2023年馬鼻疽防治技術(shù)規(guī)范

四、馬鼻疽防治技術(shù)規(guī)范

馬鼻疽(Glanders)是由假單胞菌科假單胞菌屬的鼻疽假單胞菌

感染引起的一種人獸共患傳染病。我國(guó)將其列為二類動(dòng)物疫病。

為預(yù)防、控制和消滅馬鼻疽，依據(jù)《中華人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法》

及有關(guān)的法律法規(guī)，特制定本規(guī)范。

1適用范圍

本規(guī)范規(guī)定了馬鼻疽的診斷、疫情報(bào)告、疫情處理、防治措施、

控制和消滅標(biāo)準(zhǔn)。

本規(guī)范適用于中華人民共和國(guó)境內(nèi)從事馬屬動(dòng)物的飼養(yǎng)、經(jīng)營(yíng)和

馬屬動(dòng)物產(chǎn)品加工、經(jīng)營(yíng)，以及從事動(dòng)物防疫活動(dòng)的單位和個(gè)人。

2診斷

2.1流行特點(diǎn)

以馬屬動(dòng)物最易感，人和其它動(dòng)物如駱駝、犬、貓等也可感染。

鼻疽病馬以及患鼻疽的其它動(dòng)物均為本病的傳染源。自然感染主要通

過與病畜接觸，經(jīng)消化道或損傷的皮膚、黏膜及呼吸道傳染。本病無

季節(jié)性，多呈散發(fā)或地方性流行。在初發(fā)地區(qū)，多呈急性、暴發(fā)性流

行；在常發(fā)地區(qū)多呈慢性經(jīng)過。

2.2臨床特征

本病的潛伏期為6個(gè)月。

臨床上常分為急性型和慢性型。

急性型病初表現(xiàn)體溫升高，呈不規(guī)則熱(39?4UC)和頜下淋

巴結(jié)腫大等全身性變化。肺鼻疽主要表現(xiàn)為干咳，肺部可出現(xiàn)半濁音、

濁音和不同程度的呼吸困難等癥狀；鼻腔鼻疽可見一側(cè)或兩側(cè)鼻孔流

出漿液、黏液性膿性鼻汁，鼻腔黏膜上有小米粒至高粱米粒大的灰白

色圓形結(jié)節(jié)突出黏膜表面，周圍繞以紅暈，結(jié)節(jié)壞死后形成潰瘍，邊

緣不整，隆起如堤狀，底面凹陷呈灰白色或黃色；皮膚鼻疽常于四肢、

胸側(cè)和腹下等處發(fā)生局限性有熱有痛的炎性腫脹并形成硬固的結(jié)節(jié)。

結(jié)節(jié)破潰排出膿汁，形成邊緣不整、噴火口狀的潰瘍，底部呈油脂樣，

難以愈合。結(jié)節(jié)常沿淋巴管徑路向附近組織蔓延，形成念珠狀的索腫。

后肢皮膚發(fā)生鼻疽時(shí)可見明顯腫脹變粗。

慢性型臨床癥狀不明顯，有的可見一側(cè)或兩側(cè)鼻孔流出灰黃色

膿性鼻汁，在鼻腔黏膜常見有糜爛性潰瘍，有的在鼻中膈形成放射狀

斑痕。

2.3病理變化

主要為急性滲出性和增生性變化。滲出性為主的鼻疽病變見于急

性鼻疽或慢性鼻疽的惡化過程中；增生性為主的鼻疽病變見于慢性鼻

疽。

肺鼻疽鼻疽結(jié)節(jié)大小如粟粒，高粱米及黃豆大，常發(fā)生在肺膜

面下層，呈半球狀隆起于表面，有的散布在肺深部組織，也有的密布

于全肺，呈暗紅色、灰白色或干酪樣。

鼻腔鼻疽鼻中膈多呈典型的潰瘍變化。潰瘍數(shù)量不一，散在或

成群，邊緣不整，中央象噴火口，底面不平呈顆粒狀。鼻疽結(jié)節(jié)呈黃

白色，粟粒呈小豆大小，周圍有暈環(huán)繞。鼻疽斑痕的特征是呈星芒狀。

皮膚鼻疽初期表現(xiàn)為沿皮膚淋巴管形成硬固的念珠狀結(jié)節(jié)。多

見于前驅(qū)及四肢，結(jié)節(jié)軟化破潰后流出膿汁，形成潰瘍，潰瘍有堤狀

邊緣和油脂樣底面，底面覆有壞死性物質(zhì)或呈顆粒狀肉芽組織。

2.4實(shí)驗(yàn)室診斷

2.4.1變態(tài)反應(yīng)診斷

變態(tài)反應(yīng)診斷方法有鼻疽菌素點(diǎn)眼法、鼻疽菌素皮下注射法、鼻

疽菌素眼瞼皮內(nèi)注射法，常用鼻疽菌素點(diǎn)眼法（見附件）。

2.4.2鼻疽補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)試驗(yàn)（見附件）。該方法為較常用的輔

助診斷方法，用于區(qū)分鼻疽陽(yáng)性馬屬動(dòng)物的類型，可檢出大多數(shù)活動(dòng)

