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上海嘉定區(qū)2025屆高三生物第一學(xué)期期末檢測(cè)試題考生請(qǐng)注意:1.答題前請(qǐng)將考場(chǎng)、試室號(hào)、座位號(hào)、考生號(hào)、姓名寫在試卷密封線內(nèi),不得在試卷上作任何標(biāo)記。2.第一部分選擇題每小題選出答案后,需將答案寫在試卷指定的括號(hào)內(nèi),第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請(qǐng)將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.生物膜的結(jié)構(gòu)與功能存在密切的聯(lián)系。下列有關(guān)敘述正確的是A.葉綠體的類囊體膜上存在催化ATP水解的酶B.溶酶體膜破裂后釋放的水解酶活性會(huì)發(fā)生改變C.核膜上的核孔對(duì)物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞核沒有選擇性D.線粒體外膜上與呼吸作用有關(guān)的酶催化水的合成2.下列有關(guān)生長(zhǎng)素的敘述,正確的是()A.頂端優(yōu)勢(shì)是由于側(cè)芽產(chǎn)生的生長(zhǎng)素過多引起的B.同一植株的幼芽對(duì)生長(zhǎng)素的敏感程度高于幼根C.燕麥胚芽鞘中生長(zhǎng)素的極性運(yùn)輸與光照方向無關(guān)D.用一定濃度的生長(zhǎng)素溶液處理番茄幼苗可獲得多倍體3.下列對(duì)醋酸桿菌與動(dòng)物肝臟細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與代謝過程的比較,不正確的是A.兩者的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)均符合流動(dòng)鑲嵌模型B.兩者的遺傳物質(zhì)均儲(chǔ)存在細(xì)胞核中C.均可以進(jìn)行有氧呼吸,但進(jìn)行場(chǎng)所不完全相同D.均依賴氧化有機(jī)物合成ATP,為代謝過程供能4.胸腺嘧啶脫氧核苷(簡(jiǎn)稱胸苷)在細(xì)胞內(nèi)可以轉(zhuǎn)化為胸腺嘧啶脫氧核糖核苷酸。研究人員用含有3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷(3H-TDR)的培養(yǎng)液培養(yǎng)活的小腸黏膜層,一段時(shí)間后洗去游離的3H-TDR,換用不含放射性TDR的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。連續(xù)培養(yǎng)48h,檢測(cè)小腸絨毛的被標(biāo)記部位,結(jié)果如圖所示(黑點(diǎn)表示放射性部位)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.只有①處的細(xì)胞可以進(jìn)行DNA的復(fù)制和細(xì)胞分裂B.若再繼續(xù)培養(yǎng)一段時(shí)間,①②③處都將不再具有放射性C.若換用3H標(biāo)記的尿苷培養(yǎng)液,則①②③處均能檢測(cè)到放射性D.24h和48h時(shí)②③處分別出現(xiàn)放射性,說明H-TDR在小腸黏膜內(nèi)的運(yùn)輸速度較慢5.下列能在人體內(nèi)環(huán)境中進(jìn)行的生理過程是()A.血漿蛋白的合成 B.勞氏肉瘤病毒的增殖C.HCO3-維持酸堿平衡 D.胰蛋白酶催化蛋白質(zhì)水解6.許多植物在種子發(fā)育過程中會(huì)合成大量的脂肪,這些“油脂”積累在細(xì)胞內(nèi)一種被稱為“油質(zhì)體”的結(jié)構(gòu)中,下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是()A.脂肪和淀粉是植物體內(nèi)常見的儲(chǔ)能物質(zhì)B.單層磷脂分子包裹油滴可以構(gòu)成油質(zhì)體C.油質(zhì)體的形成與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有很密切的關(guān)系D.油質(zhì)體中積累的脂肪能參與構(gòu)成細(xì)胞膜7.某研究小組使用小鼠跑步機(jī)實(shí)驗(yàn)法研究小鼠不同運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度下機(jī)體氧氣消耗量和血液中乳酸含量,結(jié)果如圖所示,下列說法正確的是()A.在運(yùn)動(dòng)狀態(tài)下,小鼠肌肉細(xì)胞CO2的產(chǎn)生部位是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體B.無氧呼吸只在第一階段生成少量的ATP,其余能量以熱能散失C.