T-TBD 001-2024 液體發(fā)酵裝置技術(shù)操作規(guī)程

ICS65.080CCSB15TBDTechnicaloperationprocedureofliquidfermentationequipmentIT/TBD001—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由河北神威環(huán)境治理有限公司提出。本文件由保定市肥料協(xié)會歸口。本文件起草單位：河北神威環(huán)境治理有限公司、保定市肥料協(xié)會、保定瑞沃斯環(huán)境科技有限公司、綠堯河北生物科技有限公司、河北健地寶生物科技有限公司、河北科豪生物科技有限公司、河北航農(nóng)農(nóng)業(yè)科技有限公司、河北庫克生物科技有限公司。本文件主要起草人：江洋、孟慶偉、沙瑞光、李高生、戈文贊、劉海研、聶永斌、郭建波。1T/TBD001—2024液體發(fā)酵裝置技術(shù)操作規(guī)程本文件規(guī)定了發(fā)酵企業(yè)在使用發(fā)酵罐的過程中所涉及的操作使用程序等內(nèi)容。本文件適用于發(fā)酵企業(yè)空消、實消等工作。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1空消在投料前，氣路、料路、發(fā)酵罐等必須用飽和蒸汽進行滅菌，消除所有死角的雜菌，保證系統(tǒng)處于無菌狀態(tài)。3.2實消實消是當罐內(nèi)加入培養(yǎng)基后，用蒸汽對培養(yǎng)基進行滅菌的過程。4基本要求4.1在發(fā)酵罐開機使用之前，應先檢查電源是否正常，空壓機、蒸汽發(fā)生器、循環(huán)水系統(tǒng)是否能正常工作。4.2檢查整系統(tǒng)上的閥門、接頭及緊固螺釘是否擰緊。4.3開動空壓機，用0.15MPa壓力，檢查發(fā)酵罐、過濾器、管路、閥門的密封性能是否良好，有無泄漏。4.4溶氧儀、pH儀等應根據(jù)使用說明書進行檢查、校正。4.5上崗人員對上述發(fā)酵罐的各項內(nèi)容必須能熟練操作。5方法與步驟5.1空氣過濾系統(tǒng)的空消5.1.1關(guān)閉空氣系統(tǒng)進空氣閥門（即空氣預過濾器后的進氣閥門切勿忘掉！防止蒸汽進入空氣氣源系統(tǒng)，損壞氣源管路和設備。2T/TBD001—20245.1.2打開蒸汽過濾器的小排汽閥及進口蒸汽閥門，冷凝水排盡后微開此排水閥。5.1.3打開空氣精過濾器下面的小排汽閥，打開其前面的進蒸汽的閥門，往空氣管路通入蒸汽。進蒸汽首先通過空氣精過濾器下面的排水閥排出，待冷凝水排盡后，微開此排水間，使其達到并保持0.10一0.11MPa，然后開始人工記時，保證滅菌時間持續(xù)20-30分鐘。5.1.4滅菌時間到后，關(guān)閉空氣精過濾器前面的進蒸汽的閥門，在精過濾器上的壓力降到零以前立即打開空氣精過濾器前面的進空氣的閥門（如操作不及，可先關(guān)掉過濾器上相關(guān)的排氣閥，待通入空氣后再打開這些閥門通入壓縮空氣。吹空氣過濾系統(tǒng)10一20分鐘，然后將精過濾器后的閥門關(guān)閉及微開過濾器排氣閥，使空氣過濾系統(tǒng)始終保持正壓備用。5.2發(fā)酵罐空消5.2.1打開夾套上口的排空閥以及夾套下口的排污閥，排盡發(fā)酵罐夾套內(nèi)的冷水。