2022屆新高考一輪復(fù)習(xí)第10章第3講基因工程含生物技術(shù)的安全性和倫理問題教案

第10章生物技術(shù)技術(shù)與工程第3講基因工程(含生物技術(shù)的安全性和倫理問題)考綱要求核心素養(yǎng)1.基因工程的誕生Ⅰ2．基因工程的原理及技術(shù)(含DNA的粗提取與鑒定)Ⅱ3．基因工程的應(yīng)用Ⅱ4．蛋白質(zhì)工程Ⅰ5．轉(zhuǎn)基因生物的安全性Ⅰ6．生物武器對(duì)人類的威脅Ⅰ7．生物技術(shù)中的倫理問題Ⅰ生命觀念結(jié)合生活或生產(chǎn)實(shí)例，利用基因的結(jié)構(gòu)與功能理解基因工程的原理及蛋白質(zhì)工程的概念及流程。科學(xué)探究針對(duì)人類生產(chǎn)或生活的需求，選取恰當(dāng)?shù)幕蚬こ碳夹g(shù)和方法，嘗試提出初步的工程學(xué)構(gòu)想，進(jìn)行簡(jiǎn)單的設(shè)計(jì)和制作。社會(huì)責(zé)任面對(duì)日常生活或社會(huì)熱點(diǎn)話題中與基因工程有關(guān)的話題，基于證據(jù)運(yùn)用生物學(xué)基本概念和原理，就基因工程與安全性表明自己觀點(diǎn)并展開討論。一、基因工程的操作工具1.基因工程的概念(1)供體：提供目的基因。(2)操作環(huán)境：體外。(3)操作水平：分子水平。(4)原理：基因重組。(5)受體：表達(dá)目的基因。(6)本質(zhì)：性狀在受體體內(nèi)的表達(dá)。(7)優(yōu)點(diǎn)：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，定向改造生物的遺傳性狀。2.DNA重組技術(shù)的基本工具(1)限制性核酸內(nèi)切酶(簡(jiǎn)稱：限制酶)①來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。②作用：識(shí)別特定的核苷酸序列并切開特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。③結(jié)果：產(chǎn)生黏性末端或平末端。(2)DNA連接酶①種類：按來源可分為E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。②作用：將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。③DNA連接酶和限制酶的關(guān)系(3)載體①種類：質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒等。②質(zhì)粒的特點(diǎn)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(能自我復(fù)制,有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn),有特殊的標(biāo)記基因))eq\o\ac(○,3)載體的作用及作為載體的條件(1)作用：①作為運(yùn)載工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi)。②利用它在受體細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制。(2)條件與目的條件目的對(duì)受體細(xì)胞無害不影響受體細(xì)胞正常的生命活動(dòng)在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并大量復(fù)制目的基因數(shù)量可擴(kuò)增有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)以便與外源基因連接具有特殊的標(biāo)記基因以便將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來【探究·實(shí)踐】DNA的粗提取與鑒定1.實(shí)驗(yàn)原理(1)DNA與蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同溶解規(guī)律2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液DNA溶解析出蛋白質(zhì)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度從2mol/L逐漸降低的過程中，溶解度逐漸增大部分發(fā)生鹽析沉淀溶解(2)DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理可將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。(3)DNA與二苯胺沸水浴加熱，呈藍(lán)色。2.操作流程材料的選取：選用DNA含量相對(duì)較高的生物組織↓破碎細(xì)胞(以雞血為例)：雞血細(xì)胞→加蒸餾水→用玻璃棒攪拌→用紗布過濾→收集濾液↓eq\x(去除雜質(zhì)：)利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)↓DNA的析出：將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液↓DNA的鑒定：在溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑，混合均勻后將試管置于沸水中加熱5min，溶液變成藍(lán)色二、基因工程的操作過程與應(yīng)用1.基因工程的操作過程與應(yīng)用目的基因的篩選與獲取(1)基因工程的操作步驟目的基因的篩選與獲?、佟╝.篩選合適的目的基因b.利用PCR獲取和擴(kuò)增目的基因）↓②eq\x(基因表達(dá)載體的構(gòu)建)—組成eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(a.目的基因,b.啟動(dòng)子,c.終止子,d.標(biāo)記基因))↓③eq\x(將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞)—方法↓④eq\x(目的基因的檢測(cè)與鑒定)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(a.利用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因的有無,b.利用分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因的轉(zhuǎn)錄,c.利用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因的翻譯,d.