番茄對(duì)主要病害抗性鑒定評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程 第5部分：番茄抗早疫病鑒定評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程-送審討論稿

1本文件適用于所有種類的番茄，包括番茄屬（LycopersiconMiller.）下2個(gè)亞群和9個(gè)種，以及栽培24接種體制備4.1基本設(shè)備持在20℃~30℃)、塑料盆、鋁鍋、電爐、培養(yǎng)皿4.2接種體分離4.3接種體確定分別選擇分布較廣、致病力較強(qiáng)的番茄早疫病菌的優(yōu)勢(shì)菌株作為人4.4接種體保存4.4.1短期保存將番茄早疫病菌分別接種于PDA斜面養(yǎng)基上，在25℃~26℃培養(yǎng)7d后，置4℃冰箱中保存。將番茄早疫病菌分別接種于PDA平板培養(yǎng)基上，并在接種點(diǎn)周圍放置一定數(shù)量的滅菌濾紙片，在25℃~26℃培養(yǎng)7d后，取出濾紙片，經(jīng)真空干燥后于-20℃~-80℃的低溫冰箱中保存。34.5接種體懸浮液制備將保存在PDA培養(yǎng)基上的早疫病菌，在無菌操作下，移植于PDA平板培養(yǎng)基上，置于25℃~26℃培25℃~26℃36小時(shí)皿內(nèi)形成大量分生孢子，用無菌蒸餾水洗下并收集分生孢子懸浮液，得到接種體懸浮5鑒定番茄苗培育露白發(fā)芽后播植于溫室，采用營(yíng)養(yǎng)缽盆栽法進(jìn)行育苗，基質(zhì)應(yīng)自來水澆透育苗基質(zhì)，隨后將已催芽的待鑒定番茄種子播于上述塑料營(yíng)養(yǎng)缽中，每缽1粒種子，然后用泥炭育苗基質(zhì)覆蓋，以蓋住種子為宜。重復(fù)3次，每重復(fù)30缽，5.5接種前管理播種后將塑料缽置于溫室中，進(jìn)行培育，出苗前，溫室溫度保持在25℃~30℃,保持盆中土壤濕度；番茄苗出土后，溫室溫度保持在23℃~25℃,土壤濕度保持在60%～80%，正常栽培管理，不施用每年4月～6月和10月～12月為番茄對(duì)早疫病抗性鑒定與抗4用無菌水將接種體懸浮液稀釋，配制成接種體濃度為1.0×105個(gè)孢子/mL～4.0×105個(gè)孢子/mL的接接種后的番茄苗，置于溫度為20℃~22℃的溫室中，黑暗保濕（RH95%～100%）24h；以后每天光照12h～14h，溫室溫度保持在20℃~22℃,適時(shí)澆水，保持正常栽培管理，不施用殺菌劑。接種后7d～10d時(shí)進(jìn)行調(diào)查。也可根據(jù)感病的對(duì)照品種病級(jí)擴(kuò)展到最高病級(jí)的Ri=×100…………（1）59結(jié)果評(píng)價(jià)9.1鑒定有效性判別當(dāng)感病對(duì)照品種達(dá)到其相應(yīng)感病程度（DI≥50.0），該批9.2抗病性劃分12R345S69.3鑒定結(jié)果記錄編號(hào)品種/種質(zhì)名稱來源重復(fù)病情級(jí)別病情指數(shù)平均病指抗性評(píng)價(jià)0135796ⅠⅡⅢ……播種日期接種日期接種生育期接種病原物分離編號(hào)接種病原物株系類型調(diào)查時(shí)間鑒定人（簽字）：校核人（簽字）：鑒定技術(shù)負(fù)責(zé)人（簽字）：鑒定單位蓋章）7200g，切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持30min，用2層紗布趁熱在量杯上過濾，棄濾渣，取濾液補(bǔ)充水分到1000ml；把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂17g，然后至6.8～7.0。將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞或泡沫度的1/5，滅菌后制成斜面；三角瓶的分裝量以不超過其容積的一半為宜，滅菌后倒入滅菌培養(yǎng)皿，制8茄鏈格孢菌即番茄早疫病菌侵染番茄葉、莖和果實(shí)引起番茄早疫病。葉片被害，初呈深褐色或黑茄鏈格孢菌絲有隔膜和分枝，較老的顏色較深。分生孢子梗從病斑壞死組織的氣孔中抽出，直立或稍彎曲，