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2025屆內(nèi)蒙古自治區(qū)呼和浩特市第六中學(xué)高三生物第一學(xué)期期末達(dá)標(biāo)測(cè)試試題注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫(xiě)清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2.選擇題必須使用2B鉛筆填涂;非選擇題必須使用0.5毫米黑色字跡的簽字筆書(shū)寫(xiě),字體工整、筆跡清楚。3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書(shū)寫(xiě)的答案無(wú)效;在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。4.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.下列關(guān)于單克隆抗體制備過(guò)程的敘述,錯(cuò)誤的是A.獲得B細(xì)胞之前需給動(dòng)物注射特定的抗原B.分離出的B細(xì)胞應(yīng)與骨髓瘤細(xì)胞融合C.需要從融合的細(xì)胞中篩選出雜交瘤細(xì)胞D.得到的所有雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體均相同2.如圖是某哺乳動(dòng)物細(xì)胞減數(shù)分裂的相關(guān)示意圖(圖中只顯示一對(duì)同源染色體)。不考慮基因突變,下列相關(guān)說(shuō)法正確的是()A.圖l產(chǎn)生異常配子的原因可能是減數(shù)第一次分裂或減數(shù)第二次分裂異常B.圖l中的②與正常配子結(jié)合形成受精卵后發(fā)育成的個(gè)體產(chǎn)生的配子均為異常的C.圖2中甲→乙的變化發(fā)生在減數(shù)第一次分裂前期,同一著絲粒連接的染色單體基因型相同D.若圖2甲細(xì)胞經(jīng)分裂產(chǎn)生了基因型為AB的精細(xì)胞,則另三個(gè)精細(xì)胞的基因型是Ab、ab、aB3.下列關(guān)于細(xì)胞結(jié)構(gòu)的敘述錯(cuò)誤的是()A.哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞壽命較短的原因是細(xì)胞結(jié)構(gòu)不完整B.葉綠體中,類(lèi)囊體堆疊使還原C3化合物的酶的附著面積增加C.線粒體內(nèi),H2O中的氫可參與構(gòu)成還原型輔酶ID.染色體和核糖體均由核酸和蛋白質(zhì)組成4.下圖為人體某個(gè)細(xì)胞所經(jīng)歷的生長(zhǎng)發(fā)育各個(gè)階段示意圖。圖中①?⑥為各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞,a~c表示細(xì)胞所進(jìn)行的生理過(guò)程。據(jù)圖分析,下列敘述不正確的是()A.圖中①?⑥細(xì)胞都具有細(xì)胞的全能性B.⑤和⑥的核基因基本相同,c過(guò)程導(dǎo)致基因選擇性表達(dá),使細(xì)胞的mRNA不完全相同C.⑤由于細(xì)胞代謝受損或中斷引起的細(xì)胞死亡稱(chēng)為細(xì)胞凋亡D.⑤和⑥細(xì)胞的衰老過(guò)程中細(xì)胞核體積增大,可能會(huì)有基因的表達(dá)5.土壤微生物是反映土壤質(zhì)量狀況的重要指標(biāo),常以磷脂脂肪酸總量來(lái)表示??蒲腥藛T開(kāi)展芒萁(蕨類(lèi)植物)對(duì)馬尾松林植被恢復(fù)過(guò)程中土壤微生物群落影響的研究,測(cè)定結(jié)果如下圖。以下推測(cè)或結(jié)論不成立的是()A.土壤微生物細(xì)胞中磷脂脂肪酸的含量比較穩(wěn)定B.測(cè)定中隨機(jī)設(shè)置取樣地且同一類(lèi)型樣地要重復(fù)取樣C.在植被恢復(fù)初期,芒萁對(duì)土壤微生物的影響較小D.隨著植被的恢復(fù),芒萁對(duì)土壤微生物的影響變?nèi)?.非洲豬瘟是由非洲豬瘟病毒(雙鏈DNA病毒)引起的一種豬的傳染病,發(fā)病率和死亡率幾乎達(dá)100%。下列敘述正確的是A.非洲豬瘟病毒侵人豬體內(nèi)會(huì)刺激T細(xì)胞分泌淋巴因子與該病毒結(jié)合B.侵入豬細(xì)胞內(nèi)的非洲豬瘟病毒可以通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄等過(guò)程進(jìn)行自我復(fù)制C.病毒為寄生生物,需要體液免疫和細(xì)胞免疫共同作用才能將其徹底清除D.再次感染非洲豬瘟病毒后,豬體內(nèi)的記憶細(xì)胞會(huì)迅速分泌抗體將其殺滅二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)Ⅰ黑腐皮殼菌是一種能引發(fā)蘋(píng)果植株腐爛病的真菌?,F(xiàn)欲對(duì)該菌進(jìn)行分離培養(yǎng)和應(yīng)用的研究,下表是分離培養(yǎng)時(shí)所用的培養(yǎng)基配方。請(qǐng)回答:物質(zhì)馬鈴薯葡萄糖自來(lái)水氯霉素瓊脂含量211g21g1111mL1.3g21g(1)上述配方中,可為真菌生長(zhǎng)繁殖提供碳源的是____;氯霉素的作用是____。