DB3401T 231-2021 生態(tài)環(huán)境檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)菌株管理規(guī)范

ICS13.020.01CCSZ003401IDB3401/T231—2021前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語(yǔ)和定義 4一般要求 2人員 2場(chǎng)所與設(shè)備 2安全防護(hù) 2記錄 25管理流程 2流程概述 2采購(gòu) 2驗(yàn)收 2保藏 2期間核查 2制備 3銷毀 4附錄A（資料性）菌株的代數(shù)、使用類型、繼承關(guān)系 5附錄B（規(guī)范性）標(biāo)準(zhǔn)菌株管理流程 6附錄C（資料性）記錄表 7附錄D（規(guī)范性）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備流程 附錄E（規(guī)范性）儲(chǔ)備菌株制備流程 附錄F（規(guī)范性）工作菌株制備流程 DB3401/T231—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由合肥市生態(tài)環(huán)境局提出并歸口。本文件起草單位：安徽海峰分析測(cè)試科技有限公司、中國(guó)建材檢驗(yàn)認(rèn)證集團(tuán)安徽有限公司、合肥市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站、肥西縣環(huán)境監(jiān)測(cè)站、安徽國(guó)測(cè)檢測(cè)技術(shù)有限公司、安徽海恒檢測(cè)技術(shù)有限公司、安徽省環(huán)境檢測(cè)行業(yè)協(xié)會(huì)、合肥志鵬環(huán)保職業(yè)培訓(xùn)學(xué)校有限公司。本文件主要起草人：丁月、王家菊、程燕、劉莎莎、夏晴、夏俊雅、戴光玉、李偉、楊圣廣、張漢昌、孫美慧、王莉莉、?？　⒋藿p。1DB3401/T231—2021生態(tài)環(huán)境檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)菌株管理規(guī)范本文件規(guī)定了生態(tài)環(huán)境檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)菌株管理的一般要求和流程。本文件適用于生態(tài)環(huán)境檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)菌株的管理。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB/T27405-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品微生物檢測(cè)GB50346生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范SN/T2660食品微生物實(shí)驗(yàn)室菌種保藏方法3術(shù)語(yǔ)和定義GB/T27405-2008界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。標(biāo)準(zhǔn)菌株referencestrain至少定義到屬或種水平的菌株。按其特性進(jìn)行分類和描述，有明確的來(lái)源。[來(lái)源：GB/T27405-2008，3.10]標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株referencestocks標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)過(guò)一代轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。[來(lái)源：GB/T27405-2008，3.11]儲(chǔ)備菌株stockculture標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。工作菌株workingcultures由標(biāo)準(zhǔn)菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、儲(chǔ)備菌株或4代以內(nèi)經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)接獲得的同種菌株，直接用于培養(yǎng)基檢驗(yàn)、人員比對(duì)、陰性及陽(yáng)性對(duì)照等實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。代generation將微生物接種至新鮮培養(yǎng)基上或培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)生長(zhǎng)一次即為一代。注：按照菌株的傳代過(guò)程，對(duì)各代菌株的代數(shù)、使用類型、繼24.1人員3DB3401/T231—2021制備5.6.1制備要求5.6.1.1制備過(guò)程應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行。5.6.1.2培養(yǎng)條件應(yīng)按照供應(yīng)商提供的使用說(shuō)明書要求進(jìn)行。