運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度為15米/分鐘時(shí),無氧呼吸消耗的葡萄糖大約是有氧呼吸的3倍D.研究可知提倡慢跑可以避免肌肉組織乳酸積累引起下丘腦形成酸脹感8.(10分)科研人員對(duì)運(yùn)動(dòng)員運(yùn)動(dòng)前與運(yùn)動(dòng)剛結(jié)束時(shí)的血糖濃度、血漿pH等生理指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè),發(fā)現(xiàn)各項(xiàng)生理指標(biāo)都處于正常水平。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.運(yùn)動(dòng)時(shí)胰島A細(xì)胞分泌胰島素增加,調(diào)節(jié)血糖含量相對(duì)穩(wěn)定,從而保證能量的正常供應(yīng)B.運(yùn)動(dòng)過程中肝細(xì)胞的代謝對(duì)維持血糖濃度具有重要作用C.與運(yùn)動(dòng)前相比,運(yùn)動(dòng)結(jié)束時(shí)血漿的酸堿度會(huì)稍微有所下降D.血漿中部分水分和鹽分的丟失可改變抗利尿激素的分泌二、非選擇題9.(10分)基因工程為培育抗病毒植物開辟了新途徑,下圖為研究人員培育轉(zhuǎn)花葉病毒外殼蛋白基因(CMV-CP基因,長(zhǎng)度為740個(gè)堿基對(duì))番茄的主要過程示意圖(Kanr為卡那霉素抗性基因)。請(qǐng)回答:(1)將CMV-CP基因?qū)敕鸭?xì)胞后,培育的番茄植株具有抗CMV感染能力,這種現(xiàn)象屬于植物的特異性免疫,該免疫過程中抗原是____。(2)過程①接種的農(nóng)桿菌細(xì)胞中,Kanr及CMV-CP基因應(yīng)整合在Ti質(zhì)粒的T-DNA內(nèi)部,這是由于__。使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)農(nóng)桿菌的目的是____。(3)為確定用于篩選的Kan適宜濃度,研究人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果如右表。最終確定過程③④加入的Kan濃度為35mg·L-1,該濃度既可___,又不至于因Kan濃度過高影響導(dǎo)入重組DNA細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育。Kan濃度/mg.L-1接種外植體數(shù)形成愈傷組織數(shù)外植體狀況05549正常形成愈傷組織25662只膨大、不易形成愈傷組織35660變褐色死亡50640變褐色死亡(4)過程③、④所需的培養(yǎng)基為__(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基。過程⑤再生植株抗性鑒定時(shí),引物序列設(shè)計(jì)的主要依據(jù)是_____,引物序列長(zhǎng)度及G+C比例直接影響著PCR過程中_______(填“變性”或“退火”或“延伸”)的溫度。(5)過程⑤電泳結(jié)果如圖,其中l(wèi)號(hào)為標(biāo)準(zhǔn)參照,2號(hào)為重組Ti質(zhì)粒的PCR產(chǎn)物,3-6號(hào)為抗性植株DNA的PCR產(chǎn)物,可以確定3—6號(hào)再生植株中____號(hào)植株基因組中整合了CMV-CP基因。10.(14分)利用轉(zhuǎn)基因的工程菌生產(chǎn)藥用蛋白,近些年在我國(guó)制藥行業(yè)中異軍突起。圖1表示基因工程常用的一種質(zhì)粒?;卮鹩嘘P(guān)問題:(1)SphⅠ和SacⅠ兩種限制酶識(shí)別并切割不同的DNA序列,將目的基因和質(zhì)粒都通過SphⅠ和SacⅠ切割,可以避免_______________。拼接成重組質(zhì)粒,需要加入_______________酶才能完成。(2)各限制酶在該質(zhì)粒上分別只有一處識(shí)別序列,有關(guān)質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的限制酶酶切片段長(zhǎng)度如下表所示。已知質(zhì)粒被切除的片段長(zhǎng)度為0.5kb,則與質(zhì)粒結(jié)合的目的基因長(zhǎng)度為_____kb。質(zhì)粒上ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域之間的長(zhǎng)度為2.4kb(圖1所示),結(jié)合圖2分析目的基因上ClaI、PstⅠ兩種限制酶的切割位點(diǎn)分別為___________(填“a和b”或“b和a”)。質(zhì)粒重組質(zhì)粒BglⅡ6.0kb7.1kbClaⅠ6.0kb2.3kb,4.8kbPstⅠ6.0kb1.5kb,5.6kb(3)在篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體菌時(shí),培養(yǎng)基中加入適量的________________,使導(dǎo)入重組質(zhì)粒和普通質(zhì)粒的受體菌都能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。