血液學(xué)檢驗(yàn)技術(shù) 課件匯 韓際梅 項(xiàng)目1-10 造血基礎(chǔ)理論簡介 - 溶血性貧血

單元一：造血細(xì)胞檢驗(yàn)項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介目錄任務(wù)一：胚胎期造血任務(wù)二：出生后造血任務(wù)三：造血調(diào)控任務(wù)四：造血細(xì)胞及生長發(fā)育項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介

學(xué)習(xí)目標(biāo)1.掌握胚胎期造血器官及造血特點(diǎn)，血細(xì)胞生長發(fā)育階段及過程。2.熟悉造血干細(xì)胞的概念、基本特征。3.了解造血微環(huán)境的概念及組成。4.初步具備識別造血細(xì)胞的能力項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介

胚胎期造血出生后造血造血調(diào)控造血細(xì)胞及生長發(fā)育項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論造血系統(tǒng)由造血器官和造血細(xì)胞兩部分組成，是機(jī)體內(nèi)制造血液的整個系統(tǒng)。主要包括卵黃囊、肝臟、脾、腎、胸腺、淋巴結(jié)和骨髓。造血細(xì)胞均發(fā)生于胚胎的中胚層，隨胚胎發(fā)育過程，造血中心轉(zhuǎn)移。

造血器官分為

胚胎期造血器官出生后造血器官項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)一、胚胎期造血第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論胚胎期造血器官項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)一、胚胎期造血第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論造血器官造血時間造血特點(diǎn)中胚層造血人胚2周末～9周人體唯一的血管內(nèi)造血，可形成第一代巨幼紅細(xì)胞，產(chǎn)生Hb-Gower1、Hb-Gower2和Hb-portland肝臟造血人胚6周～7個月形成第二代幼紅細(xì)胞，4個月時可形成粒細(xì)胞。產(chǎn)生HbF脾臟造血人胚5周～出生后首先產(chǎn)生紅細(xì)胞，以后產(chǎn)生粒細(xì)胞，5個月可以形成淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，出生后只產(chǎn)生淋巴細(xì)胞胸腺造血人胚6周～胚胎后期形成淋巴細(xì)胞，也可以產(chǎn)生紅細(xì)胞和粒細(xì)胞淋巴結(jié)造血人胚7、8周～出生后終生形成淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞骨髓造血人胚14周～出生后出生后唯一產(chǎn)生粒、紅、巨核細(xì)胞的場所，也可產(chǎn)生淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和單核細(xì)胞。除產(chǎn)生HbF外，還可產(chǎn)生HbA和HbA2人胚胎期造血器官及造血特點(diǎn)項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介

骨髓造血根據(jù)造血器官不同出生后造血分為淋巴造血項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)二出生后造血第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論（一）骨髓造血骨髓被封閉于堅(jiān)硬的骨髓腔中，肉眼觀是一種海綿樣、膠狀的組織。健康成人骨髓約占體重的4.5％(3.4％～5.9％)，平均重量為2800g(1600g～3700g）。骨髓按其組成和功能分為紅骨髓和黃骨髓。

骨髓分為紅骨髓黃骨髓項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)二出生后造血第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論骨髓有著活躍的造血功能。不同年齡的人群紅骨髓的分布不同，5歲以下的兒童全身的骨髓腔內(nèi)均為紅骨髓，5～7歲后，長骨的骨髓中開始出現(xiàn)脂肪細(xì)胞。18歲時，紅骨髓僅存在于扁骨、短骨及長管狀骨的近心端，如顱骨、胸骨、脊椎骨、肋骨、髂骨以及肱骨和股骨的近心端。紅骨髓占全部骨髓的50％左右。項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)二出生后造血第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論

紅骨髓主要由結(jié)締組織、血管、神經(jīng)及造血實(shí)質(zhì)細(xì)胞組成，由網(wǎng)狀纖維和網(wǎng)狀細(xì)胞構(gòu)成立體網(wǎng)架，各發(fā)育階段的血細(xì)胞位于網(wǎng)孔中。

黃骨髓是指骨髓中的造血細(xì)胞被脂肪細(xì)胞替代。黃骨髓在正常情況下不再參與造血，但仍保留造血的潛能。當(dāng)機(jī)體需要時（如急性失血或溶血時）可重新恢復(fù)其造血功能。項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)二出生后造血第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論（二）淋巴器官造血

淋巴器官中樞淋巴器官周圍淋巴器官骨髓胸腺脾淋巴結(jié)黏膜淋巴組織（扁桃體）

淋巴細(xì)胞聚集和免疫應(yīng)答發(fā)生的場所淋巴細(xì)胞產(chǎn)生、增殖分化和成熟的場所項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)二出生后造血1.胸腺

產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和分泌可促進(jìn)T細(xì)胞分化、發(fā)育和成熟的胸腺素。

2.脾

T、B淋巴細(xì)胞分化、成熟的主要場所之一，同時具有造血、儲血、濾血和免疫反應(yīng)等多種功能。3.淋巴結(jié)

出生后，淋巴結(jié)只產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞。

項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)二出生后造血第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論（三）髓外造血剛出生時全身骨髓普遍造血，5歲以后由四肢遠(yuǎn)側(cè)呈向心性退縮，正常成人紅骨髓主要見于全身扁平骨，肱骨及股骨近端骨髓中尚殘留有紅骨髓組織，其余為黃骨髓。黃骨髓平時無造血功能，但在生理需要或某些病理情況下，黃骨髓、肝、脾、甚至淋巴結(jié)等可恢復(fù)造血功能，稱為髓外造血。

項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)二出生后造血（一）造血微環(huán)境造血微環(huán)境是由各種調(diào)控細(xì)胞以及許多來自原位和遠(yuǎn)處的細(xì)胞因子等構(gòu)成的空間。各細(xì)胞間保持一個正適合于細(xì)胞間相互作用、信號傳遞的距離。這個調(diào)控造血干祖細(xì)胞增殖分化的環(huán)境稱之為造血微環(huán)境。造血干祖細(xì)胞周圍有調(diào)控活性的細(xì)胞統(tǒng)稱為調(diào)控細(xì)胞，由間充質(zhì)干細(xì)胞分化而成的各種造血調(diào)控細(xì)胞與各種造血細(xì)胞混雜在一起，組成造血組織。項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)三造血調(diào)控

三造血調(diào)控（二）細(xì)胞因子

“細(xì)胞因子”可以包括一切源自細(xì)胞而又以不同方式作用于細(xì)胞的活性多肽，它可以調(diào)控細(xì)胞的各種功能，如增殖、分化、凋亡、識別、防御、惡變、逆轉(zhuǎn)、生物合成等。由于細(xì)胞因子的多能性，它們往往對造血、免疫、神經(jīng)、腫瘤等細(xì)胞都有調(diào)控作用。目前在造血調(diào)控方面研究較多的細(xì)胞因子有以下一些：項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)三造血調(diào)控

三造血調(diào)控（二）細(xì)胞因子

①粒單核細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）；②粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）；③單核巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF）；多向性集落刺激因子（Multi-CSF），即白介素3（IL-3）；⑤白介素6（IL-6）；⑥白介素11（IL-11）；⑦促紅細(xì)胞生成素（EPO）；⑧血小板生成素（TPO）；⑨干細(xì)胞因子（SCF）；⑩刺激T、B淋巴系細(xì)胞生長的其他細(xì)胞因子，如白細(xì)胞介素2、4、5等。項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)三造血調(diào)控（三）造血的基因調(diào)控

造血干祖細(xì)胞增殖分化的每個環(huán)節(jié)都受基因的調(diào)節(jié)控制或決定的。各種細(xì)胞因子以及它們相對應(yīng)的受體都是基因表達(dá)的產(chǎn)物?；虮磉_(dá)的效率決定了細(xì)胞因子及其受體的表達(dá)量。這直接關(guān)系到造血細(xì)胞與調(diào)控細(xì)胞之間的相互作用關(guān)系。項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)三造血調(diào)控

四造血細(xì)胞及生長發(fā)育

造血干細(xì)胞分化為早期祖細(xì)胞,經(jīng)大量不斷增殖又逐步分化，成為晚期祖細(xì)胞。然后分化為具有特異形態(tài)的骨髓中不同系別的前體細(xì)胞。最后，分化成各類具有生理功能的血細(xì)胞。這個過程稱之為“造血”（hematopoiesis）。項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育全能干細(xì)胞

多能干細(xì)胞

專能干細(xì)胞

分類能形成完整個體受精卵、胚胎干細(xì)胞能分化多種組織細(xì)胞造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、間質(zhì)干細(xì)胞

能分化一種類型細(xì)胞肝干細(xì)胞、腸上皮干細(xì)胞項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育

造血干/祖細(xì)胞的臨床應(yīng)用

公認(rèn)的理想靶細(xì)胞

胎肝干細(xì)胞移植

外周血干細(xì)胞移植

臍血干細(xì)胞移植

造血干細(xì)胞移植

骨髓移植

基因治療

項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育

四造血細(xì)胞及生長發(fā)育（一）造血干細(xì)胞

造血干細(xì)胞是具有高度自我更新和多向分化能力，在造血組織中含量極少，形態(tài)難以辯認(rèn)的類似小淋巴細(xì)胞樣的一群異質(zhì)性的細(xì)胞群體。

特征①高度的自我更新能力，也稱自我維持。②多向分化能力，也稱全能性。③不均一性，即多態(tài)性。項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育表面標(biāo)志有CD34+、CD38-等，其中最重要的是CD34抗原。CD34+

造血細(xì)胞是公認(rèn)理想的造血干/祖細(xì)胞移植物。

CD34+CD38-是造血干/祖細(xì)胞的表面標(biāo)志。四造血細(xì)胞及生長發(fā)育（二）造血干/祖細(xì)胞的表面標(biāo)志項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育

