高中生物：克隆技術(shù)三年高考二年模擬

克隆技術(shù)

三年高考真題演練

1全國課標(biāo)題

1.（2013?全國理綜，2）關(guān)于動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（）

A.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同

B.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶

C.煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細胞可離體培養(yǎng)增殖

D.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒

2.（2014?課標(biāo)卷I,40）某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z）,

每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價（能檢測出抗原

抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。

血清抗體效價

32()0()

28()00

24000

2000()

=

I6()()()=

=

12000

三

=

8000=

4000

第一次第二次第三次第四次第五次免疫次數(shù)

若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細胞（染色體數(shù)目40條），并將

該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞（染色體數(shù)目60條）按一定比例加入試管中,

再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗

體的雜交瘤細胞。

回答下列問題。

⑴制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000

以上，則小鼠最少需要經(jīng)過_______次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的

X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是小鼠，

理由是

（2）細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可

能還有，體系中出現(xiàn)多種類型細

胞的原因是

（3）雜交瘤細胞中有個細胞核，染色體數(shù)目最多是條。

（4）未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是

3.（2013?課標(biāo)全國理綜n,40）甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，

甲含有效成分A,乙含有效成分Bo某研究小組擬培育同時含有A和B的新型

藥用植物。

回答下列問題：

（1）為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用酶和

酶去除細胞壁，獲得具有活力的,再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合，形成

的融合細胞進一步培養(yǎng)形成組織，然后經(jīng)過_______形成完整的雜種植

株。這種培育技術(shù)稱為。

⑵上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指

假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異

的原因是o

⑶這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到

的等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。

2地方精選題

4.（2016?江蘇卷，9）下列有關(guān)細胞工程的敘述，正確的是（）

A.PEG是促細胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細胞融合

B.用原生質(zhì)體制備人工種子，要防止細胞破裂

C.骨髓瘤細胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體

D.核移植克隆的動物，其線粒體DNA來自供卵母體

5.（2016?江蘇卷，10）定量分析是科學(xué)研究的重要方法。下列能用血細胞計數(shù)板直

接計數(shù)的是()

A.海拉細胞懸液B.濃縮培養(yǎng)的噬菌體

C.自來水中大腸桿菌D.蛙卵

6.(2015?高考安徽卷,31—II)科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿

羊，以便通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖。

綿

羊

凝

人

一

一

一-

重

胎

兒篩選整合有目的

體外代

轉(zhuǎn)

重

血

因

組"

纖

成

連

鑒定基因的成纖核移植組培養(yǎng)

子

細

因

母

胚

細

維維細胞

基

胞

綿

羊

IX因

胎

胞

一

一

羊

-一

(1)由過程①獲得的A為o

⑵在核移植之前，必須先去掉受體卵母細胞的核，目的是

。受體應(yīng)選用期卵母細胞。

⑶進行胚胎移植時，代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生_______,

這為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。

(4)采用胎兒成纖維細胞進行轉(zhuǎn)基因體細胞克隆，理論上可獲得無限個轉(zhuǎn)基因綿

羊，這是因為

7.(2015?天津卷，7)DHA對腦神經(jīng)發(fā)育至關(guān)重要。以A、B兩種單細胞真核藻為

親本，利用細胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻。兩種藻特性如下表。

優(yōu)勢代生長速率固體培養(yǎng)基DHA含量

親本藻

-1%0

謝類型[g-(L-d)]上藻落直徑

A藻自養(yǎng)0.06小0.7

B藻異養(yǎng)0.14大無

據(jù)表回答：

(1)選育的融合藻應(yīng)具有A藻與B藻的優(yōu)點。

(2)誘導(dǎo)融合前需用纖維素酶處理兩種藻，其目的是獲得

(3)通過以下三步篩選融合藻，步驟可淘汰B藻，步驟可淘汰

生長速率較慢的藻落，再通過步驟_______生產(chǎn)所需的融合藻。

步驟a：觀察藻落的大小

步驟b：用不含有機碳源(碳源一生物生長的碳素來源)的培養(yǎng)基進行光照培養(yǎng)

步驟c：測定DHA含量

(4)以獲得的融合藻為材料進行甲、乙、丙三組試驗，結(jié)果如下圖。

①甲組條件下，融合藻產(chǎn)生［H］的細胞器是；丙組條件下產(chǎn)生ATP的細

胞器是.o

②與甲、丙兩組相比，乙組融合藻生長速率較快，原因是在該培養(yǎng)條件下

甲、乙兩組DHA產(chǎn)量均較高，但實際生產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件，其原因

是___________________________________________________________________

8.(2014?福建卷，33)［生物一現(xiàn)代生物科技專題］Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟

的淋巴細胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因

治療。其技術(shù)流程如圖：

造血干細胞ES細胞ES細胞

(1)步驟①中，在核移植前應(yīng)去除卵母細胞的o

(2)步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到期時，可從其內(nèi)細胞團分離出ES細胞。