利用個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定檢測(cè)重組性狀的表達(dá)))（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建eq\o\ac(○,1)基因表達(dá)載體的組成及作用eq\o\ac(○,2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程(3)目的基因?qū)氩煌荏w細(xì)胞的過程生物種類植物動(dòng)物微生物常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射技術(shù)感受態(tài)細(xì)胞法受體細(xì)胞體細(xì)胞或受精卵受精卵原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上→表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動(dòng)物Ca2＋處理細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞→重組表達(dá)載體DNA分子與感受態(tài)細(xì)胞混合→感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子(4)基因工程的應(yīng)用：培育轉(zhuǎn)基因植物和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，生產(chǎn)基因工程藥物，進(jìn)行基因治療。2.蛋白質(zhì)工程(1)流程圖寫出流程圖中字母代表的含義：A.轉(zhuǎn)錄，B.翻譯，C.分子設(shè)計(jì)，D.多肽鏈，E.預(yù)期功能。(2)結(jié)果：改造了現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造出新的蛋白質(zhì)。(3)應(yīng)用：主要集中應(yīng)用于對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，改良生物性狀。三、生物技術(shù)的安全性和倫理問題1.轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性(1)轉(zhuǎn)基因成果eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(工程菌——重組微生物,基因制藥,轉(zhuǎn)基因優(yōu)良家畜、家禽,生物反應(yīng)器——生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品,轉(zhuǎn)基因抗性農(nóng)作物))(2)對(duì)安全性問題的爭(zhēng)論①轉(zhuǎn)基因生物與食物安全②轉(zhuǎn)基因生物與生物安全③轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全：轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性和人類生活環(huán)境造成破壞。(3)理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)①正視轉(zhuǎn)基因技術(shù)可能帶來的安全性問題，要趨利避害，不能因噎廢食。②制定政策和法規(guī)，最大程度保證轉(zhuǎn)基因技術(shù)和產(chǎn)品的安全性。2.關(guān)注生物技術(shù)的倫理問題反對(duì)支持克隆人倫理方面違反了人類的倫理道德觀念，中國(guó)禁止生殖性克隆中國(guó)不反對(duì)治療性克隆技術(shù)方面技術(shù)不成熟，流產(chǎn)率高、畸形率高、出生后死亡率高可通過胚胎分級(jí)、基因診斷、染色體檢查等方法解決技術(shù)問題設(shè)計(jì)試管嬰兒胚胎也是生命，殺死胚胎無異于“謀殺”提供骨髓造血干細(xì)胞并不會(huì)對(duì)試管嬰兒造成損傷基因檢測(cè)技術(shù)方面很難用在具體醫(yī)療中有一些遺傳性疾病可以通過基因檢測(cè)后在早期采取預(yù)防措施道德方面可能引起基因歧視通過正確的科學(xué)知識(shí)傳播、倫理道德教育和立法，解決基因歧視現(xiàn)象3.禁止生物武器(1)生物武器的種類(連線)(2)我國(guó)政府觀點(diǎn)：在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。1．應(yīng)用限制性核酸內(nèi)切酶可將DNA片段定點(diǎn)切割，在此斷開的鍵是（）A．高能磷酸鍵 B．肽鍵 C．氫鍵 D．磷酸二酯鍵【解析】本題考查限制性核酸內(nèi)切酶。ATP水解酶能夠?qū)TP水解為ADP和Pi，因此能夠使高能磷酸鍵斷裂，A項(xiàng)錯(cuò)誤；肽酶能夠?qū)⒍嚯乃庑纬砂被?，因此作用部位為肽鍵，B項(xiàng)錯(cuò)誤；解旋酶的作用部位為氫鍵，C項(xiàng)錯(cuò)誤；限制酶的作用部位為磷酸二酯鍵，D項(xiàng)正確。【答案】D2．在基因表達(dá)載體的構(gòu)建中，下列說法正確的是（）①一個(gè)基因表達(dá)載體的組成只包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子②有了啟動(dòng)子才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA③終止子的作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止④所有基因表達(dá)載體的構(gòu)建是完全相同的⑤必須在細(xì)胞外進(jìn)行A．②③⑤B．①④ C．①②⑤D．③④【解析】本題考查基因表達(dá)載體的構(gòu)建?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建的目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用?；虮磉_(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因。①基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心內(nèi)容，一個(gè)表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還有啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，①錯(cuò)誤；②啟動(dòng)子在基因的首端，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始，②正確；③終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束，③正確；④由于受體細(xì)胞有植物、動(dòng)物以及微生物之分，以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同，因此基因表達(dá)載體的構(gòu)建是不完全相同的，④錯(cuò)誤；基因表達(dá)載體的構(gòu)建必須在細(xì)胞外進(jìn)行，⑤正確。②③⑤正確，①④錯(cuò)誤。故選A?！敬鸢浮緼3．下列有關(guān)質(zhì)粒的敘述，正確的是（）A．質(zhì)粒是廣泛分布于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀細(xì)胞器B．質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的小型單鏈環(huán)狀DNA分子C．質(zhì)粒只有在侵入宿主細(xì)胞后，才能再完成復(fù)制D．基因工程中常用的載體除了質(zhì)粒外，還有動(dòng)植物病毒、λ噬菌體的衍生物【解析】本題考查質(zhì)粒。