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2025屆云南省宣威市第十二中學(xué)高三生物第一學(xué)期期末經(jīng)典試題考生須知:1.全卷分選擇題和非選擇題兩部分,全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂;非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2.請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號。3.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.下列有關(guān)生物進(jìn)化的敘述,正確的是()A.不同種群都向適應(yīng)無機(jī)環(huán)境的方向進(jìn)化就是共同進(jìn)化B.種群基因頻率的變化趨勢能反映變異的方向C.種群基因型頻率發(fā)生改變,說明生物在發(fā)生進(jìn)化D.精明捕食者是指捕食者對獵物不造成過度捕食,能保持其食物源2.TATA框是多數(shù)真核生物基因啟動子中的一段DNA序列,位于轉(zhuǎn)錄起始點上游,其堿基序列為TATAATAAT。在轉(zhuǎn)錄mRNA前,先由轉(zhuǎn)錄因子TFII-D蛋白和TATA框結(jié)合,形成穩(wěn)定的復(fù)合物,然后由RNA聚合酶依據(jù)模板鏈進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。下列相關(guān)敘述正確的是()A.TATA框的DNA片段中共含有2種脫氧核苷酸和8個氫鍵B.TATA框經(jīng)RNA聚合酶催化轉(zhuǎn)錄形成的片段中含有起始密碼子C.轉(zhuǎn)錄開始時,TFII-D蛋白首先與TATA框結(jié)合打開堿基對之間的氫鍵D.RNA聚合酶催化形成磷酸二酯鍵將游離的核糖核苷酸依次連接成mRNA3.圖1為人體細(xì)胞正常分裂時某物質(zhì)或結(jié)構(gòu)數(shù)量變化的曲線,圖2為人體某細(xì)胞分裂過程中某染色體行為示意圖。下列敘述正確的是()A.圖1可表示有絲分裂部分時期染色單體數(shù)目的變化B.若圖1表示有絲分裂過程中染色體組數(shù)目變化的部分曲線,則n=1C.若圖1表示減數(shù)分裂過程中每條染色體上DNA分子數(shù)目變化的部分曲線,則n=1D.若圖1表示減數(shù)分裂過程,圖2所示行為發(fā)生在b點之后4.在黑腹果蠅(2n=8)中,缺失一條點狀染色體的個體(單體,如圖所示)仍可以存活,而且能夠繁殖后代,若兩條點狀染色體均缺失則不能存活。若干這樣的單體黑腹果蠅單體相互交配,其后代為單體的比例為()A.1 B.1/2 C.1/3 D.2/35.下列對各種“比值”變化的敘述中正確的是()A.分泌蛋白的形成過程中,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜面積與細(xì)胞膜膜面積比值變大B.減數(shù)分裂中同源染色體正在分離時,細(xì)胞中染色體數(shù)目與核DNA數(shù)比值不變C.用噬菌體去感染細(xì)菌時,由于保溫時間過長,上清液放射性與沉淀物放射性比值變小D.調(diào)查人群中遺傳病的發(fā)病率時,由于樣本過小,發(fā)病人數(shù)與調(diào)查人數(shù)比值變大6.下列有關(guān)細(xì)胞分化和細(xì)胞衰老的敘述,錯誤的是A.細(xì)胞分化導(dǎo)致不同功能的細(xì)胞中RNA和蛋白質(zhì)種類發(fā)生差異B.細(xì)胞分化使機(jī)體細(xì)胞功能趨向?qū)iT化,有利于提高生理功能的效率C.衰老細(xì)胞呼吸速率減慢,核體積減小,染色質(zhì)染色加深D.細(xì)胞分化和細(xì)胞衰老貫穿于多細(xì)胞生物個體發(fā)育的全過程二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)P53基因是正常細(xì)胞內(nèi)重要的抑癌基因,研究表明P53基因突變可導(dǎo)致肝臟細(xì)胞癌變。