江蘇省五市十一校2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期5月階段聯(lián)考試題生物（選修）

2023～2024學(xué)年度第二學(xué)期階段聯(lián)測高二生物試題（選修）考試時間75分鐘，總分100分一、單項選擇題：本題共14小題，每小題2分，共28分。在每小題給出的四個選項中，只有一項符合題目要求。1.東臺陳皮酒以優(yōu)質(zhì)糯米為原料，加以陳皮、黃芪、黨參、當(dāng)歸等10多種滋補藥物，采用蒸煮、拌曲、糖化、發(fā)酵、壓榨、煮酒（90℃）過程釀造而成。下列說法錯誤的是（）A.蒸煮能在滅菌的同時破壞細胞結(jié)構(gòu)，促進淀粉的釋放B.拌曲前需要加水浸曲，目的是活化曲中的微生物C.發(fā)酵過程中酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2D.煮酒可使酒體中的蛋白質(zhì)變性，同時殺死酒體中的全部微生物2.下列關(guān)于酵母菌和細菌實驗的敘述正確的是（）A.培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基可以直接用來培養(yǎng)酵母菌B.通常細菌的生長速度和形成的菌落都大于酵母菌C.通常培養(yǎng)細菌和酵母菌的培養(yǎng)基都可以用高壓蒸汽滅菌法滅菌D.血細胞計數(shù)板既可以用于酵母菌數(shù)量的測定，也可以用于細菌數(shù)量的測定3.某中學(xué)食堂餐廚垃圾廢液中的某些細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列關(guān)于分解尿素細菌的分離和計數(shù)的敘述，正確的是（）A.分解尿素的細菌是以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源的B.對10ml廢液稀釋105倍后，取0.1ml涂布，測得菌落數(shù)分別為320、352、303，則該10ml廢液中的目的菌數(shù)為3.25×109個C.培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用既可以提供無機鹽又可以作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定D.平板劃線法計數(shù)時每隔24小時計數(shù)一次，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果4.科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細胞獲得了一種類似胚胎干細胞的細胞，并將其稱為誘導(dǎo)多功能干細胞（iPS細胞）。研究發(fā)現(xiàn)，iPS細胞可以來源于病人自身，這為某些疾病的治療提供了廣闊前景。下列說法錯誤的是（）A.iPS細胞的分化程度要低于成纖維細胞的B.小鼠成纖維細胞和小鼠iPS細胞中的DNA相同，蛋白質(zhì)完全不相同C.可通過誘導(dǎo)使iPS細胞定向分化成移植的目的器官D.不能利用白化病患者自身體細胞培養(yǎng)的iPS細胞治療自身疾病5.為培育含β-胡蘿卜素的“黃金大米”，科研人員提出兩套方案。下列敘述正確的是（）A.甲方案中，β-胡蘿卜素基因能在玉米和水稻體內(nèi)出現(xiàn)相同表達結(jié)果B.乙方案中，在體細胞雜交前需要用吸水漲破法去除細胞壁獲得原生質(zhì)體C.誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法同動物細胞融合的方法相同D.通過⑤獲得“黃金大米”幼苗過程，除了在培養(yǎng)基中添加營養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加血清6.某興趣小組擬用植物組織培養(yǎng)繁殖一種名貴蘭花，其技術(shù)路線為“培養(yǎng)基的配制→外植體的選擇→外植體的消毒→外植體的接種→誘導(dǎo)脫分化形成愈傷組織→誘導(dǎo)再分化→煉苗移植等過程”。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.通常選擇蘭花含病毒較少的幼嫩莖組織可以獲得抗毒苗B.消毒既要殺死外植體上附著的微生物，又不能傷及外植體C.脫分化過程中植物細胞依賴培養(yǎng)基中的有機物等進行生長D.煉苗包括曝光鍛煉和濕度鍛煉等，使幼苗逐步適應(yīng)外界環(huán)境7.2024年5月11日哈佛大學(xué)麻省總醫(yī)院宣布，兩個月前全球首例接受經(jīng)過CRISPR基因編輯的豬腎臟移植手術(shù)的活體患者去世，以下關(guān)于這個技術(shù)的敘述錯誤是（）A.基因編輯技術(shù)為異種器官移植帶來了生機B.該技術(shù)實現(xiàn)了不同物種間的基因轉(zhuǎn)移，打破了物種間的遺傳壁壘C.該技術(shù)在人體上的應(yīng)用引發(fā)了倫理和道德的討論D.基因編輯是對基因進行改造，其結(jié)果屬于基因突變8.M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達?，F(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示，下列說法正確的是（）A.克隆動物A一定都是M蛋白基因失活的個體B.與胚胎細胞核移植技術(shù)相比，體細胞核移植技術(shù)的成功率更高C.獲得轉(zhuǎn)基因克隆動物A需核移植、胚胎移植、早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)D.胚胎干細胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為細胞體積大、細胞核大，核仁明顯9.某小組通過PCR（假設(shè)引物長度為8個堿基短于實際長度）獲得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶進行酶切（下圖），再用所得片段成功構(gòu)建了基因表達載體。下列敘述錯誤的是（）A.其中一個引物序列5＇TGCGCAGT3＇B.步驟①所用的酶是SpeI和CfoIC.用步驟①的酶對載體進行酶切，至少獲得了2個片段D.酶切片段和載體連接時，可使用E．coli連接酶或T4連接酶10.低毒性的廣譜除草劑，能非特異性侵入并殺死所有的植物。為避免被草甘膦殺死，科學(xué)家將細菌的EPSPS基因（控制EPSPS合成酶合成的基因）轉(zhuǎn)入小麥，提高其對草甘膦的耐受性。以下說法正確的是（）A.EPSPS基因轉(zhuǎn)錄時以DNA的兩條鏈同時作為模板，提高轉(zhuǎn)錄效率B.EPSPS基因?qū)胄←溔~肉細胞后，抗藥性狀可隨傳粉受精過程遺傳C.檢測到小麥的葉肉細胞中有EPSPS基因但并不一定會檢測到EPSPS基因的表達產(chǎn)物D.利用Ti質(zhì)粒將EPSPS基因整合到小麥染色體上時需要DNA聚合酶11.利用蛋白質(zhì)工程改造源于溶珊瑚弧菌的幾丁質(zhì)酶：保留該酶N端，在C端增加陸生真菌幾丁質(zhì)結(jié)合保守域，從而增加酶與底物的結(jié)合能力。改造后的酶活性顯著高于市售幾丁質(zhì)酶。相關(guān)敘述正確的是（）A.幾丁質(zhì)是海洋中含量豐富蛋白質(zhì)之一B.改造幾丁質(zhì)酶也需要構(gòu)建基因表達載體C.直接操作對象是溶珊瑚弧菌的幾丁質(zhì)酶D.改造后的幾丁質(zhì)酶和原幾丁質(zhì)酶是同一種酶12.下列有關(guān)生物技術(shù)安全及倫理性的問題，表述正確的是（）A.治療性克隆需借助胚胎移植技術(shù)B.世界各國達成協(xié)議僅允許少數(shù)國家保存和使用生物武器C.只要目的基因來自自然界，培育出的轉(zhuǎn)基因植物就不會有安全性問題D.大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，有可能會導(dǎo)致棉鈴蟲群體中相關(guān)抗性基因頻率增加13.“鑒別”與“篩選”是生物學(xué)研究中常用的技術(shù)手段。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.選硝化細菌時，培養(yǎng)基中不加碳源B.胚胎移植前，可取滋養(yǎng)層細胞做DNA分析，鑒別動物性別C.植物體細胞雜交過程中，原生質(zhì)體融合后需經(jīng)篩選獲得所需雜種細胞D用選擇培養(yǎng)基對微生物進行篩選時，實驗組接種微生物，對照組不接種微生物14.生物學(xué)實驗經(jīng)常需要控制溫度才能呈現(xiàn)應(yīng)有的實驗結(jié)果。下列敘述錯誤的是（）A.PCR時，需將反應(yīng)體系的溫度控制在72~74℃以使DNA解旋B.利用二苯胺試劑鑒定溶解于NaCl溶液的DNA時，需要沸水浴加熱C.做電泳所需的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份，在20℃的低溫下儲存D.PCR時，需將溫度下降到50℃左右，讓引物與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合二、多項選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。在每小題給出的四個選項中，有一項或多項符合題目要求。全部選對得3分，選對但不全得1分，有選錯得0分。15.