性患畜。

2.5結(jié)果判定

無臨床癥狀慢性馬鼻疽的診斷以鼻疽菌素點(diǎn)眼為主，血清學(xué)檢查

為輔；開放性鼻疽的診斷以臨床檢查為主，病變不典型的，則須進(jìn)行

鼻疽菌素點(diǎn)眼試驗(yàn)或血清學(xué)試驗(yàn)。

2.5.1具有明顯鼻疽臨床特征的馬屬動(dòng)物，判定為開放性鼻疽病

畜。

2.5.2鼻疽菌素點(diǎn)眼陽(yáng)性者，判定為鼻疽陽(yáng)性畜。

3疫情報(bào)告

3.1任何單位和個(gè)人發(fā)現(xiàn)疑似疫情，應(yīng)當(dāng)及時(shí)向當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫監(jiān)

督機(jī)構(gòu)報(bào)告。

3.2動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)接到疫情報(bào)告并確認(rèn)后，按《動(dòng)物疫情報(bào)

告管理辦法》及有關(guān)規(guī)定及時(shí)上報(bào)。

4疫情處理

4.1發(fā)現(xiàn)疑似患病馬屬動(dòng)物后，畜主應(yīng)立即隔離患病馬屬動(dòng)物,

限制其移動(dòng)，并立即向當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)報(bào)告。動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)

構(gòu)接到報(bào)告后，應(yīng)及時(shí)派員到現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行診斷，包括流行病學(xué)調(diào)查、臨

床癥狀檢查、病理檢查、采集病料、實(shí)驗(yàn)室診斷等，并根據(jù)診斷結(jié)果

采取相應(yīng)防治措施。

4.2確診為馬鼻疽病畜后，當(dāng)?shù)乜h級(jí)以上人民政府畜牧獸醫(yī)行政

管理部門應(yīng)當(dāng)立即派人到現(xiàn)場(chǎng)，劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)、受威脅區(qū)；采集病

料、調(diào)查疫源，及時(shí)報(bào)請(qǐng)同級(jí)人民政府對(duì)疫區(qū)實(shí)行封鎖，并將疫情逐

級(jí)上報(bào)國(guó)務(wù)院畜牧獸醫(yī)行政管理部門。縣級(jí)以上人民政府根據(jù)需要組

織有關(guān)部門和單位采取隔離、撲殺、銷毀、消毒等強(qiáng)制性控制、撲滅

措施，并通報(bào)毗鄰地區(qū)。

4.2.1劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)、受威脅區(qū)

疫點(diǎn)指患病馬屬動(dòng)物所在的地點(diǎn)，一般是指患病馬屬動(dòng)物的同

群畜所在的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）或其它有關(guān)屠宰、經(jīng)營(yíng)單位；散養(yǎng)情況下,

疫點(diǎn)指患病馬屬動(dòng)物所在的自然村（屯）。

疫區(qū)由疫點(diǎn)外延3公里范圍內(nèi)的區(qū)域。疫區(qū)劃分時(shí)注意考慮當(dāng)

地的飼養(yǎng)環(huán)境和天然屏障（如河流、山脈等）。

受威脅區(qū)是指疫區(qū)外延5公里范圍內(nèi)的區(qū)域。

4.2.2封鎖

按規(guī)定對(duì)疫區(qū)實(shí)行封鎖。疫區(qū)封鎖期間，染疫和疑似染疫的馬屬

動(dòng)物及其產(chǎn)品不得出售、轉(zhuǎn)讓和調(diào)群，禁止移出疫區(qū)；繁殖馬屬動(dòng)物

要用人工授精方法進(jìn)行配種；種用馬屬動(dòng)物不得對(duì)疫區(qū)外馬屬動(dòng)物配

種；對(duì)可疑馬屬動(dòng)物要嚴(yán)格隔離檢疫；關(guān)閉馬屬動(dòng)物交易市場(chǎng)。禁止

非疫區(qū)的馬屬動(dòng)物進(jìn)入疫區(qū)，并根據(jù)撲滅疫情的需要對(duì)出入封鎖區(qū)的

人員、運(yùn)輸工具及有關(guān)物品采取消毒和其它限制性措施。

4.2.3隔離

當(dāng)發(fā)生馬鼻疽時(shí)，要及時(shí)應(yīng)用變態(tài)反應(yīng)等方法在疫點(diǎn)對(duì)馬屬動(dòng)物

進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，將馬屬動(dòng)物群分為患病群、疑似感染群和

假定健康群三類。立即撲殺患病群，隔離觀察疑似感染群、假定健康

群。經(jīng)6個(gè)月觀察，不再發(fā)病方可解除隔離。

4.2.4檢測(cè)

疫區(qū)內(nèi)須對(duì)疑似感染馬屬動(dòng)物和周圍的馬屬動(dòng)物隔離飼養(yǎng)，每隔

6個(gè)月檢測(cè)一次，受威脅區(qū)每年進(jìn)行兩次血清學(xué)（鼻疽菌素試驗(yàn)）監(jiān)