(2)培養(yǎng)基制備時(shí)應(yīng)_____(填“先滅菌后倒平板”或“先倒平板再滅菌”)。待冷卻凝固后,應(yīng)將平板____,以防止冷凝水污染培養(yǎng)基。(3)為檢測(cè)某蘋(píng)果植株黑腐皮殼菌感染程度,需對(duì)該植株患病組織進(jìn)行病菌計(jì)數(shù),故應(yīng)將提取的菌液采用____法進(jìn)行接種。(4)科研人員將該真菌分別置于液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基中培養(yǎng),獲得圖所示的生長(zhǎng)速率曲線。圖中____(選填“a”或“b”)曲線表示該菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線。17h后,該菌生長(zhǎng)速率偏低的原因可能是____、____。ⅡSARS是由冠狀病毒SARS-CoV引起的一種急性呼吸道傳染病,具有發(fā)病急、傳播快、病死率高的特征,其病原體結(jié)構(gòu)如上圖所示。人體感染SARS病毒后,不會(huì)立即發(fā)病,一般是在2-7天的潛伏期后才出現(xiàn)肺炎的癥狀,使診斷和預(yù)防更加困難。請(qǐng)回答:(1)檢測(cè)血漿中的SARS病毒抗體含量不能及時(shí)診斷人體是否感染病毒,原因是____。為及時(shí)確診,科學(xué)家研制了基因檢測(cè)試劑盒,其機(jī)理為:分離待測(cè)個(gè)體細(xì)胞的總RNA,在____酶的作用下得到相應(yīng)的DNA,再利用____技術(shù)擴(kuò)增將樣本中微量的病毒信息放大,最后以熒光的方式讀取信號(hào)。(2)研究發(fā)現(xiàn),SARS病毒的S蛋白是SARS重組疫苗研究的重要候選抗原?,F(xiàn)已知SARS的S蛋白基因序列,經(jīng)____方法得到4條基因片段:f1、f2、f3和f4,再通過(guò)____酶處理可得到控制S蛋白合成的全長(zhǎng)DNA序列f1+f2+f3+f4,即為目的基因。再將之與載體連接形成____、導(dǎo)入受體細(xì)胞以及篩選、檢測(cè)等過(guò)程即可完成重組疫苗的制備。(3)科研人員利用重組的SARS-CoV的N蛋白片段和S蛋白片段的融合蛋白作抗原免疫小鼠,制備抗SARS-CoV的單克隆抗體。取免疫小鼠的____細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞,誘導(dǎo)融合后轉(zhuǎn)入HAT培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選。對(duì)所得的細(xì)胞再利用融合蛋白進(jìn)行____,選擇陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng),分離提純相應(yīng)抗體。8.(10分)胡蘿卜素作為一種重要的天然色素在人們的日常生活中有著廣泛的應(yīng)用,在胡蘿卜素的多種生產(chǎn)方式中,使用三孢布拉氏霉菌進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)的方法,以及產(chǎn)品的高純度、無(wú)毒副作用及綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)受到人們的廣泛重視。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)用平板劃線法純化三孢布拉氏霉菌,通常使用的劃線工具是___________,其滅菌方法是___________。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷的長(zhǎng)滿了菌,第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落,其它劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有_____________。(2)常用___________法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù),但統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌實(shí)際數(shù)目低。(3)不同的材料選用的提取方法不同,根據(jù)胡蘿卜素具有______________的特點(diǎn)。常用__________法提取胡蘿卜素。提取胡蘿卜素時(shí),干燥過(guò)程應(yīng)控制好溫度和_____________以防止胡蘿卜素分解。(4)提取的胡蘿卜素樣品通過(guò)_____________法進(jìn)行鑒定,確定是否提取到胡蘿卜素。9.(10分)蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者,但蛋白質(zhì)在高溫條件下易變性,研究人員嘗試從細(xì)菌中分離得到耐高溫的蛋白質(zhì)。回答下列問(wèn)題:(1)研究人員在取樣后,可將樣品用______(填牛肉青蛋白胨培養(yǎng)基或麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基)在______條件下培養(yǎng)篩選得到所需菌種,該菌種在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中需頻繁使用,可用______培養(yǎng)基進(jìn)行保藏。