下圖所示為發(fā)酵工程生產(chǎn)產(chǎn)品的流程圖，下列敘述正確的是（）A.若高產(chǎn)青霉素菌種是通過②培育的，②應(yīng)該是誘變育種B.培養(yǎng)基配制過程應(yīng)先滅菌再調(diào)pHC.整個發(fā)酵過程中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐發(fā)酵D.若發(fā)酵產(chǎn)品是單細胞蛋白，常采用過濾、沉淀等方法分離、提純16.羊奶是世界上公認的最接近人奶的乳品，如圖表示研究人員利用胚胎工程培育產(chǎn)奶量高的優(yōu)質(zhì)奶羊的過程，下列相關(guān)說法正確的是（）A.①過程判斷培養(yǎng)液中卵子是否受精通常以觀察到兩個極體或雌、雄原核作為標(biāo)志B.②過程卵裂期有機物總量變多，每個細胞相對表面積變小C.③過程對囊胚進行均等分割，有利于胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育D.⑤過程的成功與供體和受體具有相同的生理狀態(tài)密切相關(guān)17.利用PCR技術(shù)擴增目的基因的過程中兩種引物分別為A和B。下列敘述正確的是（）A.DNA分子擴增的速率只與DNA分子的大小有關(guān)B.PCR反應(yīng)體系中Mg2+的作用促進耐高溫DNA聚合酶的活性C.從理論上推測，第二輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段占100%D.PCR反應(yīng)中，dNTP在擴增中可以提供能量，也可以作合成DNA原料18.生命科學(xué)院課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，將青蒿素合成過程的某一關(guān)鍵酶基因fps在野生青蒿中過量表達，其過程如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.經(jīng)圖示過程得到的fps基因中含有啟動子和終止子B.酶1、酶2和酶3作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵C.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法多用于雙子葉植物和裸子植物D.導(dǎo)入fps基因的青蒿植株中該基因不一定都能過量表達19.某實驗中學(xué)生物興趣小組對DNA粗提取的實驗步驟進行了創(chuàng)新：利用液氮快速粉碎植物樣品，采用堿裂解（0.5mol/LNaOH使細胞破碎）的方式提取DNA，提取的DNA再利用TE緩沖液中和，得到DNA的粗提取液。下列說法正確的是（）A.提取DNA的實驗材料可選擇洋蔥或者新鮮的雞血細胞B.利用液氮處理植物樣品的目的是使植物細胞彼此分離C.堿溶液可以破壞細胞膜和細胞壁D.TE緩沖液能使DNA從溶液中析出三、非選擇題：本部分包括5題，共計57分。20.自生固氮菌是土壤中能獨立固定空氣中N2的細菌總稱，科研人員進行了土壤中篩選高效自生固氮菌和固氮能力測定的研究，部分實驗流程如下圖。請回答：（1）步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)豞_______（填“表層”或“深層”）土壤；步驟②需充分振蕩20min，主要目的是________。（2）步驟③中需用手指輕壓________（操作工具）的橡皮頭，吹吸3次。步驟③將土壤懸浮液稀釋了________倍，步驟④所用的接種工具是________。（3）下表為兩種培養(yǎng)基的配方，步驟④應(yīng)選其中的________培養(yǎng)基，并加入瓊脂后進行高壓蒸汽滅菌、倒平板。純化培養(yǎng)時，需同時進行未接種培養(yǎng)基的培養(yǎng)，目的是________。阿須貝氏培養(yǎng)基：甘露醇（C6H14O6）10g，KH2PO40.2g，MgSO4·7H2O0.2g，NaCl0.2g，K2SO40.3g，CaCO35g，蒸餾水1000mL。溶菌肉湯培養(yǎng)基：蛋白胨1g，酵母提取物5g，NaCl5g，蒸餾水1000mL，（4）將純化的固氮菌置于完全培養(yǎng)液中擴大培養(yǎng)48小時，經(jīng)離心后收集下層細胞并轉(zhuǎn)移至特定培養(yǎng)基中進行固氮能力的測定，篩選出固氮能力最強的菌種CM12為進一步鑒定其固氮，科研人員選用發(fā)芽一致的玉米種子進行3組盆栽實驗，30d后測定土壤微生物有機氮含量，結(jié)果如下圖。CK：對照處理組N：尿素處理組（每盆土壤澆50mL有氮全營養(yǎng)液）：成份為在1000mL無氮植物營養(yǎng)液中加入0.12g尿素）CM12：自生固氮菌CM12處理組（每盆土壤澆50mL接種自身固氮菌的無氮植物營養(yǎng)液）①對照組（CK）的處理為________。②實驗結(jié)果表明：施用尿素處理和接種固氮菌CM12處理均能顯著增加土壤微生物有機氮含量。與尿素處理組相比，CM12處理組土壤微生物有機氮含量增加了約________%。③自生固氮菌較共生固氮菌（如根瘤菌）的應(yīng)用范圍更廣，原因是________。21.圖1表示融合PCR技術(shù)的過程示意圖（P1～P4表示引物），圖2表示融合后產(chǎn)物的電泳圖。請回答下列問題：（1）圖1設(shè)計引物的前提是________，引物的作用是________。第一階段中PCR至少進行________次循環(huán)，才能獲得步驟1中的產(chǎn)物，第二階段中引物2與引物3部分堿基的________關(guān)系使得兩DNA能成功“搭橋”連接起來。（2）PCR技術(shù)的原理是________，若通過融合PCR技術(shù)將啟動子、目的基因、終止子拼接起來，需要設(shè)計________種引物。（3）若要對A、B融合基因繼續(xù)進行PCR擴增，則圖1中的M、N處位置所需要的引物分別是________。最終擴增出64個融合基因，理論上該過程消耗了________個引物。（4）圖2分離和鑒定擴增產(chǎn)物的常用方法是________。若PCR反應(yīng)沒有擴增出任何產(chǎn)物，則可能的原因是________（至少兩點）。22.I.供體細胞的分化狀態(tài)和表觀遺傳修飾模式是影響體細胞核移植胚胎發(fā)育的重要因素。為研究供體細胞RNAmA修飾（即RNA某位點的甲基化）水平對豬核移植胚胎發(fā)育的影響，研究者進行系列實驗。（1）核移植的受體是____________________細胞，核移植后的重構(gòu)胚發(fā)育至____________________階段可利用____________________技術(shù)轉(zhuǎn)移到代孕母體子宮內(nèi)以獲得子代個體，從早期胚胎中分離獲得的具有自我更新和分化潛能的____________________可用于醫(yī)學(xué)研究。（2）RNAm6A修飾可通過提高mRNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性來影響早期胚胎發(fā)育。豬骨髓間充質(zhì)干細胞（甲組）屬于多能干細胞，豬胎兒成纖維細胞（乙組）則是處于分化終端的體細胞。研究者比較了兩細胞內(nèi)RNAm6A修飾水平及其作為核供體時重構(gòu)胚的發(fā)育效率，結(jié)果如圖1、2。結(jié)果表明，核供體細胞的分化程度越高，___________________越低。II.蘭花人工種子由人工種皮、原球莖和人工胚乳構(gòu)成。原球莖是由胚性細胞組成、形態(tài)類似球莖的結(jié)構(gòu)，可發(fā)育成完整植株，人工胚乳可調(diào)控原球莖的休眠，并為原球莖的發(fā)育提供營養(yǎng)成分和激素?；卮鹣铝袉栴}：（3）從盆蘭花獲取莖尖，對其進行____________________處理后接種于培養(yǎng)基，莖尖通過_____________________后生長為原球莖。原球莖在發(fā)芽培養(yǎng)基上可很快長出幼葉，然后在生根培養(yǎng)基中形成完整植株。（4）將原球莖切成小塊，轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基進行繼續(xù)培養(yǎng)，可以得到大量原球莖，實現(xiàn)蘭花的快速繁殖。在增殖培養(yǎng)基中添加椰子水，原球莖會長得更飽滿。不同成熟度椰子的椰子水對原球莖生長的促進效果不同，推測原因是不同成熟度椰子的椰子水中____________________和____________________的含量存在差異。（5）某實驗研究發(fā)現(xiàn)，與添加用過濾除菌法處理的椰子水（A組）相比，人工胚乳中添加用濕熱滅菌法處理的椰子水（B組）使原球莖的休眠時間變短。研究人員推測B組原球莖休眠時間短的原因是脫落酸被破壞。作出上述推測的依據(jù)是：椰子水中有脫落酸；____________________;脫落酸不耐高溫。為了驗證上述推測，可增加一組實驗（C組），C組的處理是：____________________。23.以我國科學(xué)家為主的科研團隊將OSNL（即4個基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的縮寫）導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細胞（CEFs），誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細胞（iPS），再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細胞（iPGCs），然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中，最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代，實驗流程如圖。