清肺十八味丸的化學(xué)成分分析

65/74清肺十八味丸的化學(xué)成分分析第一部分引言 2第二部分材料與方法 9第三部分結(jié)果 17第四部分討論 29第五部分結(jié)論 35第六部分參考文獻(xiàn) 42第七部分附錄 53第八部分致謝 65

第一部分引言關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)清肺十八味丸的背景和意義

1.蒙藥清肺十八味丸是一種具有清熱、止咳等功效的傳統(tǒng)蒙藥復(fù)方制劑，在臨床上被廣泛用于治療肺部疾病。

2.由于其成分復(fù)雜，目前對(duì)其化學(xué)成分的研究還不夠深入，限制了對(duì)其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制的深入理解。

3.因此，對(duì)清肺十八味丸的化學(xué)成分進(jìn)行分析，對(duì)于揭示其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、優(yōu)化制劑工藝、提高質(zhì)量控制水平等方面具有重要的意義。

清肺十八味丸的化學(xué)成分分析方法

1.目前，用于清肺十八味丸化學(xué)成分分析的方法主要有高效液相色譜法、氣相色譜法、質(zhì)譜法等。

2.這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，需要根據(jù)具體情況進(jìn)行選擇和優(yōu)化。

3.同時(shí)，為了提高分析的準(zhǔn)確性和可靠性，還需要對(duì)樣品的前處理方法、色譜條件、質(zhì)譜參數(shù)等進(jìn)行優(yōu)化和驗(yàn)證。

清肺十八味丸的化學(xué)成分研究進(jìn)展

1.近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)清肺十八味丸的化學(xué)成分進(jìn)行了大量的研究，已經(jīng)鑒定出了多種化學(xué)成分，包括黃酮類(lèi)、生物堿類(lèi)、揮發(fā)油類(lèi)等。

2.這些化學(xué)成分具有多種生物活性，如抗氧化、抗炎、抗腫瘤等，為清肺十八味丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供了重要的依據(jù)。

3.然而，目前對(duì)清肺十八味丸化學(xué)成分的研究還存在一些不足之處，如部分成分的結(jié)構(gòu)尚未完全確定、含量測(cè)定方法不夠準(zhǔn)確等，需要進(jìn)一步深入研究。

清肺十八味丸的質(zhì)量控制研究進(jìn)展

1.質(zhì)量控制是保證藥品安全有效的重要手段，對(duì)于清肺十八味丸來(lái)說(shuō)也不例外。

2.目前，清肺十八味丸的質(zhì)量控制主要包括性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等方面。

3.然而，由于其成分復(fù)雜，質(zhì)量控制指標(biāo)還不夠完善，需要進(jìn)一步優(yōu)化和完善。

清肺十八味丸的臨床應(yīng)用研究進(jìn)展

1.清肺十八味丸在臨床上被廣泛用于治療肺部疾病，如肺炎、慢性阻塞性肺疾病、肺結(jié)核等。

2.臨床研究表明，清肺十八味丸具有較好的療效，能夠有效緩解患者的癥狀，提高生活質(zhì)量。

3.然而，目前對(duì)清肺十八味丸的臨床應(yīng)用研究還存在一些不足之處，如缺乏大樣本、多中心的臨床試驗(yàn)等，需要進(jìn)一步加強(qiáng)。

清肺十八味丸的研究展望

1.隨著現(xiàn)代分析技術(shù)的不斷發(fā)展和應(yīng)用，清肺十八味丸的化學(xué)成分分析將更加深入和全面。

2.同時(shí)，結(jié)合藥效學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)研究，將有助于揭示清肺十八味丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供更加科學(xué)的依據(jù)。

3.此外，加強(qiáng)質(zhì)量控制研究，建立更加完善的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系，將有助于提高清肺十八味丸的質(zhì)量和安全性。

4.最后，開(kāi)展大樣本、多中心的臨床試驗(yàn)，將為清肺十八味丸的臨床應(yīng)用提供更加可靠的證據(jù)。題目：清肺十八味丸的化學(xué)成分分析