科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)P53基因?qū)w外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞生長有抑制作用,請回答下列問題:(1)切下新鮮的肝癌組織,在37℃下用_____消化30~40分鐘,用培養(yǎng)液制成_____在培養(yǎng)箱中培養(yǎng),在培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素,其目的是_______________________。(2)若P53基因兩側(cè)的一段核苷酸序列是已知的,則獲取P53基因的方法通常是_____。(3)將P53基因經(jīng)過一系列的處理并與脂質(zhì)體混合,將混合物滴加至肝癌細(xì)胞上,輕輕混勻。最后篩選出含有P53基因的肝癌細(xì)胞。脂質(zhì)體在這個操作中的作用是_____。(4)為證明P53基因?qū)Ω伟┘?xì)胞有抑制作用,需將兩種細(xì)胞接入多孔板中,并從次日開始檢測每孔的細(xì)胞總數(shù),繪制成如圖所示的生長曲線。請分析兩條曲線分別是哪種細(xì)胞,曲線1是_____細(xì)胞,曲線2是_____細(xì)胞。8.(10分)(1)人們不會在熱泉中發(fā)現(xiàn)活著的嗜冷海藻,而經(jīng)常可以在冷水環(huán)境中分離出嗜熱微生物。請根據(jù)酶的特性分析產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因_________________________。(2)淀粉酶可以通過微生物發(fā)酵生產(chǎn)。為了提高酶的產(chǎn)量,請你設(shè)計一個實驗,利用誘變育種方法,獲得產(chǎn)生淀粉酶較多的菌株。①寫出主要實驗思路______________。②根據(jù)誘發(fā)突變率低和誘發(fā)突變不定向性的特點預(yù)期實驗結(jié)果_______________。(提示:生產(chǎn)菌株在含有淀粉的固體培養(yǎng)基上,隨著生長可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉,在菌落周圍形成透明圈。)(3)下圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中____(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。9.(10分)有資料表明胃癌細(xì)胞中有胃泌素相關(guān)基因的表達(dá),而且外源性胃泌素對胃癌細(xì)胞有明顯促進(jìn)生長的作用。某科研人員為驗證外源性胃泌素的上述作用,以及進(jìn)一步研究丙谷胺對其作用的影響,進(jìn)行了以下實驗研究。請完善實驗思路,并根據(jù)實驗結(jié)果進(jìn)行分析。(要求與說明:用細(xì)胞流式測定儀測定細(xì)胞周期分布;實驗結(jié)果測定的具體操作不作要求;培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液變化忽略不計;實驗條件適宜)(1)完善實驗思路:①將X型胃癌細(xì)胞培養(yǎng)3天后制備細(xì)胞懸液備用。用細(xì)胞培養(yǎng)液配制適宜濃度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。②取適量等量細(xì)胞懸液加入4組培養(yǎng)瓶中待繼續(xù)培養(yǎng),每組若干,各組處理如下。甲組:_______;乙組:51μL丙谷胺溶液+51uL細(xì)胞培養(yǎng)液;丙組:_______;丁組:111μL細(xì)胞培養(yǎng)液。③將上述樣品在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)。48h后取部分樣品測定________,并記錄。④_______,并記錄。⑤對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,結(jié)果如下。表:胃泌素和丙谷胺對X型胃癌細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的影響組別72h,571nm48h,各時期細(xì)胞百分比(%)OD值G1SG2+M甲1.767±1.132.613.94.9乙1.27±1.1971.119.157.85丙1.585±1.1228.619.1111.31丁1.561±1.12671.119.1111.11(注:OD值大小可體現(xiàn)細(xì)胞增殖情況;丁組細(xì)胞的細(xì)胞周期T=9h。)