DB32T 4840-2024 大球蓋菇菌種生產技術規(guī)程

ICS65.020.20CCSB29DB32/T4840—2024大球蓋菇菌種生產技術規(guī)程TechnicalregulationsforStrophariarugosoannulataspawnproduction2024-09-12發(fā)布 2024-10-12實施江蘇省市場監(jiān)督管理局 發(fā) 布中國標準出版社 出 版DB32/T4840—2024前 言本文件按照GB/T1.1—202標準化工作導則 第1部分標準化文件的結構和起草規(guī)的規(guī)起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由江蘇省園藝標準化技術委員會提出、歸口并組織實施。本文件起草單位：江蘇江南生物科技有限公司、江蘇省農業(yè)科學院、丹陽市園藝推廣站、鎮(zhèn)江市標準化研究中心。本文件主要起草人：李輝平、姜雅、張凱、曲紹軒、姜建新、曹娟、束霖平、張丹鳳、王琳、顧夢婷。ⅠDB32/T4840—2024大球蓋菇菌種生產技術規(guī)程范圍本文件規(guī)定了大球蓋菇（Strophariarugosoannulata）與留樣的要求。本文件適用于大球蓋菇菌種生產。規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文包括所有的修改單適用于本文件。GB4806.7 食品安全國家標準食品接觸用塑料材料及制品GB5749 生活飲用水衛(wèi)生標準NY/T528 食用菌菌種生產技術規(guī)程術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義?；疽蠹夹g人員、場地選擇、廠房設置和布局、設備設施、使用品種和種源應符合NY/T528的規(guī)定。母種容器宜使用18mm×180mm或20mm×200mm玻璃試管。培養(yǎng)基馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基PD200浸出汁20g20g1000mLpH自然。配置滅菌培養(yǎng)基分裝量不超過試管容量1/4121℃滅菌30min。冷卻滅菌結束后溫度降至65℃±5℃時，在潔凈的環(huán)境中擺斜面，斜面長度不超過試管長度的2/3。斜面凝固后，按NY/T528的規(guī)定進行試管滅菌效果檢驗。1DB32/T4840—2024接種培養(yǎng)按NY/T528的規(guī)定執(zhí)行，做好標記。接種后試管置于23℃~25℃下避光培養(yǎng)，待菌絲長滿斜面2/3以上。原種固體原種容器符合NY/T528的規(guī)定塑料制品符合GB4806.7的規(guī)定。培養(yǎng)料宜使用但不限于以下配方：98260~62；木屑7820260~62。配制滅菌按NY/T528的規(guī)定配制后分裝入原種瓶121℃~123℃滅菌2h。接種培養(yǎng)料溫冷卻至26℃NY/T528的規(guī)定接種，做好標記。接種后置于培養(yǎng)室，23℃~25℃遮光培養(yǎng)，空氣相對濕度保持在55~650.5時結束培養(yǎng)。培養(yǎng)期間按NY/T528要求定期檢查。質量檢驗培養(yǎng)完成后對菌種進行質量檢驗，檢查要求應符合附錄A的規(guī)定。液體原種搖瓶液體原種培養(yǎng)基馬鈴薯200浸出液100浸出液20g、磷酸二氫鉀2g0.5g1000mLpH自然。配制滅菌馬鈴薯和稻殼煮汁過濾后1000mL攪拌均勻，裝入搖瓶，裝液量不超過搖瓶容量的2/5。裝好的搖瓶放入高壓滅菌鍋內滅菌121℃下滅菌30min。接種培養(yǎng)培養(yǎng)基溫度降至26℃以下，嚴格按照無菌操作程序，將母種塊切割成3mm~5mm顆粒，接入待接種搖瓶培養(yǎng)基內，每100mL液體培養(yǎng)基接種10粒。接種后在25℃環(huán)境下靜置培養(yǎng)2d，待接入的菌種塊萌發(fā)出白色菌絲體后，置于振蕩培養(yǎng)箱，25℃下150r/min振蕩培養(yǎng)5d~7d。2DB32/T4840—2024質量檢驗培養(yǎng)完成后對菌種進行質量檢驗，檢驗要求應符合附錄B的規(guī)定。發(fā)酵罐液體原種培養(yǎng)基參考配方：按照每1000mL水加入玉米粉7.5g、黃豆粉5g、葡萄糖20g、蛋白胨2g、磷酸二氫鉀1g、硫酸鎂0.5g比例配制。配制滅菌原料攪拌均勻不應有結塊轉入發(fā)酵罐內裝液量不超過罐體容量的70 加入0.03 消泡劑。121℃滅菌90min。生產用水應符合GB5749的規(guī)定。接種培養(yǎng)培養(yǎng)基溫度降至26℃以下，維持罐體壓力在0.03MPa，快速接入搖瓶菌種。接種量為罐內培養(yǎng)基總體積的0.1 ~0.2 。維持罐體壓力在0.03MPa溫度25℃攪拌狀態(tài)下培養(yǎng)7d~10d。質量檢驗培養(yǎng)完成后對菌種進行質量檢驗，檢驗要求應符合附錄B的規(guī)定。栽培種容器應符合NY/T528的規(guī)定。宜使用17cm×35cm×0.005cm規(guī)格的聚丙烯塑料袋，塑料制品符合GB4806.7的規(guī)定。培養(yǎng)料宜使用但不限于以下配方：雜木屑43 稻殼30 玉米芯20 麩皮或米糠5 石膏1 石灰1 含水量63 ~65 ；雜木屑76 稻殼20 黃豆粉2 石灰1 石膏1 含水量63 ~65 。配制滅菌按NY/T528的規(guī)定配制后分裝入菌種袋121℃~123℃滅菌2h。接種培養(yǎng)滅菌結束后在冷卻室冷卻至25℃以下。固體原種接種按NY/T528的規(guī)定執(zhí)行。發(fā)酵罐液體原種用液體菌種接種器接種，每袋接種量20mL~30mL，封口并貼好標簽。接種后置于培養(yǎng)室，23℃~25℃遮光培養(yǎng)，空氣相對濕度保持在55~65，二氧化碳濃度低于0.5，待菌絲長滿菌袋。培養(yǎng)期間按NY/T528的規(guī)定定期檢查。質量檢驗培養(yǎng)完成后對菌種進行質量檢驗，檢驗要求應符合附錄A的規(guī)定。3DB32/T4840—2024儲藏完成培養(yǎng)后，菌種應在4℃冷庫內儲藏，時間不應超過30d。記錄與留樣各級菌種按NY/T528的規(guī)定建立生產記錄并留樣，檔案保留2年以上。4DB32/T4840—2024固體菌種質量要求見表A.1。

附 錄 A規(guī)范性）固體菌種質量要求表A.1 固體菌種質量要求項目指標檢驗方法容器外觀菌袋干凈，無破損。塞子干燥，無破損肉眼觀察菌絲生長量菌絲潔白，長滿培養(yǎng)料肉眼觀察氣味無異味鼻嗅菌袋外觀培養(yǎng)基貼壁，不收縮肉眼觀察無雜菌菌落，無蟲、螨無拮抗線、高溫線無菌皮、子實體原基微生物學檢測菌種萌發(fā)，無細菌、酵母、霉菌菌落5DB32/T4840—20