回答下列問題。（1）培養(yǎng)CEFs獲得iPS細胞時，需要定期更換培養(yǎng)液并通入CO2的目的分別是________。（2）CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的，為獲得單細胞懸液，雞胚組織剪碎后需用________處理。動物細胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加________等天然成分，以滿足細胞對某些細胞因子的需求。（3）體外獲取OSNL的方法有________。（答出1種方法即可）若要在CEFs中表達外源基因的蛋白，需構(gòu)建基因表達載體，載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外，還須有啟動子和________等。啟動子是________識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動________。（4）iPS細胞和iPGCs細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是________。（5）該實驗流程中用到的生物技術(shù)有________（答出2點即可）24.P24是HIV病毒顆粒的主要結(jié)構(gòu)蛋白（大小約為26KD），是P24基因的表達產(chǎn)物。P24單克隆抗體在HIV感染的診斷、治療等方面有重要意義，P24單克隆抗體的制備主要包括三個階段：利用基因工程生產(chǎn)P24蛋白；利用細胞融合技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體；單克隆抗體活性的鑒定。請回答下列問題：（1）提取HIV的總RNA，經(jīng)________過程獲得總cDNA。通過PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性的擴增出P24基因的cDNA。（2）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，需對質(zhì)粒和P24基因的cDNA用BamHI和XhoI進行雙酶切，雙酶切的優(yōu)點是________。研究發(fā)現(xiàn)，P24基因的cDNA缺乏這兩種限制酶的識別序列。為此，在設(shè)計PCR引物時，需要________。（3）將重組質(zhì)粒（含卡那霉素抗性基因）導(dǎo)入宿主菌體細胞后，進行部分操作及結(jié)果如下圖所示。圖中①②兩處的接種方法________（填“相同”或“不同”）。蛋白凝膠分析結(jié)果圖中，1為蛋白Marker，2為不含物質(zhì)A的菌液，3為含物質(zhì)A的菌液，實驗結(jié)果說明P24較高的是________（填“2”或“3”），據(jù)此推測物質(zhì)A的作用是________。（4）用P24蛋白對小鼠以靜脈注射的方式進行加強免疫3次，其目的是________。取免疫后小鼠脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞，用________促融，為選出能產(chǎn)生專一抗體的細胞，要從HAT培養(yǎng)基上篩選出雜交瘤細胞，然后稀釋滴入多孔培養(yǎng)板中，使多孔培養(yǎng)板每孔中有________個細胞，然后篩選出抗體檢測呈________（填“陽性”或“陰性”）的細胞進行克隆化培養(yǎng)；該克隆化培養(yǎng)細胞具有的特點為________。（5）T細胞被HIV感染后，會與未被感染的T細胞發(fā)生融合，從而形成多核巨細胞，多核巨細胞不久死亡又釋放出大量新病毒。多核巨細胞的數(shù)量可作為P24單克隆抗體活性鑒定的指標(biāo)。請完善以下鑒定P24單克隆抗體活性的實驗思路：將未被感染的T細胞等分為三組，處理如下：A組：HIV感染的T細胞+未被感染的T細胞+細胞培養(yǎng)液；B組：HIV感染的T細胞+未被感染的T細胞+________；C組：未被感染的T細胞+細胞培養(yǎng)液。2023～2024學(xué)年度第二學(xué)期階段聯(lián)測高二生物試題（選修）考試時間75分鐘，總分100分一、單項選擇題：本題共14小題，每小題2分，共28分。在每小題給出的四個選項中，只有一項符合題目要求。1.東臺陳皮酒以優(yōu)質(zhì)糯米為原料，加以陳皮、黃芪、黨參、當(dāng)歸等10多種滋補藥物，采用蒸煮、拌曲、糖化、發(fā)酵、壓榨、煮酒（90℃）過程釀造而成。下列說法錯誤的是（）A.蒸煮能在滅菌的同時破壞細胞結(jié)構(gòu)，促進淀粉的釋放B.拌曲前需要加水浸曲，目的是活化曲中的微生物C.發(fā)酵過程中酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2D.煮酒可使酒體中的蛋白質(zhì)變性，同時殺死酒體中的全部微生物【答案】D【解析】【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵，故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精；生產(chǎn)中是否有酒精的產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色?！驹斀狻緼、蒸煮的目的是使原料在高溫下滅菌，同時使細胞結(jié)構(gòu)破裂，淀粉被釋放出來，淀粉由顆粒狀變?yōu)槿苣z狀態(tài)，A正確；B、拌曲前需要加水浸曲，加水浸曲是將酵母菌活化，自由水增加使酵母菌新陳代謝旺盛，B正確；C、在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵，發(fā)酵過程中酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2，C正確；D、煎酒的溫度在90℃，可使酒體中的蛋白質(zhì)變性，但只能殺死酒體中的部分微生物，D錯誤。故選D。2.下列關(guān)于酵母菌和細菌實驗的敘述正確的是（）A.培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基可以直接用來培養(yǎng)酵母菌B.通常細菌的生長速度和形成的菌落都大于酵母菌C.通常培養(yǎng)細菌和酵母菌的培養(yǎng)基都可以用高壓蒸汽滅菌法滅菌D.血細胞計數(shù)板既可以用于酵母菌數(shù)量測定，也可以用于細菌數(shù)量的測定【答案】C【解析】【分析】培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。滅菌常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等?！驹斀狻緼、細菌是原核生物，酵母菌是真核生物，不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣，培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基不能直接用來培養(yǎng)酵母菌，A錯誤；B、通常細菌的生長速度比酵母菌快，但形成的菌落，不一定細菌的大于酵母菌的，與細菌的種類有關(guān)，部分細菌的菌落小于酵母菌，B錯誤；C、滅菌常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌，通常細菌和酵母菌的培養(yǎng)基都可以用高壓蒸汽滅菌法滅菌，C正確；D、血細胞計數(shù)板適用于真菌的計數(shù)，細菌計數(shù)板用于細菌的數(shù)量測定等，D錯誤。故選C。3.某中學(xué)食堂餐廚垃圾廢液中的某些細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列關(guān)于分解尿素細菌的分離和計數(shù)的敘述，正確的是（）A.分解尿素的細菌是以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源的B.對10ml廢液稀釋105倍后，取0.1ml涂布，測得菌落數(shù)分別為320、352、303，則該10ml廢液中的目的菌數(shù)為3.25×109個C.培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用既可以提供無機鹽又可以作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定D.平板劃線法計數(shù)時每隔24小時計數(shù)一次，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果【答案】B【解析】【分析】稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。