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43I 2 2 2 4 6 本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定12規(guī)范性引用文件3.13.23.3通過(guò)外部觀察或其他方法確定母牛發(fā)情程度的方4.1精液品質(zhì)4.2母牛5冷凍精液的貯存2冷凍精液應(yīng)浸泡在液氮生物容器中貯存,液氮生物容器應(yīng)符合GB/T5458有關(guān)規(guī)定。包裝好的冷凍精液由一個(gè)液氮容器轉(zhuǎn)換到另一液氮容器時(shí),在液氮容器外停留時(shí)間不得超6.2器具準(zhǔn)備6.3冷凍精液解凍6.4精液質(zhì)量檢查輸精前,用手掏凈母牛直腸宿糞后,再用溫水6.6輸精裝槍通過(guò)母牛的外部表現(xiàn)癥狀和外生殖器官的變化判斷母牛是否發(fā)情和發(fā)情程7.2直腸檢查通過(guò)直腸檢查卵巢,觸摸卵泡發(fā)育程度,判斷發(fā)情程度及排卵時(shí)間,見(jiàn)附8.1.1觸摸卵泡38.1.2外部觀察法母牛接受爬跨后8h~12h是適宜輸精時(shí)間。如采用兩次輸精,第二次輸精時(shí)間為母牛接受爬跨后8.2輸精部位8.3直腸把握輸精法9妊娠檢查9.2直腸檢查9.3超聲波診斷9.4妊娠特異性糖蛋白(PAGs)診斷對(duì)配種28d后的牛采血,用檢測(cè)試劑盒(PAG-ELISA)測(cè)定PAGs,按檢測(cè)試劑盒說(shuō)明4A.1玻璃器皿A.2金屬器械56用一次性采血針和5mL采血管,對(duì)配種28d~30d的母牛尾根酒精消毒采血2mL~3mL,采血管做好標(biāo)記和填寫采樣單,靜置1h,3000g離心10min,離心后血清可直接用于檢測(cè),不立即檢測(cè)的血清C.3.2用封口膜將微孔板密封以防蒸發(fā),輕輕搖勻,在20℃的恒溫培養(yǎng)箱孵育C.3.3孵育后,去掉膜,翻轉(zhuǎn)微孔板C.3.4洗滌后,向微孔內(nèi)加入檢測(cè)溶液,輕輕搖勻,隨后在20℃的恒溫培養(yǎng)箱孵育C.3.6洗滌后,再向孔內(nèi)加入酶標(biāo)抗體,輕

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