檢驗(yàn)科糖化血清白蛋白測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號(hào)：JYK-3-SH-043版本/修訂號(hào)：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書(shū)生效日期：20110701第5頁(yè)共5頁(yè)編寫制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01血清糖化白蛋白測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1檢驗(yàn)申請(qǐng)單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：血清糖化白蛋白(縮寫GALB)測(cè)定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。2標(biāo)本采集與處理2.1標(biāo)本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。2.1.2檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.1.3急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間。2.1.4標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2標(biāo)本保存2.2.1接收標(biāo)本后在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.2標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定8h，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定24h。-20℃保存穩(wěn)定30天。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對(duì)保存時(shí)間超過(guò)1天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置4～8℃冰箱內(nèi)保存7天。2.3標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛、避免劇烈活動(dòng)，24h不飲酒和12h以上禁食空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.2注意有無(wú)應(yīng)用影響測(cè)試項(xiàng)目的藥物。2.3.3可以使用肝素抗凝的血液標(biāo)本。3方法原理1.糖化白蛋白的測(cè)定：反應(yīng)生成的染料的顏色在550nm波長(zhǎng)有最大吸收，測(cè)定糖化血清蛋白所用的酶反應(yīng)如下:蛋白酶KAO糖化蛋白糖化的蛋白片斷氨基酸＋H2O2過(guò)氧化物酶H2O2＋染料染料復(fù)合物＋H2O所產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度與血清中糖化血清蛋白的含量成正比，2.白蛋白的測(cè)定：在樣品中，注入前處理液發(fā)生作用處理SH基，將還原型白蛋白變成氧化型白蛋白。其次，注入溴甲酚紫發(fā)生作用生成白蛋白和BCP的藍(lán)色結(jié)合體，測(cè)定此藍(lán)色結(jié)合體的吸光度而定量白蛋白濃度。3.糖化白蛋白的計(jì)算：得出的.糖化白蛋白濃度除以白蛋白濃度，得出.糖化白蛋白濃度值。為使本法測(cè)出的值與露喜佳法或?qū)Ｓ靡后w色譜的值一致，需要用轉(zhuǎn)換公式計(jì)算：專用液體色譜值＝（本法的值/1.14）+2.94試劑及其他用品4.1試劑：血清糖化白蛋白試劑盒，由旭化成制藥株式會(huì)社出品。4.2試劑盒保存：未開(kāi)瓶的試劑儲(chǔ)存在2～8℃可穩(wěn)定至有效期。試劑開(kāi)瓶后，在儀器冰箱試劑倉(cāng)中可保存28天。開(kāi)蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀，或起始吸光率>0.8時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。4.3試劑盒準(zhǔn)備：液態(tài)四試劑型，即開(kāi)即用，無(wú)特殊準(zhǔn)備。4.4試劑盒主要成分：糖化白蛋白試劑GAR1KAOD30U/LR1前處理液TODB2.0mmol/LGAR2（酶液）蛋白酶40KU/ml4-AA5.0mmol/L白蛋白試劑ALBR1（處理液）琥珀酸120mmol/LALBR2（發(fā)色液）BCP0.13g/l5校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式校準(zhǔn)品：試劑配套校準(zhǔn)品。6質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1質(zhì)控品采用由旭化成制藥株式會(huì)社公司提供的未定值質(zhì)控血清。6.2質(zhì)控液重建方法：粉劑復(fù)溶后分裝冰凍保存。6.3質(zhì)控品測(cè)定：在每星期一或換試劑時(shí)加做質(zhì)控一次。6.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計(jì)算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動(dòng)生化分析儀器全自動(dòng)生化分析儀器。8標(biāo)本檢測(cè)步驟裝載試劑→進(jìn)行校準(zhǔn)→進(jìn)行質(zhì)控→輸入標(biāo)本檢測(cè)項(xiàng)目→加載標(biāo)本→標(biāo)本測(cè)定→結(jié)果復(fù)核→報(bào)告。主要分析參數(shù)參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。10結(jié)果計(jì)算得出的.糖化白蛋白濃度除以白蛋白濃度，得出.糖化白蛋白濃度值。為使本法測(cè)出的值與露喜佳法或?qū)Ｓ靡后w色譜的值一致，需要用轉(zhuǎn)換公式計(jì)算：專用液體色譜值＝（本法的值/1.14）+2.911檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍11.1結(jié)果的報(bào)告11.1.1結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。11.1.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。11.2報(bào)告范圍：3.2-68.2%。12操作性能12.1精密度：批間CV<3%。12.2線性范圍：3.2-68.2%。13參考范圍11-16%14臨床意義酶法測(cè)定糖化血清蛋白測(cè)定試劑盒，用于定量檢測(cè)血清中的糖化血清蛋白。糖尿病人的血糖和糖化血清蛋白的濃度升高。糖化血清蛋白對(duì)于在糖尿病初期2-3周內(nèi)，檢測(cè)血糖濃度變化的一個(gè)非常有用的指標(biāo)。15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，審核者對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項(xiàng)目：審核與其他項(xiàng)目如GLU，HBA1C的關(guān)系，。如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16無(wú)威脅生命的“緊急值”及報(bào)告規(guī)定17有關(guān)引用程序與文件17.1Abbott自動(dòng)生化分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。17.2生化檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。17.3檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。17.4標(biāo)本送檢和接收程序。18參考文獻(xiàn)18.1陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程.杭州:浙江大學(xué)出版社,2004.