長江口中華絨螯蟹增殖放流技術規(guī)程編制說明

《長江口中華絨螯蟹增殖放流技術規(guī)程》編制說明任務來源長江口是我國漁業(yè)種質資源的寶庫，水產資源豐富，而且還棲息著多種名貴珍稀水生動物，長江口漁場亦曾是我國著名的漁場之一，孕育著冬蟹等五大漁汛；同時，長江口豐富的蟹苗等苗種資源支撐著我國中華絨螯蟹等主導水產養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，中華絨螯蟹是長江口可以向全國輸出苗種的最主要種質資源。中華絨螯蟹天然蟹苗以長江口資源的蘊藏量居首位，產區(qū)的年產蟹苗可達數(shù)千公斤乃至數(shù)萬公斤。20世紀80年代以前，長江口區(qū)蟹苗有過67.9噸的高產量，是我國最大的中華絨螯蟹產卵場。如2007年僅長江口崇明縣河蟹產量高達1.2萬噸，其中商品蟹產量8000噸，蟹種產量4000噸，實現(xiàn)總產值8.5億元以上。長江口中華絨螯蟹的苗種資源和優(yōu)良種質基礎支撐著我國中華絨螯蟹養(yǎng)殖的發(fā)展，全國中華絨螯蟹養(yǎng)殖年產量達60萬噸，年產值300多億元。長江口是長江中華絨螯蟹苗種的集中產地，是我國最大的中華絨螯蟹產卵場。長江徑流量大，河口淺灘廣闊，是中華絨螯蟹得天獨厚的產卵場，加之長江源遠流長，中下游平原地區(qū)有眾多的附屬水體。這些水體中水草茂盛，餌料豐富，對于中華絨螯蟹生長育肥十分有利，由此形成了極具特色的長江水系中華絨螯蟹品系，長江水系中華絨螯蟹具有生長速度快，個體肥大，肉質細嫩，味道鮮美等優(yōu)良特點。然而，至80年代末，由于生態(tài)環(huán)境的變化和過度捕撈，天然蟹苗量急劇下降，年產量僅有幾百公斤，2000年以來已難以形成汛期。上世紀90年代末期，中華絨螯蟹人工繁育技術的成熟，使人工蟹苗成為商品蟹生產所需苗種的主要來源，然而，由于長江口中華絨螯蟹的優(yōu)質品質，仍然吸引了大量漁民對天然蟹苗的高強度捕撈，導致天然蟹苗資源銳減，種質衰退。然而，目前關于長江中華絨螯蟹增殖的技術標準仍沒有起草頒布，亟待開展前期研究，為標準的制定提供支撐?！堕L江口中華絨螯蟹增殖放流技術規(guī)程》的標準制定任務由滬市監(jiān)標技〔2022〕371號“上海市市場監(jiān)督管理局關于下達2022年度第三批上海市地方標準制修訂項目計劃的通知”文件下達。項目承擔單位為中國水產科學研究院東海水產研究所。項目成果將對長江口水生生物的增殖放流與效果評估工作起到科學示范作用，具有重要的經濟效益、生態(tài)效益與社會效益。標準編制目的和意義目前國內關于長江口中華絨螯蟹增殖放流技術的標準未見公開。本標準編制的目的是建立長江口中華絨螯蟹增殖放流技術規(guī)程，以此來規(guī)范上海市在長江口進行中華絨螯蟹增殖放流活動。為了恢復長江中華絨螯蟹天然資源，長江沿岸省市進行了人工放流蟹苗和親蟹等措施，特別是長江口地區(qū)的親蟹增殖放流活動，以期使天然蟹苗資源得到有效恢復。近年來中國水產科學研究院東海水產研究所通過承擔國家重點研發(fā)計劃課題、國家自然科學基金面上項目、國家農業(yè)行業(yè)專項、上海市中華絨螯蟹現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系等各類科研項目，每年在長江口放流中華絨螯蟹親蟹親本10多萬只，并開展了大規(guī)模標志和效果評估，成效顯著。