細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)學(xué)習(xí)通超星期末考試答案章節(jié)答案2024年

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)學(xué)習(xí)通超星期末考試章節(jié)答案2024年動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

答案:從動(dòng)物活體體內(nèi)取出相關(guān)的組織，用機(jī)械或消化的方法分散成單細(xì)胞懸液，在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下,使之生長和生存，并維持其結(jié)構(gòu)和功能的方法。動(dòng)物組織培養(yǎng)

答案:從生物體內(nèi)取出活的組織（多指組織塊）在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法。組織培養(yǎng)的對象在體外可發(fā)生分化并保持組織的結(jié)構(gòu)和功能，但不具備器官的結(jié)構(gòu)與功能。為什么在細(xì)胞培養(yǎng)過程中要保證最大程度的無菌？

答案:有害物侵入人體內(nèi)或代謝產(chǎn)物積累時(shí)，由于體內(nèi)存在著強(qiáng)大的免疫系統(tǒng)和解毒器官（肝臟等），對它們可進(jìn)行抵抗和消除，使細(xì)胞不受危害。當(dāng)細(xì)胞被置于體外培養(yǎng)后，便失去了對微生物和有害物質(zhì)的抵抗能力，一旦被污染或自身代謝物積累等，可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。因此，培養(yǎng)環(huán)境無毒和無菌是培養(yǎng)細(xì)胞的首要條件。在卡氏瓶原理的啟發(fā)下,出現(xiàn)了試管培養(yǎng),繼而又出現(xiàn)了多種類型的（

）、培養(yǎng)皿和（

）的培養(yǎng)。從20世紀(jì)40年代開始，大多數(shù)培養(yǎng)工作都過渡到用（

）培養(yǎng)。

答案:培養(yǎng)瓶;多孔培養(yǎng)板;瓶子體外培養(yǎng)（或組織培養(yǎng)）主要包括（

）、（

）、（

）三種類型

答案:細(xì)胞培養(yǎng);組織培養(yǎng);器官培養(yǎng)5.早期細(xì)胞培養(yǎng)采用（

）培養(yǎng)基，現(xiàn)在廣泛采用添加（

）的（

）培養(yǎng)基，近二十年來，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基朝著（

）培養(yǎng)基的方向發(fā)展。

答案:天然;血清;人工合成;無血清在（）原理的啟發(fā)下，出現(xiàn)了多種類型培養(yǎng)瓶、多孔培養(yǎng)板的培養(yǎng)。

答案:卡式瓶Harrison開創(chuàng)了動(dòng)物組織和細(xì)胞培養(yǎng)的先河并建立（）。

答案:單玻片懸滴培養(yǎng)法細(xì)胞周期

答案:即一個(gè)母細(xì)胞分裂結(jié)束后形成的細(xì)胞至其下一次再分裂結(jié)束形成兩個(gè)子細(xì)胞的這段時(shí)期。貼壁型細(xì)胞

答案:在體外動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，必須貼附于支持物表面才能生長的細(xì)胞。什么是培養(yǎng)細(xì)胞的一代生存期？培養(yǎng)細(xì)胞的一代生存期可分為哪幾個(gè)階段？各有何特點(diǎn)？

答案:指的是從細(xì)胞接種到下一次再傳代接種的一段時(shí)間。每代細(xì)胞一般要經(jīng)過三個(gè)生長階段：潛伏期、指數(shù)生長期和停滯期（平頂期）。潛伏期：有代謝活動(dòng)，基本沒有細(xì)胞分裂，時(shí)間6~24小時(shí)。指數(shù)生長期：細(xì)胞數(shù)量成倍增長，代謝活動(dòng)旺盛，最適合實(shí)驗(yàn)研究階段，持續(xù)時(shí)間3~5天，培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)被消化，顏色變黃。停滯期：細(xì)胞不增殖，但仍有代謝活動(dòng)，需要進(jìn)行傳代挽救。細(xì)胞培養(yǎng)的平臺(tái)期與衰退期是否一樣，若不一樣，主要的區(qū)別在哪？

答案:不一樣。平臺(tái)期：當(dāng)細(xì)胞長滿瓶壁后，細(xì)胞數(shù)量達(dá)到飽和密度，會(huì)產(chǎn)生接觸抑制和密度抑制，細(xì)胞就會(huì)停止增殖，進(jìn)入停滯期。此時(shí)細(xì)胞數(shù)量持平，也稱平頂期。衰退期：傳代到一定代數(shù)，細(xì)胞的生命活動(dòng)明顯減弱，但增殖很慢或不增殖，難長滿培養(yǎng)面，即使換液也無濟(jì)于事，直至衰退，死亡。貼壁型細(xì)胞主要的形態(tài)分類有（

）、（

）、（

）和（

）。

答案:成纖維細(xì)胞型;上皮細(xì)胞型;游走細(xì)胞型;多形細(xì)胞型體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞其生長方式主要有（

）和（

）兩種，分別稱為（

）和（

）。

答案:貼壁生長;懸浮生長;貼壁型細(xì)胞;懸浮型細(xì)胞細(xì)胞在體外生長時(shí)具有一些特點(diǎn)，其中主要是（

）、（

）和（

）。

答案:細(xì)胞貼附;接觸抑制;密度依賴性細(xì)胞培養(yǎng)操作間經(jīng)紫外線照射消毒和化學(xué)消毒后要開窗通風(fēng)，減小對操作員的危害。

答案:錯(cuò)無菌操作間專用于無菌操作、細(xì)胞培養(yǎng),要求清潔、干燥、無菌、不通風(fēng)，局部空氣潔凈度要達(dá)到百級(jí)以下。

答案:對動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)的營養(yǎng)要求有（

）①氨基酸②碳水化合物③無毒、無菌④

無機(jī)鹽⑤適宜溫度

⑥維生素⑦促生長因子

⑧微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物⑨微量元素⑩氧氣和二氧化碳

答案:①②④⑥⑦⑨體外動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，下列那個(gè)物質(zhì)常作為必含的能量物質(zhì)（

）

答案:葡萄糖人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度為（

）

答案:36.5℃±0.5℃細(xì)胞培養(yǎng)中塑料制品主要采用（

）方法進(jìn)行滅菌，人工合成培養(yǎng)基采用（

）方式進(jìn)行滅菌

答案:紫外線消毒;膜過濾消毒細(xì)胞培養(yǎng)用品的包裝主要包括（

）和（

）兩種類型。

答案:局部包裝;全包裝玻璃器皿的清洗程序主要包括（

）、（

）、（

）和（

）

答案:浸泡;刷洗;浸酸;沖洗培養(yǎng)細(xì)胞的傳代培養(yǎng)

答案:將原細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸液，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。下列屬于培養(yǎng)細(xì)胞污染的類型有（

）

答案:微生物的污染;病毒的污染;化學(xué)物質(zhì)的污染;不同細(xì)胞交叉污染消化法進(jìn)行傳代細(xì)胞操作時(shí)最需要關(guān)注的是（