5.6.1.3培養(yǎng)物應(yīng)進(jìn)行標(biāo)識(shí)，標(biāo)識(shí)內(nèi)容應(yīng)包括名稱、菌種號(hào)、傳代日期和代數(shù)及使用類型等信息。5.6.1.4應(yīng)記錄制備信息，制備記錄表參見附錄C中的表C.4。5.6.2制備過(guò)程5.6.2.1復(fù)蘇拆開標(biāo)準(zhǔn)菌株的包裝，按照供應(yīng)商提供的使用說(shuō)明書要求對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行復(fù)蘇。5.6.2.2平板分離采用非選擇性平板對(duì)復(fù)蘇后的標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行分離、純化。5.6.2.3確認(rèn)對(duì)平板分離出的菌落進(jìn)行存活性、純度確認(rèn)。確認(rèn)合格后，方可進(jìn)行制備。如確認(rèn)不合格，應(yīng)及時(shí)滅菌銷毀。5.6.2.4標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備挑取純菌落進(jìn)行分裝保藏，即得到標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株（第2代）。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備流程按照附錄D執(zhí)行。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株不應(yīng)作為標(biāo)準(zhǔn)菌株使用。5.6.2.5儲(chǔ)備菌株制備取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株，在非選擇性平板上轉(zhuǎn)種培養(yǎng)并驗(yàn)證合格，挑取純菌落進(jìn)行分裝保藏，即得到儲(chǔ)備菌株（第3代）。儲(chǔ)備菌株制備流程按照附錄E執(zhí)行。儲(chǔ)備菌株不應(yīng)作為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株或標(biāo)準(zhǔn)菌株使用。5.6.2.6工作菌株制備5.6.2.6.1由標(biāo)準(zhǔn)菌株制備工作菌株（第3代）取標(biāo)準(zhǔn)菌株，在復(fù)蘇、分離確認(rèn)合格后，挑取純菌落轉(zhuǎn)接于斜面進(jìn)行培養(yǎng)，即得到工作菌株（第3代）。制備流程按照附錄F圖F.1執(zhí)行。工作菌株不應(yīng)作為儲(chǔ)備菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株或標(biāo)準(zhǔn)菌株使用。5.6.2.6.2由標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備工作菌株(第4代)取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株，在非選擇性平板上轉(zhuǎn)種培養(yǎng)并驗(yàn)證合格，挑取純菌落轉(zhuǎn)接于斜面進(jìn)行培養(yǎng)，即得到工作菌株（第4代）。制備流程按照附錄F圖F.2執(zhí)行。5.6.2.6.3由儲(chǔ)備菌株制備工作菌株(第5代)取儲(chǔ)備菌株，在非選擇性平板上轉(zhuǎn)種培養(yǎng)并驗(yàn)證合格，挑取純菌落轉(zhuǎn)接于斜面進(jìn)行培養(yǎng)，即得到工作菌株（第5代）。制備流程按照附錄F圖F.3執(zhí)行。5.6.2.6.4由工作菌株(第3代)制備工作菌株（第4代）4DB3401/T231—2021取工作菌株（第3代），挑取純菌落轉(zhuǎn)接于斜面進(jìn)行培養(yǎng)，即得到工作菌株（第4代）。制備流程按照附錄F圖F.4執(zhí)行。5.6.2.6.5由工作菌株(第4代)制備工作菌株（第5代）取工作菌株（第4代），挑取純菌落轉(zhuǎn)接于斜面進(jìn)行培養(yǎng)，即得到工作菌株（第5代）。制備流程按照附錄F圖F.5執(zhí)行。銷毀5.7.1銷毀工作應(yīng)由兩人共同操作，并對(duì)銷毀過(guò)程進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)督。5.7.2將需要銷毀的菌株和使用過(guò)的帶菌耗材經(jīng)121℃高壓滅菌至少30min，再放入實(shí)驗(yàn)室生物廢棄物處理桶。需要銷毀的菌株包括但不限于：a)解凍使用后的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、儲(chǔ)備菌株；b)經(jīng)確認(rèn)或驗(yàn)證不合格的菌株；c)超過(guò)保存期限的菌株；d)其他應(yīng)廢棄的菌株。5.7.3廢棄物應(yīng)按GB19489中廢物處置規(guī)定進(jìn)行處理。5.7.4銷毀記錄表參見附錄C中的表C.5。5DB3401/T231—2021（資料性）菌株的代數(shù)、使用類型、繼承關(guān)系各代菌株的代數(shù)、使用類型、繼承關(guān)系見表A.1。表A.1各代菌株的代數(shù)、使用類型、繼承關(guān)系- 注：從標(biāo)準(zhǔn)菌株到標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、儲(chǔ)備菌株和工作菌株傳代培養(yǎng)次數(shù)不超過(guò)5次。6DB3401/T231—2021（規(guī)范性）標(biāo)準(zhǔn)菌株管理流程標(biāo)準(zhǔn)菌株管理流程見圖B.1。