(3)步驟③中，需要構(gòu)建含有基因Rag2的表達載體?？梢愿鶕?jù)Rag2基因的

設(shè)計引物，利用PCR技術(shù)擴增Rag2基因片段。用HindHI和PstI限制酶分別在

片段兩側(cè)進行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達載體，所選

擇的表達載體上應(yīng)具有I________________,酶的酶切位點。

(4)為檢測Rag2基因的表達情況，可提取治療后小鼠骨髓細胞的,用抗

Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。

9.(2014,廣東卷，29)鐵皮石斛是我國名貴中藥，生物堿是其有效成分之一。應(yīng)用

組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡稱PLBs,類似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的

實驗流程如下：

新生營養(yǎng)芽|避曼恒函增殖埴養(yǎng)但區(qū)不同時間取樣、檢測|實驗結(jié)果

在固體培養(yǎng)基上，PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖所示,

請回答下列問題。

(

柴0.035

00.030

翊0.025

w0.020

s

a0.015

q

d0.010

0.005

⑴選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是

誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過程稱o

⑵與黑暗條件下相比,PLBs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在

(3)脫落酸(ABA)能提高生物堿含量，但會抑制PLBs的生長。若采用液體培養(yǎng),

推測添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開展探究實驗驗證該推測，

在設(shè)計實驗方案是探討了以下問題：

①ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式：設(shè)4個ABA處理組，1個空白對照組，3

次重復(fù)。因ABA受熱易分解，故一定濃度的無菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)

基________后按比例加入。

②實驗進程和取樣：實驗50天完成，每10天取樣，將樣品(PLBs)稱重(g/瓶)后

再測定生物堿含量。如初始(第0天)數(shù)據(jù)已知，實驗過程中還需測定的樣品數(shù)為

③依所測定數(shù)據(jù)確定適宜的ABA濃度和培養(yǎng)時間：當(dāng)某3個樣品（重復(fù)樣）的

時,其對應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度，對應(yīng)的培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。

II兩年模擬試題精練II

1.(2016?石家莊質(zhì)檢)細胞工程技術(shù)研究，特別是不對稱細胞雜交等技術(shù)是當(dāng)前研

究的熱點。請回答下列有關(guān)問題：

⑴植物組織培養(yǎng)的原理是。將離體的器官或組織，首先經(jīng)過

脫分化培養(yǎng)形成,然后再分化最終形成完整植株。

⑵細胞的不對稱雜交是指將不對等的細胞進行融合，如將二倍體甘藍體細胞與

其配子細胞進行的融合：首先經(jīng)酶的作用去除細胞壁，形成,

再經(jīng)物理或化學(xué)方法，促使二者融合，其中常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑為，融合

后符合育種條件的植物細胞中有個染色體組。

⑶動物細胞培養(yǎng)液為合成培養(yǎng)基，但該培養(yǎng)基中往往要加入一些________等天

然成分。動物細胞培養(yǎng)所需氣體主要有02和CO2,CO2的主要作用是

2.(2016?河北三市二聯(lián))胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，是一種全能性干細胞，