經多年的中華絨螯蟹親蟹增殖放流，已積累了一定的放流理論基礎和技術經驗，基于相關理論基礎和技術，制訂《長江口中華絨螯蟹增殖放流技術規(guī)程》并在水產行業(yè)中進行推廣，對于規(guī)范長江口中華絨螯蟹增殖放流、保護水生生物資源、促進漁業(yè)種群資源恢復，具有積極的現(xiàn)實意義。編制過程（一）起草單位起草單位：中國水產科學研究院東海水產研究所、上海市水產研究所、上海喜耕環(huán)保科技有限公司（二）標準主要起草人員及其所做的工作項目負責單位中國水產科學研究院東海水產研究所，按照標準主要內容涉及的相關范疇，結合單位和專業(yè)技術人員情況，由中國水產科學研究院東海水產研究所、上海市水產研究所和上海喜耕環(huán)?？萍加邢薰镜葐挝坏?名專業(yè)技術人員組成了標準起草小組，標準主要起草人為馮廣朋，莊平，趙峰，張濤，施永海，陳桂芹。并按標準內容要求進行分工負責、協(xié)調編制（見表1），保證了編制任務按期完成。表1本標準主要起草人及任務分工姓名職務/職稱工作單位任務分工馮廣朋研究員中國水產科學研究院東海水產研究所制定標準研究方案，收集資料、企業(yè)調研、標準文本、編制說明起草莊平研究員中國水產科學研究院東海水產研究所規(guī)程檢驗、驗證與標準編寫工作趙峰研究員中國水產科學研究院東海水產研究所參加放流技術參數(shù)的驗證工作張濤研究員中國水產科學研究院東海水產研究所參加效果評估技術優(yōu)化和參數(shù)驗證工作施永海研究員上海市水產研究所參加調研、數(shù)據(jù)的收集，種質標準和質量控制研究陳桂芹高工上海喜耕環(huán)?？萍加邢薰緟⒓诱{研、數(shù)據(jù)收集、整理和分析（三）主要工作過程中國水產科學研究院東海水產研究所先后承擔了國家重點研發(fā)計劃課題“典型漁業(yè)水域生境修復與生物資源養(yǎng)護技術（2019YFD0901205）”“河口生態(tài)多元化增殖模式集成創(chuàng)新示范（2020YFD0900805）”、國家自然科學基金面上項目“基于生境適宜性的長江口中華絨螯蟹產卵場變動機理研究（31972795）”、國家農業(yè)行業(yè)專項“淡水水生生物資源增殖放流及生態(tài)修復技術研究”“長江口重要漁業(yè)資源養(yǎng)護與利用關鍵技術集成與示范”、上海市中華絨螯蟹現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系（滬農科產字2017-4號）等項目研究，組織了2家科研院所的專業(yè)隊伍，具備制定、修訂和審查相關標準的專業(yè)技術人員，從事本標準起草工作。起草小組收集了相關國家標準和行業(yè)標準等，系統(tǒng)分析了長江口增殖放流相關情況，放流技術規(guī)范要點，調研了長江口中華絨螯蟹增殖放流情況，分析影響放流技術與成活率的主要環(huán)節(jié)，獲取了大量自測或文獻來源的放流技術信息。在參照GB/T1.1-2020編寫標準等標準的基礎上，經過以下三個階段的工作，完成了標準文本編制。（1）編制起草階段時間為2022年1月~2022年3月。收集整理長江口中華絨螯蟹資源相關數(shù)據(jù)以及水質測定數(shù)據(jù)，完成數(shù)據(jù)標準化處理，研究數(shù)據(jù)間的關聯(lián)關系，積累項目開展所需的背景資料。對收集到的各種技術參數(shù)進行分析研究，完成標準文本起草稿。（2）試驗驗證階段時間為2022年4月~2022年6月。驗證親蟹的標志技術，對親蟹的生物學數(shù)據(jù)進行測定，包括親蟹殼長殼寬、體質量、性別、性腺重量與發(fā)育程度、攝食強度、懷卵量等。