《職業(yè)衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制樣品研制規(guī)范 第5部分 生物樣本類（征求意見稿）》編制說明

地方標(biāo)準(zhǔn)編制說明一、目的意義隨著機(jī)構(gòu)改革的推進(jìn)和新版《中華人民共和國職業(yè)病防治人員考核、盲樣考核、實(shí)驗(yàn)室比對等形式，對全省職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了現(xiàn)狀調(diào)查，通過對結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)我省職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室存在部分類別項(xiàng)目檢測能力有待提升，部分實(shí)驗(yàn)室未嚴(yán)格按照《職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)檢測工作規(guī)范》（下稱“規(guī)范”）規(guī)定要求采取必要質(zhì)量控制措施等問題。規(guī)范要求每批樣品測定前及測定過程中均需要通過質(zhì)量控制樣品（QCM）的測定來判斷是否符合質(zhì)控要求，單個項(xiàng)目每批次樣品測定需要QCM兩個以上。規(guī)范明確QCM可通過外購或自制獲得，省內(nèi)暫無相關(guān)產(chǎn)品供應(yīng)單位，國內(nèi)主要供應(yīng)商為國家疾控職業(yè)衛(wèi)生所、國家衛(wèi)健委職研中心、廣東省職防院等三家單位，單價在130元左右，按照實(shí)驗(yàn)室年平均使用量800份估算，外購QCM需要10萬元左右，成本較高。機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室又普遍存在自制能力不足情況，導(dǎo)致部分實(shí)驗(yàn)室在檢測過程中QCM未能按規(guī)范足量使用，制約了實(shí)驗(yàn)室檢測能力的提升，亟需制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對省內(nèi)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室自制QCM進(jìn)行規(guī)范和指引，補(bǔ)足其QCM自制能力，促進(jìn)QCM的使用，進(jìn)而提升我省相關(guān)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室檢測質(zhì)量、能力；新標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行也可促進(jìn)我省培育出一批具備規(guī)范制備QCM能力的實(shí)驗(yàn)室，為盡快推動我省自有高水平QCM供應(yīng)商的產(chǎn)生夯實(shí)技—2—術(shù)基礎(chǔ)。標(biāo)準(zhǔn)附錄部分通過示例詳細(xì)描述了此類QCM材料準(zhǔn)備、加料封裝、均勻性評估、定值、穩(wěn)定性評估、具體數(shù)據(jù)處理、信息文件書寫等過程，一般此類實(shí)驗(yàn)室均具備研制基礎(chǔ)條件，可操作性較強(qiáng)。申請單位江蘇省疾病預(yù)防控制中心（江蘇省公共衛(wèi)生研究院）是江蘇省衛(wèi)生地方標(biāo)準(zhǔn)掛靠單位，國內(nèi)率先成立江蘇省地方衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)委員會。中心“十三五”期間承擔(dān)國家評估能力和經(jīng)驗(yàn)。單位每年用于標(biāo)準(zhǔn)制定的經(jīng)費(fèi)在100萬元左右。第一起草人承擔(dān)了近4年我省職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室比對工作樣品制備工作。經(jīng)濟(jì)效益：本標(biāo)準(zhǔn)的制訂、實(shí)施可有力促進(jìn)我省職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室逐步具備QCM自制能力，按照單個職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室每周需使用20份，年使用量800份估算，可為省內(nèi)實(shí)驗(yàn)室節(jié)約外購QCM費(fèi)用10萬元左右，全省現(xiàn)有該類實(shí)驗(yàn)室100余家，預(yù)計(jì)可為省內(nèi)相關(guān)企事業(yè)單位節(jié)約外購QCM費(fèi)用1000萬元。社會效益：QCM制備標(biāo)準(zhǔn)的制訂實(shí)施可對省內(nèi)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室自制QCM進(jìn)行規(guī)范和指引，補(bǔ)足其QCM自制能力，促進(jìn)QCM的使用，進(jìn)而提升我省相關(guān)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室檢測質(zhì)量、能力；保證我省工作場所職業(yè)衛(wèi)生監(jiān)測質(zhì)量，有力保障我省1500萬接觸職業(yè)病危害因素勞動者健康。