(2)實驗分析與討論:①用OD值作為檢測細(xì)胞增殖指標(biāo)的依據(jù)是_______。甲組與丁組數(shù)據(jù)比較,說明甲組的處理最可能是促進(jìn)了S期細(xì)胞的________,從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖。乙、丁組數(shù)據(jù)幾乎沒有差異,但甲、丙組數(shù)據(jù)差異明顯,可見丙谷胺具有________作用。②據(jù)表中數(shù)據(jù),在答題卷相應(yīng)坐標(biāo)系中畫出丁組細(xì)胞中核DNA含量的周期性變化曲線,并將坐標(biāo)系補充完整________________。10.(10分)近年來煙草葉綠體基因工程在提高光合效率、抗性和品質(zhì)等方面取得了研究進(jìn)展。下圖是將擬南芥果糖1,6-二磷酸醛縮酶基因(簡稱“醛縮酶基因”)轉(zhuǎn)人煙草葉綠體基因組的部分流程示意圖,請據(jù)圖同答下列問題:(1)在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是_______圖1中,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增擬南芥醛縮酶基因時,應(yīng)選用的引物是_______。(2)圖2重組質(zhì)粒中未標(biāo)注出的必需元件還有____,構(gòu)建該重組質(zhì)料用的限制性核酸內(nèi)切酶有_______。(3)將擬南芥醛縮酶基因?qū)藷煵萑~綠體基因組時,一般將含有目的基因的質(zhì)粒包裹在金粉上,通過轟擊進(jìn)入葉綠體中,這種方法稱為_______,葉綠體基因組中存在基因區(qū)和基因間隔區(qū),應(yīng)將目的基因?qū)肴~綠體基因組中的基因間隔區(qū),其原因是____。(4)檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是_______,該項技術(shù)用到的基因探針的制作方法是:在____上用放射性同位素等做標(biāo)記。11.(15分)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、代謝、遺傳等都與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān),而對蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用,首先需要獲得高純度的蛋白質(zhì)。從紅細(xì)胞中提取和分離血紅蛋白的流程圖如下:回答下列問題。(1)流程圖中步驟A、B分別是____________,步驟B所用方法的原理是__________。(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是_________,此過程中若離心速度過高和時間過長會導(dǎo)致________。(3)在利用凝膠色譜法純化血紅蛋白的過程中,色譜柱不能有氣泡存在,原因是__________。在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液(pH為1.0)的目的是______。(4)在上述實驗中利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的目的是_____________________。(5)下圖1、2是某同學(xué)利用電泳法和凝膠色譜法分離同一種樣品得到的結(jié)果,則在圖2中與圖中蛋白質(zhì)P對應(yīng)的是______________________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、D【解析】
