甘肅省平?jīng)鍪徐o寧一中2025屆高三適應(yīng)性調(diào)研考試生物試題含解析

甘肅省平?jīng)鍪徐o寧一中2025屆高三適應(yīng)性調(diào)研考試生物試題考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi)，不得在試卷上作任何標(biāo)記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi)，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔。考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．某興趣小組探究乙醇的濃度和鐵離子對纖維素酶活性的影響時進(jìn)行了相關(guān)實驗，結(jié)果如圖所示，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．該實驗的因變量是酶活性，溫度是無關(guān)變量之一B．鐵離子可降低纖維素酶催化纖維素水解時的活化能C．鐵離子的增加促進(jìn)了乙醇對纖維素酶活性的影響D．改變實驗所使用的底物種類，可以驗證該酶的專一性2．為助力“美麗鄉(xiāng)村”建設(shè)，科研人員對某地富營養(yǎng)化水體實施生態(tài)恢復(fù)。先后向水體引入以藻類為食的某些貝類，引種蘆葦、香蒲等水生植物，以及放養(yǎng)植食性魚類等。經(jīng)過一段時間，水體基本實現(xiàn)了“水清”、“景美”、“魚肥”的治理目標(biāo)。相關(guān)敘述錯誤的是A．治理前的水體不能實現(xiàn)自我凈化說明該生態(tài)系統(tǒng)抵抗力穩(wěn)定性高B．引種蘆葦、香蒲既可吸收水中無機(jī)鹽，又能遮光抑制藻類生長繁殖C．放養(yǎng)植食性魚類可使生態(tài)系統(tǒng)中的物質(zhì)和能量更好地流向人類D．這一成功案例說明調(diào)整生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)是生態(tài)恢復(fù)的重要手段3．圖中甲、乙、丙表示某動物細(xì)胞中的不同化合物，下列敘述正確的是()A．核糖核苷酸是構(gòu)成物質(zhì)甲的基本單位B．物質(zhì)甲為該生物的主要遺傳物質(zhì)C．物質(zhì)丙是構(gòu)成細(xì)胞的基本骨架D．物質(zhì)乙的種類和數(shù)量與細(xì)胞膜的功能密切相關(guān)4．如圖為果酒與果醋發(fā)酵裝置示意圖。下列敘述錯誤的是（）A．發(fā)酵瓶使用前要清洗干凈并用70%酒精消毒B．果酒發(fā)酵時，應(yīng)將果汁裝滿瓶并從e取樣鑒定C．d處設(shè)計能防止排氣時空氣中微生物的污染D．果醋發(fā)酵時，適時打開氣閥a向發(fā)酵液中充氣5．下列有關(guān)酒精作用的敘述錯誤的是（）A．檢測生物組織中脂肪的實驗，酒精的作用是洗去花生子葉薄片上的浮色B．低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目變化的實驗，酒精的作用是漂洗被解離后的根尖C．綠葉中色素的提取和分離的實驗，酒精的作用是提取綠葉中的色素D．探究土壤小動物類群豐富度的實驗，酒精的作用是對小動物進(jìn)行固定和防腐6．以下實驗操作與實驗?zāi)康闹g的匹配，不正確的是（）選項實驗?zāi)康膶嶒灢僮鰽生長素誘導(dǎo)植物枝條生根高濃度的生長素溶液長時間處理實驗材料B亞硝酸鹽含量測定利用分光光度計測定顯色后的泡菜汁的吸光值C腐乳制作（豆腐塊已長滿毛霉）逐層加鹽，抑制微生物生長并析出豆腐水分D誘導(dǎo)愈傷組織分化調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中生長素/細(xì)胞分裂素比例適宜A．A B．B C．C D．F二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）微生物食品檢測是通過微生物檢驗，判斷食品加工環(huán)境及食品衛(wèi)生情況，能夠?qū)κ称繁患?xì)菌汚染的程度作出正確的評價，為各項衛(wèi)生管理工作提供依據(jù)，目前受到高度關(guān)注。請回答下列問題。方法一：微生物培養(yǎng)法（1）培養(yǎng)細(xì)菌最常用到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，其中蛋白胨的作用是_____________________________。