DB12T 534-2014 從業(yè)人員健康檢查 血清甲肝及戊肝IgM抗體陽性者復(fù)查處置規(guī)范

13.100C

75DB12

T5342014

IgM

of

serum

antibody

天津市市場和質(zhì)量監(jiān)督管理委員會

DB12/T

534—2014目 次前言

................................................................................

II1

范圍

..............................................................................

12

規(guī)范性引用文件

....................................................................

13

術(shù)語和定義

........................................................................

14

復(fù)查程序

..........................................................................

25

結(jié)果判定

..........................................................................

26

復(fù)查結(jié)果的判定與處置

..............................................................

2附錄

................................................

3附錄

IgM

........................................

7附錄

IgM

........................................

9附錄

IgG

.......................................

11附錄

IgG

.......................................

13IDB12/T

534—2014前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T

本標(biāo)準(zhǔn)由天津市衛(wèi)生局提出并歸口，由天津市疾病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)解釋。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：天津市疾病預(yù)防控制中心本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：龐作章、姜云、楊曉毅、陳金枝、張晗、柳光斌、朱羽。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。IIDB12/T

534—20141范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了從業(yè)人員健康檢查中甲肝、戊肝IgM抗體陽性者復(fù)查術(shù)語和定義、復(fù)查程序、結(jié)果判定、復(fù)查結(jié)果的判定與處置。本標(biāo)準(zhǔn)適用于天津市具有從業(yè)人員健康檢查資質(zhì)的機構(gòu)。2規(guī)范性引用文件件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。WS

298-2008 甲型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)WS

301-2008 戊型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)3 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1感染

Infection病原微生物侵入宿主體內(nèi)并引起病理變化。3.2目標(biāo)疾病

指甲型病毒性肝炎、戊型病毒性肝炎。3.3傳染性

Infectivity病原體從宿主排出體外，通過一定的方式到達(dá)新的易感者體內(nèi)，即為傳染性。3.4從業(yè)人員

Employees品生產(chǎn)的人員，直接從事消毒產(chǎn)品生產(chǎn)的操作人員，公共場所直接為顧客服務(wù)的人員，藥品生產(chǎn)企業(yè)、藥品經(jīng)營企業(yè)和醫(yī)療機構(gòu)直接接觸藥品的工作人員，以及其他直接為顧客（他人）服務(wù)的人員。3.5復(fù)查程序Review

procedures從業(yè)人員在健康檢查過程中單項或多項結(jié)果異常，按照主檢醫(yī)師處置要求進行復(fù)查的過程。3.6結(jié)果判定

of

主檢醫(yī)師依據(jù)相關(guān)法律法規(guī)要求對從業(yè)人員各項檢查結(jié)果，進行綜合判斷的過程。3.71DB12/T

534—2014復(fù)查合格

初檢結(jié)果異常者，按照復(fù)查程序檢查后，由主檢醫(yī)師判定結(jié)果合格。4 復(fù)查程序4.1

異常結(jié)果登記：編號、姓名、性別、年齡、異常項目、OD

4.2

留存受檢者結(jié)果：檢驗異常結(jié)果個體報告、主檢醫(yī)師處置意見（附錄

4.3

留存陽性標(biāo)本：陽性結(jié)果原始記錄留檔、標(biāo)本冷凍保存；4.4

復(fù)查（45

陽性者：記錄陽性結(jié)果，檢測

IgG、ALT（附錄

A.3）；4.5

二次復(fù)查（90

陽性者：記錄陽性結(jié)果，檢測

IgG、ALT（附錄

4.6

保存原始記錄及血清，按統(tǒng)計表格及統(tǒng)計方法整理原始記錄（附錄

4.7

上述程序中所用檢驗操作規(guī)程參見附錄

B、C、D、E。5 結(jié)果判定5.1抗-HAV

天、90

天復(fù)查抗-HAV

IgM、抗-HAV

及

ALT。5.2抗-HEV

IgM

天復(fù)查抗-HEV

IgM

IgG及

ALT。5.3主檢醫(yī)師依據(jù)實驗室檢測結(jié)果及臨床癥狀和體征進行綜合判定。6 復(fù)查結(jié)果的判定與處置6.1 判定6.1.1 復(fù)查后