用稀釋涂布平板法測定同一樣品中的細菌數(shù)時，為了保證結(jié)果準確，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平板，確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行記數(shù)，求其平均值?！驹斀狻緼、分解尿素的細菌是異養(yǎng)型，不能以CO2作為碳源，A錯誤；B、對10ml廢液稀釋105倍后，取0.1ml涂布，測得菌落數(shù)分別為320、352、303，則該10ml廢液中的目的菌數(shù)為(320+352+303)/3×10×10×105=3.25×109，B正確；C、培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用既可以提供無機鹽又可以作為緩沖劑保持pH的相對穩(wěn)定，C錯誤；D、稀釋涂布平板法計數(shù)時每隔24小時計數(shù)一次，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，D錯誤。故選B。4.科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細胞獲得了一種類似胚胎干細胞的細胞，并將其稱為誘導(dǎo)多功能干細胞（iPS細胞）。研究發(fā)現(xiàn)，iPS細胞可以來源于病人自身，這為某些疾病的治療提供了廣闊前景。下列說法錯誤的是（）A.iPS細胞的分化程度要低于成纖維細胞的B.小鼠成纖維細胞和小鼠iPS細胞中的DNA相同，蛋白質(zhì)完全不相同C.可通過誘導(dǎo)使iPS細胞定向分化成移植的目的器官D.不能利用白化病患者自身體細胞培養(yǎng)的iPS細胞治療自身疾病【答案】B【解析】【分析】1、細胞分化是指在個體發(fā)育中，相同細胞的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細胞分化過程遺傳物質(zhì)不變，只是基因選擇性表達的結(jié)果。2、干細胞是動物和人體內(nèi)保留著少量具有分裂和分化能力的細胞。3、干細胞的分類：①全能干細胞：具有形成完整個體的分化潛能；②多能干細胞：具有分化出多種細胞組織的潛能；③專能干細胞：只能向一種或兩種密切相關(guān)的細胞類型分化?！驹斀狻緼、iPS細胞是一種類似胚胎干細胞的細胞，成纖維細胞是高度分化的細胞，所以iPS細胞的分化程度要低于成纖維細胞的，A正確；B、小鼠成纖維細胞和小鼠iPS細胞中的DNA相同，由于基因的選擇性表達，蛋白質(zhì)不完全相同，B錯誤；C、可通過誘導(dǎo)使iPS細胞定向分化成移植的目的器官，這為某些疾病的治療提供了廣闊前景，C正確；D、白化病患者自身體細胞中含有白化病基因，無法進行正常的功能，則不能利用白化病患者自身體細胞培養(yǎng)的iPS細胞治療自身疾病，D正確。故選B。5.為培育含β-胡蘿卜素的“黃金大米”，科研人員提出兩套方案。下列敘述正確的是（）A.甲方案中，β-胡蘿卜素基因能在玉米和水稻體內(nèi)出現(xiàn)相同表達結(jié)果B.乙方案中，在體細胞雜交前需要用吸水漲破法去除細胞壁獲得原生質(zhì)體C.誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合方法同動物細胞融合的方法相同D.通過⑤獲得“黃金大米”幼苗過程，除了在培養(yǎng)基中添加營養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加血清【答案】A【解析】【分析】分析甲方案：該方案采用基因工程技術(shù)育種，其中①表示目的基因獲取；②表示將目的基因?qū)胧荏w細胞；③表示將轉(zhuǎn)基因細胞培育成轉(zhuǎn)基因植株，需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。分析乙方案：該方案采用植物細胞工程技術(shù)育種，其中④表示植物體細胞雜交過程，⑤表示將雜交細胞培育成雜交植株，需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)?！驹斀狻緼、自然界中所有生物共用一套遺傳密碼，一種生物的基因能在另一種生物體內(nèi)表達，因此甲方案中，β-胡蘿卜素基因能在玉米和水稻體內(nèi)出現(xiàn)相同表達結(jié)果，A正確；B、在植物體細胞雜交前需用纖維素酶和果膠酶除去細胞壁獲得原生質(zhì)體，B錯誤；C、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法物理法（離心、振動、電刺激等）和化學(xué)法（聚乙二醇）；誘導(dǎo)動物細胞融合的方法：物理法（離心、振動、電刺激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒），因此誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法同動物細胞融合的方法不完全相同，C錯誤；D、在動物細胞培養(yǎng)過程中需要添加血清，在植物組織培養(yǎng)的過程中，不需要添加血清，D錯誤。故選A。6.某興趣小組擬用植物組織培養(yǎng)繁殖一種名貴蘭花，其技術(shù)路線為“培養(yǎng)基的配制→外植體的選擇→外植體的消毒→外植體的接種→誘導(dǎo)脫分化形成愈傷組織→誘導(dǎo)再分化→煉苗移植等過程”。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.通常選擇蘭花含病毒較少的幼嫩莖組織可以獲得抗毒苗B.消毒既要殺死外植體上附著的微生物，又不能傷及外植體C.脫分化過程中植物細胞依賴培養(yǎng)基中的有機物等進行生長D.煉苗包括曝光鍛煉和濕度鍛煉等，使幼苗逐步適應(yīng)外界環(huán)境【答案】A【解析】【分析】1、植物組織培養(yǎng)技術(shù)：（1）過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。（2）原理：植物細胞的全能性。（3）條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如溫度、光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。2、植物組織培養(yǎng)中生長素和細胞分裂素使用比例對植物細胞發(fā)育的影響：生長素用量比細胞分裂素用量，比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時，促進愈傷組織的形成?！驹斀狻緼、切取作物幼嫩莖組織進行組織培養(yǎng)，可以獲得無病毒的植物苗，但不具有抗病毒作用，A錯誤；B、消毒的原則是既要殺死外植體上的微生物，又要減少消毒劑對外植體的傷害，B正確；C、由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細胞的脫分化，脫分化過程中植物細胞依賴培養(yǎng)基中的有機物等進行生長，C正確；D、煉苗包括曝光鍛煉和濕度鍛煉等，使苗逐步適應(yīng)外界環(huán)境，提高組培苗對外界環(huán)境條件的適應(yīng)性，D正確。故選A。7.2024年5月11日哈佛大學(xué)麻省總醫(yī)院宣布，兩個月前全球首例接受經(jīng)過CRISPR基因編輯的豬腎臟移植手術(shù)的活體患者去世，以下關(guān)于這個技術(shù)的敘述錯誤是（）A.基因編輯技術(shù)為異種器官移植帶來了生機B.該技術(shù)實現(xiàn)了不同物種間的基因轉(zhuǎn)移，打破了物種間的遺傳壁壘C.該技術(shù)在人體上的應(yīng)用引發(fā)了倫理和道德的討論D.基因編輯是對基因進行改造，其結(jié)果屬于基因突變【答案】D【解析】【分析】免疫排斥是機體對移植物（異體細胞、組織或器官）通過特異性免疫應(yīng)答使其破壞的過程。一般是指移植術(shù)后，受者可識別移植物抗原并產(chǎn)生應(yīng)答，移植物中免疫細胞也可識別受者抗原組織并產(chǎn)生應(yīng)答?！驹斀狻緼、基因編輯技術(shù)減少異種器官移植中免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生，為異種器官移植帶來了生機，A正確；B、將豬腎臟移植給活體患者實現(xiàn)了不同物種間的基因轉(zhuǎn)移，打破了物種間的遺傳壁壘，B正確；C、由于人和豬屬于不同的物種，將豬腎臟移植給活體患者會引發(fā)了倫理和道德的討論，C正確；D、將經(jīng)過基因編輯的豬腎臟移植入一位腎病患者體內(nèi)，移植手術(shù)使用的豬腎臟經(jīng)過了基因組編輯，包括“敲除”會引起排異反應(yīng)的基因，添加一些人類基因以改善動物器官與人體的兼容性，屬于基因重組，D錯誤。故選D。8.M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達。現(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示，下列說法正確的是（）A.克隆動物A一定都是M蛋白基因失活的個體B.與胚胎細胞核移植技術(shù)相比，體細胞核移植技術(shù)的成功率更高C.獲得轉(zhuǎn)基因克隆動物A需核移植、胚胎移植、早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)D.胚胎干細胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為細胞體積大、細胞核大，核仁明顯【答案】C【解析】【分析】1、核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。