（2）對食品中具有生命活性的微生物進(jìn)行檢測，看其數(shù)量是否超標(biāo)，通常采用的接種方法是___。培養(yǎng)一段時間后，通過對菌落_________________的觀察也可初步確定待檢樣本中的微生物種類。（3）用上述方法計算每克樣品中菌株數(shù)的公式為（C/V）×M，其中C代表______________。若培養(yǎng)結(jié)果中，有的菌落連成一片，最可能的原因是______________________________________（答出一點即可）。方法二：特殊物質(zhì)檢測法（4）將待測樣品的微生物接種在含有14C標(biāo)記的葡萄糖的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)一段時間，通過測定生物代謝所產(chǎn)_______________________（填一種氣體）的放射性強(qiáng)度，間接推測待測樣品中微生物的數(shù)量。但該方法只適用于部分食品中微生物的檢測，理由是____________________________________________。8．（10分）人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值，只能從人血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。（1）為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，請用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出另一條引物的位置及擴(kuò)增方向。（2）啟動子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體，需要選擇的啟動子是_____________（填寫字母，單選）。A．人血細(xì)胞啟動子B．水稻胚乳細(xì)胞啟動子C．大腸桿菌啟動子D．農(nóng)桿菌啟動子（3）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，需添加酚類物質(zhì)，其目的是____________。（4）人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才有活性。與途徑Ⅱ相比，選擇途徑Ⅰ獲取rHSA的優(yōu)勢是____________________________________。（5）為證明rHSA具有醫(yī)用價值，須確認(rèn)rHSA與_________________的生物學(xué)功能一致。9．（10分）普通牛奶賴氨酸含量低，為提高牛奶中賴氨酸的含量，利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)，得到了一頭轉(zhuǎn)入外源賴氨酸基因的奶牛，預(yù)計將來其分泌的乳汁中含有更多的賴氨酸。下圖為培育轉(zhuǎn)基因動物的技術(shù)流程圖：（1）在過程①用到的兩種工具酶中，對核苷酸序列有嚴(yán)格要求的工具酶是______________，其作用的對象是兩個脫氧核苷酸之間的_______________鍵。（2）在基因表達(dá)載體中，目的基因的首端必須含有________，它是__________識別和結(jié)合的部位。（3）過程②中為獲得能大量產(chǎn)生賴氨酸的轉(zhuǎn)基因牛，該基因表達(dá)載體導(dǎo)入的受體細(xì)胞是_______________，常用的導(dǎo)入方法是________________法。（4）將該受體細(xì)胞培育成為一頭奶牛還需要的技術(shù)有：___________、_______________。（5）動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)環(huán)境中除須提供O2外還須混入一定量的_____，混入的氣體的主要作用是_________________。為保證被培養(yǎng)的動物細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，可以在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的___________，以防培養(yǎng)過程中的污染。