具有自我更新和多向分化的潛能，在臨床移植醫(yī)學(xué)、細胞治療、細胞工程、生物

學(xué)基礎(chǔ)研究等領(lǐng)域具有重要的科學(xué)意義和巨大的應(yīng)用前景。請回答下列問題。

(l)ES細胞從和獲取，對它可進行冷凍保存，也可進行遺傳改

造。

(2)人類在根治糖尿病時，可通過ES細胞定向分化出_______(填寫細胞名稱)再

進行移植。此過程中，若定向誘導(dǎo)培育出相應(yīng)的器官進行移植除能解決目前臨床

上存在的供體器官不足的問題外，還有一大優(yōu)點是。

(3)若將ES細胞體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中通常需加入等一些天然成分，還

需要提供5%的CO2,其作用是。

(4)用ES細胞進行核移植，所選擇的卵母細胞必須發(fā)育到(時期)才能作

受體細胞，與體細胞核移植相比更容易發(fā)育成克隆動物，原因在于ES細胞的分

化程度,全能性高。

3.(2016?濰坊統(tǒng)考)鼠源單克隆抗體用于疾病的治療時，易發(fā)生不良反應(yīng)，科學(xué)家

通過對鼠和人控制抗體產(chǎn)生的基因進行拼接，實現(xiàn)了對鼠源單克隆抗體的改造,

生產(chǎn)出對人體不良反應(yīng)小、效果更好的單克隆抗體。請回答：

⑴鼠源單克隆抗體是將經(jīng)過免疫的小鼠細胞與骨髓瘤細胞融合，然后

篩選出_______的雜交瘤細胞，并通過體內(nèi)或體外培養(yǎng)生產(chǎn)的抗體。

(2)動物細胞融合常用誘導(dǎo)，細胞融合體現(xiàn)了細胞膜的。在體

外培養(yǎng)雜交瘤細胞時，培養(yǎng)液中通常加入等天然成分，將其置于95%

空氣加5%CO2的氣體環(huán)境中，CO2的作用是0

(3)基因拼接用到的工具有和o

(4)單克隆抗體的優(yōu)點是o

4.(2016?安康二調(diào))埃博拉病毒(EBOV)是一種能引起人類和靈長類動物發(fā)生埃博

拉出血熱(EBHF)的烈性病毒，其遺傳物質(zhì)為RNA,利用相應(yīng)的生物學(xué)技術(shù)制備

出抗EBOV的單克隆抗體，可快速檢測EBOV。請回答下列問題：

(1)途徑一：在制備抗EBOV的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的

EBOV蛋白，一段時間后，從小鼠的脾臟中獲取細胞，將獲得的細胞與

小鼠的細胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞,

在細胞融合過程中體現(xiàn)了細胞膜具有的結(jié)構(gòu)特點是。

(2)途徑二：可將無限增殖的基因用技術(shù)導(dǎo)入能產(chǎn)生抗EBOV抗體的小

鼠漿細胞中，以便源源不斷地產(chǎn)生抗EBOV的單克隆抗體，此細胞可來源于

.的增殖分化。

⑶在途徑二中，將無限增殖的基因?qū)胂鄳?yīng)的免疫細胞的技術(shù)中，需要的工具

酶為O

(4)埃博拉病毒(EBOV)侵入人體時，在細胞中以RNA為模板，在________酶的

作用下，合成相應(yīng)的DNA并指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成，進行增殖。

5.(2016?懷化一模)下列是生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個途徑模式簡圖。

普通質(zhì)粒

(1)過程①和②得到的Y細胞稱為。得到的單克隆抗體最主要的優(yōu)點是

(2)抗體1與抗體2的氨基酸排列順序相同,兩者的空間結(jié)構(gòu)是否相同？

為什么?

(3)在基因表達載體中，啟動子的作用是識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動VI基

因的o

(4)質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是

⑸過程④要用到的主要酶是

6.(2016?長春二監(jiān))下列是在生產(chǎn)實踐中培育相應(yīng)動植物的過程，請回答：

⑴下圖是培育轉(zhuǎn)基因低乳糖奶牛的流程圖。

乳糖分解酶基因"成纖維細胞一一轉(zhuǎn)基因胚胎操盤受體母牛處轉(zhuǎn)基因低

乳糖奶牛

乳糖分解酶基因是具有的DNA片段，將其導(dǎo)入成纖維細胞中常用的方

法是;轉(zhuǎn)基因成功之后，通常還需要通過核移植技術(shù)將成纖維細胞的細

胞核移入到細胞中，才能培育出轉(zhuǎn)基因牛胚胎，原因是

.。應(yīng)選擇時期的胚胎移植到受體母牛體內(nèi)，受體母牛

需要經(jīng)過_______處理才適合進行胚胎移植。

⑵為保持君子蘭親本的優(yōu)良性狀，科研人員取君子蘭幼葉培養(yǎng)出愈傷組織，然

后再從愈傷組織分化形成小植株，該過程中君子蘭的生殖方式是。這種

技術(shù)稱為________,該技術(shù)的實際應(yīng)用還有方面(答出一點即

可）。

7.（2016?貴陽檢測）1.下圖為人類“治療性克隆”的大致過程，A、B、C代表過

程，甲、乙代表細胞發(fā)育的時期。請據(jù)圖回答問題。

胰島細胞血細胞心肌細胞神經(jīng)細胞肝細胞

I

器官

（供患者本人使用）

⑴圖中A、B過程用到的生物技術(shù)分別是、，甲稱做o

（2）乙是具有和的胚胎干細胞。

（3）相同的胚胎干細胞，通過C過程“克隆”可得到不同細胞，如胰島細胞、血

細胞、心肌細胞等，上述“克隆”過程是胚胎干細胞和的結(jié)果。

（4）按上述方法克隆的器官在移植方面的主要優(yōu)點是o

II.人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性

疾病的病原體為RNA病毒，該病

毒表面的A蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程如圖：

請回答下列問題：

⑴過程①表示的是；過程②表示的是基因工程操作步驟中。

基因工程的核心步驟是（填序號）。

⑵在給小鼠皮下注射A蛋白時，要重復(fù)注射幾次的目的是。

（3）在將X進行擴大培養(yǎng)之前，至少需要經(jīng)過兩次篩選，方法分別是

和O

8.（2016?北京海淀期中）研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達的H蛋白

在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達。抗H蛋白單克隆抗體能抑制過

量表達H蛋白的乳腺癌細胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段。

(1)選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點，是因為H蛋白在成年個體的正常

組織中(填“低表達”或“高表達”)。H蛋白是一個跨膜蛋白，結(jié)構(gòu)如

圖所示。制備免疫小鼠用的H蛋白(抗原)時，應(yīng)構(gòu)建_______區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核