四造血細(xì)胞及生長發(fā)育（三）造血祖細(xì)胞和干細(xì)胞的主要區(qū)別①造血干細(xì)胞有高度自我更新能力和自我維持力，但不能增殖（擴(kuò)增）；祖細(xì)胞則有高度增殖（擴(kuò)增）力，（早期）部分地以至（晚期）全部喪失自我更新和自我維持力。②造血干細(xì)胞應(yīng)兼有向髓或淋巴兩大系分化的潛能，而造血祖細(xì)胞只能單一地向髓系或淋巴系分化。淋巴系祖細(xì)胞只分化為各淋巴亞系；髓系祖細(xì)胞則只分化為髓系的紅、粒、單、巨核等亞系。

項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論

所有血細(xì)胞均來源于造血干細(xì)胞，在經(jīng)歷了增殖、分化、成熟和釋放的過程后發(fā)育為具有特定功能的成熟階段細(xì)胞，釋放進(jìn)入外周血發(fā)揮作用。是一個連續(xù)的過程。HSC

variousseriesblastcellsImmaturecell

MaturecellHPC

四造血細(xì)胞及生長發(fā)育（四）血細(xì)胞生長發(fā)育

項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論造血干細(xì)胞階段：維持造血干細(xì)胞數(shù)量衡定；是分化為各系祖細(xì)胞的源泉。造血祖細(xì)胞階段：細(xì)胞數(shù)量放大的主要階段，對維持血細(xì)胞的數(shù)量起重要作用。原始及幼稚細(xì)胞階段：失去了自我更新能力和分化能力，在骨髓涂片中形態(tài)可以辨認(rèn)。

四造血細(xì)胞及生長發(fā)育項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論1.增殖血細(xì)胞通過分裂使其數(shù)量增加的現(xiàn)象。主要通過有絲分裂方式增殖，稱為“對稱性增殖”。2.分化血細(xì)胞在發(fā)育過程中失去某些潛能，轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂行鹿δ芗?xì)胞的過程，這一過程是不可逆的。四造血細(xì)胞及生長發(fā)育項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論3.成熟指細(xì)胞定向分化后通過增殖和演變，由原始細(xì)胞經(jīng)幼稚細(xì)胞到成熟細(xì)胞的全過程。四造血細(xì)胞及生長發(fā)育項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育

四造血細(xì)胞及生長發(fā)育4.釋放

成熟的終末細(xì)胞通過骨髓-血屏障進(jìn)入血循環(huán)的過程。

項(xiàng)目一：造血基礎(chǔ)理論簡介任務(wù)四造血細(xì)胞及生長發(fā)育第一章造血檢驗(yàn)的基礎(chǔ)理論各系血細(xì)胞分化發(fā)育階段及名稱謝謝聆聽單元一：造血細(xì)胞檢驗(yàn)項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)任務(wù)一、骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律任務(wù)二、粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)任務(wù)三、紅細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)任務(wù)四、淋巴細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)任務(wù)五、單核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)任務(wù)六、巨核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)任務(wù)七、漿細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)任務(wù)八、其他細(xì)胞系統(tǒng)形態(tài)特征檢驗(yàn)任務(wù)九、骨髓中類似細(xì)胞的鑒別目錄項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)1.掌握：血細(xì)胞的命名；血細(xì)胞發(fā)育成熟的形態(tài)演變規(guī)律；正常細(xì)胞形態(tài)學(xué)；骨髓檢查的主要臨床應(yīng)用；骨髓檢查的適應(yīng)癥與禁忌證；骨髓取材滿意的指標(biāo)；骨髓涂片檢查方法；骨髓增生程度的判斷標(biāo)準(zhǔn)；骨髓象檢查的注意事項(xiàng)；骨髓象的分析與報告；正常骨髓象；異常骨髓細(xì)胞形態(tài)變化特點(diǎn)及其意義。2.熟悉：骨髓涂片和染色；骨髓檢查的臨床應(yīng)用；骨髓象檢查質(zhì)量保證。3.了解：血涂片檢查及意義；血細(xì)胞檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用評價。4.學(xué)會：正確制作骨髓涂片，及檢查和分析骨髓象的方法學(xué)習(xí)目標(biāo)項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)任務(wù)一骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)任務(wù)一骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律一、骨髓細(xì)胞六大系統(tǒng)粒細(xì)胞系統(tǒng)紅細(xì)胞系統(tǒng)淋巴細(xì)胞系統(tǒng)漿細(xì)胞系統(tǒng)巨核細(xì)胞系統(tǒng)單核細(xì)胞系統(tǒng)364521任務(wù)一骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律一、骨髓細(xì)胞六大系統(tǒng)任務(wù)一骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律二、血細(xì)胞發(fā)育演變規(guī)律圖任務(wù)一骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律三、骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律血細(xì)胞從原始細(xì)胞逐漸發(fā)育為成熟細(xì)胞，具有一定的規(guī)律性。細(xì)胞體積

細(xì)胞核

細(xì)胞質(zhì)

核質(zhì)比

任務(wù)一骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律三、骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律（一）細(xì)胞體積

原始細(xì)胞隨著細(xì)胞的逐步成熟，其體積逐漸變小。但巨核細(xì)胞系例外，細(xì)胞由小變大；粒細(xì)胞中，早幼粒細(xì)胞比原始粒細(xì)胞略大。任務(wù)一骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律三、骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律

（二）細(xì)胞核

1.大小細(xì)胞核一般由大變小，但巨核細(xì)胞由小變大。

2.核形由圓形或卵圓形逐漸變?yōu)榘枷?甚至分葉（粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞），但淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞變化不明顯，成熟紅細(xì)胞核消失。3.核染色質(zhì)由疏松、細(xì)致到粗糙、緊密，并濃縮成塊，甚至脫核（紅系）4.核膜一般由不清楚到清楚。5.核仁由清晰到模糊，最后消失。核染色質(zhì)及核仁是衡量血細(xì)胞是否處于原始和幼稚階段的重要指標(biāo)之一。任務(wù)一骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律三、骨髓細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律

（三）細(xì)胞質(zhì)1.胞質(zhì)量由少逐漸增多，但淋巴細(xì)胞系例外。2.胞質(zhì)顏色從深藍(lán)色逐漸變成淡藍(lán)或淡紅色（粉紅色），淋巴細(xì)胞仍保持淡藍(lán)色（嗜堿性）。3.胞質(zhì)顆粒從無到有，由少到多。粒細(xì)胞系的顆粒由非特異性到特異性，可分為嗜酸性、嗜堿性、中性三種顆粒。紅細(xì)胞無顆粒。