測(cè)，直至全部陰性為止；無疫區(qū)每年進(jìn)行一次血清學(xué)檢測(cè)。

4.2.5撲殺

對(duì)臨床病畜和鼻疽菌素試驗(yàn)陽(yáng)性畜，均須在不放血條件下進(jìn)行撲

殺。

4.2.6銷毀處理

病畜和陽(yáng)性畜及其胎兒、胎衣、排泄物等按照GB16548《畜禽病

害肉尸及其產(chǎn)品無害化處理規(guī)程》進(jìn)行無害化處理。焚燒和掩埋的地

點(diǎn)應(yīng)選擇距村鎮(zhèn)、學(xué)校、水源、牧場(chǎng)、養(yǎng)殖場(chǎng)等1公里以外的地方,

挖深坑將尸體焚燒后掩埋，掩埋土層不得低于1.5米。

4.2.7消毒

對(duì)患病或疑似感染馬屬動(dòng)物污染的場(chǎng)所、用具、物品等嚴(yán)格進(jìn)行

消毒；污染的墊料及糞便等采取堆積泥封發(fā)酵、高溫等方法處理后方

可使用。

4.2.8封鎖的解除

疫區(qū)從最后一匹患病馬屬動(dòng)物撲殺處理后，并經(jīng)徹底消毒等處理

后，對(duì)疫區(qū)內(nèi)監(jiān)測(cè)90天，未見新病例；且經(jīng)過半年時(shí)間采用鼻疽菌

素試驗(yàn)逐匹檢查，未檢出鼻疽菌素試驗(yàn)陽(yáng)性馬屬動(dòng)物的，并對(duì)所污染

場(chǎng)所、設(shè)施設(shè)備和受污染的其它物品徹底消毒后，經(jīng)當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫監(jiān)

督機(jī)構(gòu)檢查合格，由原當(dāng)?shù)乜h級(jí)以上獸醫(yī)行政主管部門報(bào)請(qǐng)?jiān)l(fā)布封

鎖令人民政府解除封鎖。

5預(yù)防與控制

5.1加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好消毒等基礎(chǔ)性防疫工作，提高馬匹抗病

能力。

5.2檢疫

異地調(diào)運(yùn)馬屬動(dòng)物，必須來自非疫區(qū)；出售馬屬動(dòng)物的單位和個(gè)

人，應(yīng)在出售前按規(guī)定報(bào)檢，經(jīng)當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)檢疫，證明馬

屬動(dòng)物裝運(yùn)之日無馬鼻疽癥狀，裝運(yùn)前6個(gè)月內(nèi)原產(chǎn)地?zé)o馬鼻疽病例,

裝運(yùn)前15天經(jīng)鼻疽菌素試驗(yàn)或鼻疽補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)試驗(yàn)，結(jié)果為陰性，

并簽發(fā)產(chǎn)地檢疫證后，方可啟運(yùn)。

調(diào)入的馬屬動(dòng)物必須在當(dāng)?shù)馗綦x觀察30天以上，經(jīng)當(dāng)?shù)貏?dòng)物防

疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)連續(xù)兩次（間隔5?6天）鼻疽菌素試驗(yàn)檢查，確認(rèn)健康

無病，方可混群飼養(yǎng)。

運(yùn)出縣境的馬屬動(dòng)物，運(yùn)輸部門要憑當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)出具

的運(yùn)輸檢疫證明承運(yùn)，證明隨畜同行。運(yùn)輸途中發(fā)生疑似馬鼻疽時(shí)，

畜主及承運(yùn)者應(yīng)及時(shí)向就近的動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)報(bào)告，經(jīng)確診后，動(dòng)

物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)就地監(jiān)督畜主實(shí)施撲殺等處理措施。

5.3監(jiān)測(cè)

穩(wěn)定控制區(qū)每年每縣抽查200匹（不足200匹的全檢），進(jìn)行鼻

疽菌素試驗(yàn)檢查，如檢出陽(yáng)性反應(yīng)的，則按控制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)采取相應(yīng)措施。

消滅區(qū)每縣每年鼻疽菌素試驗(yàn)抽查馬屬動(dòng)物100匹（不足100

匹的全檢）。

6控制和消滅標(biāo)準(zhǔn)

6.1控制標(biāo)準(zhǔn)

6.1.1縣級(jí)控制標(biāo)準(zhǔn)

控制縣（市、區(qū)、旗）應(yīng)達(dá)到以下三項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)：

A、全縣（市、區(qū)、旗）范圍內(nèi)，連續(xù)兩年無馬鼻疽臨床病例。

B、全縣（市、區(qū)、旗）范圍內(nèi)連續(xù)兩年檢查，每年抽檢200匹

（不足200匹全檢），經(jīng)鼻疽菌素試驗(yàn)陽(yáng)性率不高于0.5%。

C、鼻疽菌素試驗(yàn)陽(yáng)性馬屬動(dòng)物全部撲殺，并做無害化處理。

6.1.2市級(jí)控制標(biāo)準(zhǔn)

全市（地、盟、州）所有縣（市、區(qū)、旗）均達(dá)到控制標(biāo)準(zhǔn)。

6.1.3省級(jí)控制標(biāo)準(zhǔn)

全省所有市（地、盟、州）均達(dá)到控制標(biāo)準(zhǔn)。

6.1.4全國(guó)控制標(biāo)準(zhǔn)

