保健食品中異麥芽糖低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的測(cè)定

保健食品中異麥芽糖低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的測(cè)定保健食品中異麥芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的測(cè)定1.范圍本方法規(guī)定了保健食品中異麥芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的測(cè)定方法。本方法適用于保健食品（糖漿、糖粉、飲料、奶粉）中異麥芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的測(cè)定。本方法最低檢出量：異麥芽糖2μg；潘糖5μg；異麥芽三糖10μg；蔗果三糖(GF2)5μg；蔗果四糖(GF3)5μg；蔗果五糖(GF4)10μg；棉籽糖20μg；水蘇糖30μg。2.原理試樣除去蛋白后，離心、脫色，用液相色譜分析，用NH2柱分離，示差檢測(cè)器測(cè)定，外標(biāo)法定量。3.試劑除特殊說(shuō)明，所用試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)用水為去離子水或同等純度的蒸餾水。3.1乙腈（色譜純）。3.2無(wú)水乙醇。3.3麥芽糖、異麥芽糖、潘糖、麥芽三糖、異麥芽三糖、棉籽糖、水蘇糖(含量≥98%)3.4低聚果糖（總含量≥96%，其中GF238%，GF351%，GF47%）。3.5麥芽糖、異麥芽糖混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別稱取麥芽糖10.0mg，異麥芽糖15.0mg，潘糖9.0mg，麥芽三糖15.0mg，異麥芽三糖12.0mg，用水溶解，并定容至1.0mL。將此溶液逐級(jí)稀釋成下列濃度：標(biāo)準(zhǔn)溶液名稱：麥芽糖、異麥芽糖、潘糖、麥芽三糖、異麥芽三糖（mg/mL）10.500.750.450.750.6021.001.500.901.501.2032.003.001.803.002.40410.0015.009.0015.0012.003.6低聚果糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取含GF238%、GF351%、GF47%的低聚果糖標(biāo)準(zhǔn)品0.0500g，用水溶解并定容至2.50mL。將此液逐級(jí)稀釋成下列濃度：標(biāo)準(zhǔn)溶液名稱：GF2、GF3、GF4（mg/mL）11.502.000.3023.004.000.6034.506.000.9046.008.001.2057.5010.001.403.7棉籽糖、水蘇糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取棉籽糖0.0400g，水蘇糖0.0600g，用水溶解并定容至4.0mL。將此液逐級(jí)稀釋成下列濃度：標(biāo)準(zhǔn)溶液名稱：棉籽糖水蘇糖（mg/mL）12.03.024.06.036.09.048.012.0510.015.0由于試樣中程度不同的含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖，所以在配制標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液時(shí)可加入適量的葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖，主要是用于定性。將各標(biāo)準(zhǔn)系列注入高效液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。4.儀器4.1高效液相色譜儀（附帶示差檢測(cè)器）。4.2離心機(jī)：10000r/min。4.3分析天平：1/10000。4.4分析天平：1/1000。5.分析步驟5.1試樣制備5.1.1糖漿和糖粉：稱取1.0000g糖漿或0.2000g糖粉，用水稀釋或溶解，并定容置10.0mL，搖勻，溶液過(guò)0.45μm濾膜，濾液用于HPLC測(cè)定。5.1.2不含乳液體飲料：飲料直接離心，上清液過(guò)0.45mm濾膜,濾液用于HPLC測(cè)定。5.1.3含乳液體飲料：取10.0mL試樣放入燒杯中，加無(wú)水乙醇30mL，攪拌混勻，放置5min，離心，取上清液20mL在沸水浴上揮發(fā)近干。殘液用水溶解并定容至5-10mL，溶液過(guò)0.45μm濾膜，濾液用于HPLC測(cè)定。5.1.4奶粉：稱取2.000g試樣，放入200mL燒杯中，加水15.0mL溶解，再加45.0mL無(wú)水乙醇，攪勻，放置5min，離心，取上清液30.0mL在沸水浴上揮發(fā)近干，殘液用水溶解并定容至一定體積，溶液過(guò)0.45μm濾膜，濾液用于HPLC測(cè)定。5.2高效液相色譜參考條件5.1.1色譜柱：不銹鋼柱，內(nèi)徑4.6mm×300mm反相氨基柱，粒徑5μm;5.1.2柱溫45℃，檢測(cè)室40℃。5.1.3流動(dòng)相：乙腈+水=76+245.1.4流量：1.5mL/min。5.1.5靈敏度：64。5.1.6進(jìn)樣量：20μL5.1.7在上述色譜條件下注入標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。6.分析結(jié)果的表述6.1計(jì)算A×Ci×VX=——————Ai×m×1/2式中：X：試樣中某低聚糖的含量,g/kg(g/L)。A：試樣的峰面積或峰高。Ci：?jiǎn)我坏途厶菢?biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,mg/mL。Ai：標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積或峰高。ｍ：試樣質(zhì)量，g（mL）。V：試樣定容體積，mL。6.2結(jié)果表示：結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。注：功能性異麥芽低聚糖的含量以異麥芽糖、潘糖、異麥芽三糖計(jì)。7.允許差同一實(shí)驗(yàn)室，平行測(cè)定兩次結(jié)果的相對(duì)