）

答案:傳代時(shí)機(jī);消化時(shí)間;接種數(shù)量

動(dòng)物細(xì)胞原代培養(yǎng)主要的兩種方法是（

）

答案:組織塊法;消化法微生物污染的主要途徑（

）

答案:空氣;器材和試劑;操作;組織樣本細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的原則：（

）

答案:慢凍快融培養(yǎng)細(xì)胞的凍存液長利用二甲基亞砜作為凍存保護(hù)劑，其使用濃度范圍為（

）

答案:5%~15%真菌污染培養(yǎng)細(xì)胞的現(xiàn)象不包括（

）

答案:肉眼可見培養(yǎng)液渾濁下列注意事項(xiàng)是原代培養(yǎng)操作中不需要注意的（

）

答案:保證二氧化碳培養(yǎng)箱的快拿快放，快速翻轉(zhuǎn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶下面不可能引起細(xì)胞發(fā)生化學(xué)污染的物品是：（

）

答案:浸泡玻璃器皿的酸缸細(xì)胞培養(yǎng)的常規(guī)觀察不包括：（）

答案:細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)什么是CHO細(xì)胞，CHO表達(dá)系統(tǒng)的主要特點(diǎn)是什么？

答案:CHO細(xì)胞又稱中國倉鼠細(xì)胞。①表達(dá)的蛋白質(zhì)在分子結(jié)構(gòu)、理化特性和生物學(xué)功能等方面最接近于天然蛋白分子；②細(xì)胞既可以貼壁生長，又可以懸浮生長，且有較高地耐受剪切力和滲透壓能力；③具有重組基因的高效擴(kuò)增和表達(dá)能力，外源蛋白的整合穩(wěn)定；④具有產(chǎn)物胞外分泌功能，便于下游產(chǎn)物分離純化，并且很少分泌自身的內(nèi)源蛋白。氣升式生物反應(yīng)器必須有中央導(dǎo)流管才能使得液體和氣體循環(huán)。

答案:錯(cuò)攪拌式生物反應(yīng)器不適合懸浮細(xì)胞生長

答案:錯(cuò)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)工藝中的核心技術(shù)是細(xì)胞的懸浮馴化

答案:對單克隆抗體是專門識(shí)別某一特定抗原表位的抗體。

答案:對動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的一般流程不包括最后的產(chǎn)品的分離純化

答案:錯(cuò)根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)特性不同，可采用（

）、（

）、（

）等三種培養(yǎng)方法進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)。

答案:貼壁培養(yǎng);懸浮培養(yǎng);固定化培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)是指在人工條件下（除滿足培養(yǎng)過程的必需的營養(yǎng)要求外，還要進(jìn)行pH和溶氧的最佳控制），在（

）中（

）大量培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。

答案:細(xì)胞生物反應(yīng)器；生物反應(yīng)器;高密度下列關(guān)于中空纖維培養(yǎng)法敘述錯(cuò)誤的是（

）

答案:為細(xì)胞提供二維的生長空間抗原決定簇

答案:抗原上可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu)。單克隆抗體

答案:僅由一種B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生的，理化性狀高度均一、組成均一、只針對某一特定抗原決定簇的抗體分子，稱單克隆抗體。下列不是細(xì)胞融合常用的方法是（

）

答案:細(xì)胞培養(yǎng)牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中加H-Y單克隆抗體，篩選胚胎進(jìn)行移植，以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是（

）

答案:用H-Y抗原免疫母?？色@得相應(yīng)抗體在HAT培養(yǎng)系統(tǒng)中能夠穩(wěn)定生長的細(xì)胞有（

）

答案:骨髓瘤細(xì)胞與淋巴細(xì)胞融合細(xì)胞用于制備單克隆抗體的骨髓瘤細(xì)胞不具有以下哪一特點(diǎn)（

）

答案:自身可分泌免疫球蛋白單克隆抗體的特征表述不正確的是（

）

答案:針對多種抗原決定簇雜交瘤細(xì)胞的凍存均采用液氮保存的溫度是（

）

答案:-196℃葉酸的拮抗劑是（

）

答案:氨基蝶呤在HAT培養(yǎng)基中,()可利用培養(yǎng)基中的次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T)在次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶和胸腺嘧啶核苷激酶的催化下通過補(bǔ)救合成途徑合成DNA。

答案:雜交瘤細(xì)胞;淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)中,細(xì)胞融合前,需要制備哪三種細(xì)胞?()

答案:脾細(xì)胞;骨髓瘤細(xì)胞;飼養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應(yīng)用于:()。

答案:病原微生物抗原、抗體的檢測;腫瘤抗原的檢測;免疫細(xì)胞及其亞群的的檢測;激素和細(xì)胞因子的測定為了防止制備好的雜交瘤細(xì)胞停止分泌抗體,需要做到:()。

答案:應(yīng)用倒置顯微鏡經(jīng)常檢查細(xì)胞的生長狀況;大量保持和補(bǔ)充液氮凍存的細(xì)胞原管;定期進(jìn)行再克隆雜交瘤技術(shù)所使用的抗體檢測方法有()。

答案:酶聯(lián)免疫吸附法;間接免疫熒光法;放射免疫法;雙向擴(kuò)散法用于單抗生產(chǎn)的骨髓瘤細(xì)胞株一般缺乏哪兩種酶,使其不能通過補(bǔ)救途徑合成DNA:()。

答案:TK;HGPRT由一種B細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的只針對某一特定抗原決定簇的抗體分子成為單克隆抗體,它相對于多克隆抗體具有以下哪些特點(diǎn)()。

答案:特異性強(qiáng);靈敏度高;純度高下列屬于可大規(guī)模培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞的有:()。

答案:人二倍體細(xì)胞;CHO細(xì)胞;BHK-21細(xì)胞;Vero細(xì)胞固定化培養(yǎng)常用的方法有()。

答案:吸附培養(yǎng);微囊化培養(yǎng);包埋培養(yǎng)下列屬于微載體選取要求的有:()。

答案:表面適于細(xì)胞附著、伸展和增值;材料無毒性,不與培養(yǎng)基中的化學(xué)成分反應(yīng);不吸收營養(yǎng)成分;直徑盡可能小,且盡可能均一動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)時(shí),需要人工控制的條件包括()。

答案:pH;溶氧;溫度;攪拌速度凍存細(xì)胞時(shí)要緩慢冷凍,主要原因有()。

答案:細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍時(shí),細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶。;冰晶的形成會(huì)引起細(xì)胞脫水,從而使細(xì)胞局部電解質(zhì)濃度增高,pH值發(fā)生改變,部分蛋白發(fā)生變性,導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)代謝障礙。;在冷凍中易破壞細(xì)胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體,從而改變細(xì)胞膜的通透性,使細(xì)胞內(nèi)容物流失。;冰晶體積膨脹易造成DNA的空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷性變化,引起細(xì)胞死亡。造成細(xì)胞復(fù)蘇失敗的原因可能有:()。

答案:凍存時(shí)細(xì)胞數(shù)量少或生長狀態(tài)不良;細(xì)胞受細(xì)菌或支原體污染;液氮罐保管不善;復(fù)蘇方法不得當(dāng);復(fù)蘇時(shí)培養(yǎng)條件改變懸浮生長的細(xì)胞一般采用什么方法進(jìn)行傳代?()

