的形成一定要經(jīng)過生殖隔離，A錯(cuò)誤；生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是基因頻率的改變，B錯(cuò)誤；自然選擇的方向決定進(jìn)化的方向，C錯(cuò)誤；自然選擇通過作用于個(gè)體而影響種群的基因頻率，D正確。所以本題選D。7、A【解析】

由題干“某表現(xiàn)型正常的女性，其父親患紅綠色盲”推知該女性的基因型為XBXb（假設(shè)b為色盲基因）?！驹斀狻緼、有絲分裂后期，著絲點(diǎn)分裂，位于X染色體的兩條姐妹染色單體上的2個(gè)色盲基因分離，隨兩條染色體分別移向兩極，A正確；B、有絲分裂中期的細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)色盲基因，此時(shí)可觀察到細(xì)胞內(nèi)有46條染色體，B錯(cuò)誤；C、卵細(xì)胞內(nèi)有1個(gè)或0個(gè)色盲基因，卵細(xì)胞中的色盲基因既可以傳給兒子也可以傳給女兒，C錯(cuò)誤；D、次級卵母細(xì)胞可能含2個(gè)色盲基因或不含色盲基因，且核DNA數(shù)目一定是初級卵母細(xì)胞的一半，D錯(cuò)誤。故選A?！军c(diǎn)睛】本題通過色盲基因位于X染色體上，考查有絲分裂和減數(shù)分裂過程中染色體及其上攜帶基因的變化，解題關(guān)鍵是由題干信息判斷該女性的基因型。8、D【解析】

分泌蛋白是在細(xì)胞內(nèi)合成后，分泌到細(xì)胞外起作用的蛋白質(zhì)，分泌蛋白的合成、加工和運(yùn)輸過程：最初是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體中由氨基酸形成肽鏈，肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行加工，形成有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)由囊泡包裹著到達(dá)高爾基體，高爾基體對其進(jìn)行進(jìn)一步加工，然后形成囊泡經(jīng)細(xì)胞膜分泌到細(xì)胞外，該過程消耗的能量由線粒體提供?！驹斀狻緼、胰島素屬于分泌蛋白，胰島素合成過程中細(xì)胞核中mRNA進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)是通過核孔復(fù)合體的主動(dòng)運(yùn)輸，是一個(gè)信號識別與載體介導(dǎo)的過程，而胰島素分泌的方式是胞吐，A錯(cuò)誤；B、囊泡從高爾基體向細(xì)胞膜移動(dòng)是借助細(xì)胞骨架進(jìn)行運(yùn)輸?shù)?，不是主?dòng)運(yùn)輸過程，B錯(cuò)誤；C、向胰島B細(xì)胞中注入3H標(biāo)記的亮氨酸，放射性首先出現(xiàn)在核糖體，C錯(cuò)誤；D、胰島素的分泌過程在一定程度上說明細(xì)胞內(nèi)各細(xì)胞器在結(jié)構(gòu)上是緊密聯(lián)系的，如高爾基體膜與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜可通過具膜小泡間接聯(lián)系，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體膜都是生物膜系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)，所以二者成分基本相同，D正確。故選D?！军c(diǎn)睛】本題考查細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的知識，考生識記細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，明確分泌蛋白的合成和分泌過程是解題的關(guān)鍵。二、非選擇題9、限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI和DNA連接酶感受態(tài)法/Ca2+處理法愈傷組織潮霉素植物組織培養(yǎng)技術(shù)分子雜交方法/DNA分子探針法整合到染色體上的C基因沒有表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）C基因在水稻細(xì)胞中的表達(dá)產(chǎn)物沒有相應(yīng)的功能【解析】