采購(gòu)申請(qǐng)記錄合同 啟動(dòng)工作計(jì)劃采購(gòu)申請(qǐng)記錄合同 啟動(dòng)工作計(jì)劃采購(gòu)驗(yàn)收記錄 驗(yàn)收記錄驗(yàn)收保藏、期間核查保藏、領(lǐng)用記錄期間核查記錄保藏、期間核查制備制備記錄制備銷毀銷毀記錄銷毀工作結(jié)束工作結(jié)束圖B.1標(biāo)準(zhǔn)菌株管理流程圖7DB3401/T231—2021記錄表C.1驗(yàn)收記錄表見表C.1。表C.1驗(yàn)收記錄表序號(hào)標(biāo)準(zhǔn)菌株名稱標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源菌株編號(hào)批號(hào)采購(gòu)日期驗(yàn)收日期驗(yàn)收評(píng)價(jià)驗(yàn)收人備注規(guī)格數(shù)量有效期包裝標(biāo)識(shí)說(shuō)明書證書存活性純度8DB3401/T231—2021C.2保藏與領(lǐng)用記錄表見表C.2。表C.2保藏與領(lǐng)用記錄表9DB3401/T231—2021C.3期間核查記錄表見表C.3。表C.3期間核查記錄表序號(hào)菌株名稱菌株來(lái)源菌株編號(hào)批號(hào)代數(shù)及使用類型保藏日期核查日期核查結(jié)果核查人備注外觀保藏條件有效期文件資料存活性純度關(guān)鍵生化特性DB3401/T231—2021C.4制備記錄表見表C.4。表C.4制備記錄表DB3401/T231—2021C.5銷毀記錄表見表C.5。表C.5銷毀記錄表注：廢棄菌株應(yīng)標(biāo)明編號(hào)、數(shù)量。DB3401/T231—2021（規(guī)范性）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備流程標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備流程見圖D.1。標(biāo)準(zhǔn)菌株（第0標(biāo)準(zhǔn)菌株（第0代）按說(shuō)明書要求復(fù)蘇（第1代）按說(shuō)明書要求的培養(yǎng)條件，在非選擇性平板上分離（第2代）對(duì)分離出的菌落進(jìn)行存活性、純度確認(rèn)否否銷毀符合銷毀符合是挑取純菌落，用合適的保存介質(zhì)進(jìn)行分裝保藏標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株（第標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株（第2代）圖D.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備流程圖DB3401/T231—2021（規(guī)范性）儲(chǔ)備菌株制備流程儲(chǔ)備菌株制備流程見圖E.1。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株（第標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株（第2代）按說(shuō)明書要求的培養(yǎng)條件，在非選擇性平板上分離（第3代）對(duì)分離出的菌落進(jìn)行存活性、純度確認(rèn)否銷毀符合否銷毀符合是挑取純菌落，用合適的保存介質(zhì)進(jìn)行分裝保藏儲(chǔ)備菌株（第儲(chǔ)備菌株（第3代）圖E.1儲(chǔ)備菌株制備流程圖DB3401/T231—2021（規(guī)范性）工作菌株制備流程F.1標(biāo)準(zhǔn)菌株制備工作菌株流程見圖F.1。標(biāo)準(zhǔn)菌株（第標(biāo)準(zhǔn)菌株（第0代）按說(shuō)明書要求復(fù)蘇（第1代）按說(shuō)明書要求的培養(yǎng)條件，在非選擇性平板上分離（第2代）對(duì)分離出的菌落進(jìn)行存活性、純度確認(rèn)銷毀否銷毀符合是挑取純菌落轉(zhuǎn)接于斜面培養(yǎng)生長(zhǎng)工作菌株（第工作菌株（第3代）圖F.1標(biāo)準(zhǔn)菌株制備工作菌株流程圖DB3401/T231—2021F.2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備工作菌株流程見圖F.2。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株（第2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株（第2代）按說(shuō)明書要求的培養(yǎng)條件，在非選擇性平板上分離（第3代）對(duì)分離出的菌落進(jìn)行存活性、純度確認(rèn)否符合銷毀否符合銷毀是挑取純菌落轉(zhuǎn)接于斜面培養(yǎng)生長(zhǎng)工作菌株（第工作菌株（第4代）圖F.2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備工作菌株流程圖DB3401/T231—2021F.3儲(chǔ)備菌株制備工作菌株流程見圖F.3。儲(chǔ)備菌株（第3儲(chǔ)備菌株（第3代）按說(shuō)明書要求的培養(yǎng)條件，在非選擇性平板上分離（第4代）對(duì)分離出的菌落進(jìn)行存活性、純度確認(rèn)否否銷毀符合銷毀符合是挑取純菌落轉(zhuǎn)接于斜面培養(yǎng)生長(zhǎng)工作菌株（第工作菌株（第5代）圖F.3儲(chǔ)備菌株制備工作菌株流程圖DB3401/T231—2