答案:直接吹打傳代;離心分離法傳代培養(yǎng)細(xì)胞的常規(guī)觀察項(xiàng)目有:()。

答案:培養(yǎng)液的變化;細(xì)胞生長情況;細(xì)胞形態(tài);有無微生物污染微生物的污染可以通過下列哪些途徑發(fā)生:()。

答案:空氣;器材及試劑;實(shí)驗(yàn)操作;組織樣本下列屬于消化培養(yǎng)法優(yōu)點(diǎn)的有()。

答案:可以很快得到大量活細(xì)胞;可在短時(shí)間內(nèi)生長成片;原代細(xì)胞產(chǎn)量高所謂培養(yǎng)細(xì)胞生命期,是指細(xì)胞在培養(yǎng)中持續(xù)增殖和生長的時(shí)間,大致可以分為哪三個(gè)階段:()。

答案:原代培養(yǎng)期;傳代培養(yǎng)期;衰退期下列屬于體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長特點(diǎn)的是()。

答案:細(xì)胞貼附;接觸抑制;密度依賴性下列屬于優(yōu)質(zhì)血清的標(biāo)準(zhǔn)表現(xiàn)有()。

答案:透明清亮;土黃色或棕黃色;無沉淀或極少量沉淀,比較粘稠下列屬于物理滅菌法的有()。

答案:紫外線照射;干熱滅菌;濕熱滅菌;過濾除菌下列動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用品,需要采用全包裝的有:()。

答案:膠塞;解剖剪動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常用的設(shè)備有:()。

答案:消毒設(shè)備;無菌操作設(shè)備;細(xì)胞觀察設(shè)備;細(xì)胞和試劑存儲(chǔ)設(shè)備動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域相當(dāng)廣泛,下面屬于其應(yīng)用領(lǐng)域的有:()。

答案:基礎(chǔ)研究;臨床醫(yī)學(xué);動(dòng)物育種;生物制品生產(chǎn)體外培養(yǎng)的三種類型包括:()。

答案:細(xì)胞培養(yǎng);組織培養(yǎng);器官培養(yǎng)單克隆抗體與多克隆抗體有何區(qū)別？

答案:單克隆抗體：由一個(gè)B細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的針對一種它能識(shí)別的抗原決定簇的的單一性抗體。多克隆抗體：指抗原入侵機(jī)體（由于抗原包含多個(gè)抗原決定簇）后，刺激具有相應(yīng)抗原受體的不同淋巴細(xì)胞增殖分化，而產(chǎn)生的多種抗體的混合物?？梢妴慰寺】贵w與多克隆抗體的主要區(qū)別在于其抗體種類是否單一，而不是抗體數(shù)量的多少。在選擇微載體中有何要求？

答案:首先是微載體表面性質(zhì)要適于細(xì)胞附著、伸展和增殖，其次微載體材料要沒有毒性，且不會(huì)與培養(yǎng)基成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，也不會(huì)吸收培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。其次，微載體的直徑最好控制在60-250nm之間，還要有良好的光學(xué)透明性，以便于觀察。除此之外還必須能夠承受120攝氏度的高溫，以便可以高壓蒸汽滅菌。細(xì)胞凍存時(shí)，如何實(shí)現(xiàn)慢凍？

答案:可以采用以下兩種方式：人工傳統(tǒng)降溫：凍存管置于4℃10min→-20℃30min→-80℃16-18小時(shí)（或過夜，最長放置時(shí)間不要超過一個(gè)月）→轉(zhuǎn)移至液氮長期儲(chǔ)存。

程序降溫盒降溫：這種降溫盒可實(shí)現(xiàn)每分鐘1℃自主梯度降溫，大大提高凍存細(xì)胞的存活率。凍存管置于細(xì)胞凍存盒（凍存盒需要提前預(yù)冷至4℃，需檢查其內(nèi)異丙醇或其他液體是否足量）后放于-80℃冰箱16-18小時(shí)（或過夜，最長放置時(shí)間不要超過一個(gè)月）→轉(zhuǎn)移至液氮長期儲(chǔ)存。細(xì)胞培養(yǎng)的污染途徑主要有哪些？

答案:空氣

空氣是微生物傳播的最主要途徑。減少空氣流動(dòng)是防止污染的重要環(huán)節(jié)。器材及試劑

器材清洗消毒不徹底或培養(yǎng)用液等滅菌不徹底使污物殘留或?qū)е录?xì)菌污染。操作

無菌觀念不強(qiáng)、動(dòng)作不準(zhǔn)確、交叉使用吸管或培養(yǎng)液等導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。組織樣本

組織樣本如還有微生物或手術(shù)時(shí)消毒使用的碘酒等可造成污染或影響細(xì)胞生長，這也是原代培養(yǎng)失敗的主要原因之一。怎樣辨別培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞生長情況是否良好？

答案:首先，我們可以通過肉眼觀察培養(yǎng)基的顏色變化及澄清度，若培養(yǎng)基溶液為淺黃色且澄清透明，此時(shí)我們可以初步斷定細(xì)胞沒有受到微生物的污染，進(jìn)而我們可以使用倒置顯微鏡來觀察細(xì)胞生長情況，生長狀況良好的細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)為明亮、均質(zhì)、透明度大；而生長狀態(tài)不好或已經(jīng)進(jìn)入衰亡期的細(xì)胞，在胞質(zhì)中常出現(xiàn)發(fā)暗、有黑色顆粒、脂滴、空泡、形態(tài)不整及邊緣不齊等現(xiàn)象。原代培養(yǎng)細(xì)胞首次傳代時(shí)一般要特別注意哪幾個(gè)方面？

答案:1．傳代時(shí)機(jī)：待細(xì)胞生長到足以覆蓋瓶底壁的大部分表面后再傳代。2．消化時(shí)間：傳代時(shí)，不同的細(xì)胞有不同的消化時(shí)間，因而要根據(jù)需要注意觀察并及時(shí)進(jìn)行處理。原代培養(yǎng)的細(xì)胞較傳代培養(yǎng)的細(xì)胞消化時(shí)間相對較長。3．接種數(shù)量：首次傳代時(shí)細(xì)胞接種數(shù)量要多一些，使細(xì)胞能盡快適應(yīng)新環(huán)境而利于細(xì)胞生存和增殖。請簡要說說如何判斷血清的好壞？

答案:好的血清應(yīng)該是透明清亮，土黃色或棕黃色，無沉淀或極少量沉淀，比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁、不透明、含許多沉淀物，說明血清污染或血清中的蛋白變性；若血清呈棕紅色，說明血清中的血紅蛋白含量太高，取材時(shí)有溶血現(xiàn)象；如果搖晃時(shí)感覺液體稀薄，說明血清中摻入的生理鹽水太多。如果要進(jìn)一步了解血清的質(zhì)量，則應(yīng)連續(xù)培養(yǎng)某些細(xì)胞，觀察細(xì)胞的生長狀況。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用品的清洗和包裝要注意哪些事項(xiàng)？