同時打開發(fā)醉罐出料閥，排盡罐內(nèi)的余水，關(guān)好空氣閥門第一閥門。5.2.2打開罐底出料口及罐內(nèi)進氣口、視鏡蒸汽吹口、移種取樣口上的進蒸汽閥門，使蒸汽通過這些閥門進入發(fā)酵罐，并從罐頂排氣口持出。5.2.3微開出料閥、發(fā)酵罐上各排氣口、空氣過濾系統(tǒng)出口閥后的小排氣口（對發(fā)酵罐還需旋松接種口蓋，使蒸汽從蓋上小孔噴出），這些操作可有效防止出現(xiàn)滅菌死角。5.2.4調(diào)整罐頂排氣閥，使罐壓達到并保特0.11一0.13MPa，溫度121一123℃,維持時間40-60分鐘。5.2.5空消結(jié)束，按照"由近而遠的原則"關(guān)上各蒸汽進閥及所有相關(guān)排氣閥、排氣口，但保持罐頂排氣口打開，使罐內(nèi)與大氣相通，防止突然冷卻時罐內(nèi)產(chǎn)生負壓，損壞罐體。5.2.6注意事項：空氣過濾器和發(fā)酵罐，滅菌過程中過濾器的表壓應在0.11左右，最好不高于0.13MPa，過高可能會損壞濾芯；滅菌后要用壓縮空氣將介質(zhì)吹干，緩慢通氣；氣流要適當，太小吹不干，過大容易將介質(zhì)頂翻，造成空氣走短路而帶菌。5.3實消5.3.1空消結(jié)束后，按工藝要求配好培養(yǎng)基，一般以罐體全容積的70％左右為宜，泡沫多的培養(yǎng)基需加入少量消泡劑?？紤]到冷凝水和接種量的因素，加水后的容積一般為罐體全容積的60％左右。5.3.2在加入培養(yǎng)基時，打開罐內(nèi)進氣口的進空氣閥，往罐內(nèi)通入空氣并打開顯示屏上的機械攪拌，轉(zhuǎn)速在80rpm左右，使罐內(nèi)物料均勻混合，對50L發(fā)酵罐物料加好后，旋上接種口。5.3.3緩慢打開夾套上口的蒸汽進氣閥門，小開夾套下口的排污閥，預熱罐內(nèi)培養(yǎng)基，當罐內(nèi)溫度升到90一100℃,關(guān)上進氣口的進空氣閥，關(guān)上夾套進蒸汽閥門和排污閥，打開夾套上口排空閥。然后打開罐底出料口及罐內(nèi)進氣口上的進蒸汽閥門，往罐內(nèi)通入蒸汽，關(guān)小罐項排氣閥。5.3.4當罐溫達到100℃左右時，最好關(guān)掉攪拌系統(tǒng)，延長機械密封使用壽命。微開出料閥、發(fā)酵罐上各排氣口、空氣過濾系統(tǒng)出口閥后的小排氣口，對50L發(fā)酵罐，旋松接種口蓋，使蒸汽從蓋上小孔噴出。3T/TBD001—20245.3.5調(diào)整控制好罐上蒸汽進汽和排氣閥的開度，使罐內(nèi)壓力維持在0.11一0.13MPa，溫度控制在121一125℃,推持時間根據(jù)工藝要求而定，一般滅菌30分鐘左右，點擊屏幕（滅菌30分）。5.3.6滅菌時間到后，關(guān)閉罐頂除排氣閥以外所有排氣口，然后按照"由近而遠的原則"關(guān)閉進汽閥及管路上的小排氣閥，待罐內(nèi)壓力降到0.05Mpa時打開罐內(nèi)進氣口進空氣閥。5.3.7打開夾套上口滅菌冷卻水的排水閥，再打開夾套下口進水閥，通入冷卻水點擊屏幕冷水閥，開始降溫）。5.3.8調(diào)節(jié)好空氣進、排氣閥門的開度，保持罐壓為0.05Mpa。當罐溫降至100度以下時可關(guān)閉夾套下口進水閥，打開自動進水閥、打開（顯示屏上的自動控溫，點按"發(fā)酵啟動"按鈕，開始自動冷卻并保溫。5.3.9注意事項：夾層升溫