對放流水域的生態(tài)環(huán)境進行系統(tǒng)監(jiān)測，掌握變化規(guī)律和相關特征。將所得的實驗數(shù)據(jù)與有關參考文獻中的數(shù)據(jù)進行比對，經綜合分析最終確定為本標準中各參數(shù)數(shù)據(jù)。（3）征求意見階段時間為2023年6月~2023年7月。標準起草稿形成后，編制小組結合試驗驗證數(shù)據(jù)和相關文獻進行了匯總，統(tǒng)一對起草稿修改后形成了“征求意見稿”，并編制了相關“編制說明”，發(fā)出《征求意見稿》，咨詢該標準制定過程中的不足，聽取各專家的意見，力爭使該標準全面、準確，完善標準內容。編制原則本標準為漁業(yè)資源增殖放流技術規(guī)程，基于產業(yè)需求與資源養(yǎng)護等角度考慮，在編制過程中堅持通用性原則、科學性原則、實用性原則及兼容性原則，確定統(tǒng)一的質量等級標準，建立完備的增殖放流技術操作規(guī)程。標準的主要技術內容課題組前期通過知網(wǎng)空間、中國知網(wǎng)、百鏈、百度學術、水科院圖書館、Pubmed—NCBI、Webofscience、Sciencedirect等學術網(wǎng)站檢索查詢，完成了長江口中華絨螯蟹增殖放流技術規(guī)程相關信息的收集歸納，包含標準方法、綜述和研究性論文等100余篇。初步研究了主要技術研究內容，包括適用范圍、親體質量要求、檢驗規(guī)則、標志技術、跟蹤調查技術、效果評估方法等。在本市屬首次制訂，在無現(xiàn)行標準的前提下，編制主要依據(jù)和參考現(xiàn)行的水產品等級規(guī)格、水生生物增殖放流技術規(guī)程等有關標準。GB/T26435中華絨螯蟹親蟹、苗種GB/T12763.9海洋調查規(guī)范第9部分：海洋生態(tài)調查指南SC/T9102.2漁業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測規(guī)范第2部分：海洋SC/T9102.3漁業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測規(guī)范第3部分：淡水NY5070無公害食品水產品中漁藥殘留限量SC/T1099中華絨螯蟹人工育苗技術規(guī)范SC/T7014水生動物檢疫實驗技術規(guī)范SC/T9401水生生物增殖放流技術規(guī)程（1）適用范圍本標準規(guī)定了長江口中華絨螯蟹（Eriocheirsinensis）增殖放流的相關技術要求，包括水域條件、本底調查、放流物種質量、檢驗、標志、包裝、計數(shù)、運輸、投放、跟蹤調查和效果評估等技術要求。適用于在上海市長江口進行的中華絨螯蟹親蟹增殖放流。（2）質量要求親體來源符合SC/T9401的規(guī)定，為長江水域原種親蟹或中華絨螯蟹原種場經人工培育而成的子一代親蟹。培育單位應持有國家或省級漁業(yè)主管部門發(fā)放的《水產苗種生產許可證》。二者均需要檢疫合格，并以SC/T9401為主要參考依據(jù)。親體的來源是人工繁殖關鍵所在，直接關系到親體質量。故親體來源是親體質量的基礎標準之一。親體質量要求以GB/T26435主要參考依據(jù)，對親體種質、規(guī)格、疾病、藥物殘留、性比等方面進行規(guī)定。