10．（10分）人血清白蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價值。下圖是以基因工程技術(shù)獲取HSA的兩條途徑，其中報告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色?；卮鹣铝袉栴}。（1）基因工程中可通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是___________；在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是___________上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA分子雙鏈間的___________。（2）已知堿性磷酸酶能除去核苷酸末端的5磷酸，構(gòu)建表達(dá)載體的過程中用該酶處理Ti質(zhì)粒，但HSA基因不用堿性磷酸酶處理，這樣做的目的是___________，經(jīng)過上述處理后的Ti質(zhì)粒在DNA連接酶的作用下可與HSA基因之間形成___________個磷酸二酯鍵，再經(jīng)相關(guān)處理獲得結(jié)構(gòu)完整的重組DNA分子。（3）過程①中需將植物細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)后，還應(yīng)轉(zhuǎn)接到含___________的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。③過程中將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞，采用最多，也是最為有效的方法是___________，還可以使用動物病毒作為載體，實現(xiàn)轉(zhuǎn)化。（4）為檢測HSA基因的表達(dá)情況，可提取受體細(xì)胞的___________，用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實驗。11．（15分）哺乳動物成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和具膜的細(xì)胞器，是研究膜結(jié)構(gòu)功能的常用材料。當(dāng)成熟紅細(xì)胞破裂時，仍然保持原本的基本形狀和大小，這種結(jié)構(gòu)稱為紅細(xì)胞影，其部分結(jié)構(gòu)如圖所示。研究人員用不同的試劑分別處理紅細(xì)胞影。結(jié)果如下表：（“+”表示有，“－”表示無）實驗處理蛋白質(zhì)種類處理后紅細(xì)胞影的形狀A(yù)BCDEF試劑甲處理后++++－－變得不規(guī)則試劑乙處理后－－++++還能保持（1）在制備細(xì)胞膜時，將紅細(xì)胞置于____________中，使細(xì)胞膜破裂釋放出內(nèi)容物。由表中結(jié)果推測，對維持紅細(xì)胞影的形狀起重要作用的蛋白質(zhì)是____________(填表中字母)。（2）構(gòu)成紅細(xì)胞膜的基本支架是__________________。膜上有多種蛋白質(zhì)，其中B蛋白與多糖結(jié)合，主要與細(xì)胞膜的__________________功能有關(guān)。A和G蛋白均與跨膜運(yùn)輸有關(guān)，G主要功能是利用成熟紅細(xì)胞____________呼吸產(chǎn)生的ATP供能，通過______________方式排出Na+吸收K+，從而維持紅細(xì)胞內(nèi)高K+低Na+的離子濃度梯度。（3）研究發(fā)現(xiàn)，紅細(xì)胞膜上膽固醇含量與動脈粥樣硬化（As）斑塊的形成密切相關(guān)。成熟紅細(xì)胞不具有合成脂質(zhì)的________________（填細(xì)胞器），其細(xì)胞膜上的脂類物質(zhì)可來自血漿。當(dāng)血漿中膽固醇濃度升高時，會導(dǎo)致更多的膽固醇插入到紅細(xì)胞膜上，細(xì)胞膜的_______________性降低，變得剛硬易破，紅細(xì)胞破裂導(dǎo)致膽固醇沉積，加速了As斑塊的生長。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