全國(guó)所有?。ㄊ?、自治區(qū)）均達(dá)到控制標(biāo)準(zhǔn)。

6.2消滅標(biāo)準(zhǔn)

6.2.1縣級(jí)馬鼻疽消滅標(biāo)準(zhǔn)必須具備以下兩項(xiàng)條件：

A、達(dá)到控制標(biāo)準(zhǔn)后，全縣（市、區(qū)、旗）范圍內(nèi)連續(xù)兩年無馬

鼻疽病例。

B、達(dá)到控制標(biāo)準(zhǔn)后，全縣（市、區(qū)、旗）范圍內(nèi)連續(xù)兩年鼻疽

菌素試驗(yàn)檢查，每年抽檢100匹（不足100匹者全檢），全部陰性。

6.2.2市級(jí)馬鼻疽消滅標(biāo)準(zhǔn)

全市（地、盟、州）所有縣（市、區(qū)、旗）均達(dá)到消滅標(biāo)準(zhǔn)。

6.2.3省級(jí)馬鼻疽消滅標(biāo)準(zhǔn)

全省所有市（地、盟、州）均達(dá)到消滅標(biāo)準(zhǔn)。

6.2.4全國(guó)馬鼻疽消滅標(biāo)準(zhǔn)

全國(guó)所有?。ㄊ小⒆灾螀^(qū)）均達(dá)到消滅標(biāo)準(zhǔn)。

附件

馬鼻疽診斷技術(shù)及判定標(biāo)準(zhǔn)

1總則

1.1為統(tǒng)一馬鼻疽（以下簡(jiǎn)稱鼻疽）檢疫診斷技術(shù)及判定標(biāo)準(zhǔn)，

并提高鼻疽診斷技術(shù)及判定標(biāo)準(zhǔn)的準(zhǔn)確性，特制定鼻疽診斷技術(shù)及判

定標(biāo)準(zhǔn)（以下簡(jiǎn)稱本標(biāo)準(zhǔn)）。

1.2對(duì)馬、驢、騾進(jìn)行鼻疽檢疫時(shí)，統(tǒng)一按本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定辦理。

1.3本標(biāo)準(zhǔn)以鼻疽菌素點(diǎn)眼反應(yīng)為主。必要時(shí)進(jìn)行補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)、