(2)欲從細(xì)菌中分離得到耐高溫蛋白質(zhì),一般需進(jìn)行樣品處理、粗分離、______和純度鑒定。蛋白質(zhì)溶液粗分離時(shí),需進(jìn)行______除去蛋白質(zhì)溶液中的小分子雜質(zhì),該方法的原理是______。(3)利用電泳法對(duì)不同的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離時(shí),各種分子帶電性質(zhì)的差異和分子本身的大小都會(huì)影響分子的遷移速度,可在凝膠中加入______來(lái)保證影響因素的單一性。(4)凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)和凝膠電泳法鑒定蛋白質(zhì)時(shí),遷移速度都取決于蛋白質(zhì)相對(duì)分子量的大小,兩種方法中遷移速度最快的分別是相對(duì)分子量______的蛋白質(zhì)。10.(10分)HIV是艾滋病的病原體,由蛋白質(zhì)和RNA組成。準(zhǔn)確的檢測(cè)出HIV是及時(shí)治療艾滋病的前提,目前在醫(yī)學(xué)上采用的檢測(cè)方法有蛋白質(zhì)檢測(cè)和核酸檢測(cè)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)提取HIV的RNA,通過(guò)____________過(guò)程獲得_____________,用于PCR擴(kuò)增。PCR技術(shù)需用到的關(guān)鍵酶是_______________。利用擴(kuò)增產(chǎn)物獲取HIV的S蛋白基因,構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入受體細(xì)胞,從受體細(xì)胞中分離出S蛋白并純化,用于檢測(cè)疑似病例血清中的________________(填“抗原”或“抗體”),該檢測(cè)的原理是________________________。(3)核酸檢測(cè)采用逆轉(zhuǎn)錄熒光PCR技術(shù)(RT-PCR技術(shù)),其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是研制特異性基因探針。檢測(cè)HIV采用的是______________(填“人”或“HIV”)的帶熒光的一段特異性的___________________作為探針。(4)疑似患者體內(nèi)取樣提取RNA,逆轉(zhuǎn)錄后以病毒的__________________為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,同時(shí)加入特異性探針,若在擴(kuò)增中探針能與待測(cè)DNA雜交,就表明待測(cè)個(gè)體攜帶HIV。該檢測(cè)的原理是________________________________。11.(15分)某同學(xué)進(jìn)行“探究環(huán)境因素對(duì)光合作用的影響”的活動(dòng),在適宜條件下,對(duì)黑藻進(jìn)行遮光處理(完仝黑暗),測(cè)得其吸收CO2速率和釋放CO2速率隨時(shí)間變化趨勢(shì)如圖1所示(吸收或釋放CO2速率指單位時(shí)間單位葉面積吸收或釋放CO2的量),其葉肉細(xì)胞內(nèi)部分代謝途徑如圖2所示,請(qǐng)回答以下問(wèn)題(1)CO2_____________(填“氧化”或¨還原”)為糖的一系列反應(yīng)稱(chēng)為卡爾文循環(huán)。影響該反應(yīng)的因素除外部條件如光照強(qiáng)度、CO2濃度等,還有內(nèi)部因素如____________(寫(xiě)出兩個(gè))。(2)遮光處理后,短期內(nèi)葉肉細(xì)胞中RuBP的含量會(huì)____________,完全黑暗后黑藻并沒(méi)有立即停止吸收CO2,原因是____________________________。(3)黑暗環(huán)境中葉綠體輸出的三碳糖來(lái)自于____________,輸出的三碳糖轉(zhuǎn)化為葡萄糖,在氧氣充足的條件下,在_______________(填場(chǎng)所)中被徹底氧化分解成CO2。(4)該同學(xué)欲進(jìn)一步探究遮光對(duì)黑藻葉綠素含量的影響,操作如下:a.取等量遮光不同時(shí)間的黑藻苞葉烘十、粉碎、研磨,得到色素提取液;b.光電比色法定量,以____________作為對(duì)照溶液,分別在652nm、663nm和645nm處測(cè)定葉綠體色素提取液的____________;c.計(jì)算。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、D【解析】
