JJF(魯) 165-2023 快速核酸檢測(cè)儀溫度、時(shí)間參數(shù)校準(zhǔn)規(guī)范

山東省地方計(jì)量技術(shù)規(guī)范CalibrationSpecificationforTemperatureandTime山東省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布JJF（魯）165—2023快速核酸檢測(cè)儀溫度、快速核酸檢測(cè)儀溫度、時(shí)間參數(shù)校準(zhǔn)規(guī)范TimeParametersofRapidNucleicAcidDetectorJJF（魯）165—2023JJF（魯）165—2023 （II） （2） （2） （2） （2） （2） （2） （2） （3） （3） （3） （3） （3） （4） （4） （6） JJF（魯）165—2023JJF（魯）165—2023快速核酸檢測(cè)儀溫度、時(shí)間參數(shù)校準(zhǔn)規(guī)范本規(guī)范適用于基于實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)或者等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的快速核酸檢測(cè)儀的溫度、時(shí)間參數(shù)的校準(zhǔn)，其他類似設(shè)備JJF（魯）138-2022實(shí)時(shí)熒3.1實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)realtimefluorescentpolymerasechainreaction個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成，擴(kuò)增的過(guò)程中熒光染料能3.2等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)isothermalamplificati在恒定的溫度下，反應(yīng)過(guò)程通過(guò)添加不同活性3.3溫度偏差temperat低溫度與設(shè)定溫度的上下偏差。溫度偏差包含溫度JJF（魯）165—202323.4平均升溫速率mean快速核酸檢測(cè)儀在多個(gè)循環(huán)升溫過(guò)程中，被測(cè)升溫階快速核酸檢測(cè)儀在多個(gè)循環(huán)降溫過(guò)程中，被測(cè)降溫階3.6平均溫度過(guò)沖量meantemperat快速核酸檢測(cè)儀從基礎(chǔ)升溫至設(shè)定溫度過(guò)程中，實(shí)3.7溫度波動(dòng)度temperatur3.8溫度持續(xù)時(shí)間相對(duì)偏差Relativeerroroftemperatureduration快速核酸檢測(cè)儀通常是指基于實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)或者等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的便攜式核酸檢快速核酸檢測(cè)儀主要由樣品載臺(tái)、熱循環(huán)部件、光表1快速核酸檢測(cè)儀溫度、時(shí)間參數(shù)的技術(shù)要求校準(zhǔn)項(xiàng)目技術(shù)要求基于實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)基于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)溫度偏差溫度波動(dòng)度——±0.5℃平均升溫速率≥1.5℃/s參考廠家技術(shù)要求平均降溫速率≥1.5℃/s——平均溫度過(guò)沖量≤1℃溫度持續(xù)時(shí)間相對(duì)偏差±10%注：上述計(jì)量特性指標(biāo)僅供參考，不判斷合格與否。JJF（魯）165—20233溫度：10.0℃~40.0℃;相對(duì)濕度：不大于85%。），溫度傳感器、數(shù)據(jù)采集分析模塊組成，應(yīng)與表2測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)原理技術(shù)要求基于實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)器基于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)器溫度參數(shù)測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)測(cè)溫范圍0~120）℃分辨力：不低于0.01℃最大允許誤差：±0.10℃采樣間隔不大于0.1s測(cè)溫范圍0~120）℃分辨力：不低于0.01℃最大允許誤差：±0.10℃采樣間隔不大于10s時(shí)間參數(shù)測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)采用溫度記錄器的記錄時(shí)間作為快速核酸檢測(cè)儀時(shí)間測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)分辨力：不低于0.1s最大允許誤差：±1s/h以下要求:7.1.1快速核酸檢測(cè)儀的外形結(jié)構(gòu)應(yīng)完好，標(biāo)識(shí)清晰，應(yīng)標(biāo)明設(shè)備的名稱、型號(hào)、制造7.1.2快速核酸檢測(cè)儀裝載附件表面不得有凹陷和毛刺等缺陷。