現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的內(nèi)容:種群是生物進(jìn)化的基本單位,生物進(jìn)化的實質(zhì)是種群基因頻率的改變。突變和基因重組,自然選擇及隔離是物種形成過程的三個基本環(huán)節(jié),通過它們的綜合作用,種群產(chǎn)生分化,最終導(dǎo)致新物種形成?!驹斀狻緼、共同進(jìn)化是指不同物種之間、生物與無機(jī)環(huán)境之間在相互影響中不斷進(jìn)化和發(fā)展,A錯誤;B、種群基因頻率的變化趨勢能反映進(jìn)化的方向,不能反映變異的方向,變異是不定向的,B錯誤;C、生物種群中基因頻率的改變可說明生物在發(fā)生進(jìn)化,C錯誤;D、精明捕食者是指捕食者在進(jìn)化過程中能夠形成自我約束能力,對獵物不造成過度捕食,能保持其食物源,D正確。故選D。【點睛】本題考查現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的主要內(nèi)容,要求考生識記現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的主要內(nèi)容,能運用所學(xué)的知識對選項作出正確的判斷。2、D【解析】
轉(zhuǎn)錄,是指遺傳信息從基因(DNA)轉(zhuǎn)移到RNA,在RNA聚合酶的作用下形成一條與DNA堿基序列互補的mRNA的過程?!驹斀狻緼、根據(jù)題意信息可知TATA框的DNA片段中共含有2種脫氧核苷酸和18個氫鍵,A錯誤;B、TATA框?qū)儆诨騿幼拥囊徊糠?,屬于真核生物的非編碼區(qū),起始密碼位于對應(yīng)的基因的編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄形成的mRNA片段中,因此TATA框經(jīng)RNA聚合酶催化轉(zhuǎn)錄形成的片段中不含有起始密碼子,B錯誤;C、轉(zhuǎn)錄開始時,TFII-D蛋白首先與TATA框結(jié)合形成穩(wěn)定的復(fù)合物,C錯誤;D、RNA聚合酶催化基因的轉(zhuǎn)錄過程,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA的基本單位是核糖核苷酸,因此RNA聚合酶能催化形成磷酸二酯鍵將游離的核糖核苷酸依次連接成mRNA,D正確。故選D。3、C【解析】
1、有絲分裂過程中,各物質(zhì)的變化規(guī)律:(1)染色體變化:后期加倍(4N),平時不變(2N);(2)DNA變化:間期加倍(2N→4N),末期還原(2N);(3)染色單體變化:間期出現(xiàn)(0→4N),后期消失(4N→0),存在時數(shù)目同DNA;(4)核膜和核仁:前期消失,末期重建;(5)中心體:間期復(fù)制后加倍,前期分離,末期細(xì)胞質(zhì)分裂后恢復(fù)體細(xì)胞水平。2、減數(shù)分裂過程中,各物質(zhì)的變化規(guī)律:(1)染色體變化:染色體數(shù)是2N,減數(shù)第一次分裂結(jié)束減半(2N→N),減數(shù)第二次分裂過程中的變化N→2N→N;(2)DNA變化:間期加倍(2N→4N),減數(shù)第一次分裂結(jié)束減半(4N→2N),減數(shù)第二次分裂再減半(2N→N);(3)染色單體變化:間期出現(xiàn)(0→4N),減數(shù)第一次分裂結(jié)束減半(4N→2N),減數(shù)第二次分裂后期消失(2N→0),存在時數(shù)目同DNA。【詳解】A、有絲分裂過程中,染色體單體數(shù)目沒有出現(xiàn)過減半的情況,A錯誤;B、若圖1曲線表示有絲分裂中染色體組數(shù)目變化的部分曲線,則n=2,B錯誤;C、每條染色體上的DNA數(shù)目為1或2,若圖1曲線表示減數(shù)分裂中每條染色體上DNA分子數(shù)目變化的部分曲線,則n=l,C正確;D、圖2所示變異屬于基因重組,相應(yīng)變化發(fā)生在減數(shù)第一次分裂前期,對應(yīng)于圖1中的a點時,D錯誤。故選C。4、D【解析】
試題分析:閱讀題干和題圖可知,本題涉及的知識有染色體變異和基因的分離定律,明確知識點后梳理相關(guān)的基礎(chǔ)知識,然后解析題圖結(jié)合問題的具體提示綜合作答?!驹斀狻扛鶕?jù)題意和圖示分析可知:假設(shè)正常黑腹果蠅基因型為AA,缺失一條點狀染色體的個體為Aa,單體黑腹果蠅相互交配,即Aa×Aa→1AA、2Aa、1aa,則后代中有1/4的正常個體,有1/2的單體,有1/4的個體死亡,所以后代中單體的比例為2/3,故選D。5、B【解析】