答案:清洗注意事項(xiàng)：（1）沖洗時(shí)要流水振蕩沖洗，方法是：每瓶灌2/3容積的自來水，振蕩后倒掉，重復(fù)8-10次。（2）浸泡、酸泡的器皿內(nèi)要充滿液體，不得有氣泡。包裝注意事項(xiàng)：（1）手指與器材接觸面積要小，手指不能觸及器材的使用端；（2）封閉器材使用端，標(biāo)記器材手持端；（3）小包裝；（4）玻璃管道口（尖吸管、移液管手持端等）加棉花。超凈工作臺(tái)和二氧化碳培養(yǎng)箱在使用時(shí)需要注意什么？

答案:1.超凈工作臺(tái)使用超凈工作臺(tái)時(shí)應(yīng)注意：（1）使用凈化工作臺(tái)前先以紫外線滅菌燈照射30～50min處理凈化工作區(qū)內(nèi)積存的微生物，關(guān)閉滅菌燈后應(yīng)啟動(dòng)風(fēng)機(jī)使之運(yùn)轉(zhuǎn)兩分鐘后再進(jìn)行無菌操作；（2）超凈工作臺(tái)內(nèi)切勿放有機(jī)溶劑；（3）如試劑滴灑于超凈工作臺(tái)上，請及時(shí)清潔；（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)束請用75%乙醇清潔臺(tái)面。2.二氧化碳培養(yǎng)箱使用二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí)應(yīng)注意：（1）保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣干凈，主要措施如下：存放于箱內(nèi)的培養(yǎng)瓶先用酒精棉擦拭干凈；定期對培養(yǎng)箱內(nèi)壁及其附件進(jìn)行酒精消毒，酒精消毒后用無菌干紗布將內(nèi)壁及附件酒精擦除干凈，待箱內(nèi)酒精揮發(fā)干凈后，再開啟加熱開關(guān)；（2）培養(yǎng)液若灑在培養(yǎng)箱內(nèi)要及時(shí)用75%酒精清潔，以防細(xì)菌污染；（3）培養(yǎng)箱內(nèi)水盤每周消毒、換無菌蒸餾水一次；（4）隨時(shí)注意二氧化碳?jí)毫Ρ淼目潭蕊@示，及時(shí)更換氣瓶。單克隆抗體是由一種（

）克隆所產(chǎn)生的只針對某一特定（

）的抗體分子。

答案:B細(xì)胞;抗原決定簇動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)是指在人工條件（除滿足培養(yǎng)過程必需的營養(yǎng)要求外，還要進(jìn)行pH和溶氧的最佳控制）下，在（

）中（

）大量培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。

答案:細(xì)胞生物反應(yīng)器；動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器;高密度貼壁依賴性細(xì)胞傳代時(shí)采用(

)傳代,而懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞在傳代時(shí)采用(

)或直接傳代。

答案:酶消化法；消化法；消化；酶消化;離心法傳代；離心法;離心傳代；離心傳代法體外培養(yǎng)的細(xì)胞在貼附底物上(

)時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的(

)。此時(shí),瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是(

)。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來,需要用酶處理,可用的酶是(

)。

答案:連接成片、相互接觸；相互接觸；連接成片;接觸抑制;單層;胰蛋白酶細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)者的皮膚主要用1%的新潔爾滅或(

)來消毒滅菌,實(shí)驗(yàn)室地面采用來蘇爾定期拖洗消毒,培養(yǎng)室空氣可以用乳酸蒸氣或(

)。

答案:75%酒精;紫外線照射消毒在利用超凈臺(tái)工作時(shí),應(yīng)著(

)的清潔工作服。進(jìn)入原代培養(yǎng)室需徹底洗手還要戴(

)、著消毒衣帽。

答案:長袖;口罩體外培養(yǎng)主要包括(

)、(

)和(

)三種類型。

答案:細(xì)胞培養(yǎng);組織培養(yǎng);器官培養(yǎng)植物組織細(xì)胞培養(yǎng)基pH值常用（

）或（

）調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH至所定的數(shù)值。

答案:0.1-1mol/L

NaOH；0.1-1NNaOH;0.1-1mol/L

HCl；0.1-1NHCl對貼壁依賴性細(xì)胞來說,判斷是否需要傳代的主要指標(biāo)就是培養(yǎng)物是否已基本(

)培養(yǎng)瓶(皿)的底壁。一般來說原代培養(yǎng)物未達(dá)到支持物(

)的表面積,不要急于傳代。

答案:長滿；覆蓋;80%一般培養(yǎng)液中均含有(

)作為指示成分,以此來顯示培養(yǎng)液的pH值。

答案:酚紅微生物的污染可通過多種途徑發(fā)生,主要包括(

)、器材及試劑、(

)、組織樣本等途徑。

答案:空氣;操作用B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的主要過程包括：（

），（

），細(xì)胞融合和雜交瘤細(xì)胞的篩選，陽性雜交瘤細(xì)胞的篩選，陽性雜交瘤細(xì)胞的克隆及其檢測，雜交瘤細(xì)胞株的凍存和單克隆抗體的大量制備，要經(jīng)過幾個(gè)月的一系列實(shí)驗(yàn)。

答案:動(dòng)物免疫;脾細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞及飼養(yǎng)細(xì)胞的制備在細(xì)胞融合過程中瘤細(xì)胞株應(yīng)用最多的是（

）

細(xì)胞株。

答案:SP2/0細(xì)胞融合過程中使用的促融劑主要是（

），其分子量為（

）均可用，工作濃度范圍通常為（

）。

答案:聚乙二醇；PEG;1000～6000;30％～50％制備單克隆抗體的融合是指將免疫小鼠的（

）和（

）融合。

答案:B淋巴細(xì)胞；脾細(xì)胞;骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合培養(yǎng)時(shí)加入（

）選擇培養(yǎng)基，目的是保證只有雜交瘤細(xì)胞的生長。

答案:HAT在動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)中，能為細(xì)胞提供貼附表面的培養(yǎng)基質(zhì)目前主要有轉(zhuǎn)瓶、（

）、（

）和（

）。

答案:微載體;中空纖維;細(xì)胞工廠無論何種動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，就操作方式來講，大規(guī)模培養(yǎng)可分為：分批式、（