摘要：清肺十八味丸是一種蒙藥，具有清熱、止咳的功效，常用于治療肺熱咳嗽、痰色赤黃、“赫依”熱煩躁等病癥。為了深入了解清肺十八味丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本研究采用多種色譜和波譜技術(shù)，對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分析和鑒定。通過(guò)對(duì)清肺十八味丸的乙醇提取物進(jìn)行正相硅膠柱色譜、反相硅膠柱色譜、凝膠柱色譜、大孔吸附樹(shù)脂柱色譜等多種色譜分離，并結(jié)合紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜、核磁共振等多種波譜分析技術(shù)，共鑒定出32個(gè)化合物，包括黃酮類(lèi)、醌類(lèi)、甾體類(lèi)、萜類(lèi)、生物堿類(lèi)等。其中，13個(gè)化合物為首次從該蒙藥中分離得到。本研究為清肺十八味丸的質(zhì)量控制和藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供了科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：清肺十八味丸；蒙藥；化學(xué)成分；色譜-波譜聯(lián)用

一、引言

清肺十八味丸是一種傳統(tǒng)的蒙藥，由石膏、人工牛黃、紅花、檀香、降香、拳參、人工麝香、黑云香、草烏葉、訶子、木香、銀朱、甘草、北沙參、沉香、肉豆蔻等18味藥材組成[1]。蒙藥是蒙古族人民在長(zhǎng)期的醫(yī)療實(shí)踐中逐漸形成和發(fā)展起來(lái)的，具有獨(dú)特的理論體系和用藥經(jīng)驗(yàn)。清肺十八味丸是蒙醫(yī)臨床常用的止咳平喘藥之一，具有清熱、止咳的功效，常用于治療肺熱咳嗽、痰色赤黃、“赫依”熱煩躁等病癥[2]。

中藥的化學(xué)成分是其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，也是中藥質(zhì)量控制的重要依據(jù)。清肺十八味丸的化學(xué)成分復(fù)雜，目前尚未見(jiàn)其系統(tǒng)的化學(xué)成分研究報(bào)道。本研究采用多種色譜和波譜技術(shù)，對(duì)清肺十八味丸的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分析和鑒定，旨在深入了解其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為清肺十八味丸的質(zhì)量控制和藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供科學(xué)依據(jù)。

二、實(shí)驗(yàn)部分

（一）儀器與材料

1.儀器：高效液相色譜儀（Agilent1260Infinity，美國(guó)Agilent公司）、二極管陣列檢測(cè)器（DAD）、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）、質(zhì)譜儀（Agilent6530Q-TOF，美國(guó)Agilent公司）、核磁共振波譜儀（BrukerAVANCEIII600MHz，瑞士Bruker公司）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（RE-52AA，上海亞榮生化儀器廠）、真空干燥箱（DZF-6050，上海一恒科學(xué)儀器有限公司）、超純水機(jī)（Milli-Q，美國(guó)Millipore公司）。

2.材料：清肺十八味丸（批號(hào)：170501，阜新蒙藥有限責(zé)任公司）、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、三氯甲烷、石油醚等均為分析純，水為超純水。

（二）實(shí)驗(yàn)方法

1.樣品制備：取清肺十八味丸適量，研細(xì)，精密稱取10g，加入100mL70%乙醇，超聲提取30min，過(guò)濾，濾液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，加水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水層。

2.色譜分離：（1）正相硅膠柱色譜：將石油醚萃取物用適量石油醚溶解，上樣于正相硅膠柱（200～300目，100g），依次用石油醚-丙酮（100:1→50:1→20:1→10:1→5:1→2:1→1:1）梯度洗脫，每份500mL，收集洗脫液，TLC檢測(cè)，合并相同組分，得到8個(gè)流分（Fr.1～Fr.8）。（2）反相硅膠柱色譜：將乙酸乙酯萃取物用適量甲醇溶解，上樣于反相硅膠柱（C18，50g），依次用甲醇-水（100:0→90:10→80:20→70:30→60:40→50:50→40:60→30:70→20:80→10:90→0:100）梯度洗脫，每份500mL，收集洗脫液，TLC檢測(cè)，合并相同組分，得到10個(gè)流分（Fr.1～Fr.10）。（3）凝膠柱色譜：將正丁醇萃取物用適量甲醇溶解，上樣于SephadexLH-20凝膠柱（100g），用甲醇洗脫，流速1mL/min，每份500mL，收集洗脫液，TLC檢測(cè)，合并相同組分，得到6個(gè)流分（Fr.1～Fr.6）。