為了進(jìn)一步篩選,可以利用抗原-抗體雜交的方法,若出現(xiàn)______________,則該受體菌可以作為工程菌。(4)若要對(duì)藥用蛋白的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造,可利用____________工程對(duì)目的基因進(jìn)行修飾。11.(14分)戴口罩、勤洗手是預(yù)防新型冠狀病毒(COVID--19)的有效措施。某公司在防疫期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果,研究人員檢測(cè)了凝膠洗手前后,手部細(xì)菌的含量。凝膠洗手前的檢測(cè)流程見下圖?;卮鹣铝袉栴}:(1)在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前需要配置培養(yǎng)基,培養(yǎng)基指的是________________________。各種培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源、____________。如果培養(yǎng)乳酸桿菌,還需要在培養(yǎng)基中添加________。(2)為統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量,應(yīng)選擇的接種方法是____________(填“稀釋涂布平板法”或“平板劃線法”)。利用該方法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量的原理是________________________。(3)根據(jù)上圖所示的步驟得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可信度較低,為了提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度,請(qǐng)給出兩點(diǎn)建議:____________________。(4)培養(yǎng)一段時(shí)間后可根據(jù)__________(至少填兩項(xiàng))等菌落特征初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型。為了計(jì)算洗手前手部單位面積的細(xì)菌數(shù)量,除上圖所給的信息外,還需要知道____________________。12.某植物的性別由兩對(duì)獨(dú)立遺傳的基因(T/t和D/d)控制,T_dd為雌株,ttD-為雄株,T-D-、ttdd為雌雄同株。葉片顏色深綠和淺綠是由另一對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因控制。研究人員用深綠雄株個(gè)體和淺綠雌株個(gè)體雜交,所得后代(F1)中,深綠雌雄同株個(gè)體和深綠雄株個(gè)體各占一半。回答下列問題。(1)葉片顏色中顯性性狀是_。兩個(gè)親本中,雜合子親本是_。(2)單株隔離種植F1(只允許同株傳粉),所得后代(F2)中基因型有_(填數(shù)字)種,其中淺綠雌株個(gè)體所占比例是_。(3)甲、乙兩學(xué)習(xí)小組分別選用TtDd與ttdd雜交、TtDd自交的方法驗(yàn)證兩對(duì)基因(T/t和D/d)遵循自由組合定律。若甲組的子代的性狀及比例為_,則能證明兩對(duì)基因遵循自由組合定律。同學(xué)們討論后認(rèn)為,乙組所選方法優(yōu)于甲組,其理由是_。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】
生物膜系統(tǒng)由細(xì)胞膜、細(xì)胞器膜和核膜組成,生物膜系統(tǒng)在組成成分上相似、在結(jié)構(gòu)和功能上聯(lián)系;生物膜的主要組成成分是蛋白質(zhì)和磷脂,不同生物膜的功能的復(fù)雜程度是由生物膜上蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量決定的?!驹斀狻緼、葉綠體的類囊體膜是光合作用光反應(yīng)的場(chǎng)所,存在著催化ATP合成的酶,A錯(cuò)誤;B、溶酶體膜破裂后釋放的水解酶活性會(huì)發(fā)生改變,B正確;C、核膜上的核孔對(duì)物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞核具有選擇性,如RNA可以通過,而DNA不可以,C錯(cuò)誤;D、有氧呼吸第三階段合成水,發(fā)生在線粒體內(nèi)膜,因此線粒體內(nèi)膜上與呼吸作用有關(guān)的酶催化水的合成,D錯(cuò)誤。故選B。2、C【解析】