單克隆抗體制備過(guò)程包括動(dòng)物免疫、細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞、抗體檢測(cè)、雜交瘤細(xì)胞的克隆化、凍存以及單克隆抗體的大量生產(chǎn)等?!驹斀狻緼、要獲得能夠產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞,需要給動(dòng)物注射特定的抗原,A正確;B、由于分離出的B細(xì)胞不能無(wú)限增殖,所以應(yīng)與骨髓瘤細(xì)胞融合形成能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞,B正確;C、由于融合的細(xì)胞中有三種,即B細(xì)胞與B細(xì)胞融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞,所以需要從融合的細(xì)胞中篩選出雜交瘤細(xì)胞,C正確;D、得到的雜交瘤細(xì)胞不一定只產(chǎn)生一種抗體,D錯(cuò)誤。故選D。2、D【解析】
減數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體在減數(shù)第一次分裂過(guò)程中分離,形成的配子中不含同源染色體,若配子中含有同源染色體應(yīng)是減數(shù)第一次分裂異常所致?!驹斀狻緼、圖l中配子①、②存在同源染色體,配子③、④沒(méi)有相應(yīng)的染色體,應(yīng)是減數(shù)第一次分裂后期同源染色體沒(méi)有分離,而是進(jìn)入了同一個(gè)子細(xì)胞中,A錯(cuò)誤;B、圖l中的②比正常配子多一條染色體,它與正常配子結(jié)合形成的受精卵中也多一條染色體,即三體,該三體產(chǎn)生的配子中一半是異常的,B錯(cuò)誤;C、圖2中甲→乙的變化是指染色體復(fù)制,發(fā)生在減數(shù)第一次分裂前的間期,C錯(cuò)誤;D、圖2甲細(xì)胞經(jīng)分裂產(chǎn)生了基因型為AB的精細(xì)胞,而甲細(xì)胞中A和b在同一條染色體上,a和B在同一條染色體上,說(shuō)明該精原細(xì)胞形成精細(xì)胞的過(guò)程中發(fā)生了交叉互換,則另三個(gè)精細(xì)胞的基因型是Ab、ab、aB,D正確。故選D?!军c(diǎn)睛】本題結(jié)合細(xì)胞分裂圖,考查細(xì)胞的減數(shù)分裂,要求考生識(shí)記細(xì)胞減數(shù)分裂不同時(shí)期的特點(diǎn),能準(zhǔn)確判斷圖示細(xì)胞分裂異常的原因,再結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng),屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。3、B【解析】
細(xì)胞只有保持結(jié)構(gòu)的完整性才能完成各項(xiàng)生命活動(dòng)。葉綠體是綠色植物細(xì)胞中重要的細(xì)胞器,其主要功能是進(jìn)行光合作用。葉綠體由雙層膜、類(lèi)囊體和基質(zhì)三部分構(gòu)成。類(lèi)囊體是一種扁平的小囊狀結(jié)構(gòu),在類(lèi)囊體薄膜上,有進(jìn)行光合作用必需的色素和酶。許多類(lèi)囊體疊合而成基粒,光反應(yīng)在類(lèi)囊體薄膜上進(jìn)行,基粒之間充滿著基質(zhì),其中含有與光合作用暗反應(yīng)有關(guān)的酶?!驹斀狻緼、成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核和各種細(xì)胞器,其壽命不長(zhǎng)的原因是細(xì)胞結(jié)構(gòu)不完整,A正確;B、類(lèi)囊體堆疊形成基粒有利于附著更多的色素,而還原C3化合物的酶分布在葉綠體的基質(zhì)中,B錯(cuò)誤;C、有氧呼吸第二階段在線粒體的基質(zhì)中水和丙酮酸反應(yīng)生成二氧化碳和NADH,即H2O中的氫可參與構(gòu)成還原型輔酶I(即NADH),C正確;D、核酸包括DNA和RNA,染色體主要由DNA和蛋白質(zhì)組成,核糖體由RNA和蛋白質(zhì)組成,D正確。故選B。4、C【解析】
圖示為人體某個(gè)細(xì)胞所經(jīng)歷的生長(zhǎng)發(fā)育各個(gè)階段示意圖,其中a表示細(xì)胞生長(zhǎng),細(xì)胞體積增大;b表示細(xì)胞分裂,細(xì)胞數(shù)目增多,但細(xì)胞種類(lèi)不同;c表示細(xì)胞分化,細(xì)胞數(shù)目不變,但細(xì)胞種類(lèi)增多?!驹斀狻緼、圖中①~⑥細(xì)胞中都有完整的細(xì)胞核,都含有控制個(gè)體發(fā)育的全套遺傳物質(zhì),所以都具有細(xì)胞的全能性,A正確;
B、由于基因的選擇性表達(dá)導(dǎo)致c細(xì)胞分化出現(xiàn)⑤⑥,兩者核基因基本相同,但兩種細(xì)胞應(yīng)基因選擇性表達(dá),其中的mRNA不完全相同,B正確;C、⑤由于細(xì)胞代謝受損或中斷引起的細(xì)胞死亡對(duì)于機(jī)體是不利的,屬于細(xì)胞壞死而非細(xì)胞凋亡,C錯(cuò)誤;D、⑤和⑥細(xì)胞的衰老過(guò)程中細(xì)胞核體積增大,仍有基因能表達(dá),D正確。故選C?!军c(diǎn)睛】本題綜合考查細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂、分化和衰老及癌變的相關(guān)知識(shí),意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力以及分析圖示的能力,透徹理解各時(shí)期特點(diǎn)是解題關(guān)鍵。5、C【解析】