核移植得到的動物稱克隆動物，克隆動物的核基因完全來自供體動物，而細胞質(zhì)基因來自受體細胞。核移植包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植，其中體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植，因為體細胞的全能性低于胚胎細胞。2、哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞。ES細胞具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積小、細胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞?！驹斀狻緼、外源基因F不一定都插入M基因特定位置，因此最終克隆的動物A是否表現(xiàn)出M蛋白基因失活還需要進行檢測和鑒定，A錯誤；B、由于動物胚胎細胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，動物體細胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，故與胚胎細胞核移植技術(shù)相比，體細胞核移植技術(shù)的成功率低，B錯誤；C、獲得轉(zhuǎn)基因克隆動物A需核移植、胚胎移植、早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)，C正確；D、從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為細胞體積小，細胞核大，核仁明顯，具有發(fā)育的全能性，D錯誤。故選C。9.某小組通過PCR（假設(shè)引物長度為8個堿基短于實際長度）獲得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶進行酶切（下圖），再用所得片段成功構(gòu)建了基因表達載體。下列敘述錯誤的是（）A.其中一個引物序列為5＇TGCGCAGT3＇B.步驟①所用的酶是SpeI和CfoIC.用步驟①的酶對載體進行酶切，至少獲得了2個片段D.酶切片段和載體連接時，可使用E．coli連接酶或T4連接酶【答案】B【解析】【分析】E.coliDNA連接酶只能連接黏性末端；T4DNA連接酶既可連接平末端，又可連接黏性末端?！驹斀狻緼、由于引物只能引導(dǎo)子鏈從5＇到3＇，根據(jù)堿基互補配對原則，其中一個引物序列為5＇TGCGCAGT3＇，A正確；B、根據(jù)三種酶的酶切位點，左側(cè)的黏性末端是使用NheI切割形成的，右邊的黏性末端是用CfoI切割形成的，B錯誤；C、用步驟①的酶對載體進行酶切，使用了NheI和CfoI進行切割，根據(jù)他們的識別位點以及原本DNA的序列，切割之后至少獲得了2個片段，C正確；D、圖中形成的是黏性末端，而E.coliDNA連接酶只能連接黏性末端；T4DNA連接酶既可連接平末端，又可連接黏性末端，D正確。故選B。10.低毒性的廣譜除草劑，能非特異性侵入并殺死所有的植物。為避免被草甘膦殺死，科學(xué)家將細菌的EPSPS基因（控制EPSPS合成酶合成的基因）轉(zhuǎn)入小麥，提高其對草甘膦的耐受性。以下說法正確的是（）A.EPSPS基因轉(zhuǎn)錄時以DNA的兩條鏈同時作為模板，提高轉(zhuǎn)錄效率B.EPSPS基因?qū)胄←溔~肉細胞后，抗藥性狀可隨傳粉受精過程遺傳C.檢測到小麥的葉肉細胞中有EPSPS基因但并不一定會檢測到EPSPS基因的表達產(chǎn)物D.利用Ti質(zhì)粒將EPSPS基因整合到小麥染色體上時需要DNA聚合酶【答案】C【解析】【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原抗體雜交技術(shù)，個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻緼、轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過程，A錯誤；

B、EPSPS基因?qū)胄←溔~肉細胞后，培育的植株在減數(shù)分裂過程中產(chǎn)生的配子不一定含有EPSPS基因，B錯誤；C、檢測到小麥的葉肉細胞中有EPSPS基因，基因選擇性表達，故EPSPS基因不一定表達，并不一定會檢測到EPSPS基因的表達產(chǎn)物，C正確；

D、利用Ti質(zhì)粒將EPSPS基因整合到小麥染色體上時需要DNA連接酶，不需要用DNA聚合酶，D錯誤。

故選C。11.利用蛋白質(zhì)工程改造源于溶珊瑚弧菌的幾丁質(zhì)酶：保留該酶N端，在C端增加陸生真菌幾丁質(zhì)結(jié)合保守域，從而增加酶與底物的結(jié)合能力。改造后的酶活性顯著高于市售幾丁質(zhì)酶。相關(guān)敘述正確的是（）A.幾丁質(zhì)是海洋中含量豐富的蛋白質(zhì)之一B.改造幾丁質(zhì)酶也需要構(gòu)建基因表達載體C.直接操作對象是溶珊瑚弧菌的幾丁質(zhì)酶D.改造后的幾丁質(zhì)酶和原幾丁質(zhì)酶是同一種酶【答案】B【解析】【分析】蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求?！驹斀狻緼、幾丁質(zhì)也是一種多糖，又稱為殼多糖，廣泛存在于甲殼類動物和昆蟲的外骨骼中，幾丁質(zhì)是僅次于纖維素的第二大可再生資源，也是海洋中含量豐富的多糖之一，A錯誤；B、改造的為幾丁質(zhì)酶基因，改造后的基因需要表達，因此改造幾丁質(zhì)酶也需要構(gòu)建基因表達載體，B正確；C、蛋白質(zhì)工程操作的對象為基因，結(jié)合題干可知直接操作對象是溶珊瑚弧菌的幾丁質(zhì)酶基因，C錯誤；D、改造后的幾丁質(zhì)酶保留該酶N端，在C端增加陸生真菌幾丁質(zhì)結(jié)合保守域，從而增加酶與底物的結(jié)合能力，改造后的酶活性顯著高于市售幾丁質(zhì)酶，改造前后的幾丁質(zhì)酶空間結(jié)構(gòu)不同，因此改造后的幾丁質(zhì)酶和原幾丁質(zhì)酶不是同一種酶，D錯誤。故選B。12.下列有關(guān)生物技術(shù)安全及倫理性的問題，表述正確的是（）A.治療性克隆需借助胚胎移植技術(shù)B.世界各國達成協(xié)議僅允許少數(shù)國家保存和使用生物武器C.只要目的基因來自自然界，培育出的轉(zhuǎn)基因植物就不會有安全性問題D.大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，有可能會導(dǎo)致棉鈴蟲群體中相關(guān)抗性基因頻率增加【答案】D【解析】【分析】轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。【詳解】A、治療性克隆不需借助胚胎移植技術(shù)，A錯誤；B、生物武器具有強大的傳染性和致病力，應(yīng)在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴散，世界各國達成協(xié)議不允許任何國家保存和使用生物武器，B錯誤；C、即使轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，也可能會產(chǎn)生安全性問題，如某些轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生的蛋白質(zhì)可能會成為某些人的新的過敏源，C錯誤；D、大量種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，有可能會導(dǎo)致棉鈴蟲群體中相關(guān)抗性基因頻率增加，D正確。故選D。13.“鑒別”與“篩選”是生物學(xué)研究中常用的技術(shù)手段。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.選硝化細菌時，培養(yǎng)基中不加碳源B.胚胎移植前，可取滋養(yǎng)層細胞做DNA分析，鑒別動物性別C.植物體細胞雜交過程中，原生質(zhì)體融合后需經(jīng)篩選獲得所需雜種細胞D.用選擇培養(yǎng)基對微生物進行篩選時，實驗組接種微生物，對照組不接種微生物【答案】D【解析】【分析】選擇培養(yǎng)基是將允許特定種類的微生物生長、同時抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基；鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使培養(yǎng)后會發(fā)生某種變化，從而區(qū)別不同類型的微生物的培養(yǎng)基?！驹斀狻緼、由于硝化細菌是自養(yǎng)型微生物，能夠利用二氧化碳作為碳源，故培養(yǎng)基中可以不加碳源，A正確；B、胚胎移植前前可取滋養(yǎng)層細胞做DNA分析，鑒定性別，B正確；C、植物體細胞雜交過程中，同種細胞也可能發(fā)生融合，原生質(zhì)體融合后需經(jīng)篩選獲得所需雜種細胞，C正確；D、選擇培養(yǎng)基的作用是目的菌能夠正常在其上生存，其他微生物不能正常生存，為了確定選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用，應(yīng)設(shè)計一個在完全培養(yǎng)基上接種的培養(yǎng)皿作對照，D錯誤。