尿液檢驗(yàn)-尿液干化學(xué)分析儀應(yīng)用（臨床檢驗(yàn)技術(shù)）

尿液干化學(xué)分析儀應(yīng)用學(xué)習(xí)目標(biāo)了解尿液干化學(xué)分析儀發(fā)展史、結(jié)構(gòu)及檢測原理0102握尿液干化學(xué)檢驗(yàn)中各項(xiàng)目的原理、方法03掌重點(diǎn)掌握尿液干化學(xué)檢驗(yàn)中的注意事項(xiàng)及臨床意義04掌握干化學(xué)檢查過程中應(yīng)注意的問題現(xiàn)代尿液分析儀類型干化學(xué)分析儀檢驗(yàn)全自動尿沉渣分析儀流式細(xì)胞術(shù)分析儀影像式尿沉渣尿干化學(xué)試帶測試原理、臨床應(yīng)用級及質(zhì)量控制1全自動尿沉渣分析儀2CONTENTS

尿干化學(xué)試帶測試原理、臨床應(yīng)用級及質(zhì)量控制主要內(nèi)容干化學(xué)尿液分析儀試劑帶檢測原理干化學(xué)尿液分析儀檢驗(yàn)的干擾因素及質(zhì)量控制干化學(xué)尿液分析儀檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用歷史回顧16世紀(jì)：英國物理學(xué)家RobertBoyle發(fā)明石蕊試紙，用于測定溶液pH1937年：費(fèi)格爾利用“蛋白質(zhì)誤差（proteinerror）原理，首次發(fā)明了測定尿蛋白的一種單顏色反應(yīng)，此發(fā)明奠定了以后發(fā)展浸入即讀（Dip-and-Read）干化學(xué)試帶的基礎(chǔ)1956年：聯(lián)合尿糖、蛋白、pH等的多聯(lián)試紙問世，從3-4個項(xiàng)目組合到九十年代的尿液10項(xiàng)干化學(xué)試帶，已經(jīng)達(dá)到比較理想的境地1970年起，用于判讀尿試帶顏色變化的半自動化儀器問世1980年:具有自動進(jìn)樣，點(diǎn)滴，試帶傳輸和打印功能的全自動尿干化學(xué)分析儀問世歷史回顧歷史回顧---中國1966年：北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科生產(chǎn)出12種用于測定尿液中化學(xué)成分的試紙，包括尿蛋白、尿糖、酮體、膽紅素、pH、潛血等項(xiàng)目1980年，北京協(xié)和醫(yī)院與美國Ames公司簽訂雙方協(xié)作計(jì)劃，首次從美國引進(jìn)一批自動化和半自動化檢驗(yàn)設(shè)備中級醫(yī)刊，1966年特刊

8項(xiàng)目半自動尿液干化學(xué)分析儀

近代尿液分析儀1985年，國內(nèi)不少廠家如桂林醫(yī)療電子儀器廠等引進(jìn)日本京都第一化學(xué)或日本榮研化學(xué)的技術(shù)，生產(chǎn)8項(xiàng)的干化學(xué)試帶生產(chǎn)線然后還引進(jìn)了MA-4210等型號的尿液分析儀進(jìn)入上世紀(jì)90年代以后，尿液干化學(xué)分析儀器和試帶已經(jīng)擴(kuò)展為10項(xiàng)至11項(xiàng)MA-4210尿液化學(xué)分析儀近代尿液分析儀Clinitek500型半自動尿液干化學(xué)分析儀

Roche2400全自動尿液干化學(xué)分析系統(tǒng)近代尿液分析儀ClinitekAtlas全自動尿液干化學(xué)分析儀迪瑞H800全自動尿液干化學(xué)分析儀愛科來AUTIONMAXAX-4280全自動尿干化學(xué)分析儀和iQ-200尿液有形成分分析儀連接運(yùn)行

