CCK8-MTT細(xì)胞活力and毒性檢測試劑盒

新品推薦！CCK8/MTT細(xì)胞活力/毒性檢測試劑盒一、實驗原理dunhaoMTT全稱為3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazoliumbromide，中文名噻唑藍(lán)。其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源底物MTT還原為不溶于水的藍(lán)紫色甲臜(Formazan)并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。再利用二甲基亞砜(DMSO)等溶解劑溶解細(xì)胞中的甲臜沉積物，用酶標(biāo)儀于490nm或570nm波長處測定其光吸收值，在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，甲臜形成的量與活細(xì)胞數(shù)成正比。MTT應(yīng)用包括藥物敏感性、細(xì)胞毒性、對生長因子的反應(yīng)和細(xì)胞活化。MTT檢測法具有高度的敏感性、可重復(fù)性，并適用于高通量篩選。CCK8作為MTT方法的優(yōu)化升級，WST-8在電子耦合試劑的輔助下，能在線粒體內(nèi)琥珀酸脫氫酶的作用下，迅速轉(zhuǎn)化為高水溶性的橙黃色甲臜產(chǎn)物（formazan），其顏色的深淺直觀反映了細(xì)胞的增殖活力與毒性水平——增殖越強，顏色越深；毒性越大，顏色則越淺。通過酶標(biāo)儀在450nm波長下的精確測量OD值，即可間接量化活細(xì)胞數(shù)量，實現(xiàn)高效、靈敏的檢測。MTT與CCK8是細(xì)胞增殖與毒性檢測實驗中代表性的高靈敏度檢測試劑盒，應(yīng)用范圍極為廣泛，包括但不限于藥物篩選過程中的細(xì)胞反應(yīng)評估、細(xì)胞增殖速率的精確測定、細(xì)胞毒性測試、腫瘤細(xì)胞的藥敏性分析及生物活性因子的效能檢測等，是科研工作者不可或缺的得力工具。CCK8法因其操作簡便、靈敏度高、對細(xì)胞低毒性等優(yōu)點，在更多領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。二、細(xì)胞活力/毒性檢測試劑盒應(yīng)用細(xì)胞活力/毒性檢測試劑盒（MTT/CCK8）用于以96孔板的形式對細(xì)胞的增殖和活力進(jìn)行非放射性的光譜檢測：＞測量生長因子、激素、促分裂因子及各種營養(yǎng)物質(zhì)對細(xì)胞增殖的影響＞細(xì)胞毒性和細(xì)胞抑制化合物分析，如抗癌藥物和其他藥物化合物的分析＞生長抑制性抗體和生理性調(diào)節(jié)因子的評估＞評估細(xì)胞的增殖能力，用于繪制細(xì)胞生長曲線、監(jiān)測細(xì)胞增殖速度三、細(xì)胞活力/毒性檢測試劑盒優(yōu)勢比較四、CCK8額外優(yōu)勢＞酚紅和血清對CCK-8法的檢測不會造成干擾；細(xì)胞毒性非常低，因此加入試劑顯色后，可以在不同時間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到最佳測定時間；＞同時也可以去除含CCK8的培養(yǎng)基，添加新鮮培養(yǎng)基；以使用細(xì)胞進(jìn)行其他實驗，MTT無法實現(xiàn)這種操作；＞MTT由于需要吸走培養(yǎng)基并更換DMSO溶解液，因此不適用于懸浮細(xì)胞檢測，CCK8由于無需換液，完美適用懸浮細(xì)胞；五、細(xì)胞活力/毒性檢測試劑盒產(chǎn)品示例以CCK8法為例：＞實驗一、測試試劑線性接種已知數(shù)量的細(xì)胞，使用CCK8試劑孵育2h后采用酶標(biāo)儀檢測OD450，確定產(chǎn)品顯色值與細(xì)胞數(shù)量線性關(guān)系，驗證試劑盒工作是否正常。結(jié)果顯示顯色值（已減去空白孔本底OD值）與細(xì)胞數(shù)量呈良好線性關(guān)系，試劑盒可以有效工作。＞實驗二、細(xì)胞因子刺激實驗接種固定數(shù)量細(xì)胞，再添加不同濃度的細(xì)胞因子，檢測細(xì)胞因子對細(xì)胞刺激效果。檢測結(jié)果顯示，試劑盒檢出GM-CSF對TF-1細(xì)胞ED50約100