分析題圖：圖1矮桿基因C的兩端有EcoRI酶識別位點(diǎn)，圖2質(zhì)粒有EcoRI和BamHI酶識別位點(diǎn)，所以對基因C和質(zhì)粒用同一種酶EcoRI酶切割，再用DNA連接酶連成重組質(zhì)粒，通過感受態(tài)法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌中，讓含C基因的農(nóng)桿菌侵染水稻?！驹斀狻浚?）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)用同一種酶限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI分別切割目的基因和運(yùn)載體，并用DNA連接酶連成重組質(zhì)粒。用感受態(tài)法/Ca2+處理法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌。（2）用含C基因的農(nóng)桿菌侵染水稻的愈傷組織，將C基因?qū)爰?xì)胞；根據(jù)重組質(zhì)粒中的抗生素基因，在培養(yǎng)基中添加潮霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞；利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，將轉(zhuǎn)基因水稻細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株。（3）檢測C基因是否整合到染色體上采用分子雜交方法/DNA分子探針法。如果檢測顯示C基因整合到染色體上，但水稻并沒有矮化，則可能是整合到染色體上的C基因沒有表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）或C基因在水稻細(xì)胞中的表達(dá)產(chǎn)物沒有相應(yīng)的功能。【點(diǎn)睛】解答本題需明確幾點(diǎn)：1.用同一種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體；2.目的基因插入點(diǎn)應(yīng)在運(yùn)載體的啟動(dòng)子和終止子之間，以保證目的基因的表達(dá)。10、干旱，高鹽（逆境）實(shí)驗(yàn)組（逆境）植株OsPHDl基因的表達(dá)量高于對照（適宜條件）組（需要一段已知OsPHDl基因的核苷酸序列以便）合成引物作為標(biāo)記基因（檢測目的基因是否導(dǎo)人受體細(xì)胞）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化不能，有可能導(dǎo)入了不含OsPHDl基因的GFP載體植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞具有全能性【解析】

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

2、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（適用于目的基因的核苷酸序列已知的情況）

①概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

②原理：DNA復(fù)制

③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）?！驹斀狻浚╨）通過個(gè)體水平上驗(yàn)證OsPHDI基因的表達(dá)是否受逆境誘導(dǎo)，實(shí)驗(yàn)組需要給兩葉期水稻設(shè)置干旱，高鹽（逆境）條件，如果實(shí)驗(yàn)組（逆境）植株OsPHDl基因的表達(dá)量高于對照（適宜條件）組，說明OsPHDI基因的表達(dá)受逆境誘導(dǎo)。（2）①利用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得大量目的基因，需要加入相應(yīng)的引物，故利用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得大量OsPHDI基因，該操作的前提是合成引物。②GFP（綠色熒光蛋白基因）的作用是作為標(biāo)記基因，便于后期的篩選。③表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；若受體細(xì)胞中出現(xiàn)綠色熒光，不能說明OsPHDI基因已成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，因?yàn)橛锌赡軐?dǎo)入了不含OsPHDl基因的GFP載體。④植物組織培養(yǎng)的生物學(xué)原理是植物體細(xì)胞具有全能性。故可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育出完整的抗逆性植株?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，只要考生識記基因工程的操作步驟，明確基因表達(dá)載體的構(gòu)建是其核心步驟，注意從題干中獲取有效信息。11、DNA雙鏈復(fù)制擴(kuò)增首端抑制分瓶培養(yǎng)將轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核導(dǎo)入去核卵母細(xì)胞，并進(jìn)行體外培養(yǎng)和胚胎移植【解析】

PCR的含義：是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。原理：DNA雙鏈復(fù)制。胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，這是胚胎工程的最后一道工序?！驹斀狻浚?）由分析可知，PCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制，應(yīng)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增水母熒光蛋白基因的目的。（2）因?yàn)閱?dòng)子是位于基因首端的一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，所以，為確保水母熒光蛋白基因在成纖維細(xì)胞中表達(dá)，須在水母熒光蛋白基因的首端添加啟動(dòng)子。（3）體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)貼壁生長、接觸抑制的現(xiàn)象，為解決接觸抑制的問題，可用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理制成單細(xì)胞懸液，然后繼續(xù)分瓶培養(yǎng)。（4）要獲得含水母熒光蛋白基因的轉(zhuǎn)基因豬，現(xiàn)在已經(jīng)獲得了轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞，接下來需要將轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核導(dǎo)入去核卵母細(xì)胞（處于減數(shù)第二次分裂中期），并設(shè)法促進(jìn)重組細(xì)胞的核質(zhì)融合，并進(jìn)行體外培養(yǎng)獲得早期胚胎，然后通過胚胎移植將早期胚胎轉(zhuǎn)入同期發(fā)情的受體豬的子宮內(nèi)完成轉(zhuǎn)基因豬的培育過程?！军c(diǎn)睛】熟知PCR技術(shù)的原理和應(yīng)用是解答本題的關(guān)鍵！掌握核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植的操作程序是解答本題的另一關(guān)鍵，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中呈現(xiàn)的特征以及培養(yǎng)過程也是解答本題的必備知識。12、逆轉(zhuǎn)錄酶