1、生長(zhǎng)素作用具有兩重性,即低濃度促進(jìn)生長(zhǎng),高濃度抑制生長(zhǎng),主要表現(xiàn)為:既能促進(jìn)生長(zhǎng),也能抑制生長(zhǎng);既可以疏花蔬果,也可以防止落花落果;既能促進(jìn)生根,也能抑制生根。2、頂端優(yōu)勢(shì)是頂芽?jī)?yōu)先生長(zhǎng)而側(cè)芽受到抑制的現(xiàn)象。原因是頂芽產(chǎn)生的生長(zhǎng)素向下運(yùn)輸,使近頂端的側(cè)芽部位生長(zhǎng)素濃度較高,從而抑制了該部位側(cè)芽的生長(zhǎng)?!驹斀狻緼、頂端優(yōu)勢(shì)是由于頂端產(chǎn)生的生長(zhǎng)素大量運(yùn)輸給側(cè)芽抑制側(cè)芽的生長(zhǎng),并非是側(cè)芽產(chǎn)生的生長(zhǎng)素過多引起,A錯(cuò)誤;B、同一植株的幼芽對(duì)生長(zhǎng)素的敏感程度低于幼根,B錯(cuò)誤;C、燕麥胚芽鞘中生長(zhǎng)素的極性運(yùn)輸與光照的方向無關(guān),重力和單側(cè)光照都不影響生長(zhǎng)素的極性運(yùn)輸,C正確;D、用一定濃度的秋水仙素溶液處理番茄幼苗可獲得多倍體,D錯(cuò)誤。故選C。3、B【解析】
醋酸桿菌是細(xì)菌,屬于原核生物,由原核細(xì)胞組成;動(dòng)物是真核生物,肝臟細(xì)胞屬于真核細(xì)胞;原核細(xì)胞和真核細(xì)胞最主要的區(qū)別是有無由核膜包被的細(xì)胞核(或有無以核膜為界限的細(xì)胞核)?!驹斀狻緼、兩者的細(xì)胞膜組成成分和結(jié)構(gòu)類似,均符合流動(dòng)鑲嵌模型,A正確;B、醋酸桿菌沒有由核膜包被的細(xì)胞核,其遺傳物質(zhì)主要儲(chǔ)存在擬核內(nèi),B錯(cuò)誤;C、兩者均可以進(jìn)行有氧呼吸,但由于醋酸桿菌細(xì)胞內(nèi)沒有線粒體,所以兩者進(jìn)行有氧呼吸的場(chǎng)所不完全相同,C正確;D、ATP是生命活動(dòng)的直接能源物質(zhì),兩者均依賴氧化有機(jī)物合成ATP,為代謝過程供能,D正確。故選B。4、D【解析】
由于胸腺嘧啶脫氧核糖核苷酸是合成DNA的原料,所以只有進(jìn)行細(xì)胞分裂地方才能利用3H-TDR進(jìn)行DNA復(fù)制,從而使得細(xì)胞具有放射性。小腸黏膜層細(xì)胞通過不斷的細(xì)胞分裂,更新衰老、死亡和脫落的細(xì)胞,因而通過分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞不斷向細(xì)胞死亡、脫落處推移。3H-尿苷轉(zhuǎn)化是RNA合成的原料,只要是活細(xì)胞就要進(jìn)行轉(zhuǎn)錄并指導(dǎo)合成蛋白質(zhì),所以活細(xì)胞因利用3H-尿苷而具有放射性?!驹斀狻緼、處理后開始的幾小時(shí),發(fā)現(xiàn)只有①處能夠檢測(cè)到放射性,證明小腸黏膜層只有①處的細(xì)胞能進(jìn)行DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂,A正確;B、小腸黏膜細(xì)胞上的放射性將會(huì)因?yàn)榧?xì)胞的衰老、死亡、脫落而消失。若再繼續(xù)培養(yǎng)一段時(shí)間,①②③處都將不再具有放射性,B正確;C、若換用3H標(biāo)記的尿苷培養(yǎng)液,則①②③處細(xì)胞進(jìn)行基因轉(zhuǎn)錄時(shí)均利用了3H-尿苷,能檢測(cè)到放射性,C正確;D、24h和48h時(shí)②③處分別出現(xiàn)放射性,說明②③處的衰老、死亡細(xì)胞被①處分裂產(chǎn)生新的細(xì)胞所取代,不能說明H-TDR的運(yùn)輸速度較慢,D錯(cuò)誤。故選D?!军c(diǎn)睛】本題綜合考查DNA分子復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的原料、細(xì)胞分裂及細(xì)胞更新等知識(shí),解題關(guān)鍵是判斷只有進(jìn)行細(xì)胞分裂的位置才會(huì)發(fā)生DNA復(fù)制,能利用3H-TDR。5、C【解析】
人體體內(nèi)的液體叫體液,可以分成細(xì)胞內(nèi)液和細(xì)胞外液,細(xì)胞外液包括組織液、血漿、淋巴,細(xì)胞外液也叫內(nèi)環(huán)境;一切與外界相通的管腔、囊腔(如消化道、呼吸道、膀胱、子宮等)及與外界相通的液體(如淚液、汗液、尿液、消化液等)都不可看作內(nèi)環(huán)境,因而其內(nèi)所含物質(zhì)也不可看作存在于內(nèi)環(huán)境中的物質(zhì)?!驹斀狻緼、血漿蛋白在細(xì)胞內(nèi)的核糖體中合成,細(xì)胞內(nèi)的核糖體不是內(nèi)環(huán)境,A錯(cuò)誤;B、病毒必須營(yíng)寄生生活,在活的宿主細(xì)胞內(nèi)才能進(jìn)行生命活動(dòng),因此勞氏肉瘤病毒的增殖發(fā)生在細(xì)胞內(nèi),不屬于內(nèi)環(huán)境,B錯(cuò)誤;C、HCO3-維持酸堿平衡發(fā)生在血漿中,血漿屬于內(nèi)環(huán)境,C正確;D、胰蛋白酶催化蛋白質(zhì)水解發(fā)生在消化道中,消化道與外界環(huán)境相通,不屬于內(nèi)環(huán)境,D錯(cuò)誤。故選C。6、D【解析】