鼻疽菌素皮下注射反應(yīng)或眼瞼皮內(nèi)注射反應(yīng)。

1.4凡鼻疽臨床癥狀顯著的馬、騾、驢，確認(rèn)為開放性鼻疽的，

可以不進(jìn)行檢疫。

1.5各種檢疫記錄表（見7附件），須保存2年以上。

2鼻疽菌素點(diǎn)眼操作方法

2.1器材藥品：

2.1.1鼻疽菌素、硼酸、來蘇爾、脫脂棉、紗布、酒精、碘酒、

記錄表。

2.1.2點(diǎn)眼器、唇（耳）夾子、煮沸消毒器、鑲子、消毒盤、工

作服、口罩、線手套。

注意：在所盛鼻疽菌素用完或在點(diǎn)眼過程中被污染（接觸結(jié)膜異

物）的點(diǎn)眼器，必須消毒后再使用。

2.2點(diǎn)眼前必須兩眼對(duì)照，詳細(xì)檢查眼結(jié)膜和單、雙瞎等情況,

并記錄。眼結(jié)膜正常者可進(jìn)行點(diǎn)眼，點(diǎn)眼后檢查頜下淋巴結(jié)，體表狀

況及有無鼻漏等。

2.3規(guī)定間隔5?6日做兩回點(diǎn)眼為一次檢疫，每回點(diǎn)眼用鼻疽

菌素原液3?4滴(0.2?0.3mL),兩回點(diǎn)眼必須點(diǎn)于同一眼中，一般

應(yīng)點(diǎn)于左眼，左眼生病可點(diǎn)于右眼，并在記錄中說明。

2.4點(diǎn)眼應(yīng)在早晨進(jìn)行，最后第9小時(shí)的判定須在白天進(jìn)行。

2.5點(diǎn)眼前助手固定馬匹，術(shù)者左手用食指插入上眼瞼窩內(nèi)使瞬

膜露出，用拇指撥開下眼瞼構(gòu)成凹兜，右手持點(diǎn)眼器保持水平方向，

手掌下緣支撐額骨眶部，點(diǎn)眼器尖端距凹兜約1cm,拇指按膠皮乳頭

滴入鼻疽菌素3?4滴。

2.6點(diǎn)眼后注意系栓。防止風(fēng)沙侵入、陽(yáng)光直射眼睛及動(dòng)物自行

磨擦眼部。

2.7判定反應(yīng)。在點(diǎn)眼后3、6、9小時(shí)，檢查3次，盡可能于注

射24小時(shí)處再檢查一次。判定時(shí)先由馬頭正面兩眼對(duì)照觀察，在第

6小時(shí)要翻眼檢查，其余觀察必要時(shí)須翻眼。細(xì)查結(jié)膜狀況，有無眼

毗，并按判定符號(hào)記錄結(jié)果。

2.8每次檢查點(diǎn)眼反應(yīng)時(shí)均應(yīng)記錄判定結(jié)果。最后判定以連續(xù)兩

回點(diǎn)眼之中最高一回反應(yīng)為準(zhǔn)。

2.9鼻疽菌素點(diǎn)眼反應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)：

2.9.1陰性反應(yīng)：點(diǎn)眼后無反應(yīng)或結(jié)膜輕微充血及流淚，為陰性。

記錄為“一

2.9.2疑似反應(yīng)：結(jié)膜潮紅，輕微腫脹，有灰白色漿液性及黏液

性（非膿性）分泌物（眼眥）的，為疑似陽(yáng)性。記錄為“士

2.9.3陽(yáng)性反應(yīng)：結(jié)膜發(fā)炎，腫脹明顯，有數(shù)量不等膿性分泌物

（眼眥）的為陽(yáng)性。記錄為“+”。

3鼻疽菌素皮下注射（熱反應(yīng)操作方法）

3.1藥品器材

3.1.1鼻疽菌素原液、來蘇爾、酒精、碘酒、脫脂棉、紗布、記

錄表。

3.1.2工作服、口罩、線手套、毛刷、毛剪、耳夾子、注射器、

針頭、體溫計(jì)、煮沸消毒器、消毒盤、鏡子。

3.2皮下注射前一日做一般臨床檢查，早午晚分別測(cè)量并記錄體

溫，體溫正常的方可做皮下注射。

3.3皮下注射前所測(cè)3次體溫，其中如有一次超過39℃,或3

次體溫平均數(shù)超過38.5℃,或在前一次皮下注射后尚未經(jīng)過一個(gè)半

月以上的，均不得做皮下注射。

3.4注射部位通常在左頸側(cè)或胸部肩胛前，術(shù)部剪毛消毒后注射

鼻疽菌素原液1mLo

3.5牲畜在注射后24小時(shí)內(nèi)不得使役，不得飲冷水。

3.6注射通常在零點(diǎn)進(jìn)行。注射后6小時(shí)起測(cè)溫，每隔2小時(shí)測(cè)

一次（即注射后6、8、10、12、14、16、18、20、22、24小時(shí)），連

續(xù)測(cè)溫10次后，再于36小時(shí)測(cè)溫一次，詳細(xì)記錄并劃出體溫曲線,

同時(shí)記錄局部腫脹程度，以備判定。局部腫脹以手掌大（橫徑10cm）

為明顯反應(yīng)。

3.7皮下注射鼻疽菌素的馬、驢、騾可發(fā)生體溫反應(yīng)及局部或全

身反應(yīng)。

3.7.1體溫反應(yīng)：鼻疽病畜一般在皮下注射鼻疽菌素后6?8小

時(shí)體溫開始上升，12?16小時(shí)體溫上升到最高，此后逐漸降低，有

的在注射30?36小時(shí)后，體溫再度輕微上升。

3.7.2局部反應(yīng)：注射部位發(fā)熱，腫脹疼痛，以注射后24?36

小時(shí)最為顯著，直徑可達(dá)10?20cm，并逐漸消散，有時(shí)腫脹可存在2?