質(zhì)粒是一種裸露的、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA（或酵母菌細(xì)胞核）之外，具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子，不屬于細(xì)胞器，A項(xiàng)錯(cuò)誤，B項(xiàng)錯(cuò)誤；質(zhì)?？梢栽谠屑?xì)胞中復(fù)制，在體外，若給予適宜的條件，質(zhì)粒也可能進(jìn)行復(fù)制，C項(xiàng)錯(cuò)誤；基因工程中的載體除了質(zhì)粒外，還有動(dòng)植物病毒以及λ噬菌體的衍生物，D項(xiàng)正確?！敬鸢浮緿4．基因疫苗是將病原微生物的一段基因插入到質(zhì)粒上，然后將重組質(zhì)粒導(dǎo)入人或動(dòng)物體內(nèi)，這段基因編碼的產(chǎn)物可以引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)。下列敘述正確的是（）A．基因疫苗導(dǎo)入人體可以表達(dá)出抗體，加強(qiáng)免疫應(yīng)答反應(yīng)B．基因疫苗引起免疫反應(yīng)前，目的基因必須經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程C．基因疫苗內(nèi)含有特定的抗原，所以能引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)D．接種后若感染此病原微生物，則體內(nèi)記憶細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生大量抗體【解析】本題考查基因工程的應(yīng)用，基因疫苗?；蛞呙鐚?dǎo)入人體可以表達(dá)出抗原，在抗原的刺激下可以引起機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，A項(xiàng)錯(cuò)誤；基因疫苗引起免疫反應(yīng)前，病原微生物的一段基因（目的基因）必須經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程表達(dá)出抗原，B項(xiàng)正確；基因疫苗內(nèi)含控制抗原合成的基因，該基因的表達(dá)產(chǎn)物能引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，C項(xiàng)錯(cuò)誤；接種后若感染此病原微生物，則體內(nèi)記憶細(xì)胞會(huì)迅速增殖分化產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞，進(jìn)而產(chǎn)生大量的抗體，D項(xiàng)錯(cuò)誤?！敬鸢浮緽5．動(dòng)物基因工程前景廣闊，最令人興奮的是利用基因工程技術(shù)使哺乳動(dòng)物成為乳腺生物反應(yīng)器，以生產(chǎn)所需要的藥品，如轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素?？茖W(xué)家培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物成為乳腺生物反應(yīng)器時(shí)，下列說法錯(cuò)誤的是（）A．利用基因工程將人的生長(zhǎng)激素導(dǎo)入到受體哺乳動(dòng)物體內(nèi)B．需要將乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子與目的基因重組在一起C．利用顯微注射法將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胧芫阎蠨．受體動(dòng)物需要進(jìn)入泌乳期才能成為“批量生產(chǎn)藥物的工廠”【解析】本題考查基因工程的應(yīng)用。利用基因工程將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)氲绞荏w哺乳動(dòng)物體內(nèi)，而不是生長(zhǎng)激素，A項(xiàng)錯(cuò)誤；構(gòu)建重組質(zhì)粒需要將人的生長(zhǎng)激素基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，B項(xiàng)正確；將重組質(zhì)粒導(dǎo)入動(dòng)物受精卵，常通過顯微注射法導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵，然后將受精卵送入母體內(nèi)使其生長(zhǎng)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，C項(xiàng)正確；由于轉(zhuǎn)入的目的基因在乳腺中可以高效表達(dá)，利用乳腺可以分泌蛋白的特性（人的生長(zhǎng)激素屬于分泌蛋白），所以在進(jìn)入泌乳期能大量產(chǎn)生人的生長(zhǎng)激素，D項(xiàng)正確。【答案】A6．利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類所需的產(chǎn)品。下列選項(xiàng)中能說明目的基因完成表達(dá)的是（）A．棉花細(xì)胞中檢測(cè)到載體上的標(biāo)記基因B．山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人的生長(zhǎng)激素基因C．大腸桿菌中檢測(cè)到人的胰島素基因轉(zhuǎn)錄出的mRNAD．酵母菌細(xì)胞中提取到人的干擾素【解析】本題考查基因工程的操作。檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞—用DNA分子雜交法；檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄—分子雜交法；目的基因是否成功表達(dá)—抗原抗體雜交法。目的基因成功表達(dá)指經(jīng)過基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，合成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，即需要檢測(cè)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)產(chǎn)物如生長(zhǎng)激素、胰島素、干擾素等。綜上所述，ABC不符合題意，D符合題意?！敬鸢浮緿1．限制酶、DNA連接酶、DNA聚合酶等相關(guān)酶的分析比較名稱作用底物作用部位形成產(chǎn)物限制酶DNA分子磷酸二酯鍵帶黏性末端或平末端的DNA片段DNA連接酶DNA片段磷酸二酯鍵重組DNA分子DNA聚合酶脫氧核苷酸磷酸二酯鍵子代DNA分子耐高溫的DNA聚合酶脫氧核苷酸磷酸二酯鍵子代DNA分子DNA(水解)酶DNA分子磷酸二酯鍵游離的脫氧核苷酸解旋酶DNA分子堿基對(duì)間的氫鍵脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈RNA聚合酶核糖核苷酸磷酸二酯鍵單鏈RNA分子2．細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的比較比較項(xiàng)目細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR不同點(diǎn)解旋解旋酶，邊解旋邊復(fù)制80～100℃高溫解旋，雙鏈完全分開酶解旋酶、DNA聚合酶、DNA連接酶耐高溫的DNA聚合酶引物RNADNA或RNA能量ATP不加溫度體內(nèi)溫和條件高溫（95℃→55℃→72℃）子鏈合成在引物基礎(chǔ)上，一條鏈連續(xù)合成，另一條鏈不連續(xù)合成一般分為變性、復(fù)性、延伸三大步。