細胞表達并提純。

8胞外區(qū)

跨膜區(qū)

胞內(nèi)區(qū)

(2)將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的脾臟細胞與細胞進行融合，

使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是,細胞融合的原理是o

⑶將融合細胞在_______培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細胞

生長。將雜交瘤細胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，應(yīng)用技術(shù)進行抗體陽性檢

測。經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞。

⑷將篩選得到的雜交瘤細胞，經(jīng)過_______或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，獲取大量的單

克隆抗體。

(5)治療乳腺癌時，可單獨使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗

癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，殺死癌細胞。這充分體現(xiàn)了單克隆抗體

.的特點。

課時考點43胚月臺工程

II三年高考真題演練||

1全國課標(biāo)題

1.(2016?全國課標(biāo)卷n,40)下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物

(二倍體)的流程。

OTI②產(chǎn)網(wǎng)

個

―"gf-fe-”個體

H體

回答下列問題：

(1)圖中A表示正常細胞核,染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為

過程①表示去除細胞核，該過程一般要在卵母細胞培養(yǎng)至適當(dāng)時期再進行，去核

時常米用的方法。②代表的過程是。

⑵經(jīng)過多次傳代后，供體細胞中的穩(wěn)定性會降低。因此，選材時必須

關(guān)注傳代次數(shù)。

（3）若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原

因是

（4）與克隆羊“多莉（利）”培養(yǎng)成功一樣，其他克隆動物的成功獲得也證明了

2地方精選題

2.（2016?江蘇卷，11）印度沙漠貓是一種珍稀貓科動物，通過胚胎工程技術(shù)，可以

讓家貓代孕而繁育，主要步驟如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）

超數(shù)

早期

產(chǎn)

印

排卵下

步

步

驟甲

胎

胚

度

漠

4沙

養(yǎng)

培

貓

仔

收集幼

精液

A.步驟甲、乙分別是指精子獲能、胚胎分離

B.誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細胞

C.受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來源于營養(yǎng)液

D.步驟甲使用的培養(yǎng)液和早期胚胎培養(yǎng)液成分基本相同

3.（2015?天津卷，6）2015年2月3日，英國議會下院通過一項歷史性法案，允許

以醫(yī)學(xué)手段培育“三親嬰兒”。三親嬰兒的培育過程可選用如下技術(shù)路線。

據(jù)圖分析，下列敘述錯誤的是（）

A.該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代

B.捐獻者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒

C.三親嬰兒的染色體全部來自母親提供的細胞核

D.三親嬰兒的培育還需要早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)

4.（2015?江蘇卷，3）下列關(guān)于動物細胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是（）

A.乳腺細胞比乳腺癌細胞更容易進行離體培養(yǎng)

B.細胞核移植主要在同種動物、同種組織的細胞之間進行

C.采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胚的數(shù)量是有限的

D.培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中含維生素、激素等多種能源物質(zhì)

5.（2015?重慶卷，8）某課題組為解決本地種奶牛產(chǎn)奶量低的問題，引進了含高產(chǎn)

奶基因但對本地適應(yīng)性差的純種公牛。

（1）擬進行如下雜交：

含A（具高產(chǎn)奶基因的純種）X早B（具適宜本地生長基因的純種）一一C

選擇B作為母本，原因之一是胚胎能在母體內(nèi)正常。若C中

的母牛表現(xiàn)為適宜本地生長，但產(chǎn)奶量并未提高，說明高產(chǎn)奶是性狀。

為獲得產(chǎn)奶量高且適宜本地生長的母牛，根據(jù)現(xiàn)有類型，最佳雜交組合是

，后代中出現(xiàn)這種母牛的概率是（假設(shè)兩對基因分別

位于不同對常染色體上）。

（2）用以上最佳組合，按以下流程可加速獲得優(yōu)良個體。

|供體公|

|牛供精|

（D

件體母|

|牛供卵|

精子要具有受精能力，需對其進行處理；卵子的成熟在過程

中完成。在過程④的培養(yǎng)基中含有葡萄糖，其作用是。為篩選出具有優(yōu)

良性狀的母牛，過程⑤前應(yīng)鑒定胚胎的。子代母牛的

優(yōu)良性狀與過程的基因重組有關(guān)。

⑶為了提高已有胚胎的利用率，可采用技術(shù)。

||兩年模擬試題精練|

1.（2016?海南七校一聯(lián)）如圖是利用高等哺乳動物的生殖細胞進行的體外受精技

術(shù)培育試管動物的大致流程。請回答下列問題：

移植到子宮

精子繼續(xù)發(fā)育

受精卵早期胚胎

（1）在體外受精前，要對精子進行處理，從而使精子具有與卵細胞受精

的能力。

（2）體外培養(yǎng)受精卵時，需給予一定量的02和C02。受精卵進行細胞呼吸產(chǎn)生C02

的場所是,消耗的02是用于的產(chǎn)生。

⑶從重組細胞到早期胚胎過程中所利用的胚胎工程技術(shù)是,胚胎移植

前通過_______技術(shù)可獲得較多胚胎。

2.（2016?渭南名校聯(lián)考）下圖是某科研小組設(shè)計的用“精子介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移法”培