）、（

）、連續(xù)式和（

）。

答案:流加式;半連續(xù)式;灌流式染色法測定細(xì)胞活性時(shí)，（

）能阻止染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，而（

）沒有這種功能。所以，（

）不會(huì)被染色，（

）會(huì)被染色。請選擇下面的正確字母填入上述空白處：A.活細(xì)胞；B.死細(xì)胞。

答案:A;B;A;BMTT法檢測細(xì)胞活性時(shí)，（

）線粒體中的脫氫酶能使外源性的四唑鹽還原為難溶性的（

）色結(jié)晶物并沉積在細(xì)胞中，而（

）則沒有這種功能。在一定細(xì)胞數(shù)量范圍內(nèi)，藍(lán)紫色結(jié)晶物形成的量與（

）數(shù)成正比。請選擇下面的正確字母填入上述空白處：A.活細(xì)胞；B.藍(lán)紫色；C.死細(xì)胞。

答案:A;B;C;A從其他實(shí)驗(yàn)室購買的細(xì)胞株,經(jīng)過(

)穩(wěn)定傳代后,應(yīng)該及時(shí)凍存。

答案:一至二次;1-2次；一到兩次；一至兩次細(xì)胞凍存時(shí)，常用的冷凍保護(hù)劑有（

）和甘油。（

）對大部分細(xì)胞無毒性作用，在細(xì)胞凍存液中被廣泛使用，其常用的最終濃度為（

）。

答案:DMSO；二甲基亞砜;DMSO；二甲基亞砜;0.1細(xì)胞凍存最常用的設(shè)備是（

）。

答案:液氮罐原代培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)傳代后便改稱做(

)。一般情況下當(dāng)傳代(

)左右,細(xì)胞增殖逐漸緩慢,以至完全停止,細(xì)胞進(jìn)入(

)。

答案:細(xì)胞系;10~50次;衰退期培養(yǎng)器皿中細(xì)胞過少或過密都會(huì)影響細(xì)胞的生長、增殖,這種現(xiàn)象稱為(

)。

答案:密度依賴性原代培養(yǎng)方法最基本和常用的有兩種:(

)培養(yǎng)法和(

)培養(yǎng)法。

答案:組織塊；組織塊培養(yǎng)法;消化；消化培養(yǎng)法從體內(nèi)取出細(xì)胞或組織的第一次培養(yǎng),稱為(

)。

答案:原代培養(yǎng)BSS中文名稱為(

),具有維持滲透壓、PH值等作用,常用作洗滌組織和細(xì)胞以及配制各種培養(yǎng)用液的基礎(chǔ)溶液。BSS種類很多,常用的有(

)、(

)

和PBS。

答案:平衡鹽溶液;Hanks液；Hanks溶液;D-Hanks液；D-Hanks溶液血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,最常用的濃度是(

)。

答案:10%動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的合成培養(yǎng)基除需添加血清,為防止污染,培養(yǎng)基中還要添加抗生素,有的細(xì)胞(如上皮細(xì)胞)還要添加(

),添加了以上物質(zhì)的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基稱為(

)。

答案:谷氨酰胺;完全培養(yǎng)基人工合成培養(yǎng)基和酶液采用(

)方式進(jìn)行除菌。

答案:濾過消毒；濾過除菌；過濾消毒；過濾除菌超凈工作臺(tái)臺(tái)面先用(

)擦拭,用紫外線消毒至少(

)min,然后啟動(dòng)超凈臺(tái)(

)和照明燈。

答案:75%酒精;30;風(fēng)機(jī)二氧化碳培養(yǎng)箱通常使用條件為(

)

答案:37℃、5%

二氧化碳；37℃、5%CO2觀察培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)物,要用(

)顯微鏡。

答案:倒置在無菌操作時(shí),首先要點(diǎn)燃(

)。

答案:酒精燈早期細(xì)胞培養(yǎng)采用(

)培養(yǎng)基,現(xiàn)在廣泛采用添加(

)的(

)培養(yǎng)基,近二十年來,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基朝著(

)培養(yǎng)基的方向發(fā)展。

答案:天然;血清;人工合成；合成;無血清Wave、NBS、Applikon等公司在原有的技術(shù)基礎(chǔ)上，推出了各種類型的一次性生物反應(yīng)器。

答案:對動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器與微生物生物反應(yīng)器的攪拌器及通氣方式?jīng)]有區(qū)別。（

）

答案:錯(cuò)下面哪種動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器是模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長的三維狀態(tài)而建立的一種體外培養(yǎng)系統(tǒng)？

答案:中空纖維生物反應(yīng)器下面哪種動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器采用噴射空氣供氧，氧傳遞速率高？（

）

答案:氣升式生物反應(yīng)器下面哪種動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器既可以培養(yǎng)懸浮生長的細(xì)胞，又可以培養(yǎng)貼壁依賴性的細(xì)胞?（

）

答案:中空纖維生物反應(yīng)器下面哪個(gè)不是動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器？（

）

答案:光照生物反應(yīng)器在籠式通氣攪拌式生物反應(yīng)器的基礎(chǔ)上，開發(fā)出的動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器是（

）

答案:籃式通氣攪拌式生物反應(yīng)器下面哪種動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器比較適合進(jìn)行微載體培養(yǎng)？（

）

答案:籃式通氣攪拌式生物反應(yīng)器下面與細(xì)胞的篩選馴化不相符的是：（

）

答案:提高目標(biāo)生物制品的穩(wěn)定性和表達(dá)量（

）一般用于小量培養(yǎng)到大規(guī)模培養(yǎng)的過渡階段，或作為生物反應(yīng)器接種細(xì)胞準(zhǔn)備的一條途徑。

答案:轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)（

）管壁表面有許多海綿狀多孔結(jié)構(gòu)，細(xì)胞能在上面貼壁生長。

答案:中空纖維將貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來的動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法是(

)：

答案:微載體培養(yǎng)固定化培養(yǎng)的適用對象：（

）

答案:貼壁依賴型細(xì)胞和非貼壁依賴型細(xì)胞選擇微載體時(shí)，應(yīng)注意的是（

）:(1)微載體表面性質(zhì)要適應(yīng)于細(xì)胞吸附；(2)微載體材料本身無毒性

；(3)微載體直徑盡可能??；(4)能承受高溫，以便高溫滅菌

；(5)要有良好的透光性

答案:(1)(2)(3)(4)(5)下列不屬于動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)中貼壁培養(yǎng)的是（

）。

答案:微囊化培養(yǎng)（

）的培養(yǎng)小室通過兩條垂直的管道（供應(yīng)管）分別在兩個(gè)相鄰角處互相連接，所以培養(yǎng)液可在各小室間流動(dòng)。

答案:細(xì)胞工廠下列關(guān)于中空纖維培養(yǎng)法敘述錯(cuò)誤的是（

）。

答案:為細(xì)胞提供二維的生長空間轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)過程中，轉(zhuǎn)瓶不斷旋轉(zhuǎn)，使細(xì)胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣，從而提供較好的傳質(zhì)和傳熱條件。

答案:對動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)是指在人工條件下，在細(xì)胞生物反應(yīng)器中低密度大量培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。

答案:錯(cuò)動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)已成功應(yīng)用于生產(chǎn)疫苗、蛋白質(zhì)因子、免疫調(diào)節(jié)劑及單克隆抗體。（

）

答案:對能為細(xì)胞提供貼附表面的培養(yǎng)方式目前主要有旋轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)、中空纖維培養(yǎng)、微囊化培養(yǎng)、微載體等。（

）

答案:錯(cuò)根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)特性不同，可分為旋轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)、中空纖維培養(yǎng)、細(xì)胞工廠培養(yǎng)等。（

）

答案:錯(cuò)/star3/origin/5004528fda9ae7d235f8d7884c380551.png

答案:原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)不包括：（

）

答案:勞動(dòng)強(qiáng)度小原代培養(yǎng)的細(xì)胞較傳代培養(yǎng)的細(xì)胞消化時(shí)間相對較短。

答案:錯(cuò)上皮細(xì)胞型細(xì)胞彼此緊密相連,因?yàn)橄嗷頂D而呈現(xiàn)“鋪路石”狀。(

)