同時課題組近幾年主持了國家重點研發(fā)計劃課題“典型漁業(yè)水域生境修復與生物資源養(yǎng)護技術（2019YFD0901205）”“河口生態(tài)多元化增殖模式集成創(chuàng)新示范（2020YFD0900805）”、國家自然科學基金面上項目“基于生境適宜性的長江口中華絨螯蟹產卵場變動機理研究（31972795）”、上海市中華絨螯蟹現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系（滬農科產字2017-4號）等項目研究，每年在長江口標志中華絨螯蟹2萬只，并放流10多萬只親蟹，對比了放流水域和不同技術參數(shù)的增殖情況，開展了增殖放流效果評估，取得了大量的一手技術數(shù)據(jù)。2020年11月調研了上海樣樣紅養(yǎng)殖公司和上海浦東塘之趣公司（已通過上海市自然水域漁業(yè)資源增殖放流中華絨螯蟹種質鑒定）的中華絨螯蟹親蟹培育過程，取得了種質質量參數(shù)，為《長江口中華絨螯蟹增殖放流技術規(guī)程》標準草案的撰寫提供支撐。確定了放流中華絨螯蟹性比為雌雄比3:1最合適。雌蟹體重110g以上，雄蟹體重130g以上。放流親體規(guī)格合格率≥90%。放流親體死亡率與傷殘率之和≤5%。現(xiàn)場規(guī)格測定，抽樣數(shù)量不少于50只。每袋親體數(shù)量以15只～20只為宜。（3）檢驗規(guī)則種質檢驗以GB/T26435的要求為主要參考依據(jù)；疾病檢疫以SC/T7014的要求為主要參考依據(jù)；藥物殘留檢驗以NY5070的要求為主要參考依據(jù)。檢驗規(guī)則以SC/T9401為主要參考依據(jù)。（4）標志技術采取標簽和套環(huán)的方法對放流親體進行雙重標志。中華絨螯蟹標志用外標簽由粘膠層、基質層、油墨層和覆膜層組成，其特征是該標簽為橢圓形，長度為1.5-2.5厘米，寬度為0.7-1.5厘米，這個規(guī)格可以減少因摩擦而導致的標志脫落概率，而且在保證最大化的方便識別前提下，可以較好較快地在不平整的蟹背殼上進行標志粘貼。通過2011年以來的放流試驗證明，采用外標簽與套環(huán)兩種技術同時標志時，效果較好：每只親蟹均有唯一的編碼，價格低廉，檢測方便，保持時間長，保持率90%以上，具有防偽功能，標志對蟹的存活與攝食無顯著性影響。圖1中華絨螯蟹外標簽與套環(huán)標志（5）跟蹤調查技術在長江口典型區(qū)域設立監(jiān)測船，分別派人上船持續(xù)監(jiān)測，對船只情況、日捕總網(wǎng)次、日總產量、日捕蟹總個數(shù)、被標志個數(shù)，雌蟹與雄蟹個數(shù)等生物學數(shù)據(jù)進行詳細記錄，研究分析中華絨螯蟹洄游親蟹數(shù)量、規(guī)格、性比等特征，并且對回收的標志蟹進行取樣監(jiān)測，掌握放流后中華絨螯蟹的生理變化。（6）效果評估方法通過對標志放流親蟹回捕數(shù)據(jù)，從親蟹洄游路徑、洄游速度、分布區(qū)域、資源評估和放流貢獻率等方面對放流效果進行評估。2010年～2012年，中國水產科學研究院東海水產研究所連續(xù)3年開展了中華絨螯蟹人工標記放流，通過對標記放流親蟹的跟蹤監(jiān)測結果進行分析，目前長江口中華絨螯蟹的洄游通道和產卵場無明顯變遷。鑒于目前長江北支趨于淤塞，咸潮倒灌，南支為長江口區(qū)中華絨螯蟹主要入海通道，多數(shù)親蟹經南支順流而下進入半咸水，長江北支很少有親蟹分布。通過對標志放流親蟹回捕數(shù)據(jù)，得到放流親蟹在長江口的移動速度為3-7公里/天，具體放流標志蟹移動速度見下表。