育轉(zhuǎn)基因山羊（2n）的流程圖。據(jù)圖回答下列問題：

標(biāo)記的①

.—*精子

外源墓因、②③早期④代孕一轉(zhuǎn)基

卵母細胞L"?一胚胎一母羊一因羊

（1）”精子介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移法”是利用精子易于與外源基因結(jié)合的能力，通過圖

中的①過程,將精子作為外源基因的,由的精子，經(jīng)過②過程，

將外源基因送入卵母細胞。

（2）進行②過程的卵母細胞應(yīng)處于期，此時細胞中含個染色

體組。受精過程中防止多精入卵的兩道屏障是透明帶反應(yīng)和。

（3）③過程需要在____________________________________________________

____________________________________________（寫出兩點）等條件下進行。

（4）胚胎工程是指對動物的早期胚胎或所進行的多種顯微操作和處理

技術(shù)。④過程涉及的胚胎工程技術(shù)是。

3.（2016?河北省唐山市灤南一中高三期初）治療性克隆對解決供體器官缺乏和

器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義，流程如下：

n

H一

H組

u移

織

植

一

器

包

（1）過程①米用的是細胞工程中的技術(shù)，過程②米用的是胚胎工程中

的技術(shù)。

（2）體細胞進行體外培養(yǎng)時，所需氣體主要有02和C02,其中C02的作用是維

持培養(yǎng)液（基）的0

（3）如果克隆過程中需進行基因改造，在構(gòu)建基因表達載體（重組載體）時必

須使用和兩種工具酶。基因表達載體上除目的基因外，還必須

有、以及等。

（4）胚胎干細胞可以來自于囊胚中的。在一定條件下，胚胎干細胞可

以分化形成不同的組織器官。若將圖中獲得的組織器官移植給個體（填

“A”或"B”），則不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

4.（2016?沂州聯(lián)考）自然條件下，哺乳動物不發(fā)生孤雌生殖。2014年3月，云

南農(nóng)大科研團隊把豬卵母細胞進行人為的孤雌激活處理，使其發(fā)育成胚胎，移植

到代孕母豬體內(nèi)，獲得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆豬。這種克隆豬不同于

核移植獲得的克隆豬，現(xiàn)將兩種技術(shù)進行比較。

①

良種卵母孤雌激活處理爰育③

母豬f細胞^＞二~^底胎十小

\⑤：重組上早期移植一受體更仃降您

"荷商細胞胚胎子宮兄隆豬

即一體細胞/提取

mRNAfcDNAf擴增產(chǎn)物

（1）圖中過程①②③④是獲得孤雌生殖克隆豬的技術(shù)流程，那么獲得核移植克

隆豬的技術(shù)流程是過程（填序號）。

（2）孤雌生殖克隆豬仍然是二倍體生物，但由于缺失方親本基因，導(dǎo)

致其生長發(fā)育中出現(xiàn)多種問題，給研究者提供了很好的材料。

（3）孤雌激活處理其實質(zhì)是要激活卵母細胞,使其發(fā)育成早期胚胎，

得到克隆豬。

（4）體細胞核移植技術(shù)中也會用到卵母細胞，需要選擇時期的卵母細

胞，并用微型吸管吸出o

（5）早期胚胎移植時，必需移植到同種、的其他雌性動物子宮中，才

可能移植成功。

（6）可以從兩種不同的克隆豬中提取mRNA進行研究，也可通過方法

得到多種cDNA,并通過技術(shù)擴增產(chǎn)物。

5.（2016?黃岡八校聯(lián)考）如圖是牛胚胎移植示意圖，請回答相關(guān)問題:

選擇供體母牛受體母牛

.....同期發(fā)情...........

超數(shù)排卵

I

供體公牛一配種

I

收集胚胎胚胎移植

質(zhì)量檢查、培養(yǎng)妊娠檢查

/

分娩（胚胎移植的犢牛）

（1）牛胚胎移植過程中，分娩產(chǎn)生的犢牛的遺傳物質(zhì)來自,移植前可

選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的進行,實現(xiàn)同卵多胎。

（2）胚胎移植前可用SRY-PCR法進行性別鑒定,在用PCR擴增SRY基因時，

需要的條件主要有擴增緩沖液、模板DNA、4種脫氧核甘酸、特定引物和

（3）從供體母牛子宮內(nèi)收集胚胎的方法叫,其生理學(xué)基礎(chǔ)是

（4）一頭良種犢牛成年后腎功能異常，治療方式為選擇器官移植，為避免發(fā)生

免疫排斥,可通過技術(shù)獲其胚胎干細胞,再誘導(dǎo)分化成相應(yīng)組織、器官，

然后進行移植，胚胎干細胞可來源于囊胚的,可分化為成年動物體內(nèi)任

何一種組織細胞，即具有。

6.（2016?蘭州統(tǒng)考）下圖表示克隆羊的培育過程，請根據(jù)所學(xué)知識回答問題：

（1）培育克隆羊時用到的卵母細胞可以從屠宰場收集，并在體外培養(yǎng)到

期。

（2）從供體羊中取上皮細胞，用處理后，進行分散培養(yǎng)。在體外培養(yǎng)