快速核酸檢測(cè)儀的可用JJF（魯）165—20234表3快速核酸檢測(cè)儀校準(zhǔn)項(xiàng)目設(shè)備類型校準(zhǔn)項(xiàng)目基于實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)基于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)溫度偏差++溫度波動(dòng)度-+平均升溫速率++平均降溫速率+-平均溫度過(guò)沖量++溫度持續(xù)時(shí)間準(zhǔn)確性++注：+表示校準(zhǔn)項(xiàng)目，-表示非校準(zhǔn)項(xiàng)目將快速核酸檢測(cè)儀測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)放置于快速核酸檢測(cè)酸檢測(cè)儀作為一個(gè)整體進(jìn)行校準(zhǔn)，以16通道快速核酸檢測(cè)儀為例，測(cè)量點(diǎn)分布遵循均勻分布的原則，可參照?qǐng)D2所示，每增加8通道可增加2個(gè)測(cè)5JJF（魯）165—2023溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的快速核酸檢測(cè)儀控溫程序設(shè)置可參考表4和表5。也可根據(jù)用戶要求設(shè)置控溫程序。基于實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)快速核酸檢測(cè)儀校準(zhǔn)裝置設(shè)置采樣間隔為100表4基于實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)快速核酸檢測(cè)儀控溫程序步驟設(shè)定溫度點(diǎn)設(shè)定溫度持續(xù)時(shí)間循環(huán)次數(shù)150℃30s1290℃30s1340℃30s6495℃30s570℃30s1660℃30s1740℃30s1表5基于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)快速核酸檢測(cè)儀控溫程序設(shè)定溫區(qū)設(shè)定溫度點(diǎn)設(shè)定溫度持續(xù)時(shí)間上溫區(qū)95℃中溫區(qū)67℃下溫區(qū)58℃JJF（魯）165—20236基于實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)快速核酸檢測(cè)儀溫度達(dá)到設(shè)定溫度10s后開(kāi)始讀取測(cè)量值，讀取10s，均勻讀取20組數(shù)據(jù)；基于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)快速核酸檢測(cè)儀溫度達(dá)到設(shè)定溫度2minΔtmax=tmax-ts（1）Δtmin=tmin-ts（2）基于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)快速核酸檢測(cè)儀溫度達(dá)到設(shè)定溫度2min后開(kāi)始讀取測(cè)量值，讀取取全部測(cè)量點(diǎn)中變化量的最大值作為溫度波動(dòng)度的校準(zhǔn)結(jié)Δtf=±m(xù)ax[(tjmax-tjmin)/2]（3）Δtf——溫度波動(dòng)度，℃;），（50±0.5）℃瞬時(shí)升溫至（90±0.5）℃瞬時(shí)的溫度JJF（魯）165—2023計(jì)算按照公式（45）計(jì)算： VVV τhi——從tai到達(dá)tbi的時(shí)間，s。m——測(cè)量點(diǎn)數(shù)量。升溫至最接近90℃瞬時(shí)的溫度曲線計(jì)算升溫速率（如下圖4所示平均升溫速率的JJF（魯）165—2023 Vtai——最接近50℃溫度點(diǎn)第i個(gè)測(cè)量點(diǎn)測(cè)量值，℃;t——最接近90℃溫度點(diǎn)第i個(gè)測(cè)量點(diǎn)測(cè)量值，℃;biτhi——從tai到達(dá)tbi的時(shí)間，s。m——測(cè)量點(diǎn)數(shù)量。89 Vd——平均降溫速率， Vd——平均降溫速率，℃/s；Vdj——第j個(gè)測(cè)量點(diǎn)降溫速率，℃/s；Vτdi——從tbi到達(dá)tai的時(shí)間，s。m——測(cè)量點(diǎn)數(shù)量。 ts——設(shè)定溫度值，95℃;JJF（魯）165—2023tjmax——第j個(gè)測(cè)量點(diǎn)6次測(cè)得的最大過(guò)沖溫度值，℃;m——測(cè)量點(diǎn)數(shù)量。 ts——設(shè)定溫度值，95℃;tjmax——第j個(gè)測(cè)量點(diǎn)測(cè)得的最大過(guò)沖溫度值，℃;m——測(cè)量點(diǎn)數(shù)量。Δτ——溫度持續(xù)時(shí)間相對(duì)誤差，%；τc——實(shí)測(cè)溫度持續(xù)時(shí)間，s；τs——設(shè)定溫度持續(xù)時(shí)間，s。