本題以“比值”為依據(jù)考查多種生物過程,綜合性強(qiáng),要求考生對涉及知識有整體把握與理解,旨在考查考生的理解能力與知識的綜合運用能力。【詳解】分泌蛋白的形成過程中,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜面積略有減小,細(xì)胞膜膜面積略有增加,故內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜面積與細(xì)胞膜膜面積比值變小,A錯誤;減數(shù)分裂中同源染色體分離發(fā)生在減數(shù)第一次分裂后期,此時細(xì)胞中染色體數(shù)目與核DNA數(shù)為1:1,比值不變,B正確;用噬菌體去感染細(xì)菌時,保溫時間過長會造成子代噬菌體釋放到上清液,導(dǎo)致上清液放射性與沉淀物放射性比值變大,C錯誤;某遺傳病的發(fā)病率等于該遺傳病的發(fā)病人數(shù)占被調(diào)查人數(shù)的百分率,若樣本過小,發(fā)病人數(shù)與調(diào)查人數(shù)比值可能偏大或偏小,D錯誤?!军c睛】調(diào)查某種遺傳病的發(fā)病率要對人群進(jìn)行隨機(jī)抽樣調(diào)查,調(diào)查的遺傳病一般選擇在群體中發(fā)病率較高的遺傳病,選取的樣本應(yīng)該足夠大。6、C【解析】
本題考查細(xì)胞分化及細(xì)胞衰老的相關(guān)知識,意在考查學(xué)生的識記和理解能力,需要學(xué)生掌握同一生物體內(nèi)不同部位的細(xì)胞DNA、基因、轉(zhuǎn)運RNA相同,但信使RNA和蛋白質(zhì)不完全相同;還需要學(xué)生識記細(xì)胞衰老的特征?!驹斀狻緼、細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果,會導(dǎo)致不同功能的細(xì)胞中RNA和蛋白質(zhì)種類發(fā)生差異,A正確;B、細(xì)胞分化可以使多細(xì)胞生物體中的細(xì)胞趨于專門化形成各種不同細(xì)胞,進(jìn)而形成具有特定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的組織和器官,而每一種器官都可以相對獨立地完成特定的生理功能,這樣就使得機(jī)體內(nèi)可以同時進(jìn)行多項生理活動,而不相互干擾,這樣有利于提高各種生理功能的效率,B正確;C、衰老細(xì)胞呼吸速率減慢,細(xì)胞核體積變大,核膜內(nèi)折,染色質(zhì)收縮,染色加深,C錯誤;D、細(xì)胞衰老和細(xì)胞分化是由基因控制的,貫穿于多細(xì)胞生物個體發(fā)育的全過程,D正確。故選C。二、綜合題:本大題共4小題7、胰蛋白酶細(xì)胞懸液防止雜菌污染利用PCR人工擴(kuò)增目的基因?qū)53(目的)基因?qū)敫伟┘?xì)胞肝癌轉(zhuǎn)入P53基因的肝癌【解析】
本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)和應(yīng)用。分析曲線圖:P53基因是正常細(xì)胞內(nèi)重要的抑癌基因,所以導(dǎo)入P53基因的肝癌細(xì)胞數(shù)目會下降,即曲線2,而普通肝癌細(xì)胞能無限增殖,其數(shù)目不斷上升,即曲線1?!驹斀狻浚?)動物細(xì)胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶處理組織,使細(xì)胞分散成單個細(xì)胞。用培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液在培養(yǎng)箱中培養(yǎng),在培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素,其目的是防止其他細(xì)菌等雜菌的污染。(2)若P53基因兩側(cè)的一段核苷酸序列是已知的,則獲取P53基因的方法通常是利用PCR人工擴(kuò)增目的基因,在短時間內(nèi)獲得大量的目的基因。
(3)脂質(zhì)體在這個操作中的作用是作為運載體將P53(目的)基因?qū)敫伟┘?xì)胞。