分析圖示:自變量是恢復(fù)年限,因變量是磷脂脂肪酸總量,隨著恢復(fù)年限增長(zhǎng),磷脂脂肪酸總量含量增加,在植被恢復(fù)的初期芒萁對(duì)土壤微生物活體總量的影響較大,而隨著生態(tài)系統(tǒng)逐漸成熟,芒萁覆蓋對(duì)土壤微山物總量的影響減弱,有無(wú)芒萁覆蓋的差距變小。【詳解】A、土壤微生物細(xì)胞中磷脂脂肪酸的含量比較穩(wěn)定,故土壤微生物總量常以磷脂脂肪酸總量來(lái)表示,A正確;B、為排除偶然性影響,測(cè)定中隨機(jī)設(shè)置取樣地且同一類(lèi)型樣地要重復(fù)取樣,B正確;C、在植被恢復(fù)初期,芒萁對(duì)土壤微生物的影響較大,C錯(cuò)誤;D、隨著植被的恢復(fù),芒萁覆蓋對(duì)土壤微山物總量的影響減弱,有無(wú)芒萁覆蓋的差距變小,D正確。故選C。6、C【解析】
非洲豬瘟病毒無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),遺傳物質(zhì)是DNA,作為抗原會(huì)誘發(fā)機(jī)體發(fā)生相應(yīng)的免疫反應(yīng)?!驹斀狻緼、淋巴因子可加強(qiáng)有關(guān)免疫細(xì)胞的功能,但不能與病毒直接結(jié)合,A錯(cuò)誤;B、該病毒遺傳物質(zhì)是DNA,不會(huì)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程,B錯(cuò)誤;C、病毒為寄生生物,需要進(jìn)入宿主細(xì)胞內(nèi)繁殖,因此需要體液免疫和細(xì)胞免疫共同作用才能將其徹底清除,C正確;D、記憶細(xì)胞不能分泌抗體,抗體由漿細(xì)胞合成并分泌,D錯(cuò)誤。故選C?!军c(diǎn)睛】易錯(cuò)點(diǎn):只有漿細(xì)胞才能產(chǎn)生抗體,記憶細(xì)胞可以產(chǎn)生漿細(xì)胞,由漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體。二、綜合題:本大題共4小題7、馬鈴薯、葡萄糖抑制細(xì)菌等雜菌的生長(zhǎng)先滅菌后倒平板倒置稀釋涂布平板/涂布分離a培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分不足有害有毒的物質(zhì)積累種群數(shù)量大啟動(dòng)免疫應(yīng)答需要時(shí)間比較長(zhǎng)/感染病毒后人體產(chǎn)生抗體所需時(shí)間長(zhǎng)逆轉(zhuǎn)錄PCR化學(xué)合成/人工合成限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接重組DNA/重組質(zhì)粒脾細(xì)胞/B淋巴細(xì)胞/漿細(xì)胞抗體檢測(cè)/抗原抗體雜交【解析】
1、培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分:名稱(chēng)特征功能固體培養(yǎng)基外觀顯固體狀態(tài)的培養(yǎng)基主要用于微生物的分離、鑒定液體培養(yǎng)基呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基主要用于工業(yè)生產(chǎn)2、微生物接種常用的兩種方法:①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板,接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分,微生物往往連在一起生長(zhǎng),隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。3、單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng),之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞;誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行抗體檢測(cè),篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?!驹斀狻竣瘢?)培養(yǎng)基的基本成分包括碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水,表中馬鈴薯和葡萄糖可為微生物生長(zhǎng)提供碳源;氯霉素是一種抗生素,其作用是抑制細(xì)菌等雜菌的生長(zhǎng)。(2)培養(yǎng)基的制備步驟包括計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板,因此是先滅菌后倒平板。平板冷卻凝固后將平板倒置,目的是防止冷凝水污染培養(yǎng)基。(3)接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法,其中只有稀釋涂布平板法能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù),因此對(duì)該植株患病組織進(jìn)行病菌計(jì)數(shù)研究時(shí),應(yīng)將提取的菌液采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。(4)液體培養(yǎng)基能擴(kuò)大培養(yǎng)微生物,因此圖中a曲線表示該菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線。17h