答案:對細(xì)胞培養(yǎng)瓶外的污染物,一般情況下無需處理。(

)

答案:錯(cuò)細(xì)胞代謝旺盛,酸性物質(zhì)積累,致營養(yǎng)液pH值下降,顏色變紫,需換液或傳代處理。

答案:錯(cuò)處于停滯期的細(xì)胞可通過傳代進(jìn)行挽救,但處于生命衰退期的細(xì)胞會(huì)不可逆的向死亡方向發(fā)展。(

)

答案:對液氮滲透性很弱,所以當(dāng)人體皮膚接觸液氮時(shí),不易受到嚴(yán)重凍傷。(

)

答案:錯(cuò)細(xì)胞凍存時(shí),常采用二甲基亞砜(DMSO)作保護(hù)劑。(

)

答案:對細(xì)胞活性檢測是了解不同藥物、生物活性物質(zhì)等對細(xì)胞作用效果的一種簡單、直觀的手段。

答案:對體外培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,因此體外培養(yǎng)的細(xì)胞要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代。

答案:對細(xì)胞被微生物污染后,若鏡下觀察菌體形態(tài)呈卵形,散在細(xì)胞周邊和細(xì)胞之間生長,可判斷為細(xì)菌污染。(

)

答案:錯(cuò)貼附生長的細(xì)胞在外形上一般與體內(nèi)無明顯不同。(

)

答案:錯(cuò)臺(tái)盼藍(lán)法鏡下計(jì)數(shù)時(shí),遇見2個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算。

答案:對細(xì)胞復(fù)蘇應(yīng)采用快速融化的方法,

這樣可以保證細(xì)胞內(nèi)結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)被融化,避免形成胞內(nèi)再結(jié)晶,從而對細(xì)胞造成損害。(

)

答案:錯(cuò)細(xì)胞復(fù)蘇失敗與液氮罐中液氮的容量保管沒有關(guān)系。(

)

答案:錯(cuò)原代培養(yǎng)時(shí),因小鼠毛中有很多微生物,應(yīng)使用75%的酒精長時(shí)消毒。(

)

答案:錯(cuò)有些貼壁依賴性細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞質(zhì)常向外伸出2-3個(gè)長短不同的突起,細(xì)胞形態(tài)有梭形、扇形或不規(guī)則三角形,具有這種細(xì)胞形態(tài)的細(xì)胞歸入成纖維細(xì)胞型。(

)

答案:對原代培養(yǎng)最基本、最常用的方法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法兩種。(

)

答案:對原代培養(yǎng)時(shí),常采用頸椎脫臼法處死小鼠。(

)

答案:對細(xì)胞系的維持是通過換液、傳代、再換液、再傳代實(shí)現(xiàn)的。

答案:錯(cuò)常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)法有血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法和自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)法。(

)

答案:對WST-1溶液4℃避光只能保存一周,-20℃避光可以保存半年,建議使用時(shí)適當(dāng)分裝,盡量避免反復(fù)凍融。

答案:對液氮溫度低達(dá)-196℃,能長時(shí)間保存細(xì)胞活力,理論上在液氮內(nèi)細(xì)胞的儲(chǔ)存時(shí)間是無限的。(

)

答案:對原代培養(yǎng)物首次傳代時(shí)細(xì)胞接種數(shù)量要多一些,使細(xì)胞能盡快適應(yīng)新環(huán)境而利于細(xì)胞生存和增殖

答案:對取材時(shí)要剔除脂肪、神經(jīng)組織、壞死組織等等。(

)

答案:對一般來說,成熟個(gè)體較胚胎組織容易培養(yǎng),正常組織較腫瘤組織容易培養(yǎng)。(

)

答案:錯(cuò)因受支原體污染的培養(yǎng)液常不發(fā)生混濁,細(xì)胞病理變化多數(shù)情況下表現(xiàn)輕微或不顯著,所以支原體污染細(xì)胞后,不易察覺而被忽視。(

)

答案:對半懸浮生長細(xì)胞貼壁不牢,可用直接吹打法使細(xì)胞從瓶壁脫落下來,進(jìn)行傳代。

答案:對生長狀況不好的細(xì)胞,用顯微鏡觀察時(shí),折光性變強(qiáng),輪廓不清,邊緣整齊,細(xì)胞發(fā)暗、胞質(zhì)中常出現(xiàn)空泡、脂滴、顆粒樣物質(zhì),細(xì)胞之間空隙加大。(

)

答案:錯(cuò)抗生素聯(lián)合使用比單獨(dú)使用效果好。預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用效果好。(

)

答案:對細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,為防止交叉污染,實(shí)驗(yàn)器材和培養(yǎng)用液不能混用。(

)

答案:對原代培養(yǎng)取材的基本要求只有無菌取材、器材鋒利兩個(gè)要點(diǎn)。(

)

答案:錯(cuò)細(xì)胞復(fù)蘇整個(gè)操作都需在無菌條件下進(jìn)行,嚴(yán)防污染。

答案:對將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細(xì)胞解凍之后重新培養(yǎng),使細(xì)胞恢復(fù)生長,這個(gè)過程就叫細(xì)胞復(fù)蘇。(

)

答案:對細(xì)菌和霉菌的污染多發(fā)生在傳代、換液或其它實(shí)驗(yàn)操作之后,因而在進(jìn)行上述操作后24~48

h要密切注意是否有污染發(fā)生。(

)

答案:對細(xì)胞凍存時(shí),于4℃及-20℃可放置一個(gè)月。(

)

答案:錯(cuò)已發(fā)生細(xì)菌污染,再使用抗生素,常難根除。有價(jià)值的細(xì)胞被污染后,可試用5~10倍常用劑量,作用24~28小時(shí),再換入常規(guī)培養(yǎng)液中,有時(shí)可奏效。(

)

答案:對細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),要在1min內(nèi)使凍存的細(xì)胞解凍。(

)

答案:對在電鏡下可觀察到污染物多分布在細(xì)胞周圍和細(xì)胞間隙,有的直接吸附在細(xì)胞表面膜上,但在細(xì)胞基質(zhì)內(nèi)未見,可判斷為支原體污染。(

)

答案:對臺(tái)盼藍(lán)法檢測細(xì)胞活性時(shí),死細(xì)胞圓形透明,活細(xì)胞染成藍(lán)色,用活細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞中的百分比表示細(xì)胞活力。

答案:錯(cuò)細(xì)胞體外培養(yǎng),其生長方式可以分為貼壁生長、懸浮生長和兼性貼壁生長三種。(

)

答案:對鼠胚組織取材極為不便,不易培養(yǎng),價(jià)格昂貴,實(shí)驗(yàn)室不經(jīng)常使用。(

)