分別從兩條鏈的引物端開始，都是連續(xù)合成，控制溫度72℃循環(huán)次數(shù)受生物體自身控制30多次相同點(diǎn)①需要提供DNA復(fù)制的模板②四種脫氧核苷酸作原料③子鏈延伸的方向都是從5′端到3′端④都需在一定的緩沖溶液中進(jìn)行3．基因工程操作程序易錯(cuò)點(diǎn)剖析(1)基因表達(dá)載體≠載體：基因表達(dá)載體與載體相比增加了目的基因。(2)目的基因的插入位點(diǎn)不是隨意的：基因表達(dá)需要啟動(dòng)子與終止子的調(diào)控，所以目的基因應(yīng)插入啟動(dòng)子與終止子之間的部位，若目的基因插入啟動(dòng)子內(nèi)部，啟動(dòng)子將失去原功能。(3)啟動(dòng)子≠起始密碼子，終止子≠終止密碼子：?jiǎn)?dòng)子和終止子位于DNA片段上，分別控制轉(zhuǎn)錄過程的啟動(dòng)和終止；起始密碼子和終止密碼子位于mRNA上，分別控制翻譯的啟動(dòng)和終止。(4)切割目的基因和載體并非只能用同一種限制酶。如果用兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端相同時(shí)，在DNA連接酶的作用下目的基因與載體也可以連接起來。4．蛋白質(zhì)工程與基因工程區(qū)別和聯(lián)系(1)區(qū)別項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程基因工程過程預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列獲取目的基因→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定實(shí)質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需的生物類型和生物產(chǎn)品結(jié)果可生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)只能生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)(2)聯(lián)系①蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。②基因工程中所利用的某些酶需要通過蛋白質(zhì)工程進(jìn)行修飾、改造。③蛋白質(zhì)工程的起點(diǎn)是預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)的功能，實(shí)質(zhì)是通過改造相應(yīng)的基因達(dá)到對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行改造的目的?；蚬こ痰钠瘘c(diǎn)是目的基因，實(shí)質(zhì)是基因重組。拓展一：基因工程中基本工具的8個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)(1)限制酶是一類酶，而不是一種酶。(2)限制酶的成分為蛋白質(zhì)，其作用的發(fā)揮需要適宜的理化條件，高溫、強(qiáng)酸或強(qiáng)堿均易使之變性失活。(3)在切割目的基因和載體時(shí)要求用同一種限制酶，目的是產(chǎn)生相同的黏性末端。(4)將一個(gè)基因從DNA分子上切割下來，需要切兩處，同時(shí)產(chǎn)生4個(gè)黏性末端。(5)不同DNA分子用同一種限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端都相同，同一個(gè)DNA分子用不同的限制酶切割，產(chǎn)生的黏性末端一般不相同。(6)限制酶切割位點(diǎn)應(yīng)位于標(biāo)記基因之外，不能破壞標(biāo)記基因，以便進(jìn)行檢測(cè)。(7)基因工程中的載體與細(xì)胞膜上物質(zhì)運(yùn)輸?shù)妮d體不同?；蚬こ讨械妮d體是DNA分子，能將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞內(nèi)；膜載體是蛋白質(zhì)，與細(xì)胞膜的通透性有關(guān)。(8)基因工程中有3種工具，但工具酶只有2種。拓展二：高考還會(huì)這樣考(1)載體上的標(biāo)記基因一般是抗生素抗性基因。受體細(xì)胞應(yīng)沒有(填“有”或“沒有”)抵抗相關(guān)抗生素的能力。(2)題中能否把核糖體蛋白基因整合到線粒體DNA或葉綠體DNA上？為什么？提示：不能。如果把核糖體蛋白基因整合到線粒體DNA或葉綠體DNA上，由于細(xì)胞分裂可能導(dǎo)致核糖體蛋白基因丟失，無法穩(wěn)定遺傳。1．基因治療的目的就是把下列哪種分子或物質(zhì)插入細(xì)胞來治療遺傳疾病（）A．隱性基因B．顯性基因C．正常蛋白D．正?；颉窘馕觥勘绢}考查基因治療?；蛑委熓前颜５任换虿迦爰?xì)胞，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，來治療遺傳疾病。綜上所述，ABC項(xiàng)錯(cuò)誤，D項(xiàng)正確?！敬鸢浮緿2．科學(xué)家們經(jīng)過多年的努力，創(chuàng)立了一種生物技術(shù)——基因工程，實(shí)施該工程的最終目的是（）A．定向提取生物體的DNA分子 B．在生物體外對(duì)DNA分子進(jìn)行改造C．定向地改造生物的遺傳性狀 D．定向地對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切”【解析】本題考查基因工程的目的?；蚬こ逃纸蠨NA重組技術(shù)，是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。通過基因工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)不同生物的基因重新組合，最終達(dá)到定向改造生物的遺傳性狀的目的，故選C。【答案】C3．細(xì)菌質(zhì)粒分子上往往帶有抗生素抗性基因，該抗性基因在基因工程中的主要作用是（）A．提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐藥性B．有利于對(duì)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)C．有利于目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)D．有利于質(zhì)粒分子與目的基因的連接【解析】本題考查載體上標(biāo)記基因的作用?？剐曰虻淖饔檬呛Y選重組質(zhì)粒，并不是提高受體細(xì)胞的耐藥性，A項(xiàng)錯(cuò)誤?？剐曰蚴亲畛Ｓ玫臉?biāo)記基因，有利于對(duì)目的基因是否導(dǎo)入進(jìn)行檢測(cè)，B項(xiàng)正確?？剐曰虿荒艽龠M(jìn)目的基因在受體細(xì)胞中的表達(dá)，C項(xiàng)錯(cuò)誤。質(zhì)粒上含有限制酶切割位點(diǎn)時(shí)，便于與外源基因連接，而抗性基因沒有這個(gè)作用，D項(xiàng)錯(cuò)誤。【答案】B4．