3天。

3.7.3全身反應(yīng)：注射后精神不振，食欲減少，呼吸短促，脈搏

加快，步態(tài)踉蹌、戰(zhàn)栗，大小便次數(shù)增加，頜下淋巴結(jié)腫大。

3.8鼻疽菌素皮下注射（熱反應(yīng)）判定標(biāo)準(zhǔn)如下：

3.8.1陰性反應(yīng)：體溫升至攝氏39C以下并無局部或全身反應(yīng)。

3.8.2疑似反應(yīng)：體溫升至39℃（不超過39.6℃）,有輕微全身

反應(yīng)及局部反應(yīng)者，或體溫升至40C以上稽留并無局部反應(yīng)時(shí)，也

可認(rèn)為疑似反應(yīng)。

3.8.3陽(yáng)性反應(yīng)：體溫升至4（TC以上稽留及有輕微局部反應(yīng)，

或體溫在39（以上稽留并有顯著的局部反應(yīng)（腫脹橫徑10cm以上）

或有全身反應(yīng)。

4鼻疽菌素眼髓皮內(nèi)注射操作方法

4.1藥品及器材

4.1.1鼻疽菌素（用前隨時(shí)稀釋，鼻疽菌素1份用0.5%石炭酸

生理鹽水3份充分混勻）。

4.1.21?2mL注射器、針頭（用前煮沸消毒）、消毒盤、煮沸消

毒器、鑲子、耳夾子、工作服、口罩、線手套。

4.1.3酒精、碘酒、硼酸、來蘇爾、紗布、脫脂棉、記錄表。

4.2注射前檢查結(jié)膜及眼睛是否單、雙瞎等情況。注射后檢查頜

下淋巴結(jié)及有無鼻漏，并詳細(xì)記錄檢查情況。

4.3注射部位通常在左下眼瞼邊緣1?2cm內(nèi)側(cè)眼角三分之一處

皮膚實(shí)質(zhì)內(nèi)，注射前用硼酸棉消毒注射部位。

4.4注射前助手保定馬匹，術(shù)者用食指、拇指捏住下眼瞼，右手

持注射器，手掌（小指外緣）支撐頭部對(duì)左手捏起的眼瞼皺裳術(shù)部斜

向刺入下眼瞼皮內(nèi)，注入0.1mL鼻疽菌素，食指感覺注射液推進(jìn)遲滯,

局部呈現(xiàn)小包，即為藥液已進(jìn)入皮內(nèi)。

4.5注射一般在早晨。注射后第24、36、48小時(shí)分別進(jìn)行檢查。

詳細(xì)記錄結(jié)果。

4.6鼻疽菌素眼瞼皮內(nèi)注射反應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)：

4.6.1陰性反應(yīng)：無反應(yīng)或下眼瞼有極輕微腫脹、流淚的，為陰

性反應(yīng)。記錄為“一”。

4.6.2疑似反應(yīng)：下眼瞼稍腫脹，有輕微疼痛及發(fā)熱，結(jié)膜潮紅，

無分泌物或僅有漿黏液性分泌物的，為疑似陽(yáng)性，記錄為“土

4.6.3陽(yáng)性反應(yīng)：下眼瞼腫脹明顯，有顯著的疼痛及灼熱，結(jié)膜

發(fā)炎畏光，有膿性分泌物的，為陽(yáng)性。記錄為“+”。

5開放性鼻疽臨床診斷鑒別要領(lǐng)