答案:錯(cuò)MTT在細(xì)胞活性檢測的實(shí)際應(yīng)用中比WST-1、WST-8等更加簡單、快速、準(zhǔn)確。

答案:錯(cuò)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,加入培養(yǎng)瓶的細(xì)胞數(shù)量都應(yīng)在一定的范圍內(nèi),細(xì)胞才能達(dá)到其最佳生長狀態(tài)。(

)

答案:對分離液體性原代細(xì)胞懸液時(shí),可采用長時(shí)間高速離心。(

)

答案:錯(cuò)細(xì)胞系指經(jīng)多次傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。

答案:錯(cuò)從體內(nèi)取出細(xì)胞或組織的第一次培養(yǎng),稱為(

)。

答案:原代培養(yǎng)觀察培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)物,要用(

)顯微鏡。

答案:倒置細(xì)胞轉(zhuǎn)化的標(biāo)志之一是細(xì)胞可能獲得(

),也稱不死性,即細(xì)胞獲持久性增殖能力,這樣的細(xì)胞群體稱(

)細(xì)胞系,也稱(

)細(xì)胞系。

答案:永生性;無限;連續(xù)下面不可能引起細(xì)胞發(fā)生化學(xué)污染的物品是:(

)

答案:浸泡玻璃器皿的酸缸下列關(guān)于培養(yǎng)細(xì)胞生命期說法正確的是:(

)

答案:所謂培養(yǎng)細(xì)胞生命期,是指細(xì)胞在培養(yǎng)中持續(xù)增殖和生長的時(shí)間。下列不屬于貼壁生長的體外培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)類型是:(

)

答案:放射細(xì)胞型MTT法的檢測波長為(

)。

答案:570nm一般原代細(xì)胞傳代按(

)接種,細(xì)胞系傳代按(

)接種。

答案:1:2;1:4細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的基本原則是:(

)

答案:慢凍快融為了除去漂浮的組織塊和殘留的血細(xì)胞,原代培養(yǎng)多少天后需換液一次:(

)

答案:3-5天應(yīng)根據(jù)細(xì)胞對營養(yǎng)的要求選擇不同的培養(yǎng)液對細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇,一般細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)常用(

)。

答案:DMEM培養(yǎng)液MTT經(jīng)活細(xì)胞線粒體脫氫酶轉(zhuǎn)化成的有色物質(zhì)不溶于水,對其進(jìn)行定量分析時(shí),需加入(

)溶解后方能測定。

答案:二甲基亞砜傳代和換液后,如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液很快變黃,不可能由以下哪個(gè)因素造成:

答案:培養(yǎng)器皿沒有洗干凈,有堿性殘留物細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),水浴溫度為:(

)

答案:38~40℃下面哪項(xiàng)不是消化法培養(yǎng)原代細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)?(

)

答案:操作比較簡單正常新鮮的培養(yǎng)液為(

),這種顏色代表培養(yǎng)液的pH值大約為7.2~7.4。

答案:紅色或橙紅色細(xì)胞培養(yǎng)過程中,使用胰蛋白酶的目的是(

)

答案:使動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)下列不屬于懸浮型細(xì)胞的是:(

)

答案:神經(jīng)細(xì)胞WST-1溶液測定細(xì)胞活性時(shí)不需注意以下哪個(gè)事項(xiàng)?(

)

答案:酶標(biāo)儀測定前,需加入二甲基亞砜溶解有色轉(zhuǎn)化物方能測定關(guān)于細(xì)胞系維持注意事項(xiàng)錯(cuò)誤的是:(

)

答案:抹去原始編號(hào),重新標(biāo)記在組織塊培養(yǎng)時(shí),下面哪種操作或方法不利使組織塊粘貼牢固?

答案:及時(shí)更換培養(yǎng)液下面哪項(xiàng)不是組織塊法培養(yǎng)原代細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)?(

)

答案:細(xì)胞生長較快臺(tái)盼藍(lán)法檢測細(xì)胞活性時(shí),細(xì)胞懸液和臺(tái)盼藍(lán)染液的添加比例為(

)。

答案:1:1各種細(xì)胞系都應(yīng)在傳代期的(

)進(jìn)行充足的凍存儲(chǔ)備。

答案:早期細(xì)胞復(fù)蘇次日,最好換液,目的是:(

)

答案:棄去漂浮的死亡細(xì)胞下面哪種試劑可用于終止胰蛋白酶的消化作用?(

)

答案:含小牛血清的培養(yǎng)液細(xì)胞經(jīng)熒光染色劑Hoechst

33258染色后,在細(xì)胞核外與細(xì)胞周圍可看到許多大小均一之熒光小點(diǎn),證明有(

)污染。

答案:支原體生長狀況良好的細(xì)胞,不具備下面哪項(xiàng)鏡下觀察特征?(

)

答案:折光性弱體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的一代生長過程為

。(

)

答案:游離期

、貼壁期、潛伏期、指數(shù)生長期、停滯期細(xì)胞凍存的最佳濃度為(

)。

答案:5×

~

1

×個(gè)/ml下面哪個(gè)凍存液的配方是正確的?(

)

答案:90%血清+10%

DMSO細(xì)胞培養(yǎng)過程中由于細(xì)胞的代謝活動(dòng),酸性物質(zhì)增多,pH值下降,培養(yǎng)液變成(

)

。

答案:黃色使用液氮凍存細(xì)胞時(shí),應(yīng)定期查看液氮余量,確保罐內(nèi)液體高度沒過重要樣品,最少時(shí),液氮不可少于罐體容積的(

)。

答案:三分之一細(xì)胞凍存的最佳時(shí)期為(

)。

答案:對數(shù)生長期快速檢驗(yàn)細(xì)胞冷凍和復(fù)蘇效果的方法是(

)。

答案:細(xì)胞活性檢測細(xì)胞復(fù)蘇失敗的因素不包括(

)

答案:將細(xì)胞從液氮罐中拿出時(shí),用鑷子挾持凍存管鏡下觀察細(xì)胞培養(yǎng)物,可見絲狀、管狀或樹枝狀菌絲,并懸浮飄蕩在培養(yǎng)液中,可判斷為(

)污染。

答案:真菌(

)污染的典型特征是細(xì)胞培養(yǎng)液短期內(nèi)變黃且明顯渾濁。(

)

答案:細(xì)菌肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)物,短期內(nèi)未見培養(yǎng)液混濁,但在培養(yǎng)液中有白色或淺黃色漂浮物,可判斷為(

)污染。

答案:真菌一般來說原代培養(yǎng)物未達(dá)到支持物(

)的表面積,不要急于傳代。

答案:80%動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體中沒有二氧化碳。

答案:錯(cuò)手或相對較臟的物品不能經(jīng)過開放的瓶口上方,瓶口最易污染,加液時(shí)如吸管尖碰到瓶口,則應(yīng)將吸管丟掉。

答案:對動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指將動(dòng)物活體體內(nèi)取出的組織用機(jī)械或消化的方法分散成單細(xì)胞懸液，然后放在模擬體內(nèi)生存環(huán)境的體外環(huán)境中，進(jìn)行孵育培養(yǎng)，使其生存和生長的方法。

答案:錯(cuò)體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞對營養(yǎng)要求很高,需要氨基酸、維生素、激素、生長因子等。