根據(jù)柱形圖分析，實驗的自變量是乙醇的濃度和有無鐵離子，因變量是酶活性?？磮D可知：隨著乙醇濃度的增大，纖維素酶的活性逐漸降低，可見乙醇對纖維素酶的活性有抑制作用，鐵離子對纖維素酶的活性有促進(jìn)作用。據(jù)此答題?！驹斀狻緼、根據(jù)該實驗的目的可知，該實驗的自變量是乙醇濃度和有無鐵離子，溫度屬于無關(guān)變量，A正確；B、乙醇濃度為零時，有鐵離子組酶的活性較高，說明鐵離子可使纖維素酶催化纖維素水解時的活化能降低，B正確；C、從圖中信息可知，乙醇對纖維素酶的活性有抑制作用，鐵離子的增加抑制了乙醇對纖維素酶活性的影響，C錯誤；D、驗證特定酶的專一性，實驗的自變量是底物的種類，D正確。故選C。【點睛】本題考查乙醇的濃度和無機(jī)鹽離子對酶活性的影響，要求考生識記分析柱形圖，得出自變量和因變量，以及實驗結(jié)論的能力，能運(yùn)用所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查。2、A【解析】

生態(tài)系統(tǒng)具有保持或恢復(fù)其自身結(jié)構(gòu)和功能相對穩(wěn)定的能力，一般組分越多，食物鏈?zhǔn)澄锞W(wǎng)越復(fù)雜，生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力就越強(qiáng)，抵抗力穩(wěn)定性就越高。水體富營養(yǎng)化是指水中的無機(jī)N、P元素增加，導(dǎo)致藻類瘋長的現(xiàn)象?！驹斀狻緼、治理前的水體不能實現(xiàn)自我凈化說明該生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)力穩(wěn)定性低，A錯誤；B、植物的生命活動需要無機(jī)鹽，故引種蘆葦、香蒲既可吸收水中無機(jī)鹽，蘆葦和香蒲為挺水植物，可以起到遮光抑制藻類生長繁殖的作用，B正確；C、放養(yǎng)植食性魚類一方面使藻類的繁殖得到抑制，防止水體污染，同時也能夠增加魚的產(chǎn)量，可使生態(tài)系統(tǒng)中的物質(zhì)和能量更好地流向人類，C正確；D、這一成功案例說明人為的合理的調(diào)整生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)是生態(tài)恢復(fù)的重要手段，D正確；故選A。3、D【解析】

閱讀題干和題圖可知，本題是組成細(xì)胞的元素和化合物以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系，先分析題圖確定甲、乙、丙的本質(zhì)，然后根據(jù)選項所涉及的內(nèi)容分析判斷．據(jù)圖示可知，甲、乙構(gòu)成染色體，故甲為DNA，乙為蛋白質(zhì)，甲、丙構(gòu)成細(xì)胞膜，故丙為磷脂?！驹斀狻课镔|(zhì)甲為DNA，脫氧核苷酸是構(gòu)成物質(zhì)甲的基本單位，A錯誤；物質(zhì)甲為DNA，是該生物的遺傳物質(zhì)，B錯誤；物質(zhì)丙為磷脂，是構(gòu)成生物膜的基本骨架，C錯誤；物質(zhì)乙是蛋白質(zhì)，其種類和數(shù)量與細(xì)胞膜的功能密切相關(guān)，D正確?！军c睛】易錯選項BC，一是作為特定生物的遺傳物質(zhì)只有一種，沒有主次之分；二是容易“細(xì)胞的基本骨架”看成“細(xì)胞中生物膜的基本骨架”而誤判。4、B【解析】

分析實驗裝置圖：果酒和果醋的發(fā)酵裝置圖，其中出料口的作用是出料、檢測；充氣口的作用是在果醋制作時通入氧氣的；排氣口的作用是排氣，其彎彎曲曲的好處是防止雜菌和浮塵的污染?！驹斀狻緼、發(fā)酵瓶使用前要清洗干凈，并用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，是為了避免雜菌污染，A正確；B、果酒發(fā)酵時果汁的量不能超過發(fā)酵瓶體積的2/3，而且不能將排氣口淹沒，B錯誤；C、裝置中d處設(shè)計成彎曲形狀的目的是防止排氣時空氣中微生物的污染，C正確；D、果酒發(fā)酵時，適時打開氣閥a向發(fā)酵液中充氣，因為醋酸桿菌為好氧微生物，D正確。故選B。5、B【解析】

酒精是生物實驗常用試劑之一，如檢測脂肪實驗中需用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液洗去浮色；觀察植物細(xì)胞有絲分裂實驗和低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實驗中都需用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精對材料進(jìn)行解離；綠葉中色素的提取和分離實驗中需用無水酒精來提取色素；果酒和果醋制作實驗中可用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精進(jìn)行消毒；DNA的粗提取和鑒定中可以體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精進(jìn)一步純化DNA等?！驹斀狻緼、檢測生物組織中脂肪的實驗，用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精洗去花生子葉薄片上的浮色，A正確；B、低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化實驗中，使用卡諾氏液固定細(xì)胞形態(tài)后，要用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精沖洗2次，解離后應(yīng)該用清水進(jìn)行漂洗，B錯誤；C、綠葉中色素的提取和分離的實驗，用無水乙醇來提取綠葉中的色素，C正確；D、探究土壤小動物類群豐富度的實驗，用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精對小動物進(jìn)行固定和防腐，D正確。故選B。6、A【解析】