（四）核質(zhì)比一般由大變小。任務(wù)二粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)任務(wù)二粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)一、粒細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律任務(wù)二粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)二、原始粒細(xì)胞1.胞體圓形或橢圓、直徑10—18μm，核圓居中或稍偏2.核染色質(zhì)細(xì)致、細(xì)顆粒狀、均勻、平坦，淡紫紅色3.核仁明顯、淡蘭色、2-5個，小、清晰4.胞漿中淡藍(lán)色、量少、無顆粒任務(wù)二粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)三、早幼粒細(xì)胞1.胞體較原始細(xì)胞大，圓形或橢圓，直徑12—20μm2.胞漿稍多，淡蘭色、有大小、數(shù)量形態(tài)不一的紫紅色3.核圓形或橢圓，常偏位，核附近有淡染區(qū)4.染色質(zhì)聚集，顆粒狀5.核仁模糊任務(wù)二粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)三、中幼粒細(xì)胞1.胞體圓形或橢圓性，直徑10-20μm2.核偏位，腎型或半圓型3.染色質(zhì)粗糙，凝聚，核仁消失。4.顆粒的特性劃分嗜酸性，嗜堿性，中性粒細(xì)胞，自中幼至晚幼、桿狀核、分葉核粒細(xì)胞的劃分，完全以細(xì)胞核的變化為依據(jù)。任務(wù)二粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)四、晚幼粒細(xì)胞1.胞體圓形或橢圓性2.直徑10-16μm3.胞核腎型，有凹陷，凹陷度在假設(shè)圓徑1/2，（小于1/2為中幼粒，大于1/2為桿狀核）任務(wù)二粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)五、中性桿狀核細(xì)胞1.胞體圓形或橢圓性2.直徑10-13μm3.胞核如桿狀、帶狀，胞核之凹陷度大于1/2，染色質(zhì)凝固塊狀任務(wù)二粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)六、中性分葉核細(xì)胞1.細(xì)胞直徑為10～14μm，圓形2.胞核分葉狀，2～5葉，葉與葉之間有細(xì)絲相連或完全斷開，核染色質(zhì)濃集呈較多小塊，染深紫紅色，副染色質(zhì)明顯3.胞質(zhì)豐富，呈淡紅色，漿內(nèi)充滿特異性顆粒任務(wù)二粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)七、嗜酸性中幼粒、晚幼粒、桿狀核、分葉核細(xì)胞任務(wù)二粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)八、嗜堿性中幼粒、晚幼粒、桿狀核細(xì)胞任務(wù)三紅細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)任務(wù)三紅細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)一、紅細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律任務(wù)三紅細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)二、原始紅細(xì)胞1.細(xì)胞圓形或橢圓形，直徑15—20μm2.胞漿深藍(lán)色，著色不均，邊緣著色深，核周淺染，無顆粒，有鈍偽足3.胞核圓形或橢圓形4.染色質(zhì)粗顆粒狀，深紫紅色，核仁不清楚，1-2個任務(wù)三紅細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)三、早幼紅細(xì)胞1.圓形，直徑1518μm2.核圓形，略偏位3.染色質(zhì)開始凝聚，核仁消失或不明顯4.胞漿量增多，藍(lán)色，核周明亮淡染區(qū)，無顆粒任務(wù)三紅細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)四、中幼紅細(xì)胞1.胞體圓形，直徑8—15μm2.核圓形，染色質(zhì)凝聚小塊直至碎墨塊狀，核周邊出現(xiàn)透亮的縫隙3.胞漿灰蘭色，淡蘭色，嗜多色性4.核、漿各占半任務(wù)三紅細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)五、晚幼紅細(xì)胞1.胞體呈圓形，直徑7-10μm2.胞核圓形，小于細(xì)胞的1/23.染色質(zhì)致密4.胞質(zhì)量多，染淺灰或淡紅任務(wù)三紅細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)六、認(rèn)一認(rèn)任務(wù)四淋巴細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)一、淋巴細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律任務(wù)四淋巴細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)任務(wù)四淋巴細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)二、原始淋巴細(xì)胞1.圓形或橢圓形，直徑10-18μm2.胞核居中，略偏位，3.染色質(zhì)呈顆粒狀，深紫紅色4.核仁1-2個，小，清晰5.胞漿極少，邊緣整齊，天蘭色，透亮，無顆粒任務(wù)四淋巴細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)三、幼稚淋巴細(xì)胞1.圓形或橢圓形，直徑10-16μm；2.胞漿稍多，淡蘭色，透明，偶有少許嗜天青顆粒3.胞核圓形或橢圓形，4.染色質(zhì)粗糙、緊密，深紫紅色，5.核仁模糊或消失任務(wù)四淋巴細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)四、淋巴細(xì)胞1.小淋巴細(xì)胞直徑6-9μm；胞漿量少，蘭色，透亮，可有少許嗜天青顆粒；胞核橢圓形、腎形、偏位；染色質(zhì):致密、塊狀2.大淋巴細(xì)胞直徑12-15μm；胞漿量多，透亮，可有少許嗜天青顆粒任務(wù)五單核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)一、單核細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律任務(wù)五單核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)二、原始單核細(xì)胞任務(wù)五單核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.外形圓形或橢圓形，直徑15-20μm2.胞核不規(guī)則，有折疊扭曲3.染色質(zhì)纖細(xì)網(wǎng)狀，淺紫紅色，淡薄4.核仁大，清晰，1-3個5.胞漿灰蘭色，淺蘭色，似毛玻璃，不透亮，有偽足，無顆粒三、幼稚單核細(xì)胞任務(wù)五單核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.外形圓形或不規(guī)則形，直徑15-25μm2.胞核不規(guī)則，偏位3.染色質(zhì)纖細(xì)有凝聚，或絲網(wǎng)狀4.核仁可有可無5.胞漿量多，灰蘭色，許多細(xì)小灰塵狀嗜天青顆粒四、單核細(xì)胞任務(wù)五單核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.外形圓形或不規(guī)則形，直徑12-20μm2.胞漿量多，灰蘭色，邊緣不規(guī)則，許多細(xì)小灰塵狀嗜天青顆粒3.胞核不規(guī)則，4.染色質(zhì)疏松，網(wǎng)狀5.無核仁任務(wù)六巨核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)一、巨核細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律任務(wù)六巨核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)二、原始巨核細(xì)胞任務(wù)六巨核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.胞體圓形或不規(guī)則形，大，直徑15-30μm2.胞漿量少，邊緣常不規(guī)則，有皺褶狀突起，深藍(lán)色，不透明，無顆粒3.胞核形狀不定，圓形或橢圓形多見4.染色質(zhì)粗糙顆粒狀，排列緊密，暗深紫紅色。5.核仁2-3個，不清晰三、幼稚巨核細(xì)胞任務(wù)六巨核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.胞體圓形或不規(guī)則形增大，30-50μm2.胞漿增多，常有偽足。藍(lán)色或淺藍(lán)色，近核處染色變淡，有嗜天青顆粒3.胞核多形性，不規(guī)則4.染色質(zhì)粗糙，開始凝聚5.核仁不清或無四、顆粒型巨核細(xì)胞任務(wù)六巨核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.外形不規(guī)則，40-70um2.胞漿多，粉紅色，云霧狀，有紫紅色小顆粒3.胞核形狀不規(guī)則4.染色質(zhì)粗糙，凝聚，呈塊狀或條索狀五、產(chǎn)小板型巨核細(xì)胞任務(wù)六巨核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.胞漿內(nèi)或周邊有血小板雛形六、裸核型巨核細(xì)胞任務(wù)六巨核細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.無胞漿任務(wù)七漿細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)一、漿細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律任務(wù)七漿細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)二、原始漿細(xì)胞任務(wù)七漿細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.胞體圓形或橢圓形14-18μm2.胞漿較多，深藍(lán)或灰蘭色，近核處有一半圓形透明區(qū)，無顆粒3.染色質(zhì)粗顆粒網(wǎng)狀，紫紅色4.胞核偏位，圓形或橢圓形5.核仁2-5個三、幼稚漿細(xì)胞任務(wù)七漿細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.胞體12-16μm，多為橢圓形2.胞漿量多，灰蘭色，近核處有一半圓形透明區(qū)，有時有少許紫紅色小顆粒或空泡3.染色質(zhì)開始凝聚，較粗密，深紫紅4.核仁模糊或消失5.胞核圓形或橢圓形，偏位四、漿細(xì)胞任務(wù)七漿細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.胞體橢圓形或不規(guī)則形，直徑8-15μm2.胞漿豐富，灰蘭色，泡沫感，常有空泡，邊緣可有刺狀突起，近核處有半圓形淡染區(qū)3.染色質(zhì)粗凝塊4.胞核圓形，明顯偏位任務(wù)八其他細(xì)胞系統(tǒng)形態(tài)特征檢驗(yàn)項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)一、組織嗜堿細(xì)胞任務(wù)八其它細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.外形細(xì)胞黑紫色塊，不規(guī)則形、直徑15-30μm2.胞漿充滿圓形、大小相同、紫色或淡紫色嗜堿顆粒，多覆蓋核上3.胞核不易辨認(rèn)二、內(nèi)皮細(xì)胞任務(wù)八其它細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.細(xì)胞直徑為25～30μm，不規(guī)則，多見長尾形、梭形。胞核圓形、橢圓形或不規(guī)則2.核染色質(zhì)呈網(wǎng)狀，多無核仁3.胞質(zhì)較少，分布于細(xì)胞一端或兩端，呈淡藍(lán)色或淡紅色，可有細(xì)小的紫紅色顆粒三、纖維細(xì)胞任務(wù)八其它細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.骨髓中最大的多核細(xì)胞之一，此種細(xì)胞非常黏稠，涂片時常被拉成一長條狀2.其胞體大，常不規(guī)則，多為長尾形，長軸直徑可達(dá)200μm以上3.常有多個至數(shù)十個、大小形態(tài)相同的圓形或橢圓形胞核4.核染色質(zhì)細(xì)或粗顆粒網(wǎng)狀；核仁1～2個5.胞質(zhì)極豐富，呈淡藍(lán)色，多分布于細(xì)胞兩端，胞質(zhì)內(nèi)含纖維網(wǎng)狀物、淺紅色顆粒及少許嗜天青顆粒四、成骨細(xì)胞任務(wù)八其它細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.數(shù)個或成堆出現(xiàn)，或單個出現(xiàn)2.胞體橢圓形，直徑20-40μm3.胞漿量多，藍(lán)灰色，不均勻，泡沫狀，距核遠(yuǎn)處有淡染區(qū)，可有少許紫紅色嗜天青顆粒4.胞核圓形，偏一側(cè)5.染色質(zhì)深紫紅色，粗糙網(wǎng)狀6.核仁小，1-3個五、組織細(xì)胞任務(wù)八其它細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.形態(tài)多樣性，周邊不整，撕紙狀，25-50μm2.胞核圓形、橢圓形3.染色質(zhì)紫紅色粗網(wǎng)狀4.核仁可有可無5.胞漿豐富，灰藍(lán)或淡蘭色嗜天青顆粒，或有空泡六、吞噬細(xì)胞任務(wù)八其它細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.形態(tài)極不一致2.胞核圓形、橢圓形，不規(guī)則形3.染色質(zhì)疏松4.核仁可有可無5.胞漿多少不一，灰藍(lán)或淡蘭色，常有空泡，吞噬物七、破骨細(xì)胞任務(wù)八其它細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.骨髓中最大多核細(xì)胞，60－100um2.胞體多不規(guī)則，周邊不整齊，如撕紙狀3.胞漿豐富，淡藍(lán)、灰蘭色，胞漿中粗大不均、分布不均的嗜天青顆粒4.胞核核3-100個，圓形或橢圓形，每個核1-2個核仁5.染色質(zhì)粗網(wǎng)狀八、組織細(xì)胞任務(wù)八其它細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.組織細(xì)胞攝取脂肪滴形成2.胞體直徑30-50um，圓形或橢圓形，邊緣不整齊3.胞漿充滿大量大小不一的脂肪空泡4.胞核較小，形狀不規(guī)則，常被擠在一邊5.染色質(zhì)致密網(wǎng)狀，無核仁九、退化細(xì)胞任務(wù)八其它細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)1.結(jié)構(gòu)不清,細(xì)胞膜不完整十、Ferrata細(xì)胞任務(wù)八其它細(xì)胞系統(tǒng)各階段形態(tài)特征檢驗(yàn)任務(wù)九骨髓中類似細(xì)胞鑒別項(xiàng)目二：骨髓細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)任務(wù)九骨髓中類似細(xì)胞鑒別一、原始粒細(xì)胞與原始紅細(xì)胞鑒別原始粒細(xì)胞原始紅細(xì)胞胞體10～18微米15～20微米，可見瘤狀突起胞漿透明，天藍(lán)色不透名，深藍(lán)色，有油畫感，核周有淡染區(qū)染色質(zhì)細(xì)砂粒狀，均勻平坦如薄紗粗顆粒狀，不均勻核膜不清楚清楚核仁2～5個，較小，清晰1～2個，較大，界限不清任務(wù)九骨髓中類似細(xì)胞鑒別二、單核細(xì)胞與中性中幼粒細(xì)胞鑒別單核細(xì)胞中性中幼粒細(xì)胞胞體圓形或不規(guī)則型，可見偽足圓形，規(guī)則胞漿灰藍(lán)，半透明，含無數(shù)散在粉塵樣嗜天青顆粒，有時可見空泡淡紅或淡藍(lán)，透明，含中等量、大小較一致的特異性中性顆粒胞核不規(guī)則，可呈腎形、馬蹄形、S形或分葉形，有名顯得扭曲、折疊橢圓或一側(cè)開始扁平，可出現(xiàn)凹陷染色質(zhì)粗網(wǎng)狀，疏松聚集成索塊任務(wù)九骨髓中類似細(xì)胞鑒別三、中幼紅細(xì)胞、漿細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的鑒別中幼紅細(xì)胞漿細(xì)胞淋巴細(xì)胞胞體圓形橢圓形圓形胞漿嗜多色性，不透明，無顆粒藍(lán)色，不透明有泡沫感，有時可見紅色鑲邊，邊緣不規(guī)則，近核處有淡染區(qū)，常有空泡，可見顆粒天藍(lán)色，透明，有核周淡染區(qū)，可見顆粒胞核圓形，居中圓形或橢圓形，常偏位圓形，常偏一側(cè)，有切跡染色質(zhì)粗密成塊，如打碎的墨硯，中間有明顯空隙，無色澤極粗密，凝成大塊，似車輪狀，中間有明顯空隙，有色澤呈大塊狀，塊與塊之間無明顯界限，有均勻光滑感謝謝聆聽單元一：造血細(xì)胞檢驗(yàn)項(xiàng)目三：骨髓象檢查任務(wù)一骨髓標(biāo)本采集目錄項(xiàng)目三：骨髓象檢查任務(wù)二骨髓涂片、固定、染色任務(wù)三骨髓細(xì)胞學(xué)檢查步驟任務(wù)四正常骨髓象任務(wù)五骨髓象分析項(xiàng)目三：骨髓象檢查任務(wù)一骨髓標(biāo)本采集