表2放流標志蟹移動速度捕獲數(shù)量（只）移動時間（天）移動距離（公里）速度（公里/天）1739.1595.599745.9326.5631045.014.5031043.294.3391044.0764.41221144.4214.0411148.2114.3831338.1582.94長江北支趨于淤塞，咸潮倒灌，長江北支很少有親蟹分布。南支為長江口區(qū)中華絨螯蟹主要入海通道，多數(shù)親蟹經南支順流而下進入半咸水。親蟹進入長江口南支，在到達長興島時，分成了兩支洄游群體，一支沿崇明島與長興島之間的水道，抵達1號產卵場，另一支沿長興島南側洄游至九段沙時再分成兩支，一支經北槽抵達銅沙東南的2號產卵場，而另一支沿南支的南槽抵達九段沙東面的3號產卵場。親蟹主要經長江口南支洄游形成3個產卵場區(qū)域，分布于長江口南支北港、南支南港北槽和南支南港南槽東部東經122.40°附近水域。圖2長江口親蟹產卵場的分布范圍主要試驗情況及分析1長江口中華絨螯蟹成蟹資源現(xiàn)狀及其繁殖特征1.1樣品采集實驗于冬季、采用刺網(wǎng)捕撈方式在長江口水域進行中華絨螯蟹成蟹資源調查，共設置崇明西灘、崇明東灘、橫沙淺灘和九段沙4個調查站位。調查期間，每個調查站位設置1艘調查船，單船每日放置10條刺網(wǎng)（每條刺網(wǎng)網(wǎng)高1.6m、網(wǎng)長100m），放置時長為一個潮水周期，起網(wǎng)后將中華絨螯蟹樣品保存待測。參考長江口中華絨螯蟹的歷史調查資料，調查時間為11月至翌年4月，11月至翌年2月期間每周調查一次，翌年2月至4月期間每兩周調查一次，具體時間根據(jù)實際情況（如資源量多少、天氣狀況等）進行調整。圖3中華絨螯蟹資源調查站位1.2室內分析根據(jù)調查船的捕撈量數(shù)據(jù)統(tǒng)計各調查站位的單網(wǎng)每日漁獲量（CPUE）；分別記錄雄蟹、未抱卵雌蟹和抱卵蟹的數(shù)量，測量其頭胸甲長（L）和體質量（W）；中華絨螯蟹抱卵率為每次調查所捕抱卵蟹數(shù)量與雌蟹總數(shù)的比值；采用傳統(tǒng)重量法統(tǒng)計抱卵蟹的繁殖力。首先稱量抱卵蟹卵塊的總質量，取少量卵粒并在解剖鏡下統(tǒng)計其數(shù)量，重復3次后換算卵子總數(shù)量，即為其絕對繁殖力，絕對繁殖力與其體質量的比值為相對繁殖力。1.3結果與分析1.3.1中華絨螯蟹性比的時間變化調查期所采885只中華絨螯蟹樣本，其中雌性235只,雄性650只，總體雌雄比為0.36:1,該值與1:1有極顯著性差異（x2=74.49,P<0.01），其中崇明西灘汛初期雌蟹比例為48.68%，汛末期下降至29.63%；崇明東灘汛初期雌蟹比例為27.69%，隨后呈上升趨勢，至調查結束雌蟹比例上升至50.00%；橫沙淺灘雌蟹比例呈波動升高趨勢，至調查結束雌蟹比例達到75.00%；九段沙雌蟹比例基本維持在20.00%的水平。崇明西灘、崇明東灘、橫沙淺灘和九段沙水域中華絨螯蟹的平均雌雄比分別為0.40:1、0.56:1、0.58:1、0.27:1，x2檢驗結果表明九段沙中華絨螯蟹雌雄比顯著小于其他3個調查站位（P<0.05），其他調查站位間無顯著性差異。圖4長江口雌蟹比例的時間變化1.3.2中華絨螯蟹抱卵率的時間變化中華絨螯蟹抱卵個體最早出現(xiàn)在12月份，主要集中在崇明東灘和九段沙水域，抱卵率分別為38.10%和33.33%，而橫沙淺灘水域直到3月份才捕到抱卵蟹。其中，調查期間九段沙水域均可捕到抱卵蟹,抱卵率先降后升，2月份抱卵率最低；與九段沙水域不同，1—3月在崇明東灘水域均無抱卵蟹分布；而4月份橫沙水域所捕雌蟹均為抱卵蟹。