實驗：《現(xiàn)代化妝品科學(xué)與技術(shù)實驗》學(xué)習(xí)通超星期末考試答案章節(jié)答案2024年

實驗：《現(xiàn)代化妝品科學(xué)與技術(shù)實驗》學(xué)習(xí)通超星期末考試章節(jié)答案2024年制備平板時，怎樣處理已經(jīng)凝固好的固體培養(yǎng)基？手持法倒平板的時候應(yīng)該怎樣操作？

答案:將三角瓶中已滅菌的培養(yǎng)基置于電爐上或微波爐中加熱使其熔化，加熱時必須不時搖動三角瓶，以免受熱不均而引起爆裂。待培養(yǎng)基完全熔化后，置一旁冷卻至55-60℃。揭下瓶塞，右手持三角瓶于火焰旁邊，瓶口要保持對著火焰，左手拿將皿蓋打開，迅速倒入培養(yǎng)基，以液體剛好蓋滿平皿底部為宜（25ml左右的培養(yǎng)基制成的9cm平板厚度約4mm），合上皿蓋后，置于水平桌面上略加轉(zhuǎn)動，等待其凝固。簡述培養(yǎng)基制備的完整步驟（按工作順序）。

答案:天秤調(diào)節(jié)、稱量、溶化、調(diào)pH、分裝、加塞和標(biāo)記，滅菌如果菌種污染了，可以采用怎樣的方法純化它？怎樣知道你的純化成功了？

答案:菌種在分離、保藏和生產(chǎn)過程中，極易遭致雜菌污染，因此必須對染有雜菌的菌種進行提純，方能用于生產(chǎn)。根據(jù)污染的類型和程度，需采用不同的純化措施。（1）排除細菌或酵母菌污染在菌種培養(yǎng)中，用肉眼仔細觀察培養(yǎng)基表面，不難發(fā)現(xiàn)被細菌或酵母菌污染的分離物常出現(xiàn)黏稠狀的菌落。取被純化物接種在無冷凝水、硬度較高（瓊脂用量2.3%～2.5%）的斜面上，再降低培養(yǎng)溫度至15～20℃，利用某些大型真菌在較低的溫度下，菌絲生長速度比細菌蔓延速度快的特點，用尖細的接種針切割菌絲的前端，轉(zhuǎn)接到新的試管斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，連續(xù)2～3次就能獲得所要的純菌絲。也可打破試管，挑取內(nèi)部長有基內(nèi)菌絲的瓊脂塊，移入無冷凝水的培養(yǎng)基上，該法適于被好氣性細菌污染的母種。（2）排除霉菌污染霉菌和細菌不同，它和食用菌菌絲很相似，也有氣生菌絲和基內(nèi)菌絲。分離的方法主要是抑制雜菌生長，拉大食用菌菌絲生長和雜菌菌絲生長的范圍差，從食用菌菌落前端切割，移植入新培養(yǎng)基。雜菌發(fā)現(xiàn)越早，分離的成功率越大。嚴格地說，在斜面培養(yǎng)基上的非接種部位發(fā)現(xiàn)的白色菌絲，應(yīng)認為是雜菌菌落，應(yīng)馬上提純。若有色孢子已出現(xiàn)，一方面易使分生孢子飄散，另一方面其基內(nèi)菌絲早已蔓延，可能和食用菌菌絲混生一起。如霉菌剛出現(xiàn)孢子且尚未成熟、變色，則可采用前端菌絲切割法提純。轉(zhuǎn)管時先將菌絲接種在斜面尖端，當(dāng)長滿斜面后，及時將原接種點連同培養(yǎng)基一起挖掉；如霉菌菌落顏色已深，說明孢子已成熟，稍一振動孢子就會飄滿培養(yǎng)基，若再行上法意義不大。如菌絲蔓延范圍較大，可將0.2%升汞溶液或1%多菌靈處理過的濕濾紙塊覆蓋在霉菌的菌落上，可抑制霉菌生長，防止孢子擴散，后用滅菌接種鏟將表層鏟掉，隨之用接種針鉤取基內(nèi)菌絲移入新的培養(yǎng)基，如此2～3次。（3）限制培養(yǎng)取直徑7～10毫米、高4～6毫米的玻璃環(huán)或不銹鋼環(huán)，經(jīng)酒精燈火焰灼燒后趁熱放到斜面培養(yǎng)基中央，將環(huán)的一半嵌入培養(yǎng)基內(nèi)，然后將染有細菌的接種塊放入環(huán)內(nèi)進行培養(yǎng)。細菌生長會被限制在環(huán)內(nèi)，而食用菌菌絲則可越過環(huán)而長到環(huán)外的培養(yǎng)基上，轉(zhuǎn)管后即可得到純化。（4）覆蓋培養(yǎng)在污染了細菌的食用菌菌絲斜面上傾注一層厚約2毫米的培養(yǎng)基，培養(yǎng)一段時間，當(dāng)食用菌菌絲透過培養(yǎng)基形成新的菌落時，即可切割轉(zhuǎn)管。最好進行二次覆蓋。（5）基質(zhì)菌絲純化培養(yǎng)對棉塞長有霉菌的試管斜面，可將試管打碎，取出培養(yǎng)基，用0.1%升汞浸泡2分鐘，用無菌水淋洗，再用無菌濾紙吸干。取一段2厘米的培養(yǎng)基從中部切開，在斷面上用無菌刀片切成米粒大小的塊，移入新的斜面上進行培養(yǎng)。（6）藥物處理菌種提純時，可向培養(yǎng)基中注入選擇性強的抗菌制劑，如加入5～10毫克/升的多菌靈（MBC）、涕必靈（TBZ）或托布津等，可有效地防止菌霉混生；在每毫升培養(yǎng)基中加入30～40毫克鏈霉素、20～30毫克四環(huán)素、金霉素，或50毫克高錳酸鉀，可以有效地防止細菌混生；加入灰黃霉素（20單位/毫升），可抑制真菌生長。（7）破碎菌絲從試管中取出已污染的培養(yǎng)基，放在0.1%升汞水中處理2分鐘，用無菌水沖洗，無菌紙吸干，再放入有玻璃珠的無菌水內(nèi)，經(jīng)組織破碎，稀釋后注入平板培養(yǎng)，取其單個菌落純化培養(yǎng)。為什么微生物在液體振蕩條件下比平板培養(yǎng)基生長快？