為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C（圖1），擬將其與質(zhì)粒（圖2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．檢測(cè)C基因是否整合到菊花染色體上可用DNA分子雜交技術(shù)B．用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)胧荏w細(xì)胞C．在培養(yǎng)基中添加潮霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞D．用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ和DNA連接酶處理目的基因和質(zhì)粒，獲得的重組DNA分子都是含有C基因的重組質(zhì)?！窘馕觥勘绢}考查基因工程的操作過程。根據(jù)分析可知，檢測(cè)C基因是否整合到菊花染色體上可用DNA分子雜交技術(shù)，A項(xiàng)正確；將目的基因?qū)氲街参锛?xì)胞，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，可以將目的基因C導(dǎo)入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA段，之后再用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)爰?xì)胞染色體上的DNA上，B項(xiàng)正確；標(biāo)記基因常用來檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，圖2中顯示標(biāo)記基因是潮霉素抗性基因，可在培養(yǎng)基中添加潮霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞，C項(xiàng)正確；據(jù)圖分析可知，在目的基因的兩端、啟動(dòng)子和終止子之間都有限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，因此可以用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ切割目的基因和運(yùn)載體，之后再用DNA連接酶連接，形成的重組DNA分子中，有重組質(zhì)粒，也有目的基因—目的基因的重組DNA分子和質(zhì)?！|(zhì)粒的重組DNA分子，D項(xiàng)錯(cuò)誤。【答案】D5．生物技術(shù)安全性和倫理問題是社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．應(yīng)嚴(yán)格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，避免產(chǎn)生對(duì)人類有害的物質(zhì)B．國(guó)際上大多數(shù)國(guó)家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C．反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒D．生物武器是用致病菌、病毒、生化毒劑及重組致病菌等來形成強(qiáng)大殺傷力【解析】本題考查社會(huì)熱點(diǎn)生物技術(shù)安全性和倫理問題。嚴(yán)格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，可避免產(chǎn)生對(duì)人類有害的物質(zhì)，減少人們對(duì)轉(zhuǎn)基因食物安全的擔(dān)憂，A項(xiàng)正確；轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上需有轉(zhuǎn)基因食品的標(biāo)記，但還沒有警示性注明可能的危害，B項(xiàng)錯(cuò)誤；試管嬰兒可以設(shè)計(jì)嬰兒的性別，反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒，C項(xiàng)正確；生物武器是指有意識(shí)的利用微生物、毒素、昆蟲侵襲人、農(nóng)作物或者牲畜等目標(biāo)，以達(dá)到某種目的的一類武器，有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣、殺傷力強(qiáng)等特點(diǎn)，應(yīng)嚴(yán)格禁止，D項(xiàng)正確?！敬鸢浮緽6．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程和基因工程的比較，錯(cuò)誤的是（）A．基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)工程可以對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，從而制造一種新的蛋白質(zhì)B．蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，蛋白質(zhì)工程最終還是要通過基因修飾或基因合成來完成C．基因工程產(chǎn)生的變異是可遺傳的，蛋白質(zhì)工程產(chǎn)生的變異是不可遺傳的D．基因工程和蛋白質(zhì)工程都遵循中心法則【解析】本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的區(qū)別和聯(lián)系。基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)工程可以通過對(duì)基因改造實(shí)現(xiàn)對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)改造，從而制造一種新的蛋白質(zhì)，A項(xiàng)正確；蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程，蛋白質(zhì)工程不是對(duì)蛋白質(zhì)分子的直接改造，而是通過修改基因或創(chuàng)造合成新基因來改變生物的遺傳和表達(dá)性狀，合成新的蛋白質(zhì)，B項(xiàng)正確；蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì)是改造基因，基因工程和蛋白質(zhì)工程產(chǎn)生的變異都是可遺傳的，C項(xiàng)錯(cuò)誤；基因工程遵循中心法則，蛋白質(zhì)工程也遵循中心法則，D項(xiàng)正確?！敬鸢浮緾7．為提高大豆對(duì)磷元素的吸收能力，研究人員利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將水稻的耐低磷基因OsPTF轉(zhuǎn)移到大豆植株中，下圖為重組Ti質(zhì)粒上T-DNA的序列結(jié)構(gòu)示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．以任意一個(gè)水稻細(xì)胞的RNA為模板通過逆轉(zhuǎn)錄及PCR擴(kuò)增就可以獲得大量OsPTF基因B．RNA聚合酶與啟動(dòng)子1識(shí)別并結(jié)合后，啟動(dòng)抗除草劑基因的轉(zhuǎn)錄C．可通過含除草劑的選擇培養(yǎng)基篩選含有目的的基因大豆愈傷組織D．用EcoRI、BamHI雙酶切重組Ti質(zhì)粒后，經(jīng)電泳分離至少得到三條帶【解析】本題考查基因工程的操作。