項(xiàng)目三：骨髓象檢查適應(yīng)癥

1.原因不明的外周血細(xì)胞數(shù)量和形態(tài)異常；2.不明原因的發(fā)熱、肝、脾、淋巴結(jié)腫大等；3.不明原因的胸骨壓痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、黃疸、紫癜、血沉明顯增；加及疑似骨髓轉(zhuǎn)移瘤和異常蛋白血癥等；4.血液病定期復(fù)查及化療后的療效觀察；5.其他：骨髓活檢、骨髓細(xì)胞表面抗原（CD）測定、造血干/祖細(xì)胞培養(yǎng)、血細(xì)胞染色體核型分析、微生物培養(yǎng)、寄生蟲檢查等。禁忌癥 1.由于凝血因子嚴(yán)重缺陷引起的出血性疾??；2.晚期妊娠婦女；3.小兒及不合作者。任務(wù)一：骨髓標(biāo)本采集一、骨髓象檢查的適應(yīng)癥和禁忌癥選擇標(biāo)準(zhǔn)：骨髓腔中紅骨髓豐富穿刺部位應(yīng)淺表、易定位應(yīng)避開重要臟器臨床上成人首選的穿刺部位是髂骨后上棘必要時應(yīng)多部位取材，以便全面料及骨髓的造血情況。任務(wù)一：骨髓標(biāo)本采集二、骨髓的采集部位骨髓標(biāo)本采集常見穿刺部位的特點(diǎn)穿刺部位特點(diǎn)髂后上棘此部位骨質(zhì)薄，進(jìn)針容易，骨髓液豐富，被血液稀釋的可能性小，故髂后上棘為臨床首選的穿刺部位。髂前上棘此部位骨質(zhì)硬、骨髓腔小，易導(dǎo)致穿刺失敗，所以髂前上棘常用于翻身困難、需要多部位穿刺等患者。胸骨胸骨是人體骨髓造血功能最旺盛的部位，但胸骨后有重要臟器，故臨床上不常用。當(dāng)其他常規(guī)部位穿刺取材不佳時，可考慮胸骨穿刺，但必須由操作經(jīng)驗(yàn)豐富的人員來做。其他部位2歲以下的患者還可以選擇脛骨粗隆內(nèi)側(cè)。其他還包括腰椎棘突穿刺、定位穿刺。定位穿刺臨床上常用于骨髓轉(zhuǎn)移癌、漿細(xì)胞瘤等。任務(wù)一：骨髓標(biāo)本采集穿刺操作步驟及注意事項(xiàng)：（詳見技術(shù)操作視頻）骨髓取材情況的判斷：取材情況特點(diǎn)取材滿意①抽吸骨髓液的瞬間患者有特殊的酸痛感；②骨髓液中有較多的骨髓小粒和脂肪滴；③顯微鏡檢查可見骨髓特有細(xì)胞，如幼稚細(xì)胞、巨核細(xì)胞、漿細(xì)胞、破骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肥大細(xì)胞；④骨髓中中性桿狀核粒細(xì)胞與分葉核粒細(xì)胞比值大于外周血二者比值；⑤骨髓液抽取應(yīng)小于0.2ml，否則易于稀釋。骨髓部分稀釋抽吸骨髓液時混入部分血液，稱為骨髓部分稀釋。特征為：①骨髓小粒、脂肪滴少或不見；②有核細(xì)胞和骨髓特有細(xì)胞少；③成熟細(xì)胞/幼稚細(xì)胞＞3/5。骨髓完全稀釋抽出的骨髓液與外周血的細(xì)胞成分完全一樣，稱為骨髓完全稀釋。肉眼觀，骨髓液較稀薄、無黃色小粒，骨髓推片尾部無骨髓小粒。任務(wù)一：骨髓標(biāo)本采集干抽：是指非技術(shù)原因多次、多部位穿刺均抽不出骨髓液或僅抽出少量血液的情況。常見于：①原發(fā)性或繼發(fā)性骨髓纖維化；②骨髓極度增生，細(xì)胞排列過于緊密結(jié)實(shí)，如白血病、真性紅細(xì)胞增多癥等；③骨髓增生減低；④腫瘤浸潤骨髓，包括惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓轉(zhuǎn)移癌。如在針頭中發(fā)現(xiàn)有少量骨髓組織時，可用針芯將其推出，制作1張涂片供檢查。如骨髓纖維化患者必須作骨髓活檢。任務(wù)一：骨髓標(biāo)本采集任務(wù)二骨髓涂片、固定、染色

項(xiàng)目三：骨髓象檢查骨髓涂片的方法：骨髓涂片的制備方法與血涂片基本相同，但由于骨髓液中含有骨髓小粒和脂肪滴、有核細(xì)胞數(shù)量多、較血液粘稠，推片時角度要略小，速度要慢，防止涂片過厚，影響細(xì)胞形態(tài)觀察。骨髓涂片固定：涂片后要迅速揮干固定，防止細(xì)胞變形。骨髓涂片染色：目前我國各臨床實(shí)驗(yàn)室多采用瑞氏（Wright）染色或瑞-姬混合染色。任務(wù)二：骨髓涂片、固定、染色一、骨髓涂片任務(wù)三骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容

項(xiàng)目三：骨髓象檢查骨髓涂片檢查骨髓細(xì)胞學(xué)檢查內(nèi)容標(biāo)本保存及資料存檔血涂片檢查填寫骨髓報告單1234任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容選擇骨髓小粒較多、涂片制備及染色良好的骨髓涂片在顯微鏡下觀察。先用低倍鏡觀察全片，選擇合適的觀察區(qū)域后，再用油鏡觀察，以獲得全面、正確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。低倍鏡下觀察：觀察骨髓涂片的整體情況：包括取材、涂片及染色。合格的骨髓涂片中可見骨髓小粒，紅細(xì)胞呈粉紅色，白細(xì)胞核染紫紅色，胞質(zhì)染色鮮艷，細(xì)胞形態(tài)清晰、無變形。若取材不好、涂片過厚、染色不佳，可另選涂片或重新取材。任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容一、骨髓涂片的檢查判斷骨髓增生程度：骨髓中有核細(xì)胞的多少可以反映出骨髓增生程度。根據(jù)有核細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞的比例確定骨髓的增生程度。分級 有核細(xì)胞有核細(xì)胞數(shù) 臨床意義 紅細(xì)胞一個高倍鏡視野 增生極度活躍1：1＞100各種白血病增生明顯活躍1：1050～100各種白血病、增生性貧血增生活躍1：2020～50正常人、貧血增生減低1：505～10造血功能低下、部分稀釋*增生極度減低1：200＜5再生障礙性貧血、完全稀釋任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容一、骨髓涂片的檢查增生極度活躍增生明顯活躍增生活躍增生減低增生極度減低任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容一、骨髓涂片的檢查