時，培養(yǎng)液中除了加入水、無機鹽、維生素、葡萄糖、氨基酸等營養(yǎng)成分之外，

通常還需要加入等天然物質(zhì)。

（3）通過顯微操作吸出卵母細胞中的細胞核，此過程中還需要將一并

吸出。

（4）將融合后的重組細胞培養(yǎng)到早期胚胎后，移入代孕母羊體內(nèi)的最佳時期

是。

（5）移入代孕母羊體內(nèi)的胚胎之所以能夠存活，是因為受體不僅不會對其發(fā)

生,而且受體還能通過子宮與其建立正常的生理和組織聯(lián)系。

（6）若要一次獲得多只相同的克隆羊，宜采用技術(shù)，若做DNA分析

鑒定性別應(yīng)取細胞。

7.（2016?黃岡質(zhì)檢）2013年7月，中國試管嬰兒之母——盧光現(xiàn)教授與研究伙

伴共同宣布全球首批經(jīng)全基因組測序的PGD/PGS試管嬰兒在長沙誕生。新技術(shù)

的突破意味著通過設(shè)計試管嬰兒解決部分不孕不育問題的同時，部分腫瘤疾病、

遺傳性疾病的家族性遺傳也將有望避免。

（1）設(shè)計試管嬰兒是為了提高受孕率，胚胎移植時多采用多胚胎移植，因此需

用處理促進母親排出更多的卵子。

（2）胚胎發(fā)育的卵裂期在（填“透明帶”或“放射冠”）內(nèi)進行。受

精卵經(jīng)72h體外培養(yǎng)發(fā)育成32細胞左右的胚胎，叫做,可用于胚胎移

植。

（3）為了某些需要，需對胚胎的性別進行鑒定。目前最有效最準(zhǔn)確的方法是

SRY—PCR法，操作的基本程序是：從被測的囊胚中取出幾個（填“滋

養(yǎng)層”或“內(nèi)細胞團”）細胞，提取DNA為模板；然后用位于Y染色體上的性

別決定基因（即SRY基因）的一段核甘酸序列作,在催化作

用下進行PCR擴增;最后與SRY特異性探針出現(xiàn)陽性反應(yīng)者，胚胎為性。

（4）設(shè)計試管嬰兒、克隆人等都是引起人們廣泛爭論的問題。我國不反對治療

性克隆，即可利用人體細胞核移植等技術(shù)治療人類疾病，在去除卵母細胞的細胞

核時，可用微型吸管把位于之間的第一極體一并吸出。

8.（2016?石家莊一模）多不飽和脂肪酸需要從膳食中攝取，而不能被人體直接

合成?？茖W(xué)家通過轉(zhuǎn)基因手段將3—6脂肪酸脫氫酶基因（FAT1）整合到肉牛基

因組，以期提高肉牛體內(nèi)的多不飽和脂肪酸含量，促進人類健康。請回答下列問

題。

（1）將3—6脂肪酸脫氫酶基因?qū)肴馀＜毎谐Ｓ玫姆椒ㄊ?

在用PCR技術(shù)擴增目的基因時，需要的條件主要有擴增緩沖液、模板DNA、4

種原料、特定引物和。

（2）體外受精獲得受精卵時，將優(yōu)良公牛的精子收集后放在一定濃度的肝素溶

液中進行培養(yǎng)其目的是

（3）下列有關(guān)胚胎移植的敘述錯誤的是（）

A.應(yīng)選擇健康和具有正常繁殖能力的個體作為受體

B.只有供、受體生理狀態(tài)相同，移入受體的胚胎才能被接受

C.胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取卵子

D.受體牛對植入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

（4）胚胎移植前可選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的（填胚胎發(fā)育時期）進

行,以實現(xiàn)同卵多胎。

（5）該轉(zhuǎn)基因牛還可以用核移植的方法繁殖，用核移植的方法得到的動物稱

為。用于核移植的供體細胞一般都選擇10代以內(nèi)的細胞，目的是保持

細胞正常的o

9.（2015?漳州龍海二中模擬）工嵌合體胚胎是指用四倍體（4n）胚胎與二倍體

胚胎（2n）或胚胎干細胞（ES細胞）進行聚合，形成由二倍體和四倍體細胞組

成的嵌合體。工嵌合體胚胎的構(gòu)建常用方法如圖，請據(jù)圖分析回答：

2n的ES細胞內(nèi)細胞團

（1）受精卵是胚胎發(fā)育的開端，圖中的卵細胞達到時期，才具備受精

的能力，而精子需經(jīng)過過程才能和卵細胞結(jié)合。

（2）2n的ES細胞來自胚胎發(fā)育過程的期，本實驗中從功能上說明了

該細胞o

（3）非嵌合體胚胎的構(gòu)建用到的現(xiàn)代生物工程技術(shù)主要有:o

10.（2016?吉林模擬）利用乳腺生物反應(yīng)器獲取藥用蛋白具有產(chǎn)量高、成本低等

優(yōu)點。下圖所示為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得人血清白蛋白的流程。請回答下列問題:

轉(zhuǎn)基因牛奶

（1）PCR擴增人血清白蛋白基因時使用的酶是0要使人血清白蛋白基

因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細胞中表達，應(yīng)將其與基因的啟動子等調(diào)控組件

重組。

（2）為使供體母牛一次排出多枚卵母細胞，常對其注射。采集的精子

需要經(jīng)過,才具備受精能力。

（3）過程①將重組表達載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是。過程②包括

技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；在進行胚胎移植時，需對受體母牛進行—處理。

（4）為了獲得母奶牛，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行。

若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用技術(shù)。

（5）為使人血清白蛋白基因在后代中長期保持，可將轉(zhuǎn)基因奶牛體細胞的—轉(zhuǎn)

入—細胞中構(gòu)成重組細胞，使其發(fā)育成與供體具有相同性狀的個體，該技術(shù)稱

為o

H.（2016?東北三省四市聯(lián)模）我國研究人員創(chuàng)造出一種新型干細胞—異種雜

合二倍體胚胎干細胞，具體研究過程如下圖所示，請據(jù)圖回答問題：

（1）圖中的單倍體囊胚1最可能是由小鼠的發(fā)育而來，所采用的技術(shù)

應(yīng)為,培養(yǎng)過程中使用的培養(yǎng)液除含有一些無機鹽和有機鹽外,

還需添加維生素、激素、以及血清等物質(zhì)。

（2）圖中的單倍體ES應(yīng)取自囊胚的細胞，ES在形態(tài)上表現(xiàn)為

（3）由于物種間存在,因此自然情況下哺乳動物遠親物種間的配子往

往無法完成作用，或者即便能完成也不能發(fā)育。但是人們?yōu)榱松飳W(xué)研

究的便利，創(chuàng)造出了各類遠親物種間的雜合細胞，如小鼠一大鼠、人一鼠等雜交

細胞，由于這些細胞都是由體細胞融合產(chǎn)生，因此雜交細胞中通常含有

個染色體組。

12.（2016?淄博一模）利用生物工程技術(shù)，可從轉(zhuǎn)基因奶山羊乳汁中分離獲得人

凝血因子IV,用于血友病的治療。請回答下列問題：

（1）根據(jù)凝血因子IV基因上游和下游的堿基序列，可用技術(shù)獲取并擴

增基因。構(gòu)建該基因表達載體時，所用到的工具酶是，該基因表達載體

中，凝血因子IV基因的上游和下游分別是o

（2）將目的基因表達載體導(dǎo)入奶山羊受精卵的常用方法是。受體細胞

選用受精卵的優(yōu)點是細胞大易操作、營養(yǎng)物質(zhì)含量高和。

（3）在體外胚胎培養(yǎng)時，應(yīng)選用囊胚的進行DNA分析，用于選擇雌

性胚胎。此期的胚胎也適于胚胎分割移植，此技術(shù)的優(yōu)點是

（4）人凝血因子IV是一種胞外酶，該蛋白的加工是在等細胞器上進行

的。人凝血因子IV只在乳腺細胞合成的原因是o

13.（2016?唐山一模）下圖為培育轉(zhuǎn)基因山羊生產(chǎn)人。一酪蛋白的流程圖。請回

答下列問題：

（人B-酪邕目顰［g運載闞［一人B-酪蛋白的轉(zhuǎn)基因

（重組人B-酪蛋白基因表達載困②■擴大的轉(zhuǎn)基因山羊群體）

厚微汽射’":：

（普通山羊）——受精卵I早期胚胎）（人B-3各蛋白）

（1）過程①為基因工程中的,人p—酪蛋白基因為,可從基

因文庫中獲取，基因文庫包括O

（2）過程②指的是胚胎移植過程，一般選取的胚胎進行胚胎移植，不

選用原腸胚時期。

（3）過程③為加速轉(zhuǎn)基因動物的繁育，可以采用、等方法。

（4）過程④指的是目的基因的表達，包括兩個階段，在分子水平上檢

測目的基因是否在轉(zhuǎn)基因山羊體內(nèi)成功表達的方法是

14.（2016?臨沂一模）人們利用轉(zhuǎn)基因、核移植等技術(shù)獲得動物胚胎，移植給受

體獲得后代。請回答：

（1）在轉(zhuǎn)基因過程中，構(gòu)建基因表達載體常用的工具酶是。目的基因

導(dǎo)入動物細胞最常用的技術(shù)是。

（2）在核移植過程中，從供體內(nèi)獲得體細胞后，對其進行的初次培養(yǎng)稱

為,其細胞數(shù)量達到一定程度后出現(xiàn)現(xiàn)象而使細胞停止分裂,