適宜濃度的生長素可以促進(jìn)扦插枝條生根；泡菜制作中亞硝酸鹽的測定常用比色法測定；腐乳制作中加鹽腌制的目的是析出豆腐中的水分，防止雜菌污染；植物組織培養(yǎng)中常常需要根據(jù)培養(yǎng)的不同階段，調(diào)節(jié)生長素和細(xì)胞分裂素的比值，當(dāng)比值偏大時，有利于生根，當(dāng)比例偏小時，有利于生芽；比例適中時能夠長出愈傷組織?！驹斀狻緼、在生長素促進(jìn)植物扦插枝條生根實驗中，插條的處理有沾蘸法和浸泡法，故高濃度的生長素溶液短時間處理實驗材料，A錯誤；

B、泡菜制作中亞硝酸鹽測定也可以利用分光光度計測定顯色后的泡菜汁的吸光值來確定，B正確；C、腐乳制作中，逐層加鹽腌制的目的是析出豆腐中的水分，防止雜菌污染，C正確；

D、在植物組織培養(yǎng)中，誘導(dǎo)愈傷組織時需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素的比例，D正確。

故選

A。二、綜合題：本大題共4小題7、提供碳源、氮源、維生素稀釋涂布平板法形狀、顏色、大小、隆起程度等某個稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)接種的菌液濃度過高CO2有的微生物不利用葡萄糖；有的微生物氧化分解葡萄糖的同時不產(chǎn)生氣體等【解析】

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基屬于完全培養(yǎng)基，其中蛋白胨主要提供碳源、氮源、維生素。微生物培養(yǎng)中的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種，稀釋涂布平板法相比較于平板劃線法可以計數(shù)?！驹斀狻浚?）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，其中蛋白胨的作用是提供碳源、氮源、維生素；（2）若要對微生物進(jìn)行計數(shù)，一般選擇的接種方法為稀釋涂布平板法；待長出菌落以后，一般通過菌落的形狀、顏色、大小、隆起程度等特征進(jìn)行初步辨認(rèn)；（3）用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)時，常常需要數(shù)出平板上長出的菌落數(shù)，一般一個菌落表示一個活細(xì)胞，再比上滴加到平板的體積后乘稀釋倍數(shù)，所以C表示的是某個稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)；若平板上菌落連成一片，沒有分散成單個菌落，很可能是因為接種的菌液濃度過高；（4）微生物以葡萄糖為代謝底物，分解葡萄糖釋放二氧化碳，因此可以通過測定生物代謝所產(chǎn)生的二氧化碳的放射性強(qiáng)度，間接推測待測樣品中微生物的數(shù)量；但對于不利用葡萄糖的微生物，或者分解葡萄糖后不產(chǎn)生二氧化碳的微生物是無法用該方法檢測的?！军c睛】該題主要考察了微生物培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識，難點為微生物計數(shù)時若使用稀釋涂布平板法，需要掌握計數(shù)的原理，由于在平板上長出的一個菌落相當(dāng)于最開始的一個活菌，因此用培養(yǎng)后的菌落數(shù)比上體積則是密度，如果進(jìn)行了稀釋，還需要乘稀釋倍數(shù)，用公式總結(jié)為（C/V）×M。8、（12分）（1）總RNA（或mRNA）（2）B（3）吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化（4）水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對初始rHSA多肽進(jìn)行高效加工（5）HSA【解析】（1）合成總cDNA需提取細(xì)胞中所有的mRNA，然后通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得。采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA時，母鏈的方向是3＇到5＇，子鏈的延伸方向是5＇到3＇，兩條引物分別與模板鏈的5＇端互補(bǔ)配對結(jié)合，引導(dǎo)子鏈延伸，故兩條引物延伸方向是相反的。（2）根據(jù)啟動子通常具有物種及組織特異性，在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA，需選擇水稻胚乳細(xì)胞的啟動子。（3）農(nóng)桿菌具有趨化性，即植物的受傷組織會產(chǎn)生一些糖類和酚類物質(zhì)吸引農(nóng)桿菌向受傷組織集中轉(zhuǎn)化。研究證明，主要酚類誘導(dǎo)物為乙酰丁香酮和羧基乙酰丁香酮，這些物質(zhì)主要在雙子葉植物細(xì)胞壁中合成，通常不存在于單子葉植物中。水稻是單子葉植物，不能產(chǎn)生上述的酚類化合物，故在農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，需要添加酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因的轉(zhuǎn)移。（4）水稻是真核生物，具有生物膜系統(tǒng)，能對初始rHSA多肽進(jìn)行加工才能形成正確的空間結(jié)構(gòu)，獲得的HAS才有活性，而大腸桿菌是原核生物，細(xì)胞中不具有膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，無法對初始rHSA多肽進(jìn)行加工。（5）為證明rHSA具有醫(yī)用價值，需確認(rèn)rHSA與天然的HSA的生物學(xué)功能是否一致?！究键c定位】基因工程的原理及技術(shù)；基因工程的操作程序；基因工程的應(yīng)用【名師點睛】本題結(jié)合生成rHSA的實例考查目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、受體細(xì)胞的選擇、目的基因的檢測與鑒定。解題關(guān)鍵是明確基因工程原理和操作程序等相關(guān)知識。9、限制性內(nèi)切酶（限制酶）磷酸二酯啟動子RNA聚合酶受精卵顯微注射早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植CO2維持培養(yǎng)液的pH抗生素【解析】