巨核細(xì)胞計(jì)數(shù)并分類由于巨核細(xì)胞胞體大、全片數(shù)量少（在尾部和邊緣較多），故巨核細(xì)胞計(jì)數(shù)一般在低倍鏡下進(jìn)行如巨核細(xì)胞需要進(jìn)行分類則在在高倍鏡或油鏡下進(jìn)行骨髓涂片標(biāo)準(zhǔn)化為1.5cm×3.0cm時，參考區(qū)間為7～35個異常細(xì)胞的篩查：觀察全片有無體積較大或成堆分布的異常細(xì)胞（尤其要注意觀察涂片的尾部、邊緣或骨髓小粒周圍）。如骨髓轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞、惡性淋巴瘤細(xì)胞、戈謝細(xì)胞、尼曼-匹克細(xì)胞等。發(fā)現(xiàn)可疑細(xì)胞時需在油鏡下確認(rèn)，這對相關(guān)疾病的明確診斷具有重要意義。任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容一、骨髓涂片的檢查油鏡下觀察：在低倍鏡觀察的基礎(chǔ)上，選擇較滿意的骨髓涂片及相應(yīng)的部位，轉(zhuǎn)為油鏡開始有序觀察，分類計(jì)數(shù)200~500和有核細(xì)胞。（1）觀察細(xì)胞形態(tài)：先在油鏡檢查區(qū)域內(nèi)仔細(xì)觀察骨髓各系細(xì)胞的增生程度、形態(tài)、大致比例等，得出骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的初步印象，然后再進(jìn)行有核細(xì)胞的分類計(jì)數(shù)。任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容一、骨髓涂片的檢查（2）有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)項(xiàng)目要求計(jì)數(shù)部位選擇厚薄均勻、細(xì)胞結(jié)構(gòu)清楚、紅細(xì)胞呈淡紅色、背景干凈的區(qū)域進(jìn)行分類計(jì)數(shù)，一般在體尾交界處計(jì)數(shù)秩序按一定順序計(jì)數(shù)，防止出現(xiàn)視野重復(fù)或遺漏現(xiàn)象計(jì)數(shù)細(xì)胞所有有核細(xì)胞，但不包括破碎細(xì)胞、有絲分裂細(xì)胞和巨核細(xì)胞計(jì)數(shù)數(shù)目一般計(jì)數(shù)200個有核細(xì)胞。WHO推薦計(jì)數(shù)500個有核細(xì)胞；增生極度減低者可計(jì)數(shù)100個有核細(xì)胞。任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容一、骨髓涂片的檢查（3）結(jié)果計(jì)算計(jì)算各系細(xì)胞和各階段細(xì)胞占有核細(xì)胞總數(shù)的百分比。一般情況下，百分比是指有核細(xì)胞的百分比（ANC）。某些白血病，還要計(jì)算非紅系細(xì)胞百分比（NEC），NEC是指去除有核紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞外的有核細(xì)胞百分比。計(jì)算粒紅比值（G/E）：所謂粒紅比值是指各階段粒細(xì)胞（包括中性、嗜酸性、嗜堿性粒細(xì)胞）百分率總和與各階段有核紅細(xì)胞百分率總和之比，反應(yīng)了粒系和紅系的相對數(shù)量關(guān)系，正常人粒紅比值約為2～4：1。計(jì)算各階段巨核細(xì)胞百分比或各階段巨核細(xì)胞的個數(shù)。任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容一、骨髓涂片的檢查1.檢查內(nèi)容（1）白細(xì)胞形態(tài)及各階段的比值。（2）成熟紅細(xì)胞的形態(tài)有無異常。（3）估計(jì)血小板的數(shù)量并觀察其形態(tài)有無異常。（4）有無寄生蟲等異常情況。任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容二、血涂片的檢查2.檢查意義（血象和骨髓象結(jié)合對疾病的診斷和鑒別診斷的意義）（1）骨髓象相似而血象有區(qū)別：如缺鐵性貧血、溶血性貧血和急性失血的骨髓象相似，均以紅細(xì)胞系統(tǒng)增生為主，但血象有區(qū)別。（2）骨髓象變化不顯著而血象顯著異常：如傳單，其骨髓中的異型淋巴細(xì)胞少見，而血象中異型淋巴細(xì)胞常大于20%。（3）骨髓象有區(qū)別而血象相似：如傳單和慢淋的血象均以小淋巴細(xì)胞增多為主，但前者骨髓象中淋巴細(xì)胞稍增多，后者明顯增多。（4）骨髓象有顯著異常而血象變化不顯著：如多發(fā)性骨髓瘤、戈謝病、尼曼-匹克病，骨髓中分別見到特異性骨髓瘤細(xì)胞、戈謝細(xì)胞、尼曼-匹克細(xì)胞，但血象很少見到。（5）血象中細(xì)胞比骨髓中的細(xì)胞更成熟：血象中的血細(xì)胞來源于骨髓，因此白血病時，血象中所看到的白血病細(xì)胞較骨髓中的白血病細(xì)胞稍成熟、形態(tài)更容易辨認(rèn)，結(jié)合血象檢驗(yàn)結(jié)果可輔助白血病類型的判斷。任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容二、血涂片的檢查填寫的主要內(nèi)容患者的基本信息填寫取材、涂片、染色情況計(jì)數(shù)及計(jì)算結(jié)果骨髓特征描述血涂片形態(tài)描述細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果填寫診斷意見及建議包括患者姓名、性別、年齡、科室、骨髓涂片編號、穿刺部位、穿刺時間及臨床診斷等?？刹捎昧己?、尚可、欠佳三級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評價。填寫血涂片分類計(jì)數(shù)結(jié)果和骨髓涂片中各階段細(xì)胞百分比、骨髓增生程度及粒紅比值等。①粒、紅兩系主要說明其增生情況、成熟情況（如各階段細(xì)胞比例是否正常、是否有成熟障礙等）、細(xì)胞形態(tài)有無異常（必要時要對細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行描述）、成熟紅細(xì)胞形態(tài)。②其他系統(tǒng)的細(xì)胞如有明顯異?；蚋淖儯惨窳?、紅兩系一樣進(jìn)行詳細(xì)描述。③報告巨核細(xì)胞的計(jì)數(shù)和分類結(jié)果，血小板的分布情況及形態(tài)。④如見到特殊細(xì)胞和寄生蟲也必須報告。①有核細(xì)胞形態(tài)有無異常及有無幼稚細(xì)胞。②紅細(xì)胞形態(tài)有無異常。③血小板數(shù)量及分布有無異常。④有無寄生蟲及其他異常細(xì)胞。對每項(xiàng)細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果進(jìn)行逐一描述，主要描述陽性率、陽性指數(shù)或陽性細(xì)胞的分布情況等根據(jù)骨髓象、血象、細(xì)胞化學(xué)染色所見，結(jié)合臨床資料填寫診斷意見或建議。對已明確診斷的疾病，要與以前骨髓涂片的結(jié)果比較，提出完全緩解、部分緩解、改善、退步、復(fù)發(fā)等意見。任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容三、骨髓檢查報告單的填寫任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容三、骨髓報告單的填寫1.登記檢查完畢后，骨髓涂片要立即登記、編號（按年度連續(xù)編號）。應(yīng)用計(jì)算機(jī)報告、保存骨髓細(xì)胞學(xué)檢測結(jié)果，便于信息的長期保存及隨時調(diào)用。2.保存用乙醚乙醇混合液（4：1）將骨髓涂片、血涂片及細(xì)胞化學(xué)染色的涂片擦凈，貼上標(biāo)簽，裝入特制的標(biāo)本袋中，按年度順序放置、保存。骨髓檢查申請單、報告單，存檔至少5年，以備復(fù)查、總結(jié)、研究及教學(xué)使用。任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容四、標(biāo)本保存及資料存檔任務(wù)三：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法及內(nèi)容骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查流程圖任務(wù)四正常骨髓象特征

項(xiàng)目三：骨髓象檢查正常骨髓象應(yīng)具備以下4個特征：1.有核細(xì)胞增生活躍2.各系、各階段細(xì)胞占有核細(xì)胞的比例在正常參考范圍內(nèi)3.各系、各階段細(xì)胞形態(tài)無明顯異常4.無特殊病理細(xì)胞及血液寄生蟲任務(wù)四：正常骨髓象特征骨髓象特征骨髓增生程度增生活躍粒紅比值2～4：1粒細(xì)胞系統(tǒng)占40%～60%，其中原始粒細(xì)胞＜2%，早幼粒細(xì)胞＜5%，中性中幼粒細(xì)胞約8%，中性晚幼粒細(xì)胞約10%，中性桿狀核粒細(xì)胞約20%，中性分葉核粒細(xì)胞約12%，嗜酸性粒細(xì)胞＜5%，嗜堿性粒細(xì)胞＜1%紅細(xì)胞系統(tǒng)占15%～25%，以中、晚幼紅細(xì)胞為主（各占1O%），原始紅細(xì)胞＜1%，早幼紅細(xì)胞＜5%淋巴細(xì)胞系統(tǒng)占20%～25%，大多為成熟淋巴細(xì)胞，原始淋巴細(xì)胞罕見，幼稚淋巴細(xì)胞偶見單核細(xì)胞系統(tǒng)＜4%，均為單核細(xì)胞，原始單核細(xì)胞罕見，幼稚單核細(xì)胞偶見漿細(xì)胞系統(tǒng)＜2%，均為漿細(xì)胞，原始漿細(xì)胞罕見，幼稚漿細(xì)胞偶見巨核細(xì)胞系統(tǒng)在1.5cm×3cm的骨髓涂膜上，可見巨核細(xì)胞7～35個，其中原始巨核細(xì)胞不見或偶見，幼稚巨核細(xì)胞占0%～10%，顆粒型巨核細(xì)胞占10%～50%，產(chǎn)血小板型巨核細(xì)胞占20%～70%，裸核型巨核細(xì)胞占0%～30%。血小板較易見，成堆存在其他細(xì)胞如組織細(xì)胞、成骨細(xì)胞、吞噬細(xì)胞等偶見，分裂象細(xì)胞少見，寄生蟲和異常細(xì)胞不見細(xì)胞形態(tài)紅細(xì)胞、血小板及各種有核細(xì)胞形態(tài)正常任務(wù)四：正常骨髓象特征任務(wù)五骨髓象分析