后,該菌生長(zhǎng)速率偏低的原因可能是:培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分不足、有害有毒的物質(zhì)積累、種群數(shù)量大,種內(nèi)斗爭(zhēng)激烈等。Ⅱ(1)感染病毒后人體產(chǎn)生抗體需要一定的時(shí)間,因此檢測(cè)血漿中抗體含量不能及時(shí)診斷人體是否感染病毒。對(duì)于該病毒的檢測(cè)手段主要為利用熒光PCR試劑盒對(duì)其核酸進(jìn)行檢測(cè)。其原理是,通過(guò)提取病人樣本中的RNA,進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄?聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR,即先通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,然后以其為模板進(jìn)行
PCR),通過(guò)擴(kuò)增反應(yīng)將樣本中微量的病毒信息加以放大,最后以熒光的方式讀取信號(hào)。(2)已知基因序列,可以通過(guò)人工合成的方法獲得基因片段,將所獲得的片段通過(guò)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶可獲得全長(zhǎng)的目的基因,目的基因與質(zhì)粒連接形成重組質(zhì)粒后再導(dǎo)入受體細(xì)胞中。(3)制備單克隆抗體過(guò)程中,取已經(jīng)免疫的小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓細(xì)胞進(jìn)行融合后進(jìn)行兩次篩選,對(duì)所得的細(xì)胞再利用融合蛋白進(jìn)行抗體檢測(cè),最終選擇陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)?!军c(diǎn)睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的種類(lèi)及功能,掌握接種微生物常用的方法,掌握兩種檢測(cè)新型冠狀病毒的方法,即PCR試劑盒和抗體-抗原雜交技術(shù),這就需要考生掌握PCR技術(shù)及單克隆抗體技術(shù)的相關(guān)內(nèi)容,再結(jié)合題中和表中信息準(zhǔn)確答題。8、接種環(huán)灼燒滅菌接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始稀釋涂布平板法易溶于有機(jī)溶劑萃取時(shí)間紙層析法【解析】試題分析:胡蘿卜素的提取:①胡蘿卜素的性質(zhì):胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶,化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。②胡蘿卜素的提取來(lái)源:提取天然胡蘿卜素的方法主要有:一是從植物中提??;二是從大面積養(yǎng)殖的巖藻中獲得;三是利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。③萃取劑:最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油醚。④實(shí)驗(yàn)流程:胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取(石油醚)→過(guò)濾_→濃縮→胡蘿卜素→鑒定(紙層析法)。(1)用平板劃線法純化三孢布拉氏霉菌,通常使用的劃線工具是接種環(huán),金屬用具的滅菌方法一般采用灼燒滅菌。接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始,可能導(dǎo)致劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷的長(zhǎng)滿了菌,第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落,其它劃線上有菌落。(2)常用稀釋涂布平板法法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù),但統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌實(shí)際數(shù)目低。(3)不同的材料選用的提取方法不同,根據(jù)胡蘿卜素具有易溶于有機(jī)溶劑的特點(diǎn);常用萃取法提取胡蘿卜素。提取胡蘿卜素時(shí),干燥過(guò)程應(yīng)控制好溫度和時(shí)間以防止胡蘿卜素分解。(4)提取的胡蘿卜素樣品通過(guò)紙層析法法進(jìn)行鑒定,確定是否提取到胡蘿卜素?!军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握平板劃線操作過(guò)程中的注意事項(xiàng),如①第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)滅菌;②灼燒接種環(huán)之后,要冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高殺死菌種;③劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連;④劃線用力大小要適當(dāng),防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。9、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基高溫固體斜面純化透析小分子可自由進(jìn)出透析袋,而大分子保存在袋內(nèi)SDS最大和最小【解析】