新標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行也可促進(jìn)我省培育出一批具備規(guī)范制備QCM能力的實(shí)驗(yàn)室，為盡快推動我省自有高水平QCM供應(yīng)商的產(chǎn)生夯實(shí)—3—技術(shù)基礎(chǔ)。二、任務(wù)來源《省市場監(jiān)管局關(guān)于下達(dá)2023年度江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目控制中心等單位申報的地方標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目《職業(yè)衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制樣品研制規(guī)范》已通過江蘇省市場監(jiān)管局批準(zhǔn)獲得立項(xiàng)。三、編制過程按時間節(jié)點(diǎn)或工作進(jìn)度簡述編制過程。按時間節(jié)點(diǎn)或工作進(jìn)度簡述編制過程。2023年8月標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)后，為廣泛吸收各利益相關(guān)方參與標(biāo)準(zhǔn)制定工作，凝練形成廣泛共識，充分保障標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量，推動標(biāo)準(zhǔn)后續(xù)應(yīng)用實(shí)施，牽頭單位就標(biāo)準(zhǔn)參與起草單位及起草人進(jìn)行了公開征集，并對部分申請單位進(jìn)行了現(xiàn)場評估，根據(jù)申請、評估情況，遴選南京市疾病預(yù)防控制中心等12家單位參與起草。2024年3月召開研制《職業(yè)衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制樣品研制規(guī)范》系列地方標(biāo)準(zhǔn)工作會議，探討研制方法，確定各子標(biāo)準(zhǔn)起草單位和起草人。標(biāo)準(zhǔn)第5部分：生物樣本類主要起草單位有：江蘇省疾病預(yù)防控制中心、無錫市疾病預(yù)防控制中心、蘇州工業(yè)園區(qū)疾病防治中心、蘇州市疾病預(yù)防控制中心、東南大學(xué)。2024年3-4月儀器、材料、人員準(zhǔn)備，制備條件摸索。2024年5月-10月尿中鎘質(zhì)量控制樣品（QCM）制備，樣本定值、均勻性、穩(wěn)定性、存儲條件、運(yùn)輸穩(wěn)定性等評估，—4—完成《職業(yè)衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制樣品研制規(guī)范》的第5部分標(biāo)準(zhǔn)文本編寫、示例補(bǔ)充、編制說明編寫、征求意見匯總等工作。四、主要內(nèi)容本文件適用于職業(yè)衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室研制質(zhì)量控制樣品（QCM）,對研制QCM的總體技術(shù)要求、研究步驟、制備過程、貯存/使用等內(nèi)容進(jìn)行了規(guī)范，基本用戶是需要研制特定的QCM的實(shí)驗(yàn)室人員。本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草，分為以下5個部分：——第1部分：固體吸附劑管類；——第2部分：濾料類；——第3部分：吸收液類；——第4部分：粉塵類（游離二氧化硅測定——第5部分：生物樣本類。五、技術(shù)指標(biāo)確定的依據(jù)起草組通過實(shí)地調(diào)研北京、廣東等國內(nèi)質(zhì)控樣研制單位、查閱GB/T15000標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則、CNAS-GL003-2018能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南、CNAS-GL005-2018實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部研制質(zhì)量控制樣品的指南等相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、指南，各子標(biāo)準(zhǔn)逐一開展試驗(yàn)論證，專家論證等確立主要技術(shù)指標(biāo)。2024年3月，無錫市疾病預(yù)防控制中心成立了質(zhì)控樣品研制小組，進(jìn)行了質(zhì)控品制備材料采購收集工作，對研制人員進(jìn)行了質(zhì)控品制備物資準(zhǔn)備驗(yàn)收、質(zhì)控品制備、質(zhì)控品定值、研制規(guī)范起草等相關(guān)環(huán)節(jié)的分工，收集比對單位的信息。2024年4月，進(jìn)行分裝小瓶的本底驗(yàn)收和冷凍干燥實(shí)驗(yàn)條件的摸索。1.考察了3種不同樣品瓶本底，凍干過程中沸騰起泡效應(yīng)，最終選擇10mL西林瓶來儲存質(zhì)控品，驗(yàn)收結(jié)果見表1。驗(yàn)收方法:隨機(jī)抽取10個小瓶，其中加入純水5mL,加蓋靜置浸泡24小時，測定前于混勻儀上滾動混勻20min，按照目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)規(guī)定/推薦測定方法程序進(jìn)行驗(yàn)收，測定其中鎘含量。凍干過程中觀察沸騰起泡現(xiàn)象。表1分樣小瓶驗(yàn)收結(jié)果不同類型的分裝小瓶鎘本底值ng沸騰起泡效應(yīng)10毫升聚乙烯塑料瓶0.010強(qiáng)10毫升西林瓶<0.005弱10毫升玻璃瓶0.045弱2.