芝麻枯萎病抗性鑒定技術(shù)規(guī)范DB41-T 2483-2023

ICS65.020.01

CCSB15

41

河南省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB41/T2483—2023

芝麻枯萎病抗性鑒定技術(shù)規(guī)范

2023-09-15發(fā)布2023-12-14實施

河南省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB41/T2483—2023

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語和定義.........................................................................1

4基本要求...........................................................................1

5苗期抗病性鑒定與評價...............................................................2

6成株期抗病性鑒定與評價.............................................................3

附錄A（資料性）芝麻枯萎病病情調(diào)查表樣式..............................................5

附錄B（規(guī)范性）芝麻枯萎病抗性鑒定結(jié)果報告表樣式......................................6

I

DB41/T2483—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由河南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。

本文件起草單位：河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院芝麻研究中心。

本文件主要起草人：張海洋、苗紅梅、段迎輝、曲文文、常淑嫻、琚銘、王慧麗、馬琴。

II

DB41/T2483—2023

芝麻枯萎病抗性鑒定技術(shù)規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了芝麻枯萎病抗性鑒定的基本要求、苗期和成株期抗病性鑒定與評價方法。

本文件適用于芝麻種質(zhì)資源及新品種（系）枯萎病抗性鑒定與評價。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB4407.2經(jīng)濟(jì)作物種子第2部分：油料類

NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則

DB41/T797夏芝麻栽培技術(shù)規(guī)程

DB41/T1312芝麻田雜草治理技術(shù)規(guī)程

DB41/T2393芝麻主要病蟲害綜合防治技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

芝麻枯萎病

由尖孢鐮刀菌芝麻?；停‵usariumoxysporumf.sp.sesami）侵染引起的芝麻主要土傳真菌病

害。苗期發(fā)生，造成葉片與幼莖萎焉、植株矮小，甚至整株枯死；成株期發(fā)生，造成葉片半邊黃化或卷

曲，莖部半邊或全部維管束變褐，嚴(yán)重時導(dǎo)致葉片萎焉脫落，植株生長受抑，甚至整株枯死。

人工病圃

人為將芝麻枯萎病菌接種到適宜病害發(fā)生的場所，以測試芝麻材料的抗病性。

病情指數(shù)

全面衡量芝麻枯萎病發(fā)病率與嚴(yán)重度的綜合指標(biāo)。

抗病性等級

依據(jù)病情指數(shù)數(shù)值對芝麻抗枯萎病能力作出的評價分級。

4基本要求

抗病性鑒定

枯萎病抗性鑒定包括苗期室內(nèi)鑒定和成株期大田病圃鑒定，可根據(jù)鑒定目的選用某個時期的鑒定結(jié)

果評價待測材料的抗病性。

1

DB41/T2483—2023

種子要求

選用飽滿芝麻種子，剔除破粒、霉粒；播種前禁止使用任何殺菌劑進(jìn)行種子處理。種子質(zhì)量應(yīng)符合

GB4407.2的規(guī)定。

5苗期抗病性鑒定與評價

苗期抗病性鑒定

5.1.1種子準(zhǔn)備

挑選待測芝麻種子100粒，依次用70%乙醇處理30s、3%次氯酸鈉溶液消毒10min、無菌蒸餾水沖洗

3～5次，然后放入盛有適量無菌蒸餾水的三角瓶中，25℃～28℃、100r/min～120r/min條件下震蕩培

養(yǎng)至種子露白。

5.1.2幼苗培養(yǎng)