答案:對細(xì)胞培養(yǎng)在細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)、藥理學(xué)、病毒學(xué)上都有廣泛應(yīng)用

。

答案:對動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)操作簡便易于檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

答案:對早期細(xì)胞培養(yǎng)常用天然培養(yǎng)基例如:胎汁、血漿、血清。

答案:對無菌操作間專用于無菌操作、細(xì)胞培養(yǎng),

要求清潔、干燥、無菌、不通風(fēng),局部空氣潔凈度要達(dá)到百級(jí)以下。

答案:對浸泡、煮沸、酸泡的器皿內(nèi)要充滿液體,不得有氣泡。

答案:對培養(yǎng)器材包裝時(shí),手指與器材接觸面積要小,手指不能觸及器材的使用端。

答案:對配制消化液要用Hanks液。

答案:錯(cuò)旋轉(zhuǎn)管培養(yǎng)法開創(chuàng)了細(xì)胞培養(yǎng)的先河。

答案:錯(cuò)血清可以直接從-20℃放到室溫中解凍。

答案:錯(cuò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用水應(yīng)使用在太陽光下晾曬四周的三蒸水。

答案:錯(cuò)培養(yǎng)器材包裝時(shí),玻璃管道口(尖吸管、移液管手持端等)加棉花。

答案:對細(xì)胞培養(yǎng)用到的每種試劑都要精確并且無細(xì)菌危害。

答案:錯(cuò)合成培養(yǎng)基仍缺少某些成分，不能完全滿足體外細(xì)胞生長需要，只能維持細(xì)胞的基本生存需要，所以又稱為基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

答案:對細(xì)胞培養(yǎng)操作間經(jīng)紫外線照射消毒和化學(xué)消毒后要開窗通風(fēng),減小對操作員的危害。

答案:錯(cuò)無菌操作時(shí),開啟、關(guān)閉長有細(xì)胞的培養(yǎng)瓶時(shí),火焰滅菌時(shí)間要長。

答案:錯(cuò)射線消毒主要指使用X射線和高速粒子加速器等發(fā)出的輻射進(jìn)行消毒,適用于消毒量大和不適做高壓或?yàn)V過等方法消毒的培養(yǎng)用品,如塑料制品等,由于一般實(shí)驗(yàn)室不具備射線發(fā)射條件,故很少采用。

答案:對在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)需加入血清。

答案:對無菌操作時(shí),不能用手觸及已消毒器皿。

答案:對一切培養(yǎng)用品都要有固定的存放地點(diǎn)。培養(yǎng)用品與非培養(yǎng)用品應(yīng)嚴(yán)格分開;已消毒與未消毒品應(yīng)嚴(yán)格分開存放。

答案:對D-Hanks液和PBS都不含鈣鎂離子,有利于細(xì)胞的分散,因此常用來配制胰蛋白酶等組織消化液。

答案:對準(zhǔn)備室主要用于培養(yǎng)器皿的洗滌、消毒、培養(yǎng)物的準(zhǔn)備和物資保存等。

答案:對沖洗器皿時(shí)不需要流水振蕩沖洗。

答案:錯(cuò)二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)水盤每周消毒、換無菌蒸餾水一次。

答案:對目前在細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的是將青霉素(常用濃度是100

U/ml)與鏈霉素(100μg/ml)混合使用,俗稱雙抗液,加入所用的培養(yǎng)基中。

答案:對無菌操作時(shí)的一切操作,如安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等,都需在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。

答案:對各種培養(yǎng)用液后,試劑瓶上都要有標(biāo)簽,標(biāo)簽注上名稱、濃度和制備日期即可。

答案:錯(cuò)由于動(dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁,所以對營養(yǎng)要求并不苛刻。

答案:錯(cuò)細(xì)胞所需氣體主要是氧和二氧化碳，氧參與三羧酸循環(huán)，二氧化碳主要與維持培養(yǎng)基的pH有直接關(guān)系。

答案:對緩沖間常設(shè)于無菌室外,

3~5m2即可,要求清潔、干燥和不通風(fēng),

并設(shè)置紫外燈(距地面不超過3m)等必要的環(huán)境消毒設(shè)備。

答案:錯(cuò)培養(yǎng)器材包裝時(shí),封閉器材手持端,標(biāo)記器材使用端。

答案:錯(cuò)現(xiàn)今國內(nèi)外都普遍使用市售商品干粉合成培養(yǎng)基,除專門從事培養(yǎng)基的研究者外,各實(shí)驗(yàn)室已無必要再自己配制培養(yǎng)基。

答案:對培養(yǎng)室是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)及各種無菌操作的區(qū)域,其位置最好設(shè)在陽面。

答案:錯(cuò)無菌操作時(shí),吸管使用前其使用端要火焰消毒,吸取過營養(yǎng)液后的吸管可再用火焰燒灼。

答案:錯(cuò)天花板、地板和四周墻壁要光滑無死角不易在墻角堆積灰塵,以便定期清潔和消毒。

答案:對體外培養(yǎng)只有組織培養(yǎng)一種方法。

答案:錯(cuò)在超凈工作臺(tái)的紫外燈開啟前,可將細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)器材移入,但(

)不能在紫外燈下直接照射,需在操作時(shí)隨手?jǐn)y入。

答案:培養(yǎng)用液和培養(yǎng)細(xì)胞濕熱消毒所用設(shè)備是(

)

答案:高壓蒸汽滅菌鍋在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中除必須的成份外,往往還需要加些液體,下列物質(zhì)不能加的是(

)。

答案:氨水動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)玻璃器皿的清洗包括(

):(1)浸泡

(2)刷洗

(3)浸酸

(4)沖洗

答案:(1)(2)(3)(4)Hanks液在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)操作中的作用是(

)。

答案:洗滌組織細(xì)胞在動(dòng)物培養(yǎng)液中往往不需要加入的物質(zhì)是(

)

答案:尿素要想使動(dòng)物細(xì)胞更好地繁殖、生長,需在合成培養(yǎng)基中補(bǔ)加小牛血清,其濃度為(

)。

答案:5-20%下面哪種培養(yǎng)用液(

)可以不采用濾過除菌方式?

答案:D-Hanks液動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中最常使用(

)孔徑的濾膜進(jìn)行濾過除菌。

答案:0.22μm在(

)原理的啟發(fā)下,出現(xiàn)了多種類型培養(yǎng)瓶、多孔培養(yǎng)板的培養(yǎng)。

答案:卡式瓶若不使用二氧化碳培養(yǎng)箱,將會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)液(

)

。

答案:堿性增強(qiáng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基(液)的除菌方法為(

)

答案:過濾除菌動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中一般都以(

)作為必含的能源物質(zhì)。

答案:葡萄糖動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,抗生素消毒主要適用于(

)消毒。

答案:培養(yǎng)用液人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度為(

)

答案:36.5℃±0.5℃培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞無需加入的營養(yǎng)成分是(

)。

答案:腎上腺素安裝正壓除菌濾器時(shí)以下操作正確的是(

)

答案:濾膜在使用前需經(jīng)三蒸水浸泡過夜動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的