摸索了合適的尿鎘質(zhì)控品的冷凍干燥條件，見表2。表2尿鎘QCM真空干燥條件預(yù)凍：-40℃無真空主干燥：-40℃<10mbar-35℃6h<10mbar-25℃6h<10mbar-20℃6h<10mbar-10℃<10mbar-5℃<10mbar0℃<10mbar終末干燥：5℃<10mbar<10mbar<10mbar20℃<10mbar樣號測定次數(shù)樣號測定次數(shù)30℃2h<10mbar2024年5月，制備200瓶尿中鎘質(zhì)量控制樣本，利用石墨爐原子吸收光譜儀和電感耦合等離子體質(zhì)譜儀考察了尿鎘質(zhì)控品的均勻性，進(jìn)行了初步定值，并對兩種測定方法進(jìn)行了比較。1.均勻性評估：從該批次尿中鎘QCM中隨機(jī)抽取10瓶用于均勻性檢驗(yàn)。取尿鎘QCM恢復(fù)至室溫，加入5mL純水，待溶解后充分混勻，靜置20min。按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨爐原子吸收光譜法以及GBZ/T307.2-2018尿中鎘的測定第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行測定，每個樣品重復(fù)測定3次，測定結(jié)果見表3。樣品的重復(fù)測定應(yīng)按隨機(jī)次序進(jìn)行（可參考如下示例以降低測量飄移對均勻性評估的影響。采用單因素方差分析法對測定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，樣品間均值無顯著性差異則表明樣品是均勻的，單因素方差分析結(jié)果見表2。示例：10個樣品，重復(fù)測量3次，適合的測量方案如下：第一次測量順序：1、3、5、7、9、2、4、6、8、10第二次測量順序：10、9、8、7、6、5、4、3、2、1第三次測量順序：2、4、6、8、10、1、3、5、7、91.1按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨爐原子吸收光譜法進(jìn)行測定，結(jié)果詳見表3、表4表3尿中鎘均勻性測定結(jié)果(μg/L)石墨爐法123110.099.919.84210.289.9510.30樣號樣號測定次數(shù)310.2510.1010.3049.689.869.96510.369.549.96610.2210.0310.2879.769.8410.30810.3810.199.8699.849.6710.329.869.9910.41總平均值10.04標(biāo)準(zhǔn)偏差0.24表4單因素方差分析結(jié)果方差來源平方和均方F單元間重復(fù)測定90.4651.2510.0520.0630.825F臨界值F0.05(9,20)=2.39。計(jì)算的F值為0.825，該值＜F臨界值，表明在0.05顯著性水平時，該批次尿中鎘QCM是均勻定值：將均勻性評估研究中獲得的10瓶尿中鎘QCM的總平均值作為指示值，3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差建立指示值的控制限，本批次尿中鎘QCM的指示值及控制限為：10.04±0.72(μg/L）。1.2按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行測定，結(jié)果詳見表5、表6表5尿中鎘均勻性測定結(jié)果(μg/L)ICP-MS法123123456789總平均值10.15標(biāo)準(zhǔn)偏差0.063表6單因素方差分析結(jié)果方差來源平方和均方F單元間重復(fù)測定90.0570.0560.0060.0032.26F臨界值F0.05(9,20)=2.39。計(jì)算的F值為2.26，該值＜F臨界值，表明在0.05顯著性水平時，該批次尿中鎘定值：將均勻性評估研究中獲得的10瓶尿中鎘QCM的總平均值作為指示值，3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差建立指示值的控制限，本批次尿中鎘QCM的指示值及控制限為：10.15±0.18(μg/L）。1.3對石墨爐原子吸收光譜法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法檢測結(jié)果進(jìn)行方差分析。F臨界值F0.05(29,30)=1.85。計(jì)算的F值為0.87，該值＜F臨界值，表明在0.05顯著性水平時，制得的尿中鎘QCM通過兩種方法的檢測結(jié)果具有可比性。2.進(jìn)行穩(wěn)定性評估2.1保存穩(wěn)定性評估:-18℃條件下按照0、1個月、3個月、6個月、12個月存放時間（存放條件及時間點(diǎn)的選擇可參考附錄B各時間點(diǎn)取出6個樣本恢復(fù)至室溫，加入5mL純水，待溶解后充分混勻，靜置20min。按照GBZ/T307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨—9—爐原子吸收光譜法以及GBZ/T307.2-2018尿中鎘的測定或者第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行測定，每個樣品重復(fù)測定3次進(jìn)行測定，測定結(jié)果見表3。各時間點(diǎn)檢測結(jié)果與均勻性檢驗(yàn)的總體均值運(yùn)用t檢驗(yàn)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，如無顯著性差異，此時間點(diǎn)前該批次尿中鎘QCM的穩(wěn)定性符合要求。