1．基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2.胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，這是胚胎工程的最后一道工序。【詳解】（1）過程①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，在該過程中用到限制酶和DNA連接酶，限制酶能識別雙鏈DNA中特定的核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。（2）一個基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動子、終止子和標(biāo)記基因等，啟動子位于目的基因的首端，是一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，并驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。（3）本實驗的最終目標(biāo)獲得能大量產(chǎn)生賴氨酸的轉(zhuǎn)基因牛，因此，過程②（目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞）中的受體細(xì)胞應(yīng)該是受精卵，常用顯微注射法將目的基因表達(dá)載體導(dǎo)入。（4）圖中的受體細(xì)胞為受精卵，將該受體細(xì)胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成適宜階段的早期胚胎，然后通過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎置入經(jīng)過同期發(fā)情處理的受體牛子宮內(nèi)，完成胚胎發(fā)育過程。（5）動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)環(huán)境中除須提供O2外還須混入一定量的CO2，CO2能維持培養(yǎng)液的pH。培養(yǎng)的動物細(xì)胞需要處于無菌、無毒的環(huán)境，因此通常在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以保證培養(yǎng)過程中的無菌、無毒環(huán)境。【點睛】熟知基因工程的原理和步驟是解答本題的關(guān)鍵！掌握轉(zhuǎn)基因動物培育的各個流程以及各流程涉及的操作要點是解答本題的另一關(guān)鍵！10、解旋酶加熱至90~95℃氫鍵防止Ti質(zhì)粒發(fā)生自身連接2無色物質(zhì)K顯微注射技術(shù)蛋白質(zhì)【解析】

由圖可知，①表示將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，②表示植物組織培養(yǎng)，③表示將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞，④需要經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植等。【詳解】（1）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，在解旋酶的作用下可以解開DNA雙鏈；在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，加熱至90~95℃引起模板DNA解鏈為單鏈，上述兩個解鏈過程均破壞了DNA分子雙鏈間的氫鍵。（2）為了防止Ti質(zhì)粒發(fā)生自身連接，構(gòu)建表達(dá)載體的過程中用該酶處理Ti質(zhì)粒