項(xiàng)目三：骨髓象檢查骨髓象綜合分析骨髓細(xì)胞增生程度骨髓細(xì)胞計(jì)數(shù)粒紅細(xì)胞比值得出的最后的骨髓象報告單及診斷結(jié)論任務(wù)五：骨髓象分析任務(wù)五：骨髓象分析一、骨髓細(xì)胞增生程度分析1.粒紅比值增加見于粒系增多或紅系減少的疾病，如粒細(xì)胞白血病、類白血病反應(yīng)、純紅細(xì)胞再生障礙性貧血等。2.粒紅比值正常見于粒、紅細(xì)胞比例正常，或兩系細(xì)胞同時增加或減少的疾病，如正常人骨髓、多發(fā)性骨髓瘤、再生障礙性貧血、傳染性單核細(xì)胞增多癥、特發(fā)性血小板減少性紫癜、骨髓纖維化等。3.粒紅比值降低見于粒系減少或紅系增多的疾病，如粒細(xì)胞減少癥、粒細(xì)胞缺乏癥、缺鐵性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、紅白血病、真紅細(xì)胞增多癥、急性失血性貧血等。任務(wù)五：骨髓象分析二、粒紅比值分析1.粒系細(xì)胞數(shù)量的改變（1）粒細(xì)胞增多：①以原始粒細(xì)胞增多為主：多見于急粒、慢粒急變期、急性粒單核細(xì)胞白血病。②以早幼粒細(xì)胞增多為主：多見于急性早幼粒細(xì)胞白血病、粒細(xì)胞缺乏癥恢復(fù)期、早幼粒細(xì)胞型白血病反應(yīng)等。③以中性中幼粒細(xì)胞增多為主：多見于急粒M2b型、慢粒、粒細(xì)胞型白血病反應(yīng)等。④以中性晚幼粒細(xì)胞、桿狀核粒細(xì)胞增多為主：多見于慢粒、粒細(xì)胞型類白血病反應(yīng)、藥物中毒、嚴(yán)重?zé)齻?、急性失血、大手術(shù)后等。⑤嗜酸性粒細(xì)胞增多：多見于變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲感染、嗜酸性粒細(xì)胞白血病、慢粒、惡性淋巴瘤、高嗜酸性粒細(xì)胞綜合征等。⑥嗜堿性粒細(xì)胞增多：多見于慢粒、嗜堿性粒細(xì)胞白血病、放射線照射反應(yīng)等。（2）粒細(xì)胞減少：見于粒細(xì)胞缺乏癥、再生障礙性貧血、急性造血停滯等。任務(wù)五：骨髓象分析三、細(xì)胞數(shù)量的分析2.紅系細(xì)胞數(shù)量的改變（1）有核紅細(xì)胞增多：①以原紅和早幼紅細(xì)胞增多為主：見于急性紅血病、急性紅白血病。②以中幼紅細(xì)胞和晚幼紅細(xì)胞增多為主：見于溶血性貧血、缺鐵性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、急性失血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜（急性期）、真性紅細(xì)胞增多癥、鉛中毒、紅白血病等。③巨幼紅細(xì)胞或巨幼樣變紅細(xì)胞增多：見于巨幼細(xì)胞性貧血、急性紅血病、急性紅白血病、骨髓增生異常綜合征、白血病化療后、鐵粒幼細(xì)胞性貧血等。④鐵粒幼紅細(xì)胞增多：見于鐵粒幼細(xì)胞性貧血、骨髓增生異常綜合征等。（2）有核紅細(xì)胞減少：純紅細(xì)胞再生障礙性貧血、急性粒細(xì)胞白血病未分化型、急性單核細(xì)胞白血病未分化型、慢性粒細(xì)胞白血病、化療后等。任務(wù)五：骨髓象分析三、細(xì)胞數(shù)量的分析3.巨核細(xì)胞系細(xì)胞數(shù)量的改變（1）巨核細(xì)胞增多：骨髓增殖性疾病、急性巨核細(xì)胞白血病、全髓白血病、特發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進(jìn)、急性大出血、急性血管內(nèi)溶血等。（2）巨核細(xì)胞減少：再生障礙性貧血、急性白血病、慢性中性粒細(xì)胞白血病、化療后等。4.單核細(xì)胞系細(xì)胞數(shù)量的改變急性單核細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞白血病急單變、急性粒單核細(xì)胞白血病等。任務(wù)五：骨髓象分析三、細(xì)胞數(shù)量的分析5.淋巴系細(xì)胞數(shù)量的改變（1）以原始及幼稚淋巴細(xì)胞增多：見于急性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤白血病、慢性粒細(xì)胞白血病急淋變、淋巴瘤白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病急性變等。（2）以成熟淋巴細(xì)胞增多為主：慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤白血病、再生障礙性貧血、淋巴細(xì)胞型類白血病反應(yīng)、傳染性淋巴細(xì)胞增多癥、傳染性單核細(xì)胞增多癥、某些病毒感染、巨球蛋白血癥淀粉樣變等。6.其他血細(xì)胞數(shù)量改變（1）漿細(xì)胞增多：見于多發(fā)性骨髓瘤、漿細(xì)胞白血病、再生障礙性貧血、過敏性疾病、結(jié)締組織病、惡性淋巴瘤、急性單核細(xì)胞白血病、肝硬化、巨球蛋白血癥、寄生蟲感染、粒細(xì)胞缺乏癥、慢性細(xì)菌性感染等。（2）組織細(xì)胞增多：見于惡性組織細(xì)胞病、感染性疾病、惡性貧血、真性紅細(xì)胞增多癥、多發(fā)性骨髓瘤、特發(fā)性血小板減少性紫癜等。任務(wù)五：骨髓象分析三、細(xì)胞數(shù)量的分析骨髓象檢查質(zhì)量評價：血細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性取決于三個方面：血液學(xué)檢驗(yàn)人員的操作技能標(biāo)本與試劑的質(zhì)量血液學(xué)檢驗(yàn)人員的臨床診斷水平任務(wù)五：骨髓象分析謝謝聆聽單元一：造血細(xì)胞檢驗(yàn)項(xiàng)目四：細(xì)胞化學(xué)染色任務(wù)一細(xì)胞化學(xué)染色基本理論目錄項(xiàng)目四：細(xì)胞化學(xué)染色任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)項(xiàng)目四：細(xì)胞化學(xué)染色1.掌握：細(xì)胞化學(xué)染色的基本步驟；過氧化物酶染色、過碘酸-雪夫染色、酯酶染色、酸性磷酸酶染色、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色、鐵染色的檢測方法、結(jié)果分析和臨床意義。2.熟悉：細(xì)胞化學(xué)染色的概念；各種常用細(xì)胞化學(xué)染色的原理及注意事項(xiàng)。3.了解：細(xì)胞的生理狀態(tài)、功能和細(xì)胞化學(xué)染色的影響因素。4.具備細(xì)胞化學(xué)染色標(biāo)本采集和處理能力，具有過氧化物酶染色、過碘酸-雪夫染色、酯酶染色、酸性磷酸酶染色、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色、鐵染色的檢測能力。5.學(xué)會依據(jù)細(xì)胞學(xué)異常和臨床要求有選擇性進(jìn)行細(xì)胞化學(xué)染色，并能根據(jù)染色結(jié)果輔助分析判斷白血病類型。學(xué)習(xí)目標(biāo)項(xiàng)目四：細(xì)胞化學(xué)染色任務(wù)一細(xì)胞化學(xué)染色基本理論細(xì)胞化學(xué)染色是細(xì)胞學(xué)和化學(xué)相結(jié)合而形成的一門科學(xué)，是以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運(yùn)用化學(xué)反應(yīng)的原理對血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)成分(如酶類、酯類、鐵、蛋白質(zhì)、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。細(xì)胞化學(xué)染色主要用于：1.輔助判斷急性白血病的細(xì)胞類型。2.輔助血液系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷，如鐵染色。3.觀察疾病的療效和預(yù)后。4.發(fā)病機(jī)制的探討。一、細(xì)胞化學(xué)染色定義與臨床應(yīng)用任務(wù)一細(xì)胞化學(xué)染色基本理論固定顯示復(fù)染固定物理法干燥固定火焰固定化學(xué)法蒸汽固定液體固定顯示聯(lián)苯胺法偶氮偶聯(lián)法雪夫反應(yīng)普魯士藍(lán)反應(yīng)金屬沉淀法復(fù)染目的是使各種細(xì)胞能顯示出來以便于觀察。選擇復(fù)染液的顏色應(yīng)與有色沉淀的顏色有明顯的對比度，即能使細(xì)胞結(jié)構(gòu)顯示又能清楚地看出細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果。細(xì)胞化學(xué)染色步驟：二、細(xì)胞化學(xué)染色步驟任務(wù)一細(xì)胞化學(xué)染色基本理論粗略估量以染色反應(yīng)的強(qiáng)弱，受色的深淺，人為地區(qū)別為陰性和各種程度的陽性。百分法只能反映細(xì)胞陽性率，不能反映受色強(qiáng)弱。積分法是常用的半定量法，將前述的等級估量與百分率相結(jié)合（計(jì)算方法見堿性磷酸酶染色），它既反映了細(xì)胞陽性率的高低，又反映了細(xì)胞受色的強(qiáng)弱。流式細(xì)胞儀最精確的定量方法，測定單個細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成分含量。以細(xì)胞受色反應(yīng)的強(qiáng)弱比色，常用于RNA、DNA定量測定和各階段幼紅細(xì)胞胞漿中血紅蛋自定位、定量等。三、細(xì)胞化學(xué)染色定量分析方法任務(wù)一細(xì)胞化學(xué)染色基本理論任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)項(xiàng)目四：細(xì)胞化學(xué)染色原理（二氨基聯(lián)苯胺法）：

操作：胞質(zhì)中POX底物H2O2分解釋放新生態(tài)氧（O）二氨基聯(lián)苯胺氧化金黃色不溶性沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶所在的活性部位產(chǎn)生固定30秒4℃底物液孵育流水沖洗蘇木素或Giemsa液10～15min復(fù)染30分鐘鏡檢：觀察100個白血病細(xì)胞的染色結(jié)果，得出陽性率和陽性指數(shù)，或報告各種陽性細(xì)胞的百分比。新鮮涂片