故選D。14.生物學(xué)實驗經(jīng)常需要控制溫度才能呈現(xiàn)應(yīng)有的實驗結(jié)果。下列敘述錯誤的是（）A.PCR時，需將反應(yīng)體系的溫度控制在72~74℃以使DNA解旋B.利用二苯胺試劑鑒定溶解于NaCl溶液的DNA時，需要沸水浴加熱C.做電泳所需的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份，在20℃的低溫下儲存D.PCR時，需將溫度下降到50℃左右，讓引物與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合【答案】A【解析】【分析】PCR是聚合酶鏈式反應(yīng)的縮寫。它是一項根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對目的基因的核苷酸序列進行大量復(fù)制的技術(shù)。PCR每個循環(huán)包括變性、復(fù)性、延伸三個步驟，每一次循環(huán)后目的基因的量可以增加一倍，即成指數(shù)形式擴增?！驹斀狻緼、PCR時需將反應(yīng)體系先加熱至90℃以上，此操作的目的是使目的基因解旋，A錯誤；B、DNA在沸水浴條件下，與二苯胺反應(yīng)呈藍色，因此可利用二苯胺溶液鑒定DNA，B正確；C、進行DNA片段的擴增及電泳鑒定實驗所需的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份，并在20℃的低溫下儲存，以防止酶變性失活，C正確；D、在復(fù)性過程中，PCR反應(yīng)體系中的溫度會被降低至50℃左右，使得引物能夠與DNA單鏈結(jié)合，D正確。故選A。二、多項選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。在每小題給出的四個選項中，有一項或多項符合題目要求。全部選對得3分，選對但不全得1分，有選錯得0分。15.下圖所示為發(fā)酵工程生產(chǎn)產(chǎn)品的流程圖，下列敘述正確的是（）A.若高產(chǎn)青霉素菌種是通過②培育的，②應(yīng)該是誘變育種B.培養(yǎng)基配制過程應(yīng)先滅菌再調(diào)pHC.整個發(fā)酵過程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐發(fā)酵D.若發(fā)酵產(chǎn)品是單細胞蛋白，常采用過濾、沉淀等方法分離、提純【答案】ACD【解析】【分析】在發(fā)酵過程中通過攪拌不僅能增加溶氧量，還能使菌種與培養(yǎng)液充分接觸，提高原料的利用率，從而使發(fā)酵過程更好地進行，發(fā)酵產(chǎn)品分離、提純時要根據(jù)產(chǎn)品的類型選擇合適的方法?！驹斀狻緼、發(fā)酵工程所用的菌種可以是由基因工程獲得的菌種、自然選擇的目標(biāo)菌種或者是通過誘變選擇的菌種，能高產(chǎn)青霉素菌種是通過②誘變育種培育的，A正確；B、根據(jù)培養(yǎng)基的用途，可以將它們分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。培養(yǎng)基通常用高壓蒸汽法進行滅菌，培養(yǎng)基配制過程應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，B錯誤；C、發(fā)酵罐發(fā)酵過程是整個發(fā)酵過程的中心環(huán)節(jié)，C正確；D、如果要獲得菌體本身，常常采用過濾、沉淀等方法分離、提純；如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物的代謝物，還要根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當(dāng)?shù)姆椒ǚ蛛x、提純，從而得到所需的代謝產(chǎn)品。單細胞蛋白屬于菌體本身，通常采用過濾、沉淀等方法分離、提純，D正確。故選ACD。16.羊奶是世界上公認的最接近人奶的乳品，如圖表示研究人員利用胚胎工程培育產(chǎn)奶量高的優(yōu)質(zhì)奶羊的過程，下列相關(guān)說法正確的是（）A.①過程判斷培養(yǎng)液中卵子是否受精通常以觀察到兩個極體或雌、雄原核作為標(biāo)志B.②過程卵裂期有機物總量變多，每個細胞相對表面積變小C.③過程對囊胚進行均等分割，有利于胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育D.⑤過程的成功與供體和受體具有相同的生理狀態(tài)密切相關(guān)【答案】ACD【解析】【分析】①表示受精作用，②表示胚胎培養(yǎng)，③表示胚胎分割，④表示胚胎培養(yǎng)，⑤表示胚胎移植?！驹斀狻緼、多數(shù)哺乳動物的第一極體不進行減數(shù)第二次分裂，因而不會形成兩個第二極體，在實際胚胎工程操作中，常以觀察到兩個極體或者雄、雄原核作為受精的標(biāo)志，A正確；B、②過程卵裂期有機物總量減小，每個細胞相對表面積變大，B錯誤；C、胚胎分割時，一般采用發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚，在對囊胚進行分割時，應(yīng)注意內(nèi)細胞團均等分割，有利于胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)，C正確；D、對供體和受體同時用激素同期發(fā)情處理是為了保證供體和受體具有相同的生理狀態(tài)，以確保胚胎移植后能正常發(fā)育，D正確。故選ACD。17.利用PCR技術(shù)擴增目的基因的過程中兩種引物分別為A和B。下列敘述正確的是（）A.DNA分子擴增的速率只與DNA分子的大小有關(guān)B.PCR反應(yīng)體系中Mg2+的作用促進耐高溫DNA聚合酶的活性C.從理論上推測，第二輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段占100%D.PCR反應(yīng)中，dNTP在擴增中可以提供能量，也可以作合成DNA原料【答案】BD【解析】【分析】PCR稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，所利用的原理為DNA分子的復(fù)制，因此PCR技術(shù)一般用于基因擴增?！驹斀狻緼、DNA分子擴增的速率與DNA分子的大小有關(guān)，但也會受到其他因素的影響，如：溫度，A錯誤；B、Mg2+能激活DNA聚合酶的活性，PCR反應(yīng)體系中Mg2+的作用促進耐高溫DNA聚合酶的活性，B正確；C、PCR擴增中引物通常是一小段DNA片段，每一次循環(huán)后DNA分子數(shù)量增加一倍，從理論上推測，第二輪后只有一個DNA片段只有引物B，含引物A的比例為3/4，C錯誤；D、PCR反應(yīng)中，dNTP（dGTP、dCTP、dATP、dTTP）在擴增中脫去兩個磷酸基團斷裂兩個化學(xué)鍵可以提供能量，脫去兩個磷酸基團后為DNA的基本組成單位，也可以作合成DNA原料，D正確。故選BD。18.生命科學(xué)院課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，將青蒿素合成過程的某一關(guān)鍵酶基因fps在野生青蒿中過量表達，其過程如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.經(jīng)圖示過程得到的fps基因中含有啟動子和終止子B.酶1、酶2和酶3作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵C.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法多用于雙子葉植物和裸子植物D.導(dǎo)入fps基因的青蒿植株中該基因不一定都能過量表達【答案】BCD【解析】【分析】1、據(jù)圖分析，酶1可以催化逆轉(zhuǎn)錄過程，表示逆轉(zhuǎn)錄酶，酶2是限制酶，酶3是DNA連接酶，據(jù)此分析作答。2、基因控制蛋白質(zhì)合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個環(huán)節(jié)：轉(zhuǎn)錄是指以DNA的一條鏈為模板，按照堿基互補配對原則，合成RNA的過程。翻譯是指以mRNA為模板，合成具有一定氨基酸排列順序的蛋白質(zhì)的過程?！驹斀狻緼、真核細胞的mRNA不含有啟動子和終止子對應(yīng)序列，故反轉(zhuǎn)錄得到的基因不含啟動子和終止子，A錯誤；B、酶1促進逆轉(zhuǎn)錄的過程，故為逆轉(zhuǎn)錄酶，酶2、酶3用于切割目的基因和質(zhì)粒，為限制酶和DNA連接酶，都能連接兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，B正確；C、在自然條件下，農(nóng)桿菌感染雙子葉植物和裸子植物，所以用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化雙子葉植物和裸子植物，C正確；D、導(dǎo)入fps基因的青蒿植株中基因不一定能過量表達，故必須檢測轉(zhuǎn)基因青蒿植株中的青蒿素產(chǎn)量，若產(chǎn)量增高，則說明達到了目的，D正確。故選BCD。19.