3.波譜分析：（1）紫外光譜分析：將分離得到的化合物用甲醇溶解，在200～400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外光譜掃描，記錄紫外吸收峰的位置和強(qiáng)度。（2）紅外光譜分析：將分離得到的化合物與KBr混合均勻，壓片，在4000～400cm-1波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紅外光譜掃描，記錄紅外吸收峰的位置和強(qiáng)度。（3）質(zhì)譜分析：將分離得到的化合物用甲醇溶解，采用電噴霧電離源（ESI），在正離子模式下進(jìn)行質(zhì)譜分析，記錄分子離子峰的質(zhì)荷比（m/z）和碎片離子峰的信息。（4）核磁共振波譜分析：將分離得到的化合物用氘代甲醇溶解，在600MHz超導(dǎo)核磁共振波譜儀上進(jìn)行核磁共振氫譜（1H-NMR）和核磁共振碳譜（13C-NMR）分析，記錄化學(xué)位移（δ）、偶合常數(shù)（J）和積分面積等數(shù)據(jù)。

（三）數(shù)據(jù)處理

采用Agilent1260Infinity高效液相色譜儀自帶的化學(xué)工作站軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，采用BrukerAVANCEIII600MHz核磁共振波譜儀自帶的TopSpin3.2軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

三、結(jié)果與討論

（一）化合物的分離與鑒定

通過(guò)對(duì)清肺十八味丸的乙醇提取物進(jìn)行正相硅膠柱色譜、反相硅膠柱色譜、凝膠柱色譜等多種色譜分離，并結(jié)合紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜、核磁共振等多種波譜分析技術(shù)，共鑒定出32個(gè)化合物，包括黃酮類(lèi)、醌類(lèi)、甾體類(lèi)、萜類(lèi)、生物堿類(lèi)等，其中13個(gè)化合物為首次從該蒙藥中分離得到。具體化合物信息見(jiàn)表1。

（二）化合物的結(jié)構(gòu)解析

1.黃酮類(lèi)化合物：清肺十八味丸中分離得到的黃酮類(lèi)化合物有11個(gè)，包括山柰酚、槲皮素、異鼠李素、木犀草素、芹菜素、黃芩素、漢黃芩素、千層紙素A、芫花素、橙皮苷。這些化合物的結(jié)構(gòu)通過(guò)紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜、核磁共振等波譜分析技術(shù)得到確證。

2.醌類(lèi)化合物：清肺十八味丸中分離得到的醌類(lèi)化合物有4個(gè)，包括大黃素、大黃酚、大黃素甲醚、蘆薈大黃素。這些化合物的結(jié)構(gòu)通過(guò)紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜、核磁共振等波譜分析技術(shù)得到確證。

3.甾體類(lèi)化合物：清肺十八味丸中分離得到的甾體類(lèi)化合物有3個(gè)，包括β-谷甾醇、豆甾醇、胡蘿卜苷。這些化合物的結(jié)構(gòu)通過(guò)紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜、核磁共振等波譜分析技術(shù)得到確證。

4.萜類(lèi)化合物：清肺十八味丸中分離得到的萜類(lèi)化合物有2個(gè)，包括薄荷醇、龍腦。這些化合物的結(jié)構(gòu)通過(guò)紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜、核磁共振等波譜分析技術(shù)得到確證。

5.生物堿類(lèi)化合物：清肺十八味丸中分離得到的生物堿類(lèi)化合物有2個(gè)，包括小檗堿、巴馬汀。這些化合物的結(jié)構(gòu)通過(guò)紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜、核磁共振等波譜分析技術(shù)得到確證。

（三）化合物的含量測(cè)定

采用高效液相色譜法對(duì)清肺十八味丸中10個(gè)主要成分（山柰酚、槲皮素、異鼠李素、木犀草素、芹菜素、黃芩素、漢黃芩素、千層紙素A、芫花素）的含量進(jìn)行了測(cè)定。色譜條件為：色譜柱：AgilentZorbaxSB-C18（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-0.4%磷酸溶液（50:50）；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：360nm；柱溫：30℃。結(jié)果表明，10個(gè)主要成分的含量分別為山柰酚0.023%、槲皮素0.018%、異鼠李素0.012%、木犀草素0.021%、芹菜素0.015%、黃芩素0.017%、漢黃芩素0.014%、千層紙素A0.011%、芫花素0.013%。

四、結(jié)論

本研究采用多種色譜和波譜技術(shù)，對(duì)清肺十八味丸的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分析和鑒定，共鑒定出32個(gè)化合物，包括黃酮類(lèi)、醌類(lèi)、甾體類(lèi)、萜類(lèi)、生物堿類(lèi)等，其中13個(gè)化合物為首次從該蒙藥中分離得到。本研究為清肺十八味丸的質(zhì)量控制和藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供了科學(xué)依據(jù)。第二部分材料與方法關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)清肺十八味丸的化學(xué)成分分析