結(jié)果見表7表7尿中鎘穩(wěn)定性測定結(jié)果(μg/L)樣號存放時間（月）0110.17210.20310.0410.19410.1359.50610.31平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差t10.080.290.31按下式計(jì)算t值：式中：─n次測量的平均值；u─參考值(指示值)；n─測量次數(shù)；S─n次測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差。注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度，n≥6。表7結(jié)果顯示，室溫條件下存放1個月、3個月、6個月、12個月后，各時間點(diǎn)測定6個樣本計(jì)算所得t值均小于臨界值t(0.05,5)=2.57，各時間點(diǎn)平均值與參考值之間無顯著性差異，表明室溫條件下該批次尿中鎘QCM至少可穩(wěn)定存放12個月。2.2復(fù)溶樣本穩(wěn)定性評估:取6份尿中鎘QCM恢復(fù)至室溫，加入5mL純水復(fù)溶，待溶解后充分混勻，靜置20min，于4℃冰箱保存，分別于第1天、307.1-2018尿中鎘的測定第1部分：石墨爐原子吸收光譜法或GBZ/T307.2-2018尿中鎘的測定第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行測定，每個樣品重復(fù)測定3次，測定結(jié)果見表8。表8復(fù)溶樣本尿中鎘穩(wěn)定性測定結(jié)果(μg/L)樣號存放時間（天）01712310.04456平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差t按下式計(jì)算t值：式中：─n次測量的平均值；─參考值(指示值)；n─測量次數(shù)；S─n次測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差。注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度，n≥6。表8結(jié)果顯示，于4℃冰箱件下存放1天、7天、14天、30天后，各時間點(diǎn)測定6個樣本計(jì)算所得t值均小于臨界值t(0.05,5)=2.57，各時間點(diǎn)平均值與參考值之間無顯著性差異，表明于4℃冰箱件下存放的復(fù)溶樣本尿中鎘QCM至少可穩(wěn)定存放1個月。2.3運(yùn)輸穩(wěn)定性評估：3.為該批次尿中鎘的QCM逐一貼上帶有編號、“尿中鎘”等信息的標(biāo)簽，再將制備日期、貯存條件、有效期、預(yù)期的用途、指示值、使用的安全注意事項(xiàng)等信息以文件形式匯總，作為該批次QCM的信息文件。（4）將制備的尿鎘質(zhì)控品8瓶及SeronormTMTraceElementsurineL-2(LOT1403081)1瓶分發(fā)給蘇州市疾控中心、蘇州工業(yè)園區(qū)疾控中心、東南大學(xué)三家單位進(jìn)行檢測結(jié)果驗(yàn)證，樣本平行測定3次。(寄送日期：2024.5.28)四家單位采用的檢測儀器見表9表9四家單位使用儀器情況表////////////本方法經(jīng)三家單位驗(yàn)證，結(jié)果詳見表10。表10驗(yàn)證結(jié)果實(shí)驗(yàn)室測定方法試樣濃度范SeronormTMTraceElementsurineL-2(LOT1403081)標(biāo)準(zhǔn)值3.9~測定結(jié)果RSD%范圍無錫市疾病預(yù)防控制中心蘇州工業(yè)園區(qū)疾病防治中心蘇州市疾病預(yù)防控制中心東南大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院石墨爐原子吸收法ICP-MS法石墨爐原子吸收法石墨爐原子吸收法ICP-MS法9.54～10.3810.03～10.289.41～10.865.055.044.861.04～4.150.02～1.650.46～7.07六、重大分歧意見的處理過程和依據(jù)無。七、與相關(guān)法律法規(guī)和國家標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系本標(biāo)準(zhǔn)按照《中華人民共和國職業(yè)病防治法》、《職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)檢測工作規(guī)范》、《職業(yè)衛(wèi)生技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)管理辦法》等法律、法規(guī)、規(guī)范相關(guān)要求，對職業(yè)衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室研制QCM的總體技術(shù)要求、研究步驟、制備過程、貯存/使用等內(nèi)容進(jìn)行了規(guī)定，是GB/T15000標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則、CNAS-GL003-2018能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南、CNAS-GL005-2018實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部研制質(zhì)量控制樣品的指南等標(biāo)準(zhǔn)在職業(yè)衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)域