(4)P53基因是正常細(xì)胞內(nèi)重要的抑癌基因,所導(dǎo)入P53基因的肝癌細(xì)胞數(shù)目下降,而普通肝癌細(xì)胞能無限增殖,其數(shù)目不斷上升,即曲線1是肝癌細(xì)胞,曲線2是轉(zhuǎn)入P53基因的肝癌細(xì)胞。【點睛】動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:①無菌、無毒的環(huán)境:消毒、滅菌;添加一定量的抗生素;定期更換培養(yǎng)液,以清除代謝廢物。②營養(yǎng)物質(zhì):糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。③溫度和PH.④一定的氣體環(huán)境:95%空氣(細(xì)胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的PH)。8、海藻體內(nèi)的酶遇到高溫后,酶的分子結(jié)構(gòu)被破壞而失去活性,海藻很快會死亡;而嗜熱微生物體內(nèi)的酶遇到低溫環(huán)境,酶的活性降低,但酶分子結(jié)構(gòu)沒有被破壞,遇到合適的溫度又可以恢復(fù)活性。將生產(chǎn)菌株一組用一定劑量的誘變劑處理,另一組不處理做對照。比較兩組菌株菌落周圍透明圈的大小,選出透明圈變大的菌株。由于誘發(fā)突變率低,誘變組中絕大多數(shù)菌落周圍的透明圈大小與對照組相同;由于誘發(fā)突變不定向性,誘變組中極少數(shù)菌落周圍的透明圈與對照組相比變大或變小③【解析】
酶的活性受溫度、pH值等條件的影響,溫度過高,酶(蛋白質(zhì))變性失活;誘發(fā)突變的特點是突變率低和突變的不定向性,據(jù)此進(jìn)行實驗設(shè)計?!驹斀狻浚?)酶具有催化作用,其實質(zhì)為蛋白質(zhì)或RNA,因此,酶的活性受溫度的影響較大,嗜冷海藻體內(nèi)的酶遇到高溫后,酶的分子結(jié)構(gòu)被破壞而失去活性,海藻很快會死亡;而嗜熱微生物體內(nèi)的酶遇到低溫環(huán)境,酶的活性降低,但酶分子結(jié)構(gòu)沒有被破壞,遇到合適的溫度又可以恢復(fù)活性,因此嗜熱微生物可以生活在冷水中。(2)①主要實驗思路:將生產(chǎn)菌株一組用一定劑量的誘變劑處理,另一組不處理做對照。比較兩組菌株菌落周圍透明圈的大小,選出透明圈變大的。②預(yù)期實驗結(jié)果:a、由于誘發(fā)突變率低,誘變組中絕大多數(shù)菌落周圍的透明圈大小與對照組相同。b、由于誘發(fā)突變不定向性,誘變組中極少數(shù)菌落周圍的透明圈與對照組相比變大或變小。(3)據(jù)圖分析可知,圖示為平板劃線法得到的平板,依據(jù)是每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端,最后一次劃線結(jié)束時更容易獲得單菌落,圖中③區(qū)域更易獲得單菌落?!军c睛】本題綜合性較強(qiáng),主要考查學(xué)生運用所學(xué)知識進(jìn)行實驗設(shè)計的能力,在設(shè)計過程中,注意對照和單一變量原則的運用,做到實驗過程科學(xué)、準(zhǔn)確、嚴(yán)密。9、51uL置泌素+51uL細(xì)胞培養(yǎng)液51uL胃泌素+51uL丙谷胺溶液細(xì)胞周期分布/各時期細(xì)胞百分比72h后取剩余樣品(在571nm波長)測定OD值細(xì)胞密度與(細(xì)胞懸液的)OD值呈正比/線性關(guān)系/OD值越大細(xì)胞數(shù)越多DNA復(fù)制對抗/抑制外源性胃泌素【解析】
題意分析,外源性胃泌素對胃癌細(xì)胞有明顯促進(jìn)生長的作用。本實驗的目的是驗證外源性胃泌素的上述作用,并且還要進(jìn)一步研究丙谷胺對胃泌素促進(jìn)生長作用的的影響,根據(jù)實驗?zāi)康牟⒔Y(jié)合題目中的信息可知實驗中的自變量為胃泌素、丙谷胺以及胃泌素和丙谷胺三種不同因素的處理,因變量為OD值以及細(xì)胞周期中各期的變化,實驗過程中無關(guān)變量要求相同且適宜?!驹斀狻浚?)根據(jù)分析可知,補充實驗如下:①實驗試劑的準(zhǔn)備:將X型胃癌細(xì)胞培養(yǎng)3天后制備細(xì)胞懸液備用。用細(xì)胞培養(yǎng)液配制適宜濃度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。②取適量等量細(xì)胞懸液加入4組培養(yǎng)瓶中待繼續(xù)培養(yǎng),每組若干,分組、編號,然后給與不同處理如下:甲組中加入51uL胃泌素溶液+51uL細(xì)胞培養(yǎng)液;乙組中加入51μL丙谷胺溶液+51uL細(xì)胞培養(yǎng)液;丙組中加入51uL胃泌素溶液+51uL丙谷胺溶液;丁組中加入111μL細(xì)胞培養(yǎng)液。③為保證無關(guān)變量的一致性,需要將上述樣品在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)。