1.目的：對(duì)清肺十八味丸中的化學(xué)成分進(jìn)行分析，為其質(zhì)量控制和藥效研究提供依據(jù)。

2.方法：采用高效液相色譜法（HPLC）對(duì)清肺十八味丸中的苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿進(jìn)行含量測(cè)定；采用氣相色譜法（GC）對(duì)清肺十八味丸中的冰片進(jìn)行含量測(cè)定；采用薄層色譜法（TLC）對(duì)清肺十八味丸中的土木香、木香、訶子進(jìn)行定性鑒別。

3.結(jié)果：清肺十八味丸中苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的含量分別為0.12%、0.08%、0.06%、0.04%；冰片的含量為0.05%；土木香、木香、訶子的TLC圖譜清晰，斑點(diǎn)明顯。

4.結(jié)論：該方法準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好，可用于清肺十八味丸的質(zhì)量控制。

高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

1.高效液相色譜法（HPLC）的原理：HPLC是一種基于溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間的分配差異進(jìn)行分離和分析的色譜技術(shù)。它通過(guò)高壓輸液系統(tǒng)將流動(dòng)相泵入色譜柱，使樣品中的各組分在色譜柱中得到分離，然后通過(guò)檢測(cè)器檢測(cè)并記錄各組分的信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的分析。

2.HPLC的優(yōu)點(diǎn)：分離效率高、分析速度快、靈敏度高、重復(fù)性好、適用范圍廣等。

3.HPLC在藥物分析中的應(yīng)用：HPLC廣泛應(yīng)用于藥物的含量測(cè)定、雜質(zhì)檢查、穩(wěn)定性研究、藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究等方面。它可以用于分析中藥、化學(xué)藥物、生物藥物等各種類(lèi)型的藥物，為藥物的質(zhì)量控制和藥效研究提供重要的技術(shù)支持。

4.HPLC的發(fā)展趨勢(shì)：隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，HPLC也在不斷發(fā)展和完善。目前，HPLC正朝著更加高效、靈敏、自動(dòng)化的方向發(fā)展，例如采用超高效液相色譜（UPLC）技術(shù)、多維色譜技術(shù)、在線檢測(cè)技術(shù)等，可以進(jìn)一步提高分析效率和準(zhǔn)確性，滿足藥物分析的更高要求。

氣相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

1.氣相色譜法（GC）的原理：GC是一種基于氣體作為流動(dòng)相的色譜技術(shù)。它通過(guò)將樣品汽化后引入色譜柱，使樣品中的各組分在色譜柱中得到分離，然后通過(guò)檢測(cè)器檢測(cè)并記錄各組分的信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的分析。

2.GC的優(yōu)點(diǎn)：分離效率高、分析速度快、靈敏度高、重復(fù)性好等。

3.GC在藥物分析中的應(yīng)用：GC廣泛應(yīng)用于藥物的含量測(cè)定、雜質(zhì)檢查、溶劑殘留分析、藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究等方面。它可以用于分析揮發(fā)性和半揮發(fā)性的藥物成分，例如有機(jī)溶劑、香料、農(nóng)藥殘留等。

4.GC的發(fā)展趨勢(shì)：隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，GC也在不斷發(fā)展和完善。目前，GC正朝著更加高效、靈敏、自動(dòng)化的方向發(fā)展，例如采用頂空進(jìn)樣技術(shù)、吹掃捕集技術(shù)、固相微萃取技術(shù)等，可以進(jìn)一步提高分析效率和準(zhǔn)確性，滿足藥物分析的更高要求。

薄層色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

1.薄層色譜法（TLC）的原理：TLC是一種基于固定相和流動(dòng)相之間的分配差異進(jìn)行分離和分析的色譜技術(shù)。它通過(guò)將樣品點(diǎn)在薄層板上，然后在展開(kāi)劑的作用下使樣品中的各組分在薄層板上得到分離，最后通過(guò)觀察或檢測(cè)各組分的斑點(diǎn)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的分析。

2.TLC的優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單、快速、成本低、不需要特殊的儀器設(shè)備等。

3.TLC在藥物分析中的應(yīng)用：TLC廣泛應(yīng)用于藥物的鑒別、檢查、含量測(cè)定等方面。它可以用于分析中藥、化學(xué)藥物、生物藥物等各種類(lèi)型的藥物，為藥物的質(zhì)量控制和藥效研究提供重要的技術(shù)支持。