IgM

陰性——通過。6.1.2 IgM

陽性——參看

及

ALT

結(jié)果進行綜合判斷。6.2 處置意見6.2.1 IgG

陽性、ALT

無明顯增高（≤100

6.2.2 IgG

陰性、ALT

無明顯增高（≤100

6.2.3 ALT

明顯增高（＞100

U/L）和（或）出現(xiàn)肝病相關(guān)臨床癥狀者——臨床診治。2DB12/T

534—2014AA附 錄 A（規(guī)范性附錄）規(guī)范性用表的樣式A.1 天津市從業(yè)人員健康檢查實驗室檢驗結(jié)果報告書的樣式見圖A.1A.2天津市從業(yè)人員健康檢查報告書的樣式天津市從業(yè)人員健康檢查報告書的樣式見圖A.2A.3天津市從業(yè)人員健康檢查復(fù)查登記表的樣式天津市從業(yè)人員健康檢查復(fù)查登記表的樣式見圖A.33DB12/T

534—2014WS301-2008

WS301-2008

檢驗項目

抗-HAV

樣品名稱 生物樣本（血清標(biāo)本）樣本性狀液體檢測部門門診化驗室 檢驗?zāi)康?從業(yè)人員健康體檢受理日期 年 月日規(guī)格數(shù)量 0.5

ml×1

份檢驗依據(jù) WS298-2008抗-HEV

檢驗方法 酶聯(lián)免疫法 所用試劑 試劑名稱及批號操作方法 參照產(chǎn)品說明書 生產(chǎn)企業(yè) 生產(chǎn)企業(yè)名稱檢驗結(jié)果：檢驗人： 校核人： 報告日期：單位公章圖A.1天津市從業(yè)人員健康檢查實驗室檢驗結(jié)果報告書的樣式4DB12/T

534—2014天津市從業(yè)人員健康檢查報告書編號： 單位：姓名： 性別：

檢查結(jié)果：

1.胸部

X線檢查：2.心、肺、肝、脾、皮膚檢查：3.血清學(xué)檢查：4.糞便檢查：復(fù)查內(nèi)容：

復(fù)查單位： 復(fù)查時間：處理意見主檢醫(yī)師： 報告日期：圖A.2 天津市從業(yè)人員健康檢查報告書的樣式5初檢編號姓名初檢一次復(fù)檢二次復(fù)檢備注時間項目結(jié)果時間項目結(jié)果時間項目結(jié)果DB12/T

534—2014天津市從業(yè)人員健康檢查復(fù)查登記表圖A.3 天津市從業(yè)人員健康檢查復(fù)查登記表的樣式6DB12/T

534—2014BB附 錄 B（資料性附錄）抗-HAV

IgM

檢測操作規(guī)程B.1 原理以ELISA法檢測。根據(jù)固相酶聯(lián)夾心法，包被在固相載體上的羊抗人μ鏈抗體與血清標(biāo)本中特異性IgM抗體結(jié)合，以后加入酶標(biāo)記甲肝抗原與特異性抗-HAV