必須以表達(dá)了OsPTF基因的水稻細(xì)胞的RNA為模板通過逆轉(zhuǎn)錄可以合成cDNA，然后再以cDNA為模板利用PCR擴(kuò)增才能獲得大量OsPTF基因，A項(xiàng)錯(cuò)誤；識(shí)圖分析可知，抗除草劑基因位于啟動(dòng)子2的后面，因此RNA聚合酶與啟動(dòng)子2識(shí)別并結(jié)合后，啟動(dòng)抗除草劑基因的轉(zhuǎn)錄，B項(xiàng)錯(cuò)誤；由于圖中T-DNA的序列中含有目的基因和抗除草劑基因，故可通過含除草劑的選擇培養(yǎng)基篩選含有目的的基因大豆愈傷組織，C項(xiàng)正確；用EcoRI、BamHI雙酶切重組Ti質(zhì)粒后，會(huì)得到兩種片段：含有耐低磷基因OsPTF的片段、另外一段（含有除草劑基因的片段、含啟動(dòng)子的片段、T-DNA以外的其他片段），因此經(jīng)電泳分離至少得到兩條帶，即含耐低磷基因OsPTF的片段和另外一段，D錯(cuò)誤?！敬鸢浮緾8．蟲草中的超氧化物歧化酶（SOD）具有抗衰老作用。研究人員培育了能合成SOD的轉(zhuǎn)基因酵母菌。回答下列問題：注：HindⅢ和ApaLⅠ是兩種限制酶，箭頭表示酶的切割位置。（1）將大量圖中的重組DNA分子用HindⅢ和ApaLⅠ完全酶切后，可得到_______種不同長(zhǎng)度的DNA片段。圖示的表達(dá)載體存在氨芐青霉素抗性基因，不能導(dǎo)入用于食品生產(chǎn)的酵母菌中，據(jù)圖分析，可用限制酶_______切除該抗性基因的部分片段使其失效，再用DNA連接酶使表達(dá)載體重新連接起來。（2）作為受體細(xì)胞的酵母菌是缺失URA3基因的，必須在含有尿嘧啶的培養(yǎng)基中才能存活。因此，圖示表達(dá)載體上的URA3基因可作為_______供鑒定和選擇；為了篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的酵母菌，所使用的培養(yǎng)基_______（填“需要”或“不需要”）添加尿嘧啶。（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為_______。利用_________技術(shù)確定受體細(xì)胞中SOD基因是否轉(zhuǎn)錄。利用_________技術(shù)確定受體細(xì)胞中SOD基因是否翻譯?！敬鸢浮浚?）3ApaLI（2）標(biāo)記基因不需要（3）轉(zhuǎn)化分子雜交抗原抗體雜交1．下列哪項(xiàng)不是基因工程中經(jīng)常使用的運(yùn)載目的基因的載體（）A．細(xì)菌擬核中的DNA B．細(xì)菌質(zhì)粒C．噬菌體 D．動(dòng)植物病毒【解析】本題考查基因工程中的運(yùn)載體。常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒。綜上所述，BCD項(xiàng)不符合題意，A項(xiàng)符合題意。【答案】A2．從分子水平分析，很多微生物被應(yīng)用于基因工程的主要理論依據(jù)是（）A．微生物的繁殖速度快，適應(yīng)性強(qiáng)，分布廣，種類多B．微生物中都含有核糖體，翻譯過程與其他生物共用一套遺傳密碼C．不同生物的DNA均有相同的核苷酸組成，且都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則D．微生物的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，容易大量合成目的基因，并能導(dǎo)入高等生物的細(xì)胞【解析】本題考查基因工程的理論依據(jù)。微生物的繁殖速度快，適應(yīng)性強(qiáng)，分布廣，種類多，這是基因工程常用微生物作為受體細(xì)胞的原因，但這不是基因工程的理論依據(jù)，A項(xiàng)錯(cuò)誤；微生物中都含有核糖體，翻譯過程與其他生物共用一套密碼子，這是基因工程中常用微生物的理論依據(jù)之一，B項(xiàng)正確；不同生物的DNA均有相同的核苷酸組成，且都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，這是不同生物之間的基因能夠?qū)崿F(xiàn)拼接的理論基礎(chǔ)，但不是基因工程常用微生物作為受體細(xì)胞的原因，C項(xiàng)錯(cuò)誤；微生物的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，容易大量合成目的基因，并能導(dǎo)入高等生物的細(xì)胞，但這不是基因工程的理論依據(jù)，D項(xiàng)錯(cuò)誤。【答案】B3．科學(xué)家將胰島素的第28和29位的氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素，生產(chǎn)速效胰島素時(shí)需要定向改造的對(duì)象是（）A．胰島B細(xì)胞的高爾基體 B．胰島素基因C．胰島素mRNA D．胰島素【解析】本題考查蛋白質(zhì)工程。蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)將胰島素的第28和29位氨基酸調(diào)換順序后可獲得速效胰島素，而蛋白質(zhì)工程通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，因此要生產(chǎn)速效胰島素，需要對(duì)胰島素基因進(jìn)行定向改造。故選B?！敬鸢浮緽4．聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。下列有關(guān)PCR過程的敘述中正確的是（）A．變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)的磷酸二酯鍵B．PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需的酶完全相同C．延伸過程需要的是耐高溫的DNA聚合酶、ATP、四種脫氧核苷酸D．復(fù)性過程中引物之間也會(huì)依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則而相互結(jié)合【解析】本題考查PCR技術(shù)有關(guān)知識(shí)。變性過程中利用95℃高溫破壞DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵，A項(xiàng)錯(cuò)誤；細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制是在生物體內(nèi)完成，需要解旋酶打開DNA雙鏈，而PCR技術(shù)的溫度是不斷循環(huán)變化的，且溫度較高，利用高溫打開DNA雙鏈，不需要解旋酶，B項(xiàng)錯(cuò)誤；延伸過程需要的是耐高溫的DNA聚合酶、ATP、四種脫氧核苷酸，C項(xiàng)正確；引導(dǎo)子鏈合成的引物是單鏈DNA片段，復(fù)性過程中引物依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與DNA模板鏈的結(jié)合，一般兩端的引物序列是不互補(bǔ)配對(duì)的，所以引物之間不會(huì)結(jié)合；D項(xiàng)錯(cuò)誤?！敬鸢浮緾5．T4溶菌酶在高溫時(shí)易失去活性。