血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)步驟:(1)樣品處理:①紅細(xì)胞的洗滌,②血紅蛋白的釋放。(2)粗分離:①分離血紅蛋白溶液,②透析。(3)純化(4)純度鑒:SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。【詳解】(1)麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基是培養(yǎng)真菌的培養(yǎng)基,所以樣品用牛肉青蛋白胨培養(yǎng)基,由于蛋白質(zhì)在高溫條件下易變性,為了篩選耐高溫的蛋白質(zhì),所以在高溫條件下篩選菌種。菌種在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中需頻繁使用,可用固體斜面培養(yǎng)基進(jìn)行保藏。(2)分離得到耐高溫蛋白質(zhì),一般需進(jìn)行樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。蛋白質(zhì)溶液粗分離時(shí),需進(jìn)行透析除去蛋白質(zhì)溶液中的小分子雜質(zhì),該方法的原理是小分子可自由進(jìn)出透析袋,而大分子保存在袋內(nèi)。(3)SDS帶有大量的負(fù)電荷,消除不同物質(zhì)帶電性質(zhì)的不同,使其遷移率只取決于樣品中各種分子量的大小。(4)凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)是大分子物質(zhì)運(yùn)動(dòng)的路徑短,所以遷移速度快,所以分子量最大的物質(zhì)遷移速度最快,凝膠電泳法鑒定蛋白質(zhì),分子量最小的物質(zhì)遷移速度最快。【點(diǎn)睛】本題考查血紅蛋白提取和分離的相關(guān)知識(shí),識(shí)記教材基本內(nèi)容,難點(diǎn)是電泳法和凝膠色譜法的基本原理。10、逆轉(zhuǎn)錄cDNA熱穩(wěn)定性DNA聚合酶抗體抗原-抗體分子雜交HIVDNA序列一段特異性DNA序列DNA分子雜交【解析】
目的基因是否在轉(zhuǎn)基因生物體內(nèi)存在的檢測(cè)方法是采用DNA分子雜交技術(shù),即將轉(zhuǎn)基因生物的基因天組DNA提取出來(lái),在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標(biāo)記,以此作為探針,使探針與基因組DNA雜交,如果顯示出雜交帶,就表明目的基因已插入染色體DNA中。其次,還需要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,這是檢測(cè)目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步。檢測(cè)方法同樣是采用分子雜交技術(shù),與上述方法不同之處是從轉(zhuǎn)基因生物中提取的是mRNA,同樣用標(biāo)記的目的基因作探針,與mRNA雜交,如果顯示出雜交帶,則表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了mRNA。最后,檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。檢測(cè)的方法與上述方法有所不同,是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原一抗體雜交,若有雜交帶出現(xiàn),表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品。除了上述的分子檢測(cè)外,有時(shí)還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。例如,一個(gè)抗蟲(chóng)或抗病的目的基因?qū)胫参锛?xì)胞后,是否賦予了植物抗蟲(chóng)或抗病特性,需要做抗蟲(chóng)或抗病的接種實(shí)驗(yàn)。【詳解】(1)HIV病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,若要進(jìn)行其遺傳物質(zhì)的擴(kuò)增,需要首先提取HIV的RNA,通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程獲得cDNA,用于PCR擴(kuò)增。PCR技術(shù)需要通過(guò)高溫使氫鍵斷裂獲得DNA單鏈,故在擴(kuò)增過(guò)程中需用到熱穩(wěn)定性高的DNA聚合酶。然后,利用擴(kuò)增產(chǎn)物獲取HIV的S蛋白基因,構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入受體細(xì)
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