5.1將病畜保定，術(shù)者和助手穿工作服（避免白色），帶膠皮手

套、口罩、風(fēng)鏡及保護(hù)面具，先用3%來蘇爾水，洗凈病畜鼻孔內(nèi)外

后，在病畜前側(cè)面適當(dāng)位置，術(shù)者用手打開鼻孔，助手用反射鏡或手

電筒照射鼻腔深部，仔細(xì)檢查黏膜上有無鼻疽特有結(jié)節(jié)潰瘍及星芒狀

瘢痕及其它異狀。檢查完畢將服裝、器材分別進(jìn)行消毒（用3%來蘇

爾水浸1小時(shí)或煮沸10分鐘），避免交叉?zhèn)魅尽?/p>

5.2鼻腔鼻疽臨床癥狀如下：

5.2.1鼻汁：初在鼻孔一側(cè)（有時(shí)兩側(cè)）流出漿液性或黏液性鼻

汁，逐漸變?yōu)椴粷嵒尹S色膿性鼻汁，內(nèi)混有凝固蛋白樣物質(zhì)，有時(shí)混

有血絲并帶有臭味，呼吸帶哮鳴音。

5.2.2鼻黏膜發(fā)生結(jié)節(jié)及潰瘍：在流鼻汁同時(shí)或稍遲，鼻腔黏膜

尤其是鼻中膈黏膜上出現(xiàn)新舊大小不同灰白色或黃白色的鼻疽結(jié)節(jié)，

結(jié)節(jié)破潰構(gòu)成大小不等、深淺不一、邊緣隆起的潰瘍（結(jié)節(jié)與潰瘍多

發(fā)生于鼻腔深部黏膜上），已愈者呈扁平如星芒狀、冰花狀的瘢痕。

5.2.3頜下淋巴結(jié)腫大：急性或慢性鼻疽的經(jīng)過期頜下淋巴結(jié)腫

脹，初有痛覺，時(shí)間長(zhǎng)久，則變硬、觸摸無痛感，附著于下頜骨內(nèi)面

不動(dòng)，有時(shí)也呈活動(dòng)性。

5.3皮膚鼻疽臨床癥狀如下：

皮膚鼻疽多發(fā)于四肢、胸側(cè)及下腹部，在皮膚或皮下組織發(fā)生黃

豆大小或胡桃、雞蛋大結(jié)節(jié)，不久破裂流出粘稠灰黃或紅色膿汁（有

時(shí)帶血）形成淺圓形潰瘍或向外穿孔呈噴火狀潰瘍。結(jié)節(jié)和潰瘍附近

淋巴結(jié)腫大，附近淋巴管粗硬呈念珠狀索腫，腫脹周圍呈水腫浸潤(rùn)，

皮膚肥厚，有時(shí)呈蜂窩織炎，橡皮腿，公畜并發(fā)睪丸炎。

5.4開放性鼻疽判定標(biāo)準(zhǔn)：

5.4.1凡有5.2.1、5.2.2、5.2.3病變的，均為開放性鼻疽。

5.4.2凡有第5.2.1病狀而無5.2.2.5.2.3病狀的或有5.2.1.5.2.3

項(xiàng)病狀而無5.2.2病狀的，可用鼻疽菌素點(diǎn)眼，呈陽(yáng)性反應(yīng)的為開放

性鼻疽。

5.4.3凡有5.3癥狀的，即為開放性鼻疽。

5.5不具備5.4項(xiàng)癥狀，并有可疑鼻疽臨床癥狀的，判定為可疑

開放性鼻疽。

6鼻疽補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)試驗(yàn)操作辦法

6.1采取被檢血清

6.1.1藥品器材：

6.1.1.1來蘇爾、石炭酸、酒精、碘酒、紗布、脫脂棉。

6.1.1.2滅菌試管、試管架、試管簽、送血箱、煮沸消毒器、消

毒盤、鏡子、毛刷、毛剪、采血針（帶膠管、每針采一次后必須清洗

煮沸消毒后，再行使用）。

6.1.2在被檢牲畜頸前三分之一處?kù)o脈溝部位剪毛消毒，將滅菌

采血針刺入頸靜脈，使血液沿管壁流入試管內(nèi)，防止血液滴入產(chǎn)生泡

沫，引起溶血現(xiàn)象。

6.1.3采出的血液，冬季應(yīng)放置室內(nèi)防止血清凍結(jié)，夏季應(yīng)放置

陰涼之處并迅速送往實(shí)驗(yàn)室。如在3晝夜內(nèi)不能送到，應(yīng)先將血清倒

入另一滅菌試管內(nèi)，按比例每1mL血清加入1?2滴5%石炭酸生理鹽

水溶液，以防腐敗。運(yùn)送時(shí)使試管保持直立狀態(tài)，避免振動(dòng)。

6.2預(yù)備試驗(yàn)（溶血素、補(bǔ)體、抗原等效價(jià)測(cè)定）

6.2.1準(zhǔn)備下列材料

6.2.1.1標(biāo)準(zhǔn)血清：鼻疽陰、陽(yáng)性馬血清。

6.2.1.2鼻疽抗原。

6.2.1.3溶血素。

6.2.1.4補(bǔ)體：采取健康豚鼠血清。采血前饑餓7?8小時(shí)，于

使用前一日晚由心臟采血，如檢查材料甚多，需大量補(bǔ)體時(shí)，亦可由

頸動(dòng)脈放血，放于培養(yǎng)皿或試管中，待血液凝固后再輕輕劃破或剝離

血塊后移于冰箱，次日清晨分離血清。如當(dāng)日采血，可直接盛于離心

管中，置恒溫箱20分鐘，將血塊攪拌后，在離心器中分出血清亦可。

每次補(bǔ)體應(yīng)由3?4個(gè)以上豚鼠血清混合。

6.2.1.5綿羊紅細(xì)胞：綿羊頸靜脈采血，脫纖防止血液凝固，并

離心3次，以清洗紅細(xì)胞；第一次1500?2000rp/m離心15分鐘，吸

出上清液加入細(xì)胞量3?4倍的生理鹽水輕輕混合后做第二次離心，

方法同前。使用前將洗滌后的細(xì)胞做成2.5%細(xì)胞液（即1：40倍溶

液）。稀釋后的紅細(xì)胞最多保存一天，但離心后的紅細(xì)胞在冰箱中可

保存3?4日。

6.2.1.6生理鹽水：1000mL蒸水水中加入8.5g氯化鈉,滅菌后

使用。

6.2.2溶血素效價(jià)測(cè)定，每一月左右測(cè)價(jià)一次，按下列方法進(jìn)行

（參照表一）。

6.2.2.1將稀釋成1：100-1：5000不同倍數(shù)的溶血素血清各

0.5mL分別置于試管中o

6.2.2.2將1：20倍補(bǔ)體及1:40綿羊紅細(xì)胞各0.5mL分別加入

上述試管中。

6.2.2.3另外制作缺少補(bǔ)體、缺少溶血素的對(duì)照管，并補(bǔ)充等量

生理鹽水。

6.2.2.4每管分別添加生理鹽水1mL,置于攝氏37?38（水浴箱

中15分鐘。

6.2.2.5觀察結(jié)果：能完全溶血的最少量溶血素，即為溶血素的

效價(jià)，也稱為1單位（對(duì)照管均不應(yīng)溶血），當(dāng)補(bǔ)體滴定和正式試驗(yàn)

時(shí)，則應(yīng)用2單位（或稱為工作量）即減少1倍稀釋。

表一

溶血素1:1：1:1:1:1:1:1:1:1:對(duì)照

稀釋10050010001500200025003000350040005000

溶血素0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5-0.5-

1：20補(bǔ)體0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5--

2.5%紅細(xì)胞0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5

生理鹽水1.01.01.01.01.01.01.01.01.01.01.51.52.0

6.2.3補(bǔ)體效價(jià)測(cè)定

每次進(jìn)行補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)試驗(yàn)，應(yīng)于當(dāng)日測(cè)定補(bǔ)體效價(jià)。先用生理

鹽水，將補(bǔ)體做1：20稀釋，然后按表二進(jìn)行操作。

表二補(bǔ)體效價(jià)測(cè)定單位：mL

對(duì)照管

A12345678910111213

分\

20倍補(bǔ)體0.1()0.130.160.190.220.250.280.310.340.370.5

生理鹽水0.400.370.340.310.280.250.220.190.160.131.5

抗原（工作0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.51.5

量）（不加

抗原管加

生理鹽水）

10倍稀釋0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.52.0

陽(yáng)性血清

或10倍稀

釋陰性陰

性血清

震蕩均勻后置37?38七水浴20分鐘

二單位溶

0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5/0.5

血素

2.5%紅細(xì)

0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5

胞懸液

振蕩均勻后置37?38（水浴20分鐘

陽(yáng)性血清加抗原#########+++#

陽(yáng)性血清未加抗原###+++++————————#

陰性血清加抗原###++++++————————#

陰性血清未加抗原###++++++————————

補(bǔ)體效價(jià)：是指在2單位溶血素存在的情況下，陽(yáng)性血清加抗原

的試管完全不溶血，而在陽(yáng)性血清未加抗原及陰性血清不論有無抗原

的試管發(fā)生完全溶血所需最少補(bǔ)體量，就是所測(cè)得補(bǔ)體效價(jià)，如表二

中第7管20義稀釋的補(bǔ)體0.28mL即為工作量補(bǔ)體按下列計(jì)算，原補(bǔ)

