實(shí)驗(yàn)室常用緩沖液配置方案_第1頁
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?實(shí)驗(yàn)室常用緩沖液配置方案實(shí)驗(yàn)室里,各種緩沖液就像是實(shí)驗(yàn)操作的基石,有了它們,實(shí)驗(yàn)才能順利進(jìn)行。今天,我就來和大家分享一下,我積累十年的實(shí)驗(yàn)室常用緩沖液配置經(jīng)驗(yàn),保證你一看就懂,一學(xué)就會(huì)!一、磷酸鹽緩沖液(PBS)PBS,這可是實(shí)驗(yàn)室的“老熟人”了。配置方法如下:1.稱取8克NaCl,0.2克KCl,1.44克Na2HPO4,0.24克KH2PO4,放入燒杯中。2.加入800毫升去離子水,用玻璃棒攪拌至溶解。3.用pH計(jì)調(diào)整溶液至7.4。4.定容至1000毫升,過濾,分裝,滅菌。二、Tris緩沖液Tris緩沖液,用途廣泛,特別是在蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中,是不可或缺的。1.稱取121.1克Trisbase,放入燒杯中。2.加入800毫升去離子水,用玻璃棒攪拌至溶解。3.用濃HCl調(diào)整溶液至所需pH值。4.定容至1000毫升,過濾,分裝,滅菌。三、醋酸緩沖液醋酸緩沖液,主要用于微生物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)。1.稱取5.7克NaAc·3H2O,放入燒杯中。2.加入800毫升去離子水,用玻璃棒攪拌至溶解。3.用冰醋酸調(diào)整溶液至所需pH值。4.定容至1000毫升,過濾,分裝,滅菌。四、甘氨酸緩沖液甘氨酸緩沖液,適用于蛋白質(zhì)電泳等實(shí)驗(yàn)。1.稱取15.1克甘氨酸,放入燒杯中。2.加入800毫升去離子水,用玻璃棒攪拌至溶解。3.用NaOH調(diào)整溶液至所需pH值。4.定容至1000毫升,過濾,分裝,滅菌。五、氨水緩沖液氨水緩沖液,主要用于微生物實(shí)驗(yàn)。1.量取100毫升濃氨水,放入燒杯中。2.加入800毫升去離子水,攪拌均勻。3.用濃HCl調(diào)整溶液至所需pH值。4.定容至1000毫升,過濾,分裝,滅菌。六、硼酸緩沖液硼酸緩沖液,適用于核酸實(shí)驗(yàn)。1.稱取12.4克硼酸,放入燒杯中。2.加入800毫升去離子水,用玻璃棒攪拌至溶解。3.用NaOH調(diào)整溶液至所需pH值。4.定容至1000毫升,過濾,分裝,滅菌。七、EDTA緩沖液EDTA緩沖液,主要用于金屬離子螯合實(shí)驗(yàn)。1.稱取372.2克EDTA·2Na,放入燒杯中。2.加入800毫升去離子水,用玻璃棒攪拌至溶解。3.用NaOH調(diào)整溶液至所需pH值。4.定容至1000毫升,過濾,分裝,滅菌。1.精確稱量試劑稱量時(shí)可得細(xì)心點(diǎn),別讓天平的讀數(shù)誤差大了,否則緩沖液的濃度就偏差了。如果發(fā)現(xiàn)稱量不準(zhǔn),那就重新稱量,別湊合。2.用水要講究3.攪拌均勻是關(guān)鍵攪拌的時(shí)候,要慢慢攪拌,直到試劑完全溶解。如果發(fā)現(xiàn)溶液下面還有未溶解的顆粒,那就多攪拌一會(huì)兒,或者適當(dāng)加熱。4.pH值要準(zhǔn)pH計(jì)是調(diào)整pH值的好幫手,不過得先校正它。如果發(fā)現(xiàn)pH值偏離目標(biāo)值,那就慢慢滴加酸或堿,一點(diǎn)一點(diǎn)調(diào)整,別急。5.定容要精確定容到1000毫升的時(shí)候,要用移液管準(zhǔn)確操作,別讓溶液多了或少了對(duì)吧?如果定容過頭,那就得重新開始,別加水企圖調(diào)整。6.滅菌要徹底7.分裝要衛(wèi)生分裝的時(shí)候,要確保容器是干凈的,避免污染。如果容器不干凈,那就重新清洗,消毒,保證緩沖液的純度。8.標(biāo)簽要清晰9.保存條件要注意緩沖液要放在合適的環(huán)境中保存,避免光照和高溫。如果發(fā)現(xiàn)緩沖液顏色變化或者有沉淀,那可能就是變質(zhì)了,得重新配制。10.經(jīng)驗(yàn)累積很重要多做幾次,自然就熟練了,實(shí)驗(yàn)中的小問題也會(huì)逐漸解決。別怕失敗,每次失敗都是向前邁進(jìn)的一步。記住這些小細(xì)節(jié),你的緩沖液配制就不會(huì)出太大岔子,實(shí)驗(yàn)也能順利進(jìn)行。別小看這些小技巧,它們可是成功的關(guān)鍵!11.配制前的準(zhǔn)備工作在動(dòng)手之前,先確認(rèn)手頭上的試劑是否齊全,有沒有過期的。發(fā)現(xiàn)少了什么或者試劑變質(zhì)了,趕緊補(bǔ)齊或者更換,別讓實(shí)驗(yàn)停下來等你。12.配制過程中的觀察配制時(shí),要時(shí)刻觀察溶液的顏色變化和透明度,這能幫你判斷溶液是否配制正確。如果顏色或者透明度不對(duì)勁,那就得停下來檢查原因。13.記錄和反思每次配制后,別忘了記錄下你的步驟和結(jié)果,不管是成功還是失敗,都是寶貴的經(jīng)驗(yàn)。反思一下哪里做得好,哪里可以改進(jìn),下次就能做得更好。14.安全第一在使用化學(xué)試劑時(shí),別忘了安全第一,戴好防護(hù)裝備,避免化學(xué)品接觸到皮膚或者吸入。如果不小心灑出來了,立即處理,保證實(shí)驗(yàn)室安全。15.節(jié)約試劑在配制過程中,要注意節(jié)約試劑,別浪費(fèi)。如果發(fā)現(xiàn)量取多了,看看能不能用在其他地方,或者妥善保存起來,別直接倒掉。16.定期檢查設(shè)備定期檢查一下實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備,比如天平、pH計(jì)等,確保它們工作正常。如果設(shè)備出了問題,及時(shí)維修,別讓它影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。17.學(xué)習(xí)交流多和同事交流配制經(jīng)驗(yàn),取長補(bǔ)短,互相學(xué)習(xí)。有時(shí)候,一個(gè)小技巧就能讓你少走很多彎路。18.環(huán)保意識(shí)實(shí)驗(yàn)過程

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