1.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)能有效地增加細(xì)胞內(nèi)的膜面積,其外連細(xì)胞膜,內(nèi)連核膜,將細(xì)胞中的各種結(jié)構(gòu)連成一個(gè)整體,具有承擔(dān)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸?shù)淖饔?。根?jù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上有沒有附著核糖體,將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分為滑面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)兩種?;鎯?nèi)質(zhì)網(wǎng)上沒有核糖體附著,這種內(nèi)質(zhì)網(wǎng)所占比例較少,但功能較復(fù)雜,它與脂類、糖類代謝有關(guān);粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上附著有核糖體,其排列也較滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)規(guī)則,功能主要與蛋白質(zhì)的合成有關(guān)。2.脂肪的功能:儲(chǔ)藏能量,緩沖壓力,減少摩擦,保溫作用?!驹斀狻緼、植物常見的儲(chǔ)能物質(zhì)有脂肪和淀粉,A正確;B、由于磷脂分子頭部親水,尾部疏水,而細(xì)胞中的油脂疏水,外部溶液親水,所以油質(zhì)體磷脂膜應(yīng)該由單層磷脂分子構(gòu)成,B正確;C、脂質(zhì)的合成在內(nèi)質(zhì)網(wǎng),因此油質(zhì)體的形成與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有很密切的關(guān)系,C正確;D、脂肪不參與構(gòu)成細(xì)胞膜,D錯(cuò)誤。故選D。7、C【解析】
分析圖示可知,隨跑步機(jī)設(shè)置的速度值增加,小鼠的耗氧量增加,血液中乳酸含量也增加,且速度值為5-10米/分鐘時(shí),乳酸含量增加較快?!驹斀狻緼、小鼠為高等動(dòng)物,無氧呼吸的產(chǎn)物是乳酸,所以只有有氧呼吸在線粒體基質(zhì)產(chǎn)生二氧化碳,A錯(cuò)誤;B、無氧呼吸時(shí)葡萄糖中的能量大部分仍儲(chǔ)存在不徹底的氧化產(chǎn)物乳酸中,只有少量釋放出來,釋放出來的能量大部分以熱能散失,其余儲(chǔ)存在ATP中,B錯(cuò)誤;C、運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度為15米/分鐘時(shí),消耗氧的相對(duì)含量和產(chǎn)生乳酸的相對(duì)含量相等,根據(jù)1摩爾葡萄糖有氧呼吸消耗6摩爾氧氣和1摩爾葡萄糖無氧呼吸產(chǎn)生2摩爾乳酸,可計(jì)算出此時(shí)無氧呼吸消耗葡萄糖的量是有氧呼吸的3倍,C正確;D、酸脹感屬于大腦皮層產(chǎn)生的感覺,D錯(cuò)誤。故選C。8、A【解析】
1、人體血糖的三個(gè)來源:食物、肝糖元的分解、非糖物質(zhì)的轉(zhuǎn)化;三個(gè)去處:氧化分解、合成肝糖元肌糖元、轉(zhuǎn)化成脂肪蛋白質(zhì)等。2、水鹽平衡調(diào)節(jié)【詳解】A、胰島素由胰島B細(xì)胞分泌產(chǎn)生,A錯(cuò)誤;B、運(yùn)動(dòng)過程中血糖的氧化分解加快,血糖的相對(duì)含量下降,肝糖原的分解等代謝,使血糖保持在正常范圍內(nèi),B正確;C、運(yùn)動(dòng)過程中,機(jī)體細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)無氧呼吸產(chǎn)生乳酸,使內(nèi)環(huán)境的酸堿度有所下降,但通過酸堿緩沖物質(zhì)及多器官的作用,血漿的pH也會(huì)保持相對(duì)穩(wěn)定,C正確;D、運(yùn)動(dòng)過程中,由于汗液的分泌等會(huì)使血漿滲透壓升高,抗利尿激素的合成與釋放量增多,D正確。故選A。二、非選擇題9、CMV-CP(花葉病毒外殼蛋白)Ti質(zhì)粒中僅T-DNA片段可以進(jìn)入植物細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體DNA中使農(nóng)桿菌大量繁殖,重組Ti質(zhì)粒擴(kuò)增殺死沒有導(dǎo)入重組DNA的普通番茄細(xì)胞固體基因兩端的部分核苷酸序列退火3【解析】