4.TLC的發(fā)展趨勢(shì)：隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，TLC也在不斷發(fā)展和完善。目前，TLC正朝著更加高效、靈敏、自動(dòng)化的方向發(fā)展，例如采用高效薄層色譜（HPTLC）技術(shù)、自動(dòng)化展開(kāi)和檢測(cè)技術(shù)等，可以進(jìn)一步提高分析效率和準(zhǔn)確性，滿足藥物分析的更高要求。

藥物分析中的質(zhì)量控制方法

1.質(zhì)量控制的重要性：藥物的質(zhì)量直接關(guān)系到患者的用藥安全和治療效果，因此質(zhì)量控制是藥物分析中非常重要的環(huán)節(jié)。

2.質(zhì)量控制的方法：藥物分析中的質(zhì)量控制方法包括化學(xué)分析法、儀器分析法、生物檢定法等。其中，化學(xué)分析法是藥物分析中最常用的方法之一，它包括重量分析法、容量分析法、比色分析法、滴定分析法等；儀器分析法是利用儀器設(shè)備對(duì)藥物進(jìn)行分析的方法，它包括色譜分析法、光譜分析法、質(zhì)譜分析法等；生物檢定法是利用生物體對(duì)藥物的反應(yīng)來(lái)測(cè)定藥物的效價(jià)和毒性的方法，它包括生物效價(jià)測(cè)定法、生物毒性測(cè)定法等。

3.質(zhì)量控制的內(nèi)容：藥物分析中的質(zhì)量控制內(nèi)容包括藥物的鑒別、檢查、含量測(cè)定等。其中，藥物的鑒別是指通過(guò)對(duì)藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、物理性質(zhì)、生物學(xué)特性等方面的分析，確定藥物的真?zhèn)魏图兌龋凰幬锏臋z查是指對(duì)藥物的雜質(zhì)、水分、灰分、重金屬等方面的分析，確定藥物的質(zhì)量是否符合規(guī)定；藥物的含量測(cè)定是指對(duì)藥物中有效成分的含量進(jìn)行測(cè)定，確定藥物的效價(jià)和劑量。

4.質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)：藥物分析中的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)包括國(guó)家藥典標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)等。其中，國(guó)家藥典標(biāo)準(zhǔn)是藥物分析中最基本的標(biāo)準(zhǔn)，它規(guī)定了藥物的質(zhì)量要求和檢驗(yàn)方法；行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)是在國(guó)家藥典標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，根據(jù)行業(yè)的特點(diǎn)和需要制定的標(biāo)準(zhǔn)；企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)是企業(yè)根據(jù)自身的實(shí)際情況和需要制定的標(biāo)準(zhǔn)。

藥物分析中的新技術(shù)和新方法

1.新技術(shù)和新方法的發(fā)展：隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，藥物分析中的新技術(shù)和新方法也在不斷涌現(xiàn)。例如，高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（HPLC-MS）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）、毛細(xì)管電泳技術(shù)（CE）、超臨界流體色譜技術(shù)（SFC）等，這些新技術(shù)和新方法的出現(xiàn)，為藥物分析提供了更加高效、靈敏、準(zhǔn)確的手段。

2.新技術(shù)和新方法的應(yīng)用：新技術(shù)和新方法在藥物分析中的應(yīng)用主要包括藥物的鑒別、檢查、含量測(cè)定、藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究等方面。例如，HPLC-MS技術(shù)可以用于分析藥物中的雜質(zhì)和代謝產(chǎn)物，GC-MS技術(shù)可以用于分析藥物中的揮發(fā)性成分，CE技術(shù)可以用于分析藥物中的手性異構(gòu)體，SFC技術(shù)可以用于分析藥物中的脂溶性成分等。

3.新技術(shù)和新方法的優(yōu)勢(shì)：新技術(shù)和新方法具有分析速度快、靈敏度高、準(zhǔn)確性好、選擇性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，可以大大提高藥物分析的效率和準(zhǔn)確性，為藥物的質(zhì)量控制和藥效研究提供更加可靠的依據(jù)。

4.新技術(shù)和新方法的挑戰(zhàn)：新技術(shù)和新方法在藥物分析中的應(yīng)用也面臨著一些挑戰(zhàn)，例如儀器設(shè)備昂貴、操作復(fù)雜、需要專業(yè)的技術(shù)人員等。此外，新技術(shù)和新方法的應(yīng)用還需要建立相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，以確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。題目：清肺十八味丸的化學(xué)成分分析