答案:液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分多，傳質(zhì)效率高。接種環(huán)(針)接種前后灼燒的目的是什么?為什么在接種前一定要將其冷卻?如何判斷接種環(huán)火焰灼燒后已冷卻可用于接種?

答案:接種前灼燒的目的是為了徹底的殺滅環(huán)上得細菌、芽孢等，可能引起污染的一切生物體。接種后再灼燒是防止菌種飄出,污染接種室或者超凈臺,影響整體接種環(huán)境,也是降低污染率的一種措施。接種的時候一定要冷卻，因為不冷卻的話，你接的目標(biāo)菌可能就直接殺死了（被熱的環(huán)燙死），如何判斷已經(jīng)冷卻了：一般是用接種環(huán)在玻璃平皿上劃線，培養(yǎng)基不融化為冷卻好，一般為1~3min。平板培養(yǎng)微生物為什么要倒置？

答案:主要原因：皿蓋向上培養(yǎng)時，培養(yǎng)基蒸發(fā)的水分會凝結(jié)在皿蓋上，并可能掉落到培養(yǎng)基表面，影響培養(yǎng)結(jié)果。而培養(yǎng)皿倒置，水分蒸發(fā)會在培養(yǎng)基表面均勻凝結(jié)，并且蒸發(fā)與凝結(jié)會形成平衡，不會影響培養(yǎng)結(jié)果。其次是倒置不會在拿起時只拿起皿蓋。而正置時拿培養(yǎng)皿，可以只把皿蓋拿起來，讓培養(yǎng)基暴露在空氣中。高壓蒸汽滅菌后，取出試管培養(yǎng)基擺制斜面，待凝固后，則可以使用。

答案:錯高壓蒸汽滅菌時一般要求120℃滅菌20min，這里的計時是從蓋上滅菌鍋的蓋子開始計時20min。

答案:錯在配制培養(yǎng)基過程中，調(diào)節(jié)pH時，如果調(diào)過頭，就可以用另一種溶解調(diào)回來就可以。

答案:錯瓊脂在培養(yǎng)基制備過程中主要起到凝固的作用，也是制備固體培養(yǎng)基必須要的原料之一。

答案:對一般固體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物的速度大于液體培養(yǎng)基的生長速度，因為，固體培養(yǎng)基不流動，有利于微生物的生長。

答案:錯液體培養(yǎng)轉(zhuǎn)接液體培養(yǎng)中，轉(zhuǎn)接菌群可以用接種環(huán)挑取一些加入待接種的培養(yǎng)液來完成。（）