尿干化學(xué)試帶結(jié)構(gòu)及組成試帶構(gòu)成第一層尼龍膜起保護(hù)作用，防止大分子物質(zhì)的污染第二層絨制層，包括碘酸鹽層和試劑層，碘酸鹽層可破壞Vitc等干擾物質(zhì)，試劑層與尿液所測定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)第三層是固有試劑的吸水層，可使尿液均勻，快速地浸入，并能抑制尿液流到相鄰反應(yīng)區(qū)第四層選取尿液不浸潤的塑料片為支持體干化學(xué)檢測原理不同型號尿干化學(xué)分析儀使用配套的專用試帶各試劑模塊與尿中被測成分的反應(yīng)呈現(xiàn)不同的顏色變化，顏色的深淺與尿中相應(yīng)物質(zhì)呈正比空白塊，固定塊作用檢測參數(shù)8項(xiàng):PH、PRO、GLU、KET、BIL、URO、ERY、NIT9項(xiàng)：增加WBC10項(xiàng)：SG11項(xiàng)：VitC腎病四聯(lián)試帶：PH、PRO、ERY、SG糖尿病五聯(lián)試帶：PH、PRO、GLU、KET、SG肝病二聯(lián)試帶：BIL、URO尿白細(xì)胞測定原理模塊成分吲哚酚酯重氮鹽粒細(xì)胞胞含有酯酶，先與試紙帶吲哚酚酯反應(yīng)作用生成吲哚酚，再與重氮鹽氧化縮合生成紫色縮合物其顏色深淺與細(xì)胞多少呈比例關(guān)系注意事項(xiàng)本法主要檢測粒細(xì)胞酯酶，不與淋巴細(xì)胞反應(yīng)尿中含福爾馬林、呋喃坦啶、大量膽紅素可致假陽性高比重尿、高蛋白（5g/L)、VC、尿中含頭孢霉素、慶大霉素、四環(huán)素以及硼酸、草酸可致假陰性注意事項(xiàng)尿液標(biāo)本應(yīng)新鮮，尿液在膀胱時間過長，或標(biāo)本存儲時間過長，引起白細(xì)胞破壞，導(dǎo)致干化學(xué)陽性，鏡檢陰性的假陽性出現(xiàn)綜合酯酶、亞硝酸鹽、鏡檢、結(jié)合臨床分析結(jié)果白細(xì)胞和紅細(xì)胞≤10/μl、亞硝酸鹽和蛋白陰性，可以使用干化學(xué)過篩而不進(jìn)行鏡檢鏡檢標(biāo)準(zhǔn)腎科及泌尿系病人以鏡檢作為診斷或療效依據(jù)的，如結(jié)石、結(jié)晶、腫瘤尿液外觀異常時依據(jù)醫(yī)師指定要求做沉渣鏡檢的標(biāo)本。

注意事項(xiàng)只要完全符合以下條件的可不進(jìn)行顯微鏡檢查。白細(xì)胞結(jié)果為陰性亞硝酸鹽為陰性尿蛋白為陰性尿紅細(xì)胞檢查≤10/μl排除藥物及其它因素的干擾尿中白細(xì)胞試帶法與鏡檢結(jié)果比較

試帶法白細(xì)胞（-）試帶法白細(xì)胞（+）鏡檢白細(xì)胞（-）正常標(biāo)本白細(xì)胞破壞、標(biāo)本久置、低滲尿、高pH尿、漏檢白細(xì)胞鏡檢白細(xì)胞（+）試帶失效、高滲尿、抗生素、錯誤識別：滴蟲、鱗狀上皮裸核型，排斥等（+）臨床意義白細(xì)胞增多主要見于泌尿系炎癥腎盂腎炎、膀胱炎、尿道炎、前列腺炎，腎小球腎炎中性粒細(xì)胞見于急性炎癥淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞見于腎移植、慢性炎癥、新月形腎小球腎炎、抗癌藥物引起的間質(zhì)性腎炎嗜酸性細(xì)胞見于過敏性炎癥、變態(tài)反應(yīng)引起的泌尿系炎癥急性腎小管壞死，可見單核細(xì)胞減少或消失女性生殖系統(tǒng)炎癥分泌物污染VitC概