體在使用時(shí)應(yīng)稀釋的倍數(shù)：

補(bǔ)體稀釋倍數(shù)

-------------------義使用時(shí)每管加入量=原補(bǔ)體稀釋倍數(shù)

測(cè)得效價(jià)

上列按公式計(jì)算為：20/0.28X0.5=35.7

即此批補(bǔ)體應(yīng)作1:35.7倍稀釋，每管加0.5mL為一個(gè)補(bǔ)體單位。

考慮到補(bǔ)體性質(zhì)極不穩(wěn)定，在操作過程中效價(jià)會(huì)降低，故使用濃度比

原效價(jià)高10%左右。因此，本批補(bǔ)體應(yīng)作1:35稀釋使用，每管加0.5mLo

6.2.4抗原效價(jià)，最少每半年滴定一次，具體操作方法如下（參

照表三）:

6.2.4.1將抗原原液稀釋為1：10至1：500,各以0.5mL置于

試管中，共作成12列。

6.2.4.2在第1列不同濃度的抗原稀釋液中，加入1：10的陰性

馬血清0.5mL；在第2列不同濃度的抗原稀釋液中，加入生理鹽水

0.5mL；在第3列到第7列不同濃度的抗原稀釋液中，分別加入1：

10、1：25、1：50、1：75及1：100的強(qiáng)陽(yáng)性馬血清0.5mL。

表三

抗原稀釋1:101：501：751：11：1：1：1：1：

00150200300400500

(mL)0.50.50.50.50.50.50.50.50.5

陰（陽(yáng)性）血清0.50.50.50.50.50.50.50.50.5

補(bǔ)體（工作量）0.50.50.50.50.50.50.50.50.5

37?38七水浴箱中20分鐘

2.5%紅細(xì)0.0.50.50.50.50.50.50.50.50.5

胞5

溶血素（工0.0.50.50.50.50.50.50.50.50.5

作量）5

6.2.4.3于前述各不同行列試管中，各加入補(bǔ)體（工作量）

0.5mLo

6.2.4.4置37?38℃水浴箱中20分鐘。

6.2.4.5加溫后，各溶液中再加入0.5mL的2.5%紅細(xì)胞及2單

位溶血素后，再置37?38（水浴箱中20分鐘。

6.2.4.6選擇在不同程度的陽(yáng)性血清中，產(chǎn)生最明顯的抑制溶血

現(xiàn)象的，在陰性血清及無血清之抗原對(duì)照中則產(chǎn)生完全溶血現(xiàn)象的抗

原最大稀釋量為抗原的工作量。

抗原效價(jià)測(cè)定結(jié)果觀察舉例

抗原稀釋1:101:1:71:1:1:1:1:1:

500100150200300400500

血1：10######++++++++

清1:25######++++++

稀1：50+++####++++++—

釋1：75+++++++++++++++++-—

1:100+++++++++++++十--—

根據(jù)以上舉例的結(jié)果，抗原的效價(jià)為1：150的稀釋量。

6.3正式試驗(yàn)

6.3.1在6.2.1至6.2.4的預(yù)備試驗(yàn)基礎(chǔ)上，進(jìn)行正式試驗(yàn)（參

照表四）

6.3.1.1排列試管加入1：10稀釋被檢血清，總量為0.5mL,此

管準(zhǔn)備加抗原。另一管總量為1mL,不加抗原作為對(duì)照。

6.3.1.2馬血清在58?59℃加溫30分鐘，騾、驢血清在攝氏36?

64℃加溫30分鐘。

6.3.1.3加入鼻疽抗原（工作量）0.5mLo

6.3.1.4加入補(bǔ)體（工作量）0.5mLo

6.3.1.5加溫后各試管中再加入2.5%紅細(xì)胞稀釋液0.5mL及2

單位溶血素0.5mLo

6.3.1.6再置37?38（水浴箱中20分鐘。

6.3.2為證實(shí)上述操作過程中是否正確，應(yīng)同時(shí)設(shè)置對(duì)照試驗(yàn)。

6.3.2.1健康馬血清

6.3.2.2陽(yáng)性馬血清

6.3.2.3抗原（工作量）

6.3.2.4溶血素（工作量）

表四

對(duì)照

正式試驗(yàn)溶血

陰性血清陽(yáng)性血清抗原

素

生理

0.450.90.450.90.450.9—1.0

鹽水

被檢

0.050.10.050.10.050.1——

血清

58?59（或63?64）℃水浴箱中30分鐘

抗原（工

0.5—0.5—0.5—1.0—

作量）

補(bǔ)體（工

0.50.50.50.50.50.50.50.5

作量）

37?38七水浴箱中20分鐘

2.5%紅細(xì)

0.50.50.50.50.50.50.50.5

胞

溶血素（工

0.50.50.50.50.50.50.50.5

作量）

37?38七水浴箱中20分鐘

判定（舉

#———#———

例）

6.3.3加溫完