答案:錯連續(xù)劃線培養(yǎng)中的劃線是隨意在培養(yǎng)皿上輕輕劃線就可。（）

答案:錯固體培養(yǎng)皿在接種時打開皿蓋的方向是向左的。（）

答案:錯金屬接種環(huán)需要用前、用后都火焰灼燒滅菌，可多次使用。

答案:對一次性塑料無菌接種環(huán)科直接使用，僅能使用一次。

答案:對在接種操作時，一般是左手持接種環(huán)，右手持培養(yǎng)平皿或者其他被接種的器皿。

答案:錯分區(qū)劃線只挑取一次微生物（

）

答案:對干熱滅菌法是指在干燥環(huán)境（如火焰或干熱空氣）進行滅菌的技術(shù)。一般有（

）和（

）。

答案:火焰滅菌法;干熱空氣滅菌法待滅菌后的試管培養(yǎng)基冷至（

）左右(以防斜面上冷凝水太多)，將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上，擱置的斜面長度以不超過試管總長的（

）為宜。

答案:60℃;一半利用分裝器將配制好的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)。以其高度的（

）左右為宜。以量筒或燒杯向錐形瓶分裝培養(yǎng)基，以其高度的（

）左右為宜。

答案:1/4;1/4--1/3在配制培養(yǎng)基時，在未調(diào)pH前，先測量培養(yǎng)基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入（

），邊加邊攪拌，并隨時用pH試紙測其pH，直至pH達本實驗所需；反之，用（

）進行調(diào)節(jié)。

答案:1mol/LNaOH;1mol/LHCl瓊脂的特點是（

）℃融化，（）℃凝固，一般加入的量是液體培養(yǎng)基的（）。

答案:95;40;1%-2%培養(yǎng)基的成分包括（

）、（

）、（

）、（

）、（

）、（

）。

答案:水分;碳源;氮源;能源;無機鹽;生長因素液體培養(yǎng)基一般使用（

）培養(yǎng)。一般細菌需要的振蕩速度為（

）r/min，放線菌需要的振蕩速度為（

）r/min。

答案:搖床振蕩;200-300;130-180各種微生物培養(yǎng)條件如下：放線菌在（

）℃培養(yǎng)（

）天；霉菌在（

）℃培養(yǎng)（

）天；酵母菌在（

）℃培養(yǎng)（

）天；細菌在（

）℃培養(yǎng)（

）即可。

答案:25-28;5-7;25-28;3-5;28-30;1-2;37;過夜從平板向斜面接種培養(yǎng)中，鋸齒形劃線培養(yǎng)適應(yīng)于（

），直線形劃線培養(yǎng)適應(yīng)于（

）。（與視屏資料相同描述）

答案:用于微生物菌種繁殖保存;用于微生物生長形態(tài)觀察劃線插片培養(yǎng)中蓋玻片的插入角度是（

），（

）劃線方向，每個9cm培養(yǎng)皿中載玻片數(shù)量是（

）片。

答案:45°;垂直;5-10平板劃線一般使用（）和（）兩種劃線方法。

答案:連續(xù)劃線;分區(qū)劃線/star3/origin/38ed22f9d39f6283c687571585ff7116.png

答案:提供碳源、氮源、生長因子;瓊脂(或凝固劑;所培養(yǎng)微生物對各營養(yǎng)成分的需要量;調(diào)pH;高壓蒸汽滅菌、灼燒接種環(huán)、酒精棉球擦手、棉塞塞試管口、在火焰旁接種;擴大接種面積培養(yǎng)基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞住，以阻止外界微生物進入培養(yǎng)基內(nèi)而造成污染，并保證有良好的通氣性能。可作為塞子的是（

）

答案:硅膠塞;

雙層鋁箔紙;8層紗布或棉塞等，外面需要包防潮紙牛肉膏或者酵母粉能為微生物培養(yǎng)提供（

）

答案:碳源;能源;維生素;磷酸鹽熒光顯微鏡保護眼睛不被紫外線損傷的裝置是（）

答案:B.紫外線防護板在干熱狀態(tài)下，由于熱穿透力較差，微生物的耐熱性較強，必須長時間受高溫的作用才能達到滅菌的目的。因此，干熱空氣滅菌法采用的溫度一般比濕熱滅菌法高。為了保證滅菌效果，選用了180-200oC滅菌，滅菌時間為（

）。

答案:1-2h下列哪種材料不適于火焰滅菌法。（

）

答案:培養(yǎng)基LB培養(yǎng)基的配制中,瓊脂可以在什么時候加入?

答案:營養(yǎng)成分溶解后,調(diào)節(jié)pH,按照分裝的量稱取相應(yīng)瓊脂粉，加入瓊脂后煮沸后分裝超凈工作臺正確使用的步驟是（）

答案:開紫外燈30min，然后關(guān)紫外燈，開照明燈，開風(fēng)機，拉起擋風(fēng)板至適當(dāng)高度3-5min，才可開始使用。接種前無菌操作的準備步