IgM結(jié)合。在酶底物作用下顯色反應(yīng)，檢測血清中是否存在特異性抗-HAV

B.2 設(shè)備和材料B.2.1

恒溫水溫箱。B.2.2

酶標(biāo)儀。B.2.3

可調(diào)式微量移液器。B.2.4

臺式離心機。B.2.5

冰箱。B.2.6

聚苯乙烯微量板。B.2.7

試管架。B.3 試劑B.3.1

B.3.2

抗-HAV

B.3.3

抗-HAV

B.3.4

抗-HAV

B.3.5

血清稀釋液，0.85%生理鹽水。B.3.6

B.3.7

顯色劑A液，6

B.3.8

顯色劑B液，6

B.3.9

終止液（2

B.3.10

自封袋，1個。B.3.11

封板膜，2張。B.4 操作B.4.1

加樣：血清標(biāo)本每孔加入100

μl，并設(shè)空白對照1孔，陰性對照2孔，陽性對照2孔，37℃

20min。B.4.2

洗滌：棄去反應(yīng)孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，洗滌5次。B.4.3

加酶標(biāo)記物：每孔加入酶標(biāo)記物100

40

B.4.4

洗滌：棄去反應(yīng)孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，洗滌5次。7DB12/T

534—2014B.4.5 顯色：每孔加入顯色反應(yīng)液A，顯色反應(yīng)液B各50

μl，37℃暗處

15

min。B.4.6 終止：每孔加入終止液50

B.5 結(jié)果判定B.5.1 酶標(biāo)儀測定波長450

B.5.2 臨界值=陰性對照孔A值均值×2.1陰性判定：樣本A值＜臨界值；陽性判定：樣本A值≥臨界值；陰性對照孔A值均值

值小于0.05按0.05計算。B.6 附注B.6.1 要求使用有衛(wèi)生部批準(zhǔn)生產(chǎn)文號試劑盒。B.6.2 具體操作方法詳見試劑盒說明。B.7 技術(shù)依據(jù)衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)WS

298-2008。8DB12/T

534—2014CC附

錄

C（資料性附錄）抗-HEV

IgM

檢測操作規(guī)程C.1 原理以ELISA法檢測。根據(jù)固相酶聯(lián)夾心法，包被在固相載體上的羊抗人μ鏈抗體與血清標(biāo)本中特異性IgM抗體結(jié)合，以后加入酶標(biāo)記戊肝抗原與特異性抗-HEV

IgM結(jié)合。在酶底物作用下顯色反應(yīng)，檢測血清中是否存在特異性抗-HEV

C.2 設(shè)備和材料C.2.1

恒溫水溫箱。C.2.2

酶標(biāo)儀。C.2.3

可調(diào)式微量移液器。C.2.4

臺式離心機。C.2.5

冰箱。C.2.6

聚苯乙烯微量板。C.2.7

試管架。C.3 試劑C.3.1

HEV-IgM酶標(biāo)板，8*12孔*5。C.3.2

HEV-IgM陰性對照，0.5

ml*5。C.3.3

HEV-IgM陽性對照，0.5

ml*5。C.3.4

HEV-IgM酶標(biāo)試劑，12

ml*5。C.3.5

HEV-IgM樣品稀釋液，12

C.3.6

濃縮洗滌液（20*

），50

C.3.7

顯色劑A液，6

ml*5。C.3.8

顯色劑B液，6

ml*5。C.3.9

終止液，6

C.3.10

自封袋，5個。C.3.11

封板膜，10張。C.4 操作C.4.1 配液：將濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋。C.4.2 波長檢測，可不設(shè)空白對照孔。C.4.3 加稀釋液：每孔加入樣品稀釋液100

C.4.4 加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測樣品或陰、陽對照10

μl，輕輕振蕩混勻。9DB12/T

534—2014C.4.5 溫育：用封板膜封板后，置37℃溫育30

min。C.4.6 洗板：小心揭掉封板膜，用洗板機洗滌5遍，最后一次盡量扣干。C.4.7 加酶：每孔加入酶標(biāo)記物100

μl，空白孔除外。C.4.8 溫育：操作同4.5。C.4.9 洗板：操作同4.6。C.4.10 顯色：每孔加入顯色劑A、B液各50

μl

min。C.4.11 測定：每孔加入終止液50

μl

，輕輕振蕩混勻，10

min內(nèi)測定結(jié)果，設(shè)定酶標(biāo)儀波長于450nm

處（建議用雙波長450

C.5結(jié)果判定C.5.1 臨界值計算，臨界值=0.26+陰性對照孔A均值。C.5.2陽性判定：樣品A值≥臨界值者為抗-HEV

IgM陽性。C.5.3 陰性判定：樣品A值＜臨界值者為抗-HEV

IgM陰性。C.5.4 C.5.5 陽性對照的正常范圍，正常情況下，陽性對照孔A值≥0.8。C.6附注C.6.1 要求使用有衛(wèi)生部批準(zhǔn)生產(chǎn)文號試劑盒。C.6.2 具體操作方法詳見試劑盒說明。C.7 技術(shù)依據(jù)衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)WS