根據(jù)題目中的實驗結(jié)果可知,48h后取部分樣品測定細(xì)胞周期分布/各時期細(xì)胞百分比,并記錄。④結(jié)合實驗表格可知,72h后取剩余樣品(在571nm波長)測定OD值,并記錄。(2)實驗分析如下①由于細(xì)胞密度與(細(xì)胞懸液的)OD值呈正比,故可用OD值的大小表示細(xì)胞數(shù)目的多少。甲組與丁組數(shù)據(jù)比較,處于S期的細(xì)胞的占比高于丁組,說明甲組胃泌素的處理最可能是促進(jìn)了S期細(xì)胞的DNA復(fù)制,進(jìn)而加快了后續(xù)的分裂過程,從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖。比較發(fā)現(xiàn)乙、丁組數(shù)據(jù)幾乎沒有差異,但甲、丙組數(shù)據(jù)差異明顯,由此可推測丙谷胺具有對抗/抑制外源性胃泌素作用,從而對抗了胃泌素促進(jìn)癌細(xì)胞生長的作用。②繪圖過程中需要根據(jù)表中的數(shù)據(jù)來繪制,故需要計算出細(xì)胞周期中各時期的長短,題意顯示丁組細(xì)胞細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞周期為9小時,則G1經(jīng)歷時間為9×71%=14小時,此期進(jìn)行DNA復(fù)制前的準(zhǔn)備階段,進(jìn)行有關(guān)RNA和蛋白質(zhì)合成;S期經(jīng)歷時間為9×9%=4小時,此期進(jìn)行DNA分子的復(fù)制,故此期后DNA數(shù)目加倍;G2+M經(jīng)歷時間為9×11%=2小時,此期后形成新的子細(xì)胞,其中的DNA數(shù)目與原來親代細(xì)胞的DNA數(shù)目相同,據(jù)此繪圖如下:【點睛】熟知有絲分裂過程中染色體行為變化以及相關(guān)的物質(zhì)變化是解答本題的關(guān)鍵!實驗設(shè)計能力是本題考查的重要能力,對實驗設(shè)計的基本原則以及設(shè)計的基本思路的掌握是學(xué)生的必備能力。10、加熱至90~95℃引物甲、引物丙復(fù)制原點HindⅢ和BclI基因槍法避免對葉綠體自身的基因組的表達(dá)造成影響DNA分子雜交技術(shù)含有目的基因的DNA單鏈片段(或“與目的基因互補的RNA單鏈片段”)【解析】
(1)目的基因的獲取的方法有:從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法昰:顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锝I胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,利用高溫條件使模板DNA解鏈為單鏈,即加熱至90~95℃條件下使模板DNA解旋,圖1中,基因中兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,故利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,應(yīng)該選基因上下游、方向相反的一對引物,故所選的引物是引物甲、引物丙。(2)重組質(zhì)粒應(yīng)包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點等,圖2重組質(zhì)粒中未標(biāo)注出的必需元件還有復(fù)制原點,由圖2可知,BamHI會破壞標(biāo)記基因,結(jié)合圖1目的基因兩端的限制酶切點可判斷構(gòu)建該重組質(zhì)粒用的限制性核酸內(nèi)切酶應(yīng)選擇HindIII和BclI。(3)將目的基因?qū)霟煵萑~綠體基因組時,一般將含有目的基因的質(zhì)粒包裹在金粉上,通過轟擊進(jìn)入葉綠體中,這種方法稱為基因槍法。葉綠體基因組中存在基因區(qū)和基因間隔區(qū),為避免對葉綠體自身的基因組的表達(dá)造成影響,應(yīng)將目的基因?qū)肴~綠體基因組中的基因間隔區(qū)。(4)檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是DNA分子雜交技術(shù),在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標(biāo)記,
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