將露白芝麻種子播種于盛有無菌蛭石的塑料花盆中，放入人工氣候培養(yǎng)箱培養(yǎng)（溫度25℃～28℃、

相對濕度60%～80%、15h/9h光暗交替）。培養(yǎng)時定期澆灌1/2霍格蘭氏營養(yǎng)液，植株生長至2～3對真葉

期備用。

5.1.3孢子液制備

挑取適量尖孢鐮刀菌芝麻?；途昃鷫K，接種于PDB液體培養(yǎng)基中，28℃、120r/min～150r/min

條件下震蕩培養(yǎng)3d～4d。用無菌醫(yī)用紗布過濾培養(yǎng)液，并在濾液中加入無菌蒸餾水，調(diào)整孢子濃度至

1×106cfu/mL～5×106cfu/mL。

5.1.4浸根接種

洗去芝麻幼苗根部粘帶的蛭石，并用吸水紙快速吸去根部水分。將根部完全浸入孢子液10min～

20min，重新栽入裝有無菌蛭石的塑料花盆中，置于人工氣候培養(yǎng)箱培養(yǎng)，培養(yǎng)條件按5.1.2的規(guī)定。

以無菌水浸根的幼苗作為對照。每處理設(shè)置3次重復(fù)，每重復(fù)植株不少于10株，對應(yīng)做標(biāo)記。

5.1.5發(fā)病程度調(diào)查

5.1.5.1調(diào)查時間及方法

接種后，每7d觀察1次各材料的枯萎病發(fā)生情況，第28d調(diào)查并記錄總株數(shù)、發(fā)病株數(shù)及病害發(fā)生

等級，填寫芝麻枯萎病病情調(diào)查表，見附錄A。

5.1.5.2發(fā)病等級

芝麻苗期枯萎病發(fā)生等級：

a)0級：全株無病狀；

b)1級：全株1/3以下葉片變黃或萎蔫；

c)2級：全株1/3～1/2葉片變黃或萎蔫，植株略矮；

d)3級：全株1/2～3/4葉片變黃、萎蔫或脫落，植株明顯變矮；

e)4級：全株所有葉片萎蔫脫落，莖稈變褐枯死。

5.1.5.3調(diào)查結(jié)果計算

2

DB41/T2483—2023

病情指數(shù)（DI）按式（1）計算：

∑(Si×ni)

DI=×100···························································(1)

N×4

式中：

DI——病情指數(shù)；

Si——各發(fā)病等級的代表數(shù)值；

ni——各發(fā)病等級對應(yīng)的植株數(shù)；

N——調(diào)查的總株數(shù)。

病情指數(shù)均值（ADI）按式（2）計算：

∑??

ADI=···································································(2)

3

式中：

ADI——被鑒定材料3次重復(fù)病情指數(shù)的平均值；

苗期抗病性評價

根據(jù)鑒定材料接種后第28d的病情指數(shù)均值（ADI）大小評定該材料的抗病性等級，填寫芝麻枯萎

病抗性鑒定結(jié)果報告表，見附錄B。芝麻苗期枯萎病抗性評價等級劃分見表1。

表1芝麻枯萎病抗性評價等級

級別抗病性等級病情指數(shù)均值(ADI)