甲醛-丙酮緩沖液

流水沖洗任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)一、過氧化物酶染色（POX或MPO染色）結(jié)果判斷：細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)胞染色─胞質(zhì)中無陽性顆?！腊|(zhì)中細(xì)小陽性顆粒+胞質(zhì)中陽性顆粒較粗大++陽性顆粒粗大密集，約占胞質(zhì)1/2～2/3+++陽性顆粒粗大幾乎布滿胞質(zhì)++++陽性顆粒呈團(tuán)塊狀，充滿胞質(zhì)，可覆蓋核上（++）（++）（+）（-）（+++）（+++）（++++）（-）（-）（-）（-）（±）一、過氧化物酶染色（POX或MPO染色）任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)正常細(xì)胞POX染色反應(yīng)細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞染色反應(yīng)粒細(xì)胞系統(tǒng)分化差的原始粒細(xì)胞為陰性，分化好的原始粒細(xì)胞至中性成熟粒細(xì)胞均呈陽性，且隨著細(xì)胞的成熟，陽性反應(yīng)的程度逐漸增強(qiáng)。中性分葉核粒細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)，但衰老的粒細(xì)胞陽性程度減弱甚至呈陰性；嗜酸性粒細(xì)胞陽性最強(qiáng)，嗜堿性粒細(xì)胞陰性單核細(xì)胞系統(tǒng)原始單核細(xì)胞呈陰性，幼稚及成熟單核細(xì)胞多呈弱陽性，陽性顆粒少而細(xì)小，分布不均。淋巴細(xì)胞系統(tǒng)淋巴細(xì)胞系統(tǒng)呈陰性反應(yīng)其他細(xì)胞成熟型網(wǎng)狀細(xì)胞及巨噬細(xì)胞可呈不同程度的陽性反應(yīng)，漿細(xì)胞、紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞系統(tǒng)等均為陰性反應(yīng)一、過氧化物酶染色（POX或MPO染色）任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)臨床意義：主要用于鑒別急性白血病類型1.急性髓細(xì)胞白血病多呈陽性反應(yīng)，以M3和M2型反應(yīng)最強(qiáng)，M1和M5型反應(yīng)較弱，故有助于區(qū)別M3和M5型。2.急性淋巴細(xì)胞白血病呈POX陰性反應(yīng)，或陽性原始細(xì)胞＜3%（可能是殘留的原?；蛟缬琢＜?xì)胞），故為急性髓細(xì)胞和淋巴細(xì)胞白血病鑒別的重要指標(biāo)。ALL（POX染色）M5（POX染色）M3（POX染色）M2（POX染色）一、過氧化物酶染色（POX或MPO染色）任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)原理：蘇丹黑是一種脂溶性重氮染料，能溶解于細(xì)胞內(nèi)的含脂結(jié)構(gòu)（如中性脂肪、磷脂、糖脂和類固醇）中，使脂類物質(zhì)呈棕黑色或深黑色而顯示出來。脂類物質(zhì)在粒細(xì)胞中含量豐富，在單核細(xì)胞中也有少量。結(jié)果判斷及正常細(xì)胞染色反應(yīng)：與POX染色基本一致臨床意義：與POX染色基本相似注：POX染色特異性高，而SBB染色的敏感性高，因SBB染色較繁瑣，臨床上POX染色更常用，但POX染色陰性者可加做SBB染色或直接采用細(xì)胞免疫分型確認(rèn)。

二、蘇丹黑B染色（SBB染色）任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)酯酶是分解各種酯類的水解酶，根據(jù)機(jī)制的不同，分為非特異性酯酶和特異性酯酶。特異性酯酶易水解具有長鏈的酯類。非特異性酯酶易水解具有短鏈的酯類。單核巨噬細(xì)胞類為非特異性酯酶，中性粒細(xì)胞類則為特異性酯酶。區(qū)分單核細(xì)胞類或中性粒細(xì)胞類的重要方法，特別是二重染色法尤為重要。酯酶特異性酯酶(氯乙酸AS-D萘酚酯酶)非特異性酯酶pH值不同酸性酯酶(酸性α-醋酸萘酚酯酶)堿性酯酶(α-丁酸萘酚酯酶)中性酯酶α-醋酸萘酚酯酶醋酸AS-D萘酚酯酶三、酯酶染色任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)（一）特異性酯酶染色—氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色（NAS-DCE）氯乙酸AS-D萘酚酯酶（NAS-DCE）幾乎只出現(xiàn)在粒細(xì)胞中，特異性高，故稱“粒細(xì)胞酯酶”、“特異性酯酶”。原理：氯乙酸AS-D萘酚被細(xì)胞內(nèi)特異性酯酶水解，產(chǎn)生AS-D萘酚，再與穩(wěn)定的重氮鹽（堅(jiān)牢紫醬GBC)偶聯(lián)，生成不溶性紅色沉淀，定位于胞漿中。含萘酚的底物（氯乙酸AS-D萘酚）細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的酶萘酚AS-D重氮鹽（堅(jiān)牢紫醬GBC）生成不溶性紅色沉淀定位于胞質(zhì)相應(yīng)位置三、酯酶染色任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)（一）特異性酯酶染色—氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色（NAS-DCE）操作：結(jié)果判斷：胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)紅色彌漫性或顆粒狀沉淀為陽性固定30-60秒基質(zhì)液37℃孵育流水沖洗蘇木素染液30min復(fù)染5min鏡檢：至少要觀察100個白血病細(xì)胞的染色結(jié)果，計(jì)算陽性率和陽性指數(shù)新鮮涂片

甲醛-丙酮液

流水沖洗實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)胞染色─為胞質(zhì)中無陽性顆粒±為胞質(zhì)中細(xì)小陽性顆粒+胞質(zhì)顯現(xiàn)均勻淺色陽性反應(yīng)，占胞質(zhì)﹤1/4++胞質(zhì)顯現(xiàn)均勻紅色陽性反應(yīng)，占胞質(zhì)﹤1/2+++胞質(zhì)充滿紅色陽性反應(yīng)++++胞質(zhì)充滿致密紅色陽性產(chǎn)物呈團(tuán)塊狀三、酯酶染色任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞染色反應(yīng)粒細(xì)胞系統(tǒng)分化差的原始粒細(xì)胞呈陰性，分化好的呈陽性，自早幼粒細(xì)胞至成熟中性粒細(xì)胞均呈陽性，但酶活性并不隨細(xì)胞的成熟而增強(qiáng)。嗜酸性粒細(xì)胞呈陰性或弱陽性，嗜堿性粒細(xì)胞呈陽性單核細(xì)胞系統(tǒng)絕大多數(shù)為陰性其他細(xì)胞淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、巨核細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、血小板等均呈陰性，但肥大細(xì)胞呈陽性。（一）特異性酯酶染色—氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色（NAS-DCE）正常細(xì)胞NAS-DCE染色反應(yīng)：任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)三、酯酶染色（一）特異性酯酶染色—氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色（NAS-DCE）臨床意義：主要用于鑒別急性白血病類型（1）急性粒細(xì)胞白血病時，原粒細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞均呈一定程度陽性。（2）急性單核細(xì)胞白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病，均呈陰性。（3）急性粒-單核細(xì)胞白血病時部分細(xì)胞陽性，部分細(xì)胞呈陰性。AML--M2a氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色1.原始粒細(xì)胞，呈弱陽性；2.幼稚粒細(xì)胞，呈強(qiáng)陽性；3.中性桿狀核粒細(xì)胞，呈強(qiáng)陽性

AML—M1氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)三、酯酶染色（二）非特異性酯酶染色—α-醋酸萘酚酯酶染色（α-NAE）α-NAE存在于單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞中，是一種中性非特異性的酯酶，只有單核系細(xì)胞的陽性可被氟化鈉抑制，故α-NAE染色+氟化鈉抑制試驗(yàn)，對鑒別單核細(xì)胞白血病有重要價值。原理：含萘酚的底物（α-醋酸萘酚）重氮鹽（堅(jiān)牢藍(lán)B）作用液+氟化鈉單核細(xì)胞被抑制其他系不被抑制α-萘酚醋酸細(xì)胞內(nèi)α-NAE生成不溶性棕黑色或灰黑色沉淀定位于胞質(zhì)相應(yīng)位置任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)三、酯酶染色（二）非特異性酯酶染色—α-醋酸萘酚酯酶染色（α-NAE）操作：固定5分鐘1張基質(zhì)液37℃孵育流水沖洗甲基綠染液1小時復(fù)染5-15min鏡檢：兩種方法染色后用油鏡計(jì)數(shù)100或200個被檢細(xì)胞，分別計(jì)算出抑制前和抑制后的陽性率和積分。按下列公式計(jì)算出抑制率：凡抑制率＞50％者，提示受氟化鈉抑制。新鮮涂片2張

固定液流水沖洗1張基質(zhì)液+氟化鈉任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)三、酯酶染色（二）非特異性酯酶染色—α-醋酸萘酚酯酶染色（α-NAE）結(jié)果判斷：胞質(zhì)內(nèi)有灰黑色或棕黑色彌漫狀或顆粒狀沉淀為陽性實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)胞染色0分（─）胞質(zhì)中無色素沉淀1分（+）胞質(zhì)呈彌漫淺灰色或含少量陽性反應(yīng)顆粒2分（++）胞質(zhì)呈彌漫灰黑著色或含中等量陽性反應(yīng)顆粒3分（+++）胞質(zhì)呈彌漫棕黑較深色或含較多陽性反應(yīng)顆?；虬|(zhì)呈彌漫棕黑較深色4分（++++）胞質(zhì)呈彌漫深黑色或胞質(zhì)中充滿粗大陽性反應(yīng)顆粒1.原始單核細(xì)胞（+）2.幼單核細(xì)胞（++）3.單核細(xì)胞（+++）4.巨核細(xì)胞（++）5.血小板（+++）6.桿狀核粒細(xì)胞（─）7.分葉核粒細(xì)胞（─）8.淋巴細(xì)胞（─）任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)三、酯酶染色（二）非特異性酯酶染色—α-醋酸萘酚酯酶染色（α-NAE）正常細(xì)胞NAS-DCE染色反應(yīng)：細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞染色反應(yīng)單核細(xì)胞系統(tǒng)分化差的原始單核細(xì)胞呈陰性，分化好的原始單核細(xì)胞呈陽性（常較強(qiáng)），幼稚單核及單核細(xì)胞也呈陽性，陽性反應(yīng)能被氟化鈉抑制粒細(xì)胞系統(tǒng)各期粒細(xì)胞多數(shù)呈陰性，少數(shù)呈弱陽性，陽性反應(yīng)不被氟化鈉抑制淋巴細(xì)胞系統(tǒng)各期淋巴細(xì)胞多呈陰性，少數(shù)呈弱陽性，陽性反應(yīng)不被氟化鈉抑制其他細(xì)胞巨核細(xì)胞和血小板呈陽性，少數(shù)有核紅細(xì)胞呈弱陽性，陽性反應(yīng)不被氟化鈉抑制；漿細(xì)胞呈陰性任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)三、酯酶染色（1）急性單核細(xì)胞白血病時，α-NAE染色呈明顯陽性反應(yīng)，且其陽性反應(yīng)被氟化鈉抑制。（2）急性粒-單核細(xì)胞白血病時；α-NAE染色呈部分陽性，并被氟化鈉抑制。（3）急性粒細(xì)胞白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病時，α-NAE染色呈陰性或（弱）陽性，且其陽性反應(yīng)不被氟化鈉抑制。M5型--α-NAE染色原、幼單核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽性M5型--α-NAE+氟化鈉抑制試驗(yàn)原、幼單核細(xì)胞陽性反應(yīng)被氟化鈉抑制M4型--α-NAE染色部分細(xì)胞呈強(qiáng)陽性M4型--α-NAE+氟化鈉抑制試驗(yàn)部分陽性反應(yīng)細(xì)胞被氟化鈉抑制任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)三、酯酶染色（二）非特異性酯酶染色—α-醋酸萘酚酯酶染色（α-NAE）臨床意義：主要用于輔助鑒別急性白血病細(xì)胞的類型（三）非特異性酯酶染色—α-丁酸萘酚酯酶染色（α-NBE）α-NBE在單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)中活性最強(qiáng)，能被氟化鈉抑制，而粒系、淋巴系、部分幼紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞和血小板等含量很少，被視為單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)所特有的標(biāo)志酶。原理：含萘酚的底物（α-丁酸萘酚）重氮鹽（堅(jiān)牢紫醬GBC）作用液+氟化鈉單核細(xì)胞被抑制其他系不被抑制α-萘酚丁酸細(xì)胞內(nèi)α-NBE生成不溶性紅色沉淀定位于胞質(zhì)相應(yīng)位置任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)三、酯酶染色（三）非特異性酯酶染色—α-丁酸萘酚酯酶染色（α-NBE）操作與結(jié)果判斷：基本同α-NAE一致正常細(xì)胞α-NBE染色反應(yīng)：臨床意義：臨床應(yīng)用同α-NAE細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞染色反應(yīng)粒細(xì)胞系統(tǒng)各階段粒細(xì)胞均呈陰性單核細(xì)胞系統(tǒng)分化差的原始單核細(xì)胞呈陰性，分化好的原始單核細(xì)胞呈陽性，幼稚單核及單核細(xì)胞呈陽性，陽性反應(yīng)能被氟化鈉抑制淋巴細(xì)胞系統(tǒng)T淋巴細(xì)胞、非T非B淋巴細(xì)胞可呈陽性，B淋巴細(xì)胞呈陰性其他細(xì)胞巨核細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、漿細(xì)胞呈陰性或弱陽性；組織細(xì)胞也可呈陽性，但不被氟化鈉抑制注：1.α-NBE敏感性比α-NAE低，但特異性強(qiáng)用于鑒別急非淋的白血病類型