述人、靈長類和豚鼠不能合成VC的閾值14mg/L通過消化道需能吸收通過尿液排出，其重吸收機(jī)制和葡萄糖基本一致攝入45mg/L,血液中6mg/L左旋抗壞血酸左旋脫氫抗壞血酸測定方法同時測定：二硝基苯肼比色法和高效液相色譜法測定左旋抗壞血酸：干化學(xué)法和二氯靛酚藍(lán)檢測原理模塊組成：2,6-二氯靛酚鈉、中性紅、亞甲基綠磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉VC含有1，2-烯二醇，在酸性條件使氧化態(tài)粉紅色2,6-二氯靛酚還原為無色的2，6-二氯二對酚胺注意事項(xiàng)在堿性環(huán)境中不穩(wěn)定，標(biāo)本要新鮮，及時測定，防止被細(xì)菌破壞只對左旋抗壞血酸反應(yīng)PH>4.0時，內(nèi)源性酚和巰基化合物如半胱氨酸、硫代硫酸鈉使結(jié)果偏高著重反映飲食VC含量，反映體內(nèi)VC營養(yǎng)狀況，VC低見于攝入不足或抗壞血酸病，長期增高與結(jié)石形成有關(guān)維生素C含量的高低對血紅蛋白、葡萄糖、膽紅素、尿膽原、亞硝酸鹽及白細(xì)胞產(chǎn)生負(fù)干擾尤其注意酮體陽性，葡萄糖陰性或葡萄糖干化學(xué)和班氏結(jié)果不一致時半胱氨酸比色法測定VC使用活性碳將抗壞血酸氧化成氧化型，與2，4-二硝基苯肼結(jié)合成紅色脎，脎溶解于硫酸，比色尿干化學(xué)檢測的原理方法比較---尿干化學(xué)法優(yōu)點(diǎn)：①標(biāo)本用量少；②速度快；③項(xiàng)目多；④重復(fù)性好;⑤準(zhǔn)確性高；⑥適用大批量標(biāo)本篩查缺點(diǎn):①顯微鏡檢查，對白細(xì)胞、管型和結(jié)晶的檢查屬于間接檢查;②很難判斷紅細(xì)胞形態(tài)特征;③測定蛋白以白蛋白為主，故不適于腎病患者;④易受藥物、外源性物質(zhì)或人為因素影響，出現(xiàn)假陽性或假陰性;⑤亞硝酸鹽只能檢查出有硝酸鹽還原酶的細(xì)菌;⑥多聯(lián)試帶保存和使用要求高檢出異常標(biāo)本和排除健康標(biāo)本，特別是避免假陰性。對假陽性可通過鏡檢進(jìn)一步排除篩查的目的質(zhì)量控制標(biāo)本必須新鮮，最好2小時內(nèi)完成，過久影響結(jié)果避免混入陰道分泌物混入尿標(biāo)本，否則，引起白細(xì)胞假陽性了解病人飲食及用藥情況試劑帶要求一定要在失效期內(nèi)避光、防潮、干燥保存使用時一次只取出所需要的試劑帶，并立即蓋緊，多余試劑帶不可放回容器內(nèi)打開蓋子后不能再放冰箱不可合并各瓶中的試劑帶。不可觸摸試劑帶上各反應(yīng)檢測塊。質(zhì)量控制操作嚴(yán)格、規(guī)范、正確2種濃度質(zhì)控液臨床應(yīng)用尿液蛋白質(zhì)檢查種類流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀原理和電阻抗相結(jié)合影像式尿沉渣分析系統(tǒng)流式細(xì)胞分析技術(shù)和粒子成像分析技術(shù)影像式尿沉渣分析儀流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀光學(xué)檢測系統(tǒng)液壓系統(tǒng)電阻抗檢測系統(tǒng)電子系統(tǒng)參

數(shù)熒光強(qiáng)度（FI):反映細(xì)胞染色質(zhì)強(qiáng)度前向熒光脈沖寬度（FLW）：主要反映染色質(zhì)長度前向散射光強(qiáng)度（Fsc）：成比例反映細(xì)胞大小前向散射光脈沖寬度（Fscw):反映細(xì)胞長度定量參數(shù)WBC/μl、RBC/μl、EC/μl、CAST/μl、BACT/μl、conductivity標(biāo)記參數(shù)PathCAST、SRC、YLC、X′TAL、SPERM等紅細(xì)胞、白細(xì)胞isomorphicRBC、dysmorphicRBC、Non-LysedRBC#,%、RBC-MFI、RBC-MFsc、RBC-FI-DWSD、WBC-MFsc)FI-Fsc、Fscw-Flw散點(diǎn)圖紅細(xì)胞：FI極低,Fsc大小不均白細(xì)胞：FI大,Fsc較紅細(xì)胞大細(xì)菌：FSC比白細(xì)胞和紅細(xì)胞小,FI比紅細(xì)胞大,比白細(xì)胞小上皮細(xì)胞：均有細(xì)胞核,主要分布在Fscw-Flw散點(diǎn)圖左上角管型：透明管型有極高的Fscw和低的FLW;病理性管型含有其他內(nèi)容物，有較高的Fscw和較高的FLWFSCWFSC酵母細(xì)胞和精子：較高的FI，F(xiàn)sc在紅細(xì)胞和白細(xì)胞之間;酵母的FSCW較精子的小,將其區(qū)分開來結(jié)晶出現(xiàn)在紅細(xì)胞區(qū)域,草酸鹽更靠近FSC,尿酸鹽和紅細(xì)胞分不清FSCWFSC80%的紅細(xì)胞Fsc≦84ch,稱為非均一性血尿80%的紅細(xì)胞Fsc≥126ch,稱為均一性血尿介于兩者之間，混合性血尿結(jié)晶、真菌、結(jié)晶增多影響結(jié)果血尿伴菌尿，尿滲量≤700mOsm/L,PH≧7.0或放置時間過長，導(dǎo)致改變紅細(xì)胞存活的白細(xì)胞，F(xiàn)sc較強(qiáng)而FI弱死亡白細(xì)胞，F(xiàn)sc較弱而FI強(qiáng)白細(xì)胞前向散射光（FSC)強(qiáng),前向熒光（FI）弱，急性感染；否則FSC弱，F(xiàn)I強(qiáng)慢性感染。利用WBC-MFsc來判別白細(xì)胞狀態(tài)，結(jié)合白細(xì)胞定量判斷急性還是慢性感染:當(dāng)其WBC-MFsc≥73.3時,可初步診斷為急性尿路感染;當(dāng)其WBC-MFsc≤38.1時,可初步診斷為慢性尿路感染,并可指導(dǎo)臨床用藥影響：上皮細(xì)胞、真菌、滴蟲、脂肪滴等，使白細(xì)胞增加