研究人員對(duì)編碼T4溶菌酶的基因進(jìn)行改造，使T4溶菌酶第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼幔摪腚装彼崤c第97位的半胱氨酸之間形成一個(gè)二硫鍵，提高了酶的耐熱性。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．T4溶菌酶耐熱性提高的原因是組成該酶的氨基酸種類和蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變B．T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程，自然界中的酶都可通過蛋白質(zhì)工程進(jìn)行改造C．蛋白質(zhì)工程與中心法則的流動(dòng)方向相反，即蛋白質(zhì)功能→蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→氨基酸序列→脫氧核苷酸序列D．若高溫使蛋白質(zhì)分子的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，蛋白質(zhì)的功能也會(huì)受到影響【解析】本題考查蛋白質(zhì)工程。由題意可知，T4溶菌酶耐熱性提高的原因是組成該酶的氨基酸種類及蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)均發(fā)生了改變，A項(xiàng)正確；T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程，酶大多是蛋白質(zhì)，少數(shù)是RNA，蛋白質(zhì)工程只能用于改造蛋白質(zhì)類，B項(xiàng)錯(cuò)誤；蛋白質(zhì)工程與中心法則的流動(dòng)方向相反，C項(xiàng)正確；若高溫使蛋白質(zhì)分子的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，蛋白質(zhì)的功能也會(huì)受到影響，D項(xiàng)正確?！敬鸢浮緽6．下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的敘述中正確的是（）A．用限制酶從一個(gè)DNA分子中部獲取一個(gè)目的基因時(shí)，2個(gè)磷酸二酯鍵斷裂B．﹣CATG↓﹣和﹣G↓GATCC﹣序列被限制酶切出的黏性末端相同C．用不同的限制酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，也可能形成重組質(zhì)粒D．限制酶識(shí)別序列越長(zhǎng)，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大【解析】本題考查限制酶的相關(guān)知識(shí)。用限制酶從一個(gè)DNA分子中部獲取一個(gè)目的基因時(shí)，需要切開兩個(gè)切口，斷裂4個(gè)磷酸二酯鍵斷，A項(xiàng)錯(cuò)誤；-CATG↓-和-G↓GATCC-序列被限制酶切出的黏性末端不同，B項(xiàng)錯(cuò)誤；用不同的限制酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，也可能形成相同的黏性末端，再用DNA連接酶也可能形成重組質(zhì)粒，C項(xiàng)正確；限制酶識(shí)別序列越長(zhǎng)，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越小，D項(xiàng)錯(cuò)誤。【答案】C7．關(guān)于基因工程的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A．培育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理細(xì)菌獲得感受態(tài)細(xì)胞B．檢測(cè)目的基因是否表達(dá)成功，可以進(jìn)行抗原——抗體雜交技術(shù)C．基因工程的應(yīng)用發(fā)展迅速，如基因治療已廣泛用于治療各種人類疾病D．基因組文庫(kù)包含某種生物的全部基因，cDNA文庫(kù)只包含某種生物的部分基因【解析】本題考查基因工程的操作。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞需要用Ca2+處理細(xì)菌獲得感受態(tài)細(xì)胞，A項(xiàng)正確；檢測(cè)目的基因是否表達(dá)成功，可以進(jìn)行抗原——抗體雜交技術(shù)，B項(xiàng)正確；基因治療目前處于初期的臨床試驗(yàn)階段，C項(xiàng)錯(cuò)誤；基因組文庫(kù)包含某種生物的全部基因，cDNA文庫(kù)只包含某種生物的部分基因，D項(xiàng)正確?！敬鸢浮緾8．下列有關(guān)構(gòu)建基因表達(dá)載體的敘述，正確的是（）A．DNA聚合酶識(shí)別啟動(dòng)子，并轉(zhuǎn)錄出mRNAB．終止子是決定翻譯過程結(jié)束的信號(hào)C．DNA連接酶不能識(shí)別特定的核苷酸序列D．目的基因的表達(dá)是基因工程的核心步驟【解析】本題考查基因工程的操作。啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)，所以有了啟動(dòng)子才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，A項(xiàng)錯(cuò)誤。終止子的作用是使轉(zhuǎn)錄在相應(yīng)的地方停止，從而終止轉(zhuǎn)錄過程，B項(xiàng)錯(cuò)誤。DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，不能識(shí)別特定的核苷酸序列，C項(xiàng)正確。基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，D項(xiàng)錯(cuò)誤?！敬鸢浮緾9．限制酶a和b的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示，下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A．一個(gè)DNA分子中，酶a與酶b的識(shí)別序列可能有多個(gè)B．酶a與酶b識(shí)別的序列不同，但是切出的黏性末端卻能相互連接C．酶a與酶b切割的位點(diǎn)不同，但是切斷的化學(xué)鍵卻相同D．用酶a切割有3個(gè)識(shí)別位點(diǎn)的質(zhì)粒，得到4種切割產(chǎn)物【解析】本題考查限制酶。一個(gè)DNA分子中，可能存在1至多個(gè)酶a與酶b的識(shí)別序列，A項(xiàng)正確；由圖可知，酶a與酶b識(shí)別的序列雖然不同，但切出的黏性末端相同，相同的黏性末端能相互連接，B項(xiàng)正確；酶a與酶b切斷的化學(xué)鍵均為相鄰脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，C項(xiàng)正確；質(zhì)粒為環(huán)狀DNA分子，用酶a切割有3個(gè)識(shí)別位點(diǎn)的質(zhì)粒，可得到3種切割產(chǎn)物，D項(xiàng)錯(cuò)誤?！敬鸢浮緿10．下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．用同樣方法從等體積豬血和豬肝中提取的DNA量相近B．