2.將POX染色與α-NBE染色+氟化鈉抑制聯(lián)合使用，對AML-M2、M4、M5分型更有價值任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)三、酯酶染色任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)三、酯酶染色（四）酯酶雙染在同一張涂片上進(jìn)行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。正常細(xì)胞α-NBE染色反應(yīng)：酯酶雙染色可鑒別粒系細(xì)胞和單核系細(xì)胞，尤其對于急性粒-單核細(xì)胞白血病的診斷具有重要價值。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色，常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS－D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS－D萘酚酯酶雙染色等。臨床應(yīng)用：主要用于鑒別急性粒細(xì)胞白血病、急性粒-單核細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病酸性磷酸酶（ACP）存在于細(xì)胞的溶酶體顆粒中，某些細(xì)胞中的酸性磷酸酶耐酒石酸，故抗酒石酸酸性磷酸酶染色有助于某些疾病的診斷及鑒別診斷。原理：血細(xì)胞內(nèi)的酸性磷酸酶在酸性（pH5.0）條件下水解基質(zhì)液中的磷酸萘酚AS-BI，釋放出萘酚AS-BI，后者與基質(zhì)液中的重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性的有色沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。pH5.0含萘酚的底物（磷酸萘酚AS-BI）重氮品紅萘酚AS-BI細(xì)胞內(nèi)ACP生成不溶性出現(xiàn)鮮紅色顆粒沉淀定位于胞質(zhì)相應(yīng)位置任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)四、酸性磷酸酶染色（ACP）（偶氮偶聯(lián)法）試劑：操作：1．甲醇-丙酮緩沖液2．基質(zhì)儲備液

：磷酸萘酚AS-BI100mg，N-N二甲基甲酰胺10ml3．0.1mol/L乙酸緩沖液

4．0.05mol/L乙酸-酒石酸緩沖液5．作用液Ⅰ（臨用時配制）：0.1mol/L乙酸緩沖液50ml，基質(zhì)儲備液1.0ml，重氮品紅25mg。6．作用液Ⅱ（臨用時配制）：0.05mol/L乙酸-酒石酸緩沖液50ml，基質(zhì)儲備液1.0ml，重氮品紅25mg。固定30秒1張作用液Ⅰ37℃避光浸染蒸餾水洗甲基綠染液30分鐘復(fù)染3-5min鏡檢新鮮涂片2張

固定液蒸餾水洗1張作用液Ⅱ稍干燥任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)四、酸性磷酸酶染色（ACP）（偶氮偶聯(lián)法）結(jié)果判斷：胞質(zhì)中出現(xiàn)鮮紅色顆粒沉淀為陽性正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)：粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨核細(xì)胞、血小板、漿細(xì)胞、巨噬細(xì)胞均呈陽性反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)胞染色─胞質(zhì)無色+胞質(zhì)出現(xiàn)淡紅色顆粒++胞質(zhì)布滿鮮紅色顆粒+++胞質(zhì)充滿深紅色顆粒1（+）2（++）3（+++）任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)四、酸性磷酸酶染色（ACP）（偶氮偶聯(lián)法）臨床意義：臨床ACP染色應(yīng)用較少，主要用于多毛細(xì)胞白血病的診斷及脂質(zhì)代謝障礙性疾病的鑒別。1.診斷多毛細(xì)胞白血?。憾嗝?xì)胞呈陽性（常呈強(qiáng)陽性），陽性反應(yīng)不被L-酒石酸抑制。慢性淋巴細(xì)胞白血病的淋巴細(xì)胞和惡性淋巴瘤細(xì)胞ACP染色也可呈陽性，但可被L-酒石酸抑制。2.鑒別戈謝細(xì)胞和尼曼-匹克細(xì)胞：前者陽性，并具有抗酒石酸功能；后者陰性。多毛細(xì)胞白血病ACP染色陽性反應(yīng)，陽性不被酒石酸抑制ALL-ACP染色陽性反應(yīng)陽性被酒石酸抑制戈謝細(xì)胞（1）-ACP染色陽性反應(yīng)陽性不被酒石酸抑制任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)四、酸性磷酸酶染色（ACP）（偶氮偶聯(lián)法）原理：過碘酸是氧化劑，能使含有乙二醇基（CHOH-CHOH）的多糖類物質(zhì)（糖原、粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖酯等）氧化，形成雙醛基（CHO-CHO），醛基與雪夫試劑中的無色品紅結(jié)合，使無色的品紅變成紫紅色化合物，定位于含有多糖類的細(xì)胞內(nèi)。試劑：1.固定劑：95%乙醇2.10g/L過碘酸溶液3.雪夫染液4.偏重亞硫酸液(新鮮配制)5.復(fù)染液：20g/L甲基綠水溶液氧化結(jié)合含乙二醇基的糖類（CHOH-CHOH）無色品紅雙醛基（CHO-CHO）過碘酸變成紫紅色品紅定位于胞質(zhì)中任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)五、糖原染色（PAS）（過碘酸-雪夫反應(yīng)）操作：結(jié)果判斷：胞質(zhì)內(nèi)有紅色或紫紅色，呈彌散狀、顆粒狀或塊狀的物質(zhì)為陽性固定氧化蒸餾水洗雪夫染液10分鐘10分鐘鏡檢：油鏡下各類細(xì)胞觀察100個，按評分標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算陽性率及積分新鮮涂片95%乙醇流水沖洗10g/L過碘酸10分鐘30-60分鐘蒸餾水洗偏重亞硫酸溶液洗3次甲基綠復(fù)染

各種血細(xì)胞PAS染色1.原始粒細(xì)胞（-）2.早幼粒細(xì)胞（+）3.中性中幼粒細(xì)胞（++）4.中性晚幼粒細(xì)胞（+++）5.中性桿狀核粒細(xì)胞（++++）6.中性分葉核粒細(xì)胞（++++）7.嗜酸性粒細(xì)胞（+++）8.嗜堿性粒細(xì)胞（+++）9.單核細(xì)胞（±）10.淋巴細(xì)胞（-）11.淋巴細(xì)胞（+）12.淋巴細(xì)胞（++）13.淋巴細(xì)胞（+++）任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)五、糖原染色（PAS）（過碘酸-雪夫反應(yīng)）正常細(xì)胞PAS染色反應(yīng)：細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞染色反應(yīng)粒細(xì)胞系統(tǒng)分化差的原始粒細(xì)胞呈陰性，分化好的原始粒細(xì)胞至中性分葉核粒細(xì)胞均呈陽性，并隨著細(xì)胞的成熟逐漸增強(qiáng)；嗜酸性粒細(xì)胞中顆粒之間的胞質(zhì)呈紅色；嗜堿性粒細(xì)胞中的嗜堿性顆粒呈陽性，而顆粒之間的胞質(zhì)不著色。紅細(xì)胞系統(tǒng)有核紅細(xì)胞及紅細(xì)胞均呈陰性單核細(xì)胞系統(tǒng)分化差的原始單核細(xì)胞呈陰性，其他為陽性，絕大多數(shù)陽性反應(yīng)物呈粗顆粒狀，有時分布于細(xì)胞邊緣的陽性反應(yīng)物顆粒較粗大淋巴細(xì)胞系統(tǒng)大多數(shù)呈陰性，少數(shù)呈陽性（陽性率常＜20%），陽性反應(yīng)物呈粗顆粒狀或塊狀巨核細(xì)胞系統(tǒng)巨核細(xì)胞和血小板呈陽性，陽性反應(yīng)的程度隨細(xì)胞的發(fā)育成熟而增強(qiáng)，成熟巨核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽性，陽性反應(yīng)物呈顆粒狀或塊狀其他細(xì)胞漿細(xì)胞一般呈陰性，少數(shù)呈陽性，巨噬細(xì)胞可為陽性，兩者陽性反應(yīng)物均呈細(xì)顆粒狀任務(wù)二常用細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)五、糖原染色（PAS）（過碘酸-雪夫反應(yīng)）臨床意義：（1