白細(xì)胞臨床應(yīng)用方法學(xué)評價不需離心尿樣，自動進(jìn)樣所需標(biāo)本量少工作效率高，50~100/h，并報告多個參數(shù)，且可定量采集信息量大，標(biāo)本9μl,相當(dāng)于50個高倍鏡視野，粒子總數(shù)0~4000，明顯高于手工鏡檢有形成分不能確認(rèn)，需離心顯微鏡區(qū)分應(yīng)用時間短，經(jīng)驗(yàn)不足，未建立公認(rèn)的參考值不能替代傳統(tǒng)尿沉渣操作程序統(tǒng)一，易于標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量控制影像式尿沉渣分析儀結(jié)合了流式細(xì)胞分析技術(shù)和粒子成像分析技術(shù)捕獲所有顆粒的影像并數(shù)字化分析系統(tǒng)分類12種有形成分可以和全自動尿液分析儀或其他設(shè)備組合使用組成顯微鏡高速攝像數(shù)字相機(jī)圖像采集電腦軟件參數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、白細(xì)胞簇、透明管型、非分類的管型、鱗狀上皮細(xì)胞、非鱗狀上皮細(xì)胞、細(xì)菌、酵母樣菌、結(jié)晶體、粘液絲、精子尿干化學(xué)分析儀應(yīng)用反映腎臟調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)環(huán)境體液、酸堿平衡能力的重要指標(biāo)之一，通常簡稱為尿液酸度。尿液pH值決定因素主要由腎臟腎小管泌H+、泌NH3、銨鹽的形成、HCO3-的重吸收有關(guān)尿液酸堿度檢查檢測方法方法學(xué)評價質(zhì)量控制臨床意義目

錄CONTENTS檢測方法01采用雙指示劑法，模塊中含有溴麝香草酚藍(lán)（PH6.0~7.6)和甲基紅（PH4.6~6.2),變色范圍5.0(黃色)—7.0(綠色)—9.0(藍(lán)色)0203溴麝香草酚藍(lán)干化學(xué)法pH試紙法指示劑法04可滴定酸度

05滴定法電極法方法學(xué)評價注意試帶保存條件.質(zhì)量控制（1）分析前標(biāo)本必須新鮮分析中試紙、試帶法試帶應(yīng)能滿足的生理和病理尿pH變化范圍定期弱酸、弱堿檢查試帶靈敏度未被酸、堿污染，未吸潮變質(zhì)在有效期內(nèi)使用浸泡時間過長，PH有降低趨勢不能浸入過多尿液，防止試帶間溢出現(xiàn)象，影響PH測定質(zhì)量控制（2）---PH計(jì)法經(jīng)常校準(zhǔn)PH計(jì)對溫度有嚴(yán)格要求，故首先調(diào)整所需試驗(yàn)溫度，新型PH計(jì)可自動對溫度進(jìn)行補(bǔ)償質(zhì)量控制（3）分析后生理?xiàng)l件下，少見PH小于4.5或大于8.0。尿液PH大于8.0見于標(biāo)本防腐或保存不當(dāng)，細(xì)菌大量繁殖并分解尿素并產(chǎn)生氨患者服用大量堿性制劑建立完善的報告審核制度參考值在正常飲食條件下，晨尿多偏弱酸性，多數(shù)尿標(biāo)本pH5.5-6.5，平均pH6.0隨機(jī)尿pH4.5-8.0。臨床意義續(xù)表有形成分臨川意義混合管型活動性腎小球腎炎顆粒管型腎實(shí)質(zhì)病變后期、藥物中毒性腎小管損傷脂肪管型慢性腎炎腎病型、類脂性腎病、腎病綜合征