需用酶處理使其分散成單個細胞繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞，原因是；

所用的去核卵母細胞一般處于期；用于培養(yǎng)供體細胞的培養(yǎng)基中通常含

有等天然成分。

（4）胚胎移植時，胚胎在受體內(nèi)存活的生理學(xué)基礎(chǔ)是受體對移入子宮的外來胚

胎基本上不發(fā)生反應(yīng)；欲獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個后代，可選擇發(fā)

育良好、形態(tài)正常的進行胚胎分割，因為該時期的細胞具有o

15.（2016?信陽三門峽聯(lián)考）哺乳動物單倍體胚胎干細胞技術(shù)是遺傳學(xué)研究的新

手段。下圖表示研究人員利用小鼠（2N=40）獲取單倍體胚胎干細胞的方法。

請分析并回答下列問題：

①②

乙

⑥⑦

（1）方法甲中，研究人員需要對實驗小鼠A注射,使其,從

而獲得更多的卵母細胞，再利用SrC12溶液處理、激活卵母細胞，并在體外培養(yǎng)

至[④]期，再利用流式細胞儀篩選出單倍體細胞。

（2）方法乙中，研究人員首先采用特定方法去除⑥中的雌原核，并在體外培養(yǎng)

至⑧。⑧中細胞染色體數(shù)目應(yīng)為。與正常二倍體小鼠的基因組染色體組

成相比，⑧中細胞的染色體的組成不同在于o

（3）研究發(fā)現(xiàn)，小鼠單倍體干細胞存在自發(fā)二倍體化的現(xiàn)象。為此，可以通過

測定并分析⑤⑩中細胞的分子含量，或者利用顯微鏡觀察處于有絲分裂

中期細胞中的染色體數(shù)目來確定。

（4）研究發(fā)現(xiàn)，單倍體胚胎干細胞也能分化，形成不同功能的細胞、組織和器

官，該技術(shù)培育的單倍體動物可成為研究基因功能的理想細胞模型。

16.（2016?日照一模）嚴重復(fù)合型免疫缺陷癥的基因治療方法是：先從病人體內(nèi)

獲得淋巴細胞進行體外培養(yǎng)，然后將腺昔酸脫氨酶基因利用逆轉(zhuǎn)錄病毒作為運載

體轉(zhuǎn)移到淋巴細胞，再篩選成功轉(zhuǎn)移的細胞增殖培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內(nèi)。

回答下列問題：

（1）體外培養(yǎng)淋巴細胞，應(yīng)保證處于環(huán)境，在合成培養(yǎng)基中通常加入

適量的等天然成分，培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用

是。

（2）該基因治療過程是在逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用下，使RNA逆轉(zhuǎn)錄為DNA,

與目的基因整合后插入到淋巴細胞基因組中?；虮磉_載體除含有目的基因外，

還必須含有等控制基因表達的信號序列。

（3）淋巴細胞主要在人體的（器官）中分化形成，并參與人體的

免疫。

（4）淋巴細胞的DNA上是否插入了目的基因，一般用標(biāo)記的腺昔酸

脫氨酶基因作為探針，進行DNA分子雜交檢測。

17.（2016?豫南九校聯(lián)考）2014年，上映了《超凡蜘蛛俠2》。電影中，“蜘

蛛俠”能產(chǎn)生高強度的蜘蛛絲，現(xiàn)實中的基因工程也創(chuàng)造出了“蜘蛛羊”，該羊

的乳汁中含有蛛絲蛋白，高強度的蛛絲蛋白可用于許多重要的特種工業(yè)領(lǐng)域。請

回答：

（1）基因工程操作的關(guān)鍵步驟是；如果是將目的基因?qū)胫?/p>

物細胞，采用最多的方法是,其次還有和花粉管通道法等。

（2）如果是將目的基因?qū)雱游锛毎畛Ｓ玫姆椒ㄊ?。此方法的?/p>

體細胞多是o

（3）重組DNA導(dǎo)入受體細胞后，篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)

是。

（4）胚胎移植時，通常將早期胚胎移植到同種且與供體相同的動物體

內(nèi)，受體對外來胚胎基本上不發(fā)生o若需要一次產(chǎn)生兩頭轉(zhuǎn)基因“蜘蛛

羊”，可將階段的胚胎進行分割，具體操作時要保證。

（5）科學(xué)家為保證乳汁中有蛛絲蛋白，應(yīng)該先用技術(shù)，檢測蛛絲蛋白

基因是否整合到了染色體上。

18.（2016?廣東廣州六中等六校聯(lián)考）為了加快優(yōu)良種牛的繁殖速度，科