將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(原理:農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上;根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn),如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。【詳解】(1)據(jù)題干信息可知“將CMV-CP基因?qū)敕鸭?xì)胞后,培育的番茄植株具有抗CMV感染能力”,故可推知該過程中抗原是CMV-CP(花葉病毒外殼蛋白)。(2)由以上分析可知:因Ti質(zhì)粒中僅T-DNA片段可以進(jìn)入植物細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體DNA中,故Kanr及CMV-CP基因應(yīng)整合在Ti質(zhì)粒的T-DNA內(nèi)部;為使農(nóng)桿菌大量繁殖,重組Ti質(zhì)粒擴(kuò)增,需要使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)農(nóng)桿菌,液體培養(yǎng)基可使菌體與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸。(3)據(jù)題干信息可知:Kanr為卡那霉素抗性基因,故若番茄細(xì)胞中成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒,則能在Kan培養(yǎng)基上存活,若未成功導(dǎo)入,則將被殺死,據(jù)表格數(shù)據(jù)可知,在Kan濃度為35mg·L-1時(shí),既可將未導(dǎo)入重組DNA的普通番茄細(xì)胞全部被殺死(愈傷組織為0,外植體變褐色死亡),又不至于因Kan濃度過高影響導(dǎo)入重組DNA細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育,故該濃度為適宜濃度。(4)過程③、④為植物組織培養(yǎng)中的過程,植物組織培養(yǎng)過程所需的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基;過程⑤再生植株抗性鑒定時(shí),引物應(yīng)根據(jù)基因兩端的部分核苷酸序列設(shè)計(jì);G+C比例越高,引物越容易與模板鏈結(jié)合,其比例直接影響著PCR過程中退火的溫度。(5)據(jù)題干信息知,2號(hào)為重組Ti質(zhì)粒的PCR產(chǎn)物,則基因組中整合了CMV-CP基因的植株電泳應(yīng)與2號(hào)結(jié)果相似,對(duì)應(yīng)3號(hào)植株?!军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記基因工程的操作步驟,尤其明確PCR技術(shù)擴(kuò)增的原理、掌握Ti質(zhì)粒的功能,并能對(duì)標(biāo)記基因的作用進(jìn)行知識(shí)的遷移運(yùn)用。10、目的基因和切割后質(zhì)粒的自身環(huán)化DNA連接1.6a和b氨芐青霉素雜交帶(抗原-抗體復(fù)合物)蛋白質(zhì)(第二代基因)【解析】
基因工程的工具酶有限制酶和DNA連接酶,一般用同種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因,但容易造成自身環(huán)化現(xiàn)象?!驹斀狻浚?)目的基因通過SphⅠ和SacⅠ切割產(chǎn)生的末端不同,可避免自身環(huán)化,質(zhì)粒通過SphⅠ和SacⅠ切割,可避免切割后的質(zhì)粒重新結(jié)合而環(huán)化;目的基因和質(zhì)粒結(jié)合,需要DNA連接酶連接磷酸二酯鍵將缺口連接起來。(2)根據(jù)表格信息,質(zhì)粒為6.0kb,減去被切除的長(zhǎng)度為0.5kb的片段,則剩余的為5.5kb,而重組質(zhì)粒為7.1kb,說明插入的目的基因長(zhǎng)度為7.1-5.5=1.6(kb);質(zhì)粒上含抗四環(huán)素基因的ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域長(zhǎng)度為2.4kb,減去被切取的片段長(zhǎng)度為0.5kb后為1.9kb,插入的目的基因長(zhǎng)度為1.6kb,所以重組質(zhì)粒上含抗四環(huán)素基因的ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域長(zhǎng)度為1.9+1.6=3.5(kb),又根據(jù)表格信息,通過ClaⅠ切割重組質(zhì)粒,產(chǎn)生了2.3kb片段,通過PstⅠ切割重組質(zhì)粒,產(chǎn)生了1.5kb片段。設(shè)PstⅠ切割位點(diǎn)為a,ClaⅠ切割位點(diǎn)為b,則會(huì)出現(xiàn)圖3中所示結(jié)果,而2.3+1.5=3.8,3.8﹥3.6,說明a為ClaI切割位點(diǎn)、b為PstⅠ切割位點(diǎn),反之則不成立。