表3中華絨螯蟹抱卵率的時間變化月份Month12月December1月January2月February3月March4月April崇明東灘ChongmingDongtan38.10%///50.00%橫沙淺灘HengshaShoal///75.00%100.00%九段沙Jiuduansha33.33%16.67%2.44%24.14%50.00%2鹽度對中華絨螯蟹繁殖性能的影響2.1中華絨螯蟹準備中華絨螯蟹準備實驗從2020年11月中旬開始，所用親蟹均取自江蘇省高郵湖養(yǎng)殖場，挑選蟹肢健全、活力較好的雌蟹240只[（111.48±20.86）g]、雄蟹120只[（125.84±8.10）g]，共360只，運至中國水產科學研究院東海水產研究所實驗室。雌、雄蟹一起暫養(yǎng)于4個淡水圓形玻璃鋼水槽中（直徑1.8m、高0.8m,水深保持在50cm）7d，每缸90只。暫養(yǎng)條件為水溫（11.5±3.5）℃、溶解氧（7.0±0.5）mg·L-1、pH7.0～7.5。每天上午9∶00投喂去殼縊蟶（Sinonovaculaconstricta），投喂量為蟹體質量的3%～5%，同時清除水中的殘餌，換水量根據(jù)當天水質情況定為總量的1/2～2/3，以保證水質清潔。2.2不同鹽度下中華絨螯蟹的交配和產卵從暫養(yǎng)水槽中取雌蟹10只、雄蟹5只作為一個重復組，放入用鹽鹵配制的0、2、4、6、8鹽度的水槽中（直徑1.0m、高0.6m）,池中水深為25cm。每只雄蟹的甲殼上進行數(shù)字和熒光的雙重標記，通過視頻攝像系統(tǒng)（DS-2CD3T46WD-I3，杭州?？低暎慌湫袨楹徒慌溥^程進行監(jiān)控。同時，每個鹽度分別設置兩個正常養(yǎng)殖組，一個組中放10只雄蟹，另一個組中放10只雌蟹，作為未交配對照。交配試驗組和正常養(yǎng)殖組每個鹽度均設3個重復。交配實驗持續(xù)20d。20d后根據(jù)觀察記錄結果，補充了鹽度1、3、5等3個梯度，旨在精確了解中華絨螯蟹交配的最低鹽度閾值和適宜鹽度范圍。2.3結果與分析2.3.1鹽度對雌蟹交配率和產卵率的影響待親蟹交配完成后，對所有雌蟹進行解剖，發(fā)現(xiàn)鹽度為0（淡水）時雌、雄蟹并未交配成功。圖5顯示鹽度1～6范圍內中華絨螯蟹雌蟹的交配率情況。在鹽度1的水體中，中華絨螯蟹可以交配，但此時交配率較低，僅為（6.67±5.77）%。當鹽度升高到4～6時，交配率大幅度上升，可達70%以上，且與鹽度1、2、3組間有顯著差異（P<0.05）。圖5低鹽度下中華絨螯蟹雌蟹的交配率圖6和圖7分別表示鹽度6～21范圍內雌蟹的交配率和產卵率情況。當水體鹽度高于6時，隨鹽度的增加，中華絨螯蟹的交配率呈先升高后下降再升高的趨勢，當鹽度為21時，雌蟹交配率最高，接近100%。產卵的鹽度下限為6,此時的產卵率為（40.97±4.91）%,顯著低于鹽度9、12、15、18和21組（P<0.05），此后隨著鹽度的增加，各組的產卵率均保持在80%左右。圖6不同鹽度下中華絨螯蟹雌蟹的交配率圖7不同鹽度下中華絨螯蟹雌蟹的產卵率3不同發(fā)育階段中華絨螯蟹對底質的喜好性采用單因子實驗方法，研究了不同發(fā)育階段中華絨螯蟹對泥、泥沙（泥：沙=1:1）、中沙（0.35mm-0.5mm）、細沙（0.25mm-0.35mm）四種底質的喜好性。中華絨螯蟹個體對底質喜好性結果表明抱卵蟹個體停留在泥、泥沙、中沙和細沙底質上的時間百分比均為25%，對底質的選擇無顯著性差異（P＞0.05）。親蟹個體停留在泥、泥沙、中沙和細沙底質上的時間百分比