1免疫（I）ADI＝0

2高抗（HR）0＜ADI≤15.0

3抗?。≧）15.0＜ADI≤30.0

4中抗（MR）30.0＜ADI≤55.0

5感病（S）55.0＜ADI≤70.0

6高感（HS）70.0＜ADI≤100

6成株期抗病性鑒定與評價

成株期抗病性鑒定

6.1.1病菌培養(yǎng)物制備

將麥粒淘洗干凈后，沸煮30min至麥粒熟透（表皮微裂），按2:1體積比與洗凈的稻殼混勻，裝入

塑料桶（上口直徑25cm，高25cm），121℃濕熱高壓滅菌1h；后接入半皿（直徑9cm）長滿芝麻枯萎病

菌菌絲的PDA固體培養(yǎng)基，混勻后22℃～28℃培養(yǎng)10d左右，至麥粒—稻殼培養(yǎng)物布滿菌絲。

6.1.2病圃準(zhǔn)備

人工病圃初次接菌前應(yīng)進(jìn)行土壤滅菌處理，處理后連續(xù)3年以上人為接入芝麻枯萎病菌培養(yǎng)物。人

工病圃需具有良好的灌溉條件，接菌后及時灌溉，保持土壤濕度。另外，人工病圃應(yīng)于當(dāng)年鑒定結(jié)束后

休田至次年鑒定開始。

6.1.3病圃接菌

3

DB41/T2483—2023

播種前，將制備好的芝麻枯萎病菌培養(yǎng)物與沙土混合后均勻撒入病圃，翻耕2～3次，耕深約15cm。

每畝接種病菌培養(yǎng)物30kg。

6.1.4試驗設(shè)計

試驗采用隨機區(qū)組法，每處理設(shè)置3次重復(fù)，重復(fù)間留走道。每重復(fù)2行，行長5m，行距40cm，株

距14cm～17cm，株數(shù)不少于60株。試驗設(shè)置抗病和感病對照各1個。在病圃中，抗病對照材料的病情指

數(shù)小于10.0，感病對照材料的病情指數(shù)≥55.0，且抗性穩(wěn)定。

6.1.5播種

5月中下旬至6月上旬，適時足墑播種，播種方式為人工開溝條播或起壟穴播，播種深度3cm左右，

適當(dāng)覆土、鎮(zhèn)壓，確保一播全苗。播種前，肥料應(yīng)作為底肥一次施入。肥料使用應(yīng)符合NY/T496的規(guī)定。

6.1.6田間管理

全生育期內(nèi)不進(jìn)行真菌病害防控，且保持土壤濕度適中，以利于枯萎病正常發(fā)生。病圃中常規(guī)田間

栽培管理及草害、蟲害防控措施應(yīng)符合DB41/T797、DB41/T1312和DB41/T2393的規(guī)定。

6.1.7發(fā)病程度調(diào)查

6.1.7.1調(diào)查時間及方法

初花后，宜每7d調(diào)查1次各材料的發(fā)病情況，記錄總株數(shù)、發(fā)病株數(shù)及病害發(fā)生等級，填寫芝麻枯

萎病病情調(diào)查表，見附錄A。成株期內(nèi)共進(jìn)行4～5次枯萎病病情調(diào)查，直至材料收獲前1周終止。當(dāng)感病

對照材料的病情指數(shù)均值≥55.0時，調(diào)查結(jié)果有效；否則無效。

6.1.7.2發(fā)病等級

芝麻成株期枯萎病發(fā)生等級：

a)0級：全株無病狀；

b)1級：全株1/3以下葉片變黃卷縮或萎蔫；

c)2級：全株1/3～1/2葉片變黃卷縮或萎蔫，植株略矮；

d)3級：全株1/2～3/4葉片變黃卷縮或萎蔫，葉片脫落，莖桿大部分變褐，植株明顯變矮；

e)4級：全株葉片變黃卷曲或萎蔫，葉片脫落，莖桿變褐枯死。

6.1.7.3調(diào)查結(jié)果計算

病情指數(shù)（DI）和病情指數(shù)均值（ADI）分別按式（1）和式（2）計算。

成株期抗病性評價

基于鑒定材料生育期內(nèi)的多次調(diào)查結(jié)果，統(tǒng)計病情指數(shù)均值（ADI）最大值。根據(jù)其大小評定該材

料的抗病性等級，填寫芝麻枯萎病抗性鑒定結(jié)果報告表，見附錄B。芝麻成株期枯萎病抗性評價等級劃

分見表1。

4

DB41/T2483—2023

A

A

附錄A

（資料性）

芝麻枯萎病病情調(diào)查表樣式

芝麻枯萎病病情調(diào)查表樣式見表A.1。

表A.1芝麻枯萎病病情調(diào)查表

調(diào)查時間：年月日第次調(diào)查

各病害等級病株數(shù)（株）

材料編號總株數(shù)（株）病情指數(shù)

0級1級2級3級4級

調(diào)查人：核校人：審核人：

年月日年月日年月日

5

DB41/T2483—2023

B

B

附錄B

（規(guī)范性）

芝麻枯萎病抗性鑒定結(jié)果報告表樣式

芝麻枯萎病抗性鑒定結(jié)果報告樣式見表B.1。

表B.1芝麻枯萎病抗性鑒定結(jié)果報告表

送樣單位：

樣品編號材料名稱病情指數(shù)均值抗病性等級

感病對照

抗病對照

制表人：校核人：負(fù)責(zé)人：

年月日年月日年月日

6

DB41/T2483—2023

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語和定義.........................................................................1

4基本要求...........................................................................1

5苗期抗病性鑒定與評價...............................................................2

6成株期抗病性鑒定與評價.............................................................3

附錄A（資料性）芝麻枯萎病病情調(diào)查表樣式..............................................5

附錄B（規(guī)范性）芝麻枯萎病抗性鑒定結(jié)果報告表樣式......................................6