某實驗中學(xué)生物興趣小組對DNA粗提取的實驗步驟進行了創(chuàng)新：利用液氮快速粉碎植物樣品，采用堿裂解（0.5mol/LNaOH使細胞破碎）的方式提取DNA，提取的DNA再利用TE緩沖液中和，得到DNA的粗提取液。下列說法正確的是（）A.提取DNA的實驗材料可選擇洋蔥或者新鮮的雞血細胞B.利用液氮處理植物樣品的目的是使植物細胞彼此分離C.堿溶液可以破壞細胞膜和細胞壁D.TE緩沖液能使DNA從溶液中析出【答案】ABC【解析】【分析】DNA粗提取選材的標(biāo)準：DNA含量高，并且材料易得，由于哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核和細胞器，因此不采用哺乳動物的血液。DNA粗提取和鑒定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同；3、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色?！驹斀狻緼、洋蔥或者新鮮的雞血細胞均有細胞核，核中有DNA，所以可以為材料提取DNA，A正確；B、由題干“液氮快速粉碎植物樣品”可知，利用液氮處理樣品的作用是使植物細胞彼此分離，B正確；C、由題干“NaOH使細胞破碎”可知，NaOH呈堿性，堿溶液可能可以破壞細胞膜和細胞壁，C正確；D、由題干“提取的DNA再利用TE緩沖液中和，得到DNA的粗提取液”可知，TE緩沖液是溶解DNA的溶液，D錯誤。故選ABC。三、非選擇題：本部分包括5題，共計57分。20.自生固氮菌是土壤中能獨立固定空氣中N2的細菌總稱，科研人員進行了土壤中篩選高效自生固氮菌和固氮能力測定的研究，部分實驗流程如下圖。請回答：（1）步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)豞_______（填“表層”或“深層”）土壤；步驟②需充分振蕩20min，主要目的是________。（2）步驟③中需用手指輕壓________（操作工具）的橡皮頭，吹吸3次。步驟③將土壤懸浮液稀釋了________倍，步驟④所用的接種工具是________。（3）下表為兩種培養(yǎng)基的配方，步驟④應(yīng)選其中的________培養(yǎng)基，并加入瓊脂后進行高壓蒸汽滅菌、倒平板。純化培養(yǎng)時，需同時進行未接種培養(yǎng)基的培養(yǎng)，目的是________。阿須貝氏培養(yǎng)基：甘露醇（C6H14O6）10g，KH2PO40.2g，MgSO4·7H2O0.2g，NaCl0.2g，K2SO40.3g，CaCO35g，蒸餾水1000mL。溶菌肉湯培養(yǎng)基：蛋白胨1g，酵母提取物5g，NaCl5g，蒸餾水1000mL，（4）將純化的固氮菌置于完全培養(yǎng)液中擴大培養(yǎng)48小時，經(jīng)離心后收集下層細胞并轉(zhuǎn)移至特定培養(yǎng)基中進行固氮能力的測定，篩選出固氮能力最強的菌種CM12為進一步鑒定其固氮，科研人員選用發(fā)芽一致的玉米種子進行3組盆栽實驗，30d后測定土壤微生物有機氮含量，結(jié)果如下圖。CK：對照處理組N：尿素處理組（每盆土壤澆50mL有氮全營養(yǎng)液）：成份為在1000mL無氮植物營養(yǎng)液中加入0.12g尿素）CM12：自生固氮菌CM12處理組（每盆土壤澆50mL接種自身固氮菌的無氮植物營養(yǎng)液）①對照組（CK）的處理為________。②實驗結(jié)果表明：施用尿素處理和接種固氮菌CM12處理均能顯著增加土壤微生物有機氮含量。與尿素處理組相比，CM12處理組土壤微生物有機氮含量增加了約________%。③自生固氮菌較共生固氮菌（如根瘤菌）的應(yīng)用范圍更廣，原因是________。【答案】（1）①.表層②.使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中（2）①.膠頭滴管②.1000③.涂布器（3）①.阿須貝氏②.檢測培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基是否被雜菌污染（4）①.每盆土壤澆50mL無氮植物營養(yǎng)液②.83.3③.自生固氮菌能在土壤中獨立固氮，不受宿主的限制【解析】【分析】1、微生物常見的接種的方法（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。2、培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)；分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)；在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物種和氧氣的要求?！拘?詳解】土壤中含有豐富微生物，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大、種類最多。在富含有機質(zhì)的土壤表層，有更多的微生物生長，故步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥?；步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中。【小問2詳解】步驟③中需用手指輕壓膠頭滴管的橡皮頭，吹吸三次。由圖觀察可知，步驟③中的稀釋梯度分別為10、100、1000倍，實驗中取樣進行培養(yǎng)的是稀釋倍數(shù)為1000的試管，實驗采用的是稀釋涂布平板法，所以步驟④中所用的接種工具是涂布器。【小問3詳解】由題干信息分析可知，科研人員的目的是分離土壤中自生固氮菌，故為了模擬類似的生長環(huán)境，培養(yǎng)基中需要添加多種無機鹽來模擬土壤環(huán)境，同時不能有含氮物質(zhì)，因此步驟④應(yīng)選擇其中的阿須貝氏培養(yǎng)基；純化培養(yǎng)時，需同時進行未接種培養(yǎng)基的培養(yǎng)，目的是檢測培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基是否被雜菌污染?！拘?詳解】①對照組的目的是排除無關(guān)變量對實驗的影響，故對照組（CK）的處理為每盆土壤澆50mL無氮植物營養(yǎng)液。②由柱狀圖可知，空白對照組中土壤微生物有機氨含量為10，故尿素處理組的土壤微生物有機氨含量為1210=2，而CM12處理組土壤微生物有機氮含量為2210=12，故與尿素處理組相比，CM12處理組土壤微生物有機氮含量增加值大概為（1（2÷12））×100%=83.3%。③自生固氮菌較共生固氮菌（如根瘤菌）的應(yīng)用范圍更廣，原因是自生固氮菌能在土壤中獨立固氮，不受宿主的限制。21.圖1表示融合PCR技術(shù)的過程示意圖（P1～P4表示引物），圖2表示融合后產(chǎn)物的電泳圖。請回答下列問題：（1）圖1設(shè)計引物的前提是________，引物的作用是________。第一階段中PCR至少進行________次循環(huán)，才能獲得步驟1中的產(chǎn)物，第二階段中引物2與引物3部分堿基的________關(guān)系使得兩DNA能成功“搭橋”連接起來。（2）PCR技術(shù)的原理是________，若通過融合PCR技術(shù)將啟動子、目的基因、終止子拼接起來，需要設(shè)計________種引物。（3）若要對A、B融合基因繼續(xù)進行PCR擴增，則圖1中的M、N處位置所需要的引物分別是________。最終擴增出64個融合基因，理論上該過程消耗了________個引物。（4）圖2分離和鑒定擴增產(chǎn)物的常用方法是________。若PCR反應(yīng)沒有擴增出任何產(chǎn)物，則可能的原因是________（至少兩點）?！敬鸢浮浚?）①.已知基因的序列②.使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸③.2④.堿基互補配對（2）①.DNA復(fù)制②.8（3）①.P1、P4②.126（4）①.瓊脂糖凝膠電泳②.復(fù)性溫度太高；引物設(shè)計不合理無法與目基因結(jié)合

【解析】【分析】1、PCR（聚合酶鏈式反應(yīng)）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制。2、PCR（聚合酶鏈式反應(yīng)）是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60℃左右）時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72℃左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖（5'3'）的方向合成互補鏈。3、PCR需要的條件：引物、Taq酶、模板、脫氧核苷酸（dCTP、dATP、dGTP、dTTP）【小問1詳解】需要根據(jù)已知基因的序列設(shè)計引物，引物是一小段單鏈DNA或RNA，能與目的基因堿基互補配對，其作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸。在第一階段中，利用PCR技術(shù)進行第一次擴增（循環(huán)），得到的含有P2與P3的產(chǎn)物，其DNA雙鏈不等長，該產(chǎn)物繼續(xù)進行第二次擴增（循環(huán)），才能獲得雙鏈等長的DNA，所以PCR經(jīng)過兩次循環(huán)才能獲得純的目的基因片段。由圖可知，引物P2與P3添加序列的互補鏈發(fā)生堿基互補配對，然后在TaqDNA聚合酶的作用下向兩邊延伸，使基因A、B完成融合。