(3)重組質(zhì)粒的抗四環(huán)素基因已經(jīng)由于目的基因的插入而破壞,但氨芐青霉素基因完整,培養(yǎng)基中若加入適量的氨芐青霉素,含普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的受體菌都能存活,而沒有導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌會(huì)死亡而淘汰;若受體菌成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒,并且目的基因正常表達(dá),則可以產(chǎn)生所需的藥用蛋白,通過抗原-抗體雜交的方法,若出現(xiàn)雜交帶,則該受體菌可以作為工程菌;通過蛋白質(zhì)工程對(duì)目的基因進(jìn)行修飾,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)已有的藥用蛋白進(jìn)行改造?!军c(diǎn)睛】一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,并在特定的切點(diǎn)進(jìn)行切割。本題的難點(diǎn)在第2問,要根據(jù)表中各限制酶的切割片段進(jìn)行計(jì)算。11、人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求不同,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)無機(jī)鹽維生素稀釋涂布平板法當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌,通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就可以推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌①同一稀釋度下涂布三個(gè)平板,取三個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值②設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基,排除雜菌污染對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成的干擾菌落的大小、形狀(隆起程度和顏色)稀釋倍數(shù)和涂布平板時(shí)所取的稀釋液體積【解析】
1、各種培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源、氮源;另外,培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、氧氣的要求。2、微生物常見的接種方法(稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)):
①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板,接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分,微生物往往連在一起生長(zhǎng),隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個(gè)菌落。
②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?!驹斀狻浚?)培養(yǎng)基指人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求不同,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般培養(yǎng)基中均含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽,在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)還需要額外添加維生素。(2)平板劃線無法得知稀釋倍數(shù),因此不能用于活菌計(jì)數(shù)。稀釋涂布平板法用于活菌計(jì)數(shù)的原理是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就可以推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。(3)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需要遵循對(duì)照原則和平行重復(fù)原則,因此需要的改進(jìn)措施有:①同一種稀釋度下涂布三個(gè)平板,取三個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值;②設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基,排除雜菌污染對(duì)
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