實(shí)驗(yàn)中利用DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同的原理C．用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行沸水浴加熱D．菜花提取的DNA濾液中，加入冷酒精有利于提取DNA【解析】本題考查DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)。豬血液中紅細(xì)胞沒有DNA，因此等體積的兔血提取的DNA量小于豬肝，A項(xiàng)錯(cuò)誤；實(shí)驗(yàn)中利用DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同的原理，B項(xiàng)正確；用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行沸水浴加，C項(xiàng)正確；DNA在冷酒精中的溶解度很低，加入冷酒精有利于提取DNA，D項(xiàng)正確。【答案】A11．科學(xué)家發(fā)現(xiàn)栽種含有抗除草劑基因的農(nóng)作物后，會(huì)使附近的、與其親緣關(guān)系較近的野生植物也獲得抗除草劑基因。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．野生植物通過自然雜交獲得抗除草劑基因B．野生植物不可以通過基因突變產(chǎn)生抗除草劑基因C．隨著轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的種植面積擴(kuò)大，基因工程也可能會(huì)導(dǎo)致基因污染D．隨著轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的種植面積擴(kuò)大，轉(zhuǎn)基因生物會(huì)危及生物圈的穩(wěn)定【解析】本題考查轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題。栽種含有抗除草劑基因的農(nóng)作物后，會(huì)使附近的、與其親緣關(guān)系較近的野生植物也獲得抗除草劑基因，可見野生植物可通過自然雜交獲得抗除草劑基因，這說明基因工程會(huì)導(dǎo)致基因污染，A、C項(xiàng)正確；野生植物可能通過基因突變獲得抗除草劑基因，B項(xiàng)錯(cuò)誤；栽種含有抗除草劑基因的農(nóng)作物后，會(huì)使野生植物也獲得抗除草劑基因，進(jìn)而危及生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定，D項(xiàng)正確?！敬鸢浮緽12．綠葉海天牛（簡(jiǎn)稱甲）吸食濱海無隔藻（簡(jiǎn)稱乙）后，身體就逐漸變綠，這些“奪來”的葉綠體能夠在甲體內(nèi)長(zhǎng)期穩(wěn)定存在，有科學(xué)家推測(cè)其原因是在甲的染色體DNA上可能存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因。為證實(shí)上述推測(cè)，以這種變綠的甲為材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，方法和結(jié)果最能支持上述推測(cè)的是（）A．通過PCR技術(shù)能從甲消化道內(nèi)獲得的DNA中克隆出屬于乙的編碼葉綠體蛋白的核基因B．通過核酸分子雜交技術(shù)，在甲體內(nèi)檢測(cè)到乙的編碼葉綠體蛋白的核基因轉(zhuǎn)錄出的RNAC．給甲提供14CO2，一段時(shí)間后檢測(cè)到其體內(nèi)的部分有機(jī)物出現(xiàn)放射性D．用乙編碼葉綠體蛋白的核基因做探針與甲的染色體DNA雜交，結(jié)果顯示出雜交帶【解析】本題考查目的基因的檢測(cè)與鑒定。通過PCR技術(shù)從甲消化道內(nèi)獲得的DNA中克隆出屬于乙的編碼葉綠體蛋白的核基因，這只能說明甲吞食了乙，A項(xiàng)錯(cuò)誤；通過核酸分子雜交技術(shù)，在甲體內(nèi)檢測(cè)到乙的編碼葉綠體蛋白的核基因轉(zhuǎn)錄出的RNA，這只能說明甲體內(nèi)含有乙的編碼葉綠體蛋白的核基因，但不能說明甲的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，B項(xiàng)錯(cuò)誤；給甲提供14CO2，一段時(shí)間后檢測(cè)到其體內(nèi)的部分有機(jī)物出現(xiàn)放射性，這說明甲中含有葉綠體，能進(jìn)行光合作用，但不能說明甲的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，C項(xiàng)錯(cuò)誤；用乙編碼葉綠體蛋白的核基因做探針與甲的染色體DNA雜交，結(jié)果顯示出雜交帶，這說明甲的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，D項(xiàng)正確?！敬鸢浮緿13．為實(shí)現(xiàn)目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，以便在大腸桿菌中大量表達(dá)相應(yīng)的蛋白質(zhì)，研究人員進(jìn)行了下圖所示操作。請(qǐng)分析回答下列問題：（1）用BamHI切割含目的基因的DNA片段，質(zhì)粒經(jīng)相同限制酶處理后，經(jīng)____________的作用獲得a，a稱作_____________。（2）將a與感受態(tài)大腸桿菌混合后，混合物應(yīng)接種在含有_____________的培養(yǎng)基上。質(zhì)粒中抗氨芐青霉素基因稱為_____________，在篩選過程起作用。若要證明培養(yǎng)基是否符合實(shí)驗(yàn)要求，培養(yǎng)基上需接種未經(jīng)質(zhì)粒混合的感受態(tài)大腸桿菌，培養(yǎng)后________（“出現(xiàn)”/“不出現(xiàn)”）菌落則培養(yǎng)基合格。（3）DNA分子中，一條鏈中的兩個(gè)核苷酸通過_____________相連，已知堿性磷酸酶能除去核苷酸末端的5’磷酸，構(gòu)建a的過程中用該酶處理質(zhì)粒，但目的基因不用堿性磷酸酶處理，這樣做的目的是__________________________。（4）如果要檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)，須提取培養(yǎng)后大腸桿菌的______________，用相應(yīng)_________檢測(cè)?！敬鸢浮浚?）DNA連接酶基因表達(dá)載體（重組質(zhì)粒）（2）氨芐青霉素標(biāo)記基因不出現(xiàn)（3）磷酸二酯鍵防止質(zhì)粒自我連接（4）總蛋白抗體14．下圖為獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米的技術(shù)路線，請(qǐng)回答：（1）構(gòu)建表達(dá)載體選擇限制酶時(shí)，要求Ti質(zhì)粒內(nèi)每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)，同時(shí)要求酶切后，G基因形成的兩個(gè)黏性末端序列不相同，這個(gè)過程至少需用_____種限制酶，目的是______________________________。除草劑抗性基因G和Ti質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化