呼吸道合胞病毒RSV疫苗抗原最優(yōu)解：融合前構象（Pre-F）

呼吸道合胞病毒RSV疫苗抗原最優(yōu)解：融合前構象（Pre-F）RSV疫苗前沿速遞2024年6月7日，葛蘭素史克（GSK）宣布Arexvy適用范圍擴展至50-59歲的RSV高危成人。Arexvy包含RSV融合前重組pre-F糖蛋白及AS01E佐劑，是首款FDA批準的RSV疫苗。2024年8月14日，輝瑞（Pfizer）宣布在免疫功能低下的成年患者中，接種兩劑Abrysvo疫苗具有良好的安全性和免疫原性。Abrysvo是根據(jù)RSV融合前F蛋白制備的不含佐劑的重組亞單位疫苗。2024年9月3日，據(jù)藥物臨床試驗登記與信息公示平臺顯示，深信生物自研的RSV二價mRNA疫苗啟動臨床Ⅰ期（登記號CTR20243326），用于預防60周歲及以上人群呼吸道合胞病毒所致下呼吸道疾病。Pre-F蛋白是RSV疫苗研發(fā)的關鍵抗原呼吸道合胞病毒（RespiratorySyncytialVirus，RSV）是引起包含新生兒及嬰幼兒在內(nèi)的5歲以下兒童肺炎和老年人肺炎的主要病原體之一，具有高度傳染性和致病性。據(jù)統(tǒng)計，全球每年約有3300萬5歲以下兒童患下呼吸道感染疾病。印度、中國、尼日利亞、巴基斯坦和印度尼西亞5個國家的RSV疾病負擔約占全球的50%。早在20世紀60年代科研人員就開始研究RSV疫苗，但由于ERD影響造成其研發(fā)一直停滯不前。結(jié)構性或構象疫苗的提出及RSVpreF穩(wěn)定結(jié)構的成功，推動了近十年RSV疫苗的突破性進展。RSV屬于負鏈RNA病毒，分為A、B兩種亞型，基因組長約15.2kb，包含10個基因，編碼11種蛋白質(zhì)。其中F蛋白和G蛋白對病毒黏附和入侵非常重要，是病毒表面的主要保護性抗原。但由于G蛋白變異多、不穩(wěn)定，F(xiàn)蛋白成為RSV疫苗更理想的靶點。F蛋白存在融合前（Pre-fusionProtein，Pre-F）和融合后（Post-fusionProtein，Post-F）構象變化。病毒感染過程中，亞穩(wěn)態(tài)的Pre-F蛋白表達在病毒包膜表面，當與宿主細胞膜接觸后，發(fā)生結(jié)構重排，形成高度穩(wěn)定的Post-F蛋白。RSVF蛋白融合前后的構象變化（源自文獻：doi:10.1016/j.cytogfr.2022.10.001）如圖所示，Pre-F蛋白有6種抗原表位，Post-F蛋白僅有4種?？乖砦虎鹾?可誘導更強的中和抗體活性，尤其是位于Post-F頂端的Site?誘導活性最高。Chang等人對兩種形式的F蛋白進行研究，發(fā)現(xiàn)使用Pre-F蛋白免疫產(chǎn)生的中和效價比Post-F蛋白高6.9倍，從而高效預防RSV感染。因此，結(jié)構穩(wěn)定的Pre-F蛋白是產(chǎn)生高效主動免疫的關鍵。義翹神州已成功開發(fā)具有穩(wěn)定融合前構象的Pre-F蛋白（貨號：11049-VNAS）助力RSV疫苗開發(fā)，而融合后構象的Post-F蛋白（貨號：40999-V08H）有助于篩選特異性抗Pre-F抗體。3款獲批上市的RSV疫苗均是基于Pre-F蛋白，而未采用Pre-F蛋白設計的多款疫苗折戟在臨床Ⅲ期，盡管有些在Ⅰ期或Ⅱ期取得了較好的結(jié)果，如Novavax的RSV納米顆粒疫苗、GSK的ChAd155.RSV（FNM2-1）和BavarianNordic的MVABN-RSV等。?義翹神州RSV特色產(chǎn)品義翹神州已開發(fā)具有穩(wěn)定融合前構象的Pre-F蛋白（貨號：11049-VNAS）、RSVPre-F小鼠血抗體滴度檢測試劑盒（貨號：KIT053）、RSV-F(A2)肽庫（貨號：PP004）等產(chǎn)品以助力RSV疫苗開發(fā)。RSVPre-F重組蛋白，Cat:11049-VNAS經(jīng)抗體驗證：具有穩(wěn)定的融合前構象經(jīng)SEC-MALS驗證：三聚體比例≥90%高批間一致性CHO穩(wěn)定株表達，單批次g級供應高純度，三聚體比例≥90%Purity:≥95%bySDS,≥90%bySEC-MALS(MW~170kDa)高批間一致性ELISAassayvalidated:ImmobilizedRSVPre-fusionproteincanbindtoasite?specificPre-Fantibody高穩(wěn)定性RSVPre-F蛋白(Cat:11049-VNAS)經(jīng)反復凍融5次或置于4℃放置48h后，理化性質(zhì)不發(fā)生改變，穩(wěn)定性高。檢測樣品SDS濃度HPLC純度分子量（MALS）原液99%98%170kDa凍融5次99%98%172kDa4℃放置48h99%98%171kDaELISA結(jié)合實驗驗證，經(jīng)過5次反復凍融后的Pre-F蛋白與抗體的結(jié)合活性沒有降低。ImmobilizedPre-Fproteinbindstoapre-Fspecificantibodythattargetsaquaternary-dependentepitopeataconcentrationof0.2μg/mL(100μL/well).Post-F(HisTag)isnotrecognizedbythementionedantibodyatlowconcentrations(routinelytested).免責聲明：義翹神州內(nèi)容團隊僅是分享和解讀公開的研究論文及其發(fā)現(xiàn)，專注于介紹全球生物醫(yī)藥研究新進展。本文僅作信息交流用，文中觀點不代表義翹神州立場。隨著對疾病機制研究的深入，新的實驗結(jié)果或結(jié)論可能會修改或推翻文中的描述，還請大家理解。本文不屬于治療方案推薦，如需獲得治療方案指導，請前往正規(guī)醫(yī)院就診。【參考文獻】1.Cranketal.Aproofofconceptforstructure-basedvaccinedesigntargetingRSVinhumans.Science,2019.doi:10.1126/science.aav90332.XiruiQiu,etal.DevelopmentofmRNAvaccinesagainstrespiratorysyncytialvirus(RSV).CytokineandGrowthFactorReviews,2022./10.1016/j.cytogfr.2022.10.0013