【小問2詳解】PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制，通過融合PCR技術(shù)，每一次將兩個DNA片段拼接起來，需要4個引物，其中有2個起著“搭橋”作用。依此類推，若通過融合PCR技術(shù)將啟動子、標(biāo)記基因、目的基因、終止子拼接起來，需要設(shè)計8種引物，其中能夠起著“搭橋”作用的引物有6種。【小問3詳解】根據(jù)引物延伸的方向，N處添加的引物是P4，M處添加的引物是P1。最終擴增出64個融合基因，理論上該過程消耗的引物為64×22=126個?！拘?詳解】通常用瓊脂糖凝膠電泳法分離和鑒定擴增產(chǎn)物。若復(fù)性溫度太高；引物設(shè)計不合理無法與目的基因結(jié)合等原因會導(dǎo)致PCR反應(yīng)沒有擴增出任何產(chǎn)物。22.I.供體細胞的分化狀態(tài)和表觀遺傳修飾模式是影響體細胞核移植胚胎發(fā)育的重要因素。為研究供體細胞RNAmA修飾（即RNA某位點的甲基化）水平對豬核移植胚胎發(fā)育的影響，研究者進行系列實驗。（1）核移植的受體是____________________細胞，核移植后的重構(gòu)胚發(fā)育至____________________階段可利用____________________技術(shù)轉(zhuǎn)移到代孕母體子宮內(nèi)以獲得子代個體，從早期胚胎中分離獲得的具有自我更新和分化潛能的____________________可用于醫(yī)學(xué)研究。（2）RNAm6A修飾可通過提高mRNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性來影響早期胚胎發(fā)育。豬骨髓間充質(zhì)干細胞（甲組）屬于多能干細胞，豬胎兒成纖維細胞（乙組）則是處于分化終端的體細胞。研究者比較了兩細胞內(nèi)RNAm6A修飾水平及其作為核供體時重構(gòu)胚的發(fā)育效率，結(jié)果如圖1、2。結(jié)果表明，核供體細胞的分化程度越高，___________________越低。II.蘭花人工種子由人工種皮、原球莖和人工胚乳構(gòu)成。原球莖是由胚性細胞組成、形態(tài)類似球莖的結(jié)構(gòu)，可發(fā)育成完整植株，人工胚乳可調(diào)控原球莖的休眠，并為原球莖的發(fā)育提供營養(yǎng)成分和激素?；卮鹣铝袉栴}：（3）從盆蘭花獲取莖尖，對其進行____________________處理后接種于培養(yǎng)基，莖尖通過_____________________后生長為原球莖。原球莖在發(fā)芽培養(yǎng)基上可很快長出幼葉，然后在生根培養(yǎng)基中形成完整植株。（4）將原球莖切成小塊，轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基進行繼續(xù)培養(yǎng)，可以得到大量原球莖，實現(xiàn)蘭花的快速繁殖。在增殖培養(yǎng)基中添加椰子水，原球莖會長得更飽滿。不同成熟度椰子的椰子水對原球莖生長的促進效果不同，推測原因是不同成熟度椰子的椰子水中____________________和____________________的含量存在差異。（5）某實驗研究發(fā)現(xiàn)，與添加用過濾除菌法處理的椰子水（A組）相比，人工胚乳中添加用濕熱滅菌法處理的椰子水（B組）使原球莖的休眠時間變短。研究人員推測B組原球莖休眠時間短的原因是脫落酸被破壞。作出上述推測的依據(jù)是：椰子水中有脫落酸；____________________;脫落酸不耐高溫。為了驗證上述推測，可增加一組實驗（C組），C組的處理是：____________________?！敬鸢浮浚?）①.去核的卵母②.桑葚胚或囊胚③.胚胎移植④.胚胎干細胞（2）RNA修飾水平和核移植重構(gòu)胚的發(fā)育效率（3）①.消毒②.脫分化（4）①.營養(yǎng)物質(zhì)②.激素（5）①.脫落酸促進休眠②.人工胚乳中先添加用高壓蒸汽滅菌法處理的椰子水后加脫落酸【解析】【分析】植物組織培養(yǎng)：（1）幼嫩的組織脫分化較為容易，如莖尖、根尖、形成層細胞易脫分化，而植物的莖、葉和成熟的組織則較難。（2）對外植體要進行消毒處理，而對各種器械要徹底滅菌。（3）植物組織培養(yǎng)中用到的有機碳源一般為蔗糖，用葡萄糖也可以，但后者的成本高。（4）誘導(dǎo)愈傷組織再分化形成胚狀體或叢芽及生根的過程中，要進行換瓶處理，以改變培養(yǎng)基中的激素配比及濃度?！拘?詳解】核移植的受體一般是去核的卵母細胞，當(dāng)胚胎發(fā)育到桑葚胚或囊胚時，可以進行胚胎移植。另外，從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細胞，由于具有自我更新和分化潛能，可用于醫(yī)學(xué)研究?！拘?詳解】豬骨髓間充質(zhì)干細胞（甲組）屬于多能干細胞，豬胎兒成纖維細胞（乙組）則是處于分化終端的體細胞，前者分化程度比后者低，由圖1和圖2分析可知，核供體細胞的分化程度越高，RNA修飾水平和核移植重構(gòu)胚的發(fā)育效率越低?！拘?詳解】進行植物組織培養(yǎng)時，需要進行無菌操作，即對外植體進行消毒，對培養(yǎng)基及其他器械進行滅菌等；將消毒后的外植體接種在培養(yǎng)基上，通過控制培養(yǎng)基中各種激素的比例來控制細胞的分裂分化，先誘導(dǎo)莖尖脫分化形成原球莖，再轉(zhuǎn)移至發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)其發(fā)芽，然后轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)其生根?！拘?詳解】由于椰子水中含有營養(yǎng)物質(zhì)和激素，故增殖培養(yǎng)基中添加椰子水，原球莖會長得更飽滿，但由于不同成熟度椰子的椰子水中營養(yǎng)物質(zhì)和激素的含量存在差異，故對原球莖生長的促進效果不同?！拘?詳解】脫落酸主要由根冠和萎蔫的葉片合成，作用是抑制細胞分裂、促進氣孔關(guān)閉、促進葉和果實衰老和脫落、維持種子休眠。高壓蒸汽滅菌法處理的椰子水（B

組）使原球莖的休眠時間短于過濾除菌法處理的椰子水（A），由于椰子水中有脫落酸、脫落酸促進休眠、

脫落酸不耐高溫，可推測B

組原球莖休眠時間短的原因是脫落酸被破壞?？稍黾右唤M實驗：人工胚乳中先添加用高壓蒸汽滅菌法處理的椰子水后加脫落酸，若原球莖的休眠時間比B組長，即可驗證推測。23.以我國科學(xué)家為主的科研團隊將OSNL（即4個基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的縮寫）導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細胞（CEFs），誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細胞（iPS），再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細胞（iPGCs），然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中，最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代，實驗流程如圖?；卮鹣铝袉栴}。（1）培養(yǎng)CEFs獲得iPS細胞時，需要定期更換培養(yǎng)液并通入CO2的目的分別是________。（2）CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的，為獲得單細胞懸液，雞胚組織剪碎后需用________處理。動物細胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加________等天然成分，以滿足細胞對某些細胞因子的需求。（3）體外獲取OSNL的方法有________。（答出1種方法即可）若要在CEFs中表達外源基因的蛋白，需構(gòu)建基因表達載體，載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外，還須有啟動子和________等。啟動子是________識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動________。（4）iPS細胞和iPGCs細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是________。（5）該實驗流程中用到的生物技術(shù)有________（答出2點即可）【答案】（1）避免營養(yǎng)物質(zhì)缺乏以及代謝廢物積累對細胞增殖造成影響、維持培養(yǎng)液的pH（2）①.胰蛋白酶②.動物血清（3）①.基因文庫、PCR技術(shù)、人工合成法②.終止子③.RNA聚合酶④.轉(zhuǎn)錄開始（4）基因的選擇性表達（5）基因工程、動物細胞培養(yǎng)【解析】【分析】胚胎干細胞（ES細胞）具有自我更新及多向分化潛能，為發(fā)育學(xué)、遺傳學(xué)、人類疾病的發(fā)病機理與替代治療等研究提供非常寶貴的資源。iPS細胞技術(shù)是借助基因?qū)爰夹g(shù)將某些特定因子基因?qū)雱游锘蛉说捏w細胞，以將其重編程或誘導(dǎo)為ES細胞樣的細胞，即iPS細胞?！拘?詳解】培養(yǎng)CE