301-2008。10DB12/T

534—2014DD附

錄

D（資料性附錄）抗-HAV

IgG

檢測操作規(guī)程D.1 原理以ELISA法檢測。根據(jù)固相酶聯(lián)夾心法，包被在固相載體上的羊抗人μ鏈抗體與血清標(biāo)本中特異性IgG抗體結(jié)合，以后加入酶標(biāo)記甲肝抗原與特異性抗-HAV

IgG結(jié)合。在酶底物作用下顯色反應(yīng)，檢測血清中是否存在特異性抗-HAV

D.2 設(shè)備和材料D.2.1

恒溫水溫箱。D.2.2

酶標(biāo)儀。D.2.3

可調(diào)式微量移液器。D.2.4

臺式離心機。D.2.5

冰箱。D.2.6

聚苯乙烯微量板。D.2.7

試管架。D.3 試劑D.3.1

酶標(biāo)板，8*12孔。D.3.2

空白對照，1

D.3.3

標(biāo)準(zhǔn)品（2

D.3.4

酶標(biāo)試劑，12

D.3.5

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，8

D.3.6

濃縮洗滌液，20

D.3.7

顯色劑A液，

6

ml*1瓶。D.3.8

顯色劑B液，

6

ml*1瓶。D.3.9

終止液（2

6

ml*1瓶。D.3.10

自封袋，1個。D.3.11

封板膜，2張。D.4 操作D.4.1

加樣：空白對照、標(biāo)準(zhǔn)品、血清標(biāo)本每孔加入50

μl，37℃

45

D.4.2

洗滌：棄去反應(yīng)孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，洗滌5次。D.4.3

加酶標(biāo)記物：每孔加入酶標(biāo)記物100

30

D.4.4

洗滌：棄去反應(yīng)孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，洗滌5次。D.4.5

顯色：每孔加入顯色反應(yīng)液A，顯色反應(yīng)液B各50

μl，37℃暗處

5

min。11DB12/T

534—2014D.4.6 終止：每孔加入終止液50

D.5結(jié)果判定D.5.1 酶標(biāo)儀測定波長450

nm以空白對照孔校零，測定樣品及標(biāo)準(zhǔn)品對照孔OD值。D.5.2 臨界值=標(biāo)準(zhǔn)品（300

IU/ml）對照孔OD值均值樣本OD值≥臨界值為陽性；樣本OD值＜臨界值為陰性。D.6 附注D.6.1 要求使用有衛(wèi)生部批準(zhǔn)生產(chǎn)文號試劑盒。D.6.2 具體操作方法詳見試劑盒說明。D.7 技術(shù)依據(jù)衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)WS

298-2008。12DB12/T

534—2014EE附

錄

E（資料性附錄）抗-HEV

IgG

檢測操作規(guī)程E.1 原理以ELISA法檢測。在微孔條上預(yù)包被高純度基因重組HEV

ORF-2/ORF-3抗原，可與樣品中抗-HEV

IgG

測血清中是否存在特異性抗-HEV

IgG。E.2設(shè)備和材料E.2.1

恒溫水溫箱。E.2.2

酶標(biāo)儀。E.2.3

可調(diào)式微量移液器。E.2.4

臺式離心機。E.2.5

冰箱。E.2.6

聚苯乙烯微量板。E.2.7

試管架。E.3 試劑E.3.1

HEV-IgG酶標(biāo)微孔板，8*12孔。E.3.2

HEV-IgG陰性對照，0.5

E.3.3

HEV-IgG陽性對照，0.5

E.3.4

HEV-I