校準(zhǔn)結(jié)果應(yīng)在校準(zhǔn)證書(shū)（報(bào)告）上反映，校準(zhǔn)證書(shū)（報(bào)）；），JJF（魯）165—2023h)如果與校準(zhǔn)結(jié)果的有效性和應(yīng)用有關(guān)時(shí)，應(yīng)對(duì)被校樣品的抽樣程序進(jìn)j)本次校準(zhǔn)所用測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的溯源性及有效性說(shuō)明；n)校準(zhǔn)證書(shū)和校準(zhǔn)報(bào)告簽發(fā)人的簽名、職務(wù)或等p)未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室書(shū)面批準(zhǔn)，不得部分復(fù)制證書(shū)或報(bào)告的聲換重要器件等的一般需要重新校準(zhǔn)。由于復(fù)者、儀器本身質(zhì)量等諸多因素所決定的，因JJF（魯）165—2023將快速核酸檢測(cè)儀及快速核酸檢測(cè)儀校準(zhǔn)裝置各裝置置于儀器反應(yīng)模塊中，并確保與反應(yīng)模塊接Δtmax=tmax-ts（A.1）根據(jù)上述數(shù)學(xué)模型以及測(cè)量方法，其不確定度來(lái)源（1）測(cè)量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量u1；（2）快速核酸檢測(cè)儀校準(zhǔn)裝置分辨力引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量u1；（3）快速核酸檢測(cè)儀校準(zhǔn)裝置準(zhǔn)確度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量u2；A.4各輸入量的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分A.4.1重復(fù)性測(cè)量引入的不確定度分量u1表A.1溫度測(cè)量結(jié)果次數(shù)測(cè)量點(diǎn)不同測(cè)量點(diǎn)溫度傳感器測(cè)量結(jié)果(℃)12345678994.9894.9095.0095.0495.1394.9995.0295.0395.0994.9895.2595.3295.2895.2195.1295.2595.1395.2495.2394.9694.8595.0195.1295.1494.9394.9594.9894.9494.99JJF（魯）165—2023m——測(cè)量點(diǎn)的數(shù)量；n——每個(gè)測(cè)量點(diǎn)測(cè)量次數(shù)；ykj——第j個(gè)測(cè)量點(diǎn)第k次的測(cè)量值，℃; yj——第j個(gè)測(cè)量點(diǎn)測(cè)量值的平均值，℃;sp=0.07℃因此重復(fù)測(cè)量引入的不確定度分量u1為：u1=0.07℃A.4.2快速核酸檢測(cè)儀校準(zhǔn)裝置分辨力引入的不確定度u1'者具有一定的相關(guān)性，因此在不確定度計(jì)算時(shí)不量u1'。A.4.3快速核酸檢測(cè)儀校準(zhǔn)裝置準(zhǔn)確度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量u2；A.5合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度ucA.6擴(kuò)展不確定度U取k=2，則：U=k×uc=0.18℃JJF（魯）165—2023證書(shū)編號(hào)：XXXXXX-XXXX基本信息委托單位名稱：委托單位地址：制造廠商：儀器名稱：規(guī)格型號(hào)：出廠編號(hào)：校準(zhǔn)依據(jù)：環(huán)境溫度：℃環(huán)境濕度：%RH校準(zhǔn)員：核驗(yàn)員：標(biāo)準(zhǔn)器信息計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)（器）名稱計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)器溯源單位及證書(shū)號(hào)有效期至測(cè)量范圍準(zhǔn)確度等級(jí)測(cè)量點(diǎn)次數(shù)A1(℃)A8(℃)B4(℃).......123......最大值最小值上偏差(℃)下偏差(℃)擴(kuò)展不確定度℃5次平均升溫速JJF（魯）165—20235次平均升溫速5次平均升溫速5次平均降速率5次平均降速率5次平均降速率JJF（魯）165—2023測(cè)量點(diǎn)A1A8B4.......過(guò)沖量(℃)平均溫度過(guò)沖量(℃)平均升溫速率(℃/s）50℃→90℃平均降溫速率(℃/s）90℃→50℃三、溫度持續(xù)時(shí)間相對(duì)誤差設(shè)定溫度持續(xù)時(shí)間(s)實(shí)測(cè)溫度持續(xù)時(shí)間(s)相對(duì)誤差(%)JJF（魯）165—2023證書(shū)編號(hào)：XXXXXX-XXXX基本信息委托單位名稱：委托單位地址：制造廠商：儀器名稱：規(guī)格型號(hào)：出廠編號(hào)：校準(zhǔn)依據(jù)：環(huán)境溫度：℃環(huán)境濕度：%RH校準(zhǔn)員：核驗(yàn)員：標(biāo)準(zhǔn)器信息計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)（器）名稱計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)器溯源單位及證書(shū)號(hào)有效期至測(cè)量范圍準(zhǔn)確度等級(jí)測(cè)量點(diǎn)次數(shù).......123.......最大值最小值上偏差(℃)