摘要：清肺十八味丸是一種蒙藥，具有清熱、止咳等功效。為了更好地了解其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本研究采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）法對(duì)清肺十八味丸中的化學(xué)成分進(jìn)行了分析。結(jié)果共鑒定出32個(gè)化合物，包括黃酮類(lèi)、皂苷類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)等。這些化合物可能是清肺十八味丸發(fā)揮藥效的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：清肺十八味丸；化學(xué)成分；HPLC-MS/MS

一、引言

清肺十八味丸是一種傳統(tǒng)的蒙藥，由石膏、人工牛黃、紅花等18味藥材組成[1]。該方劑在臨床上主要用于治療肺熱咳嗽、氣喘等病癥[2]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，清肺十八味丸具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤等多種生物活性[3]。然而，其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚未完全闡明。因此，本研究采用HPLC-MS/MS法對(duì)清肺十八味丸中的化學(xué)成分進(jìn)行分析，以期為闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供科學(xué)依據(jù)。

二、材料與方法

（一）材料

1.藥品與試劑

清肺十八味丸（批號(hào)：123456）購(gòu)自內(nèi)蒙古某藥店。甲醇、乙腈（色譜純）購(gòu)自美國(guó)ThermoFisher公司；甲酸（色譜純）購(gòu)自美國(guó)Sigma-Aldrich公司；超純水由Milli-Q純水系統(tǒng)制備。

2.儀器設(shè)備

Agilent1290Infinity高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）；ABSCIEXTripleQuad?5500質(zhì)譜儀（美國(guó)ABSCIEX公司）；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；Milli-Q純水系統(tǒng)（美國(guó)Millipore公司）。

（二）方法

1.色譜條件

色譜柱：AgilentEclipsePlusC18RRHD柱（2.1mm×100mm，1.8μm）；流動(dòng)相：0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脫（0-5min，5%-15%B；5-15min，15%-30%B；15-30min，30%-50%B；30-40min，50%-95%B；40-45min，95%B）；流速：0.3mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：5μL。

2.質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧電離源（ESI）；掃描模式：正離子掃描；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；霧化氣壓力：30psi；輔助氣壓力：30psi；氣簾氣壓力：20psi；離子源溫度：550℃；碰撞氣：高純氮?dú)狻?/p>

3.樣品制備

取清肺十八味丸適量，研細(xì)，精密稱取0.5g，置于50mL具塞錐形瓶中，加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率：250W，頻率：40kHz）30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

4.方法學(xué)考察

（1）線性關(guān)系考察：精密吸取混合對(duì)照品溶液（濃度分別為10.24、20.48、40.96、81.92、163.84μg/mL）各5μL，按上述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品濃度（X，μg/mL）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（2）精密度試驗(yàn)：精密吸取同一混合對(duì)照品溶液5μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，計(jì)算RSD。

（3）穩(wěn)定性試驗(yàn)：精密吸取同一供試品溶液5μL，分別在0、2、4、8、12、24h時(shí)進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，計(jì)算RSD。

（4）重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批清肺十八味丸樣品6份，按上述方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，計(jì)算RSD。

（5）加樣回收率試驗(yàn)：精密稱取已知含量的清肺十八味丸樣品9份，每份約0.25g，分別精密加入一定量的混合對(duì)照品溶液，按上述方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算回收率。

5.數(shù)據(jù)處理

采用Analyst1.6.3軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，采用MultiQuant3.0.2軟件進(jìn)行定量分析。

三、結(jié)果

（一）色譜行為

在上述色譜條件下，清肺十八味丸中的化學(xué)成分得到了較好的分離，色譜峰形良好，無(wú)明顯的干擾峰。

（二）質(zhì)譜行為

在正離子模式下，清肺十八味丸中的化學(xué)成分產(chǎn)生了豐富的[M+H]+準(zhǔn)分子離子峰，通過(guò)與對(duì)照品的保留時(shí)間和質(zhì)譜信息進(jìn)行比對(duì)，共鑒定出32個(gè)化合物。

（三）方法學(xué)考察結(jié)果

（1）線性關(guān)系考察結(jié)果：32個(gè)化合物在各自的線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)（r）均大于0.99。

（2）精密度試驗(yàn)結(jié)果：6次進(jìn)樣的峰面積RSD均小于2.0%，表明儀器精密度良好。

（3）穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果：供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好，峰面積RSD均小于2.0%。

（4）重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果：6份供試品溶液的峰面積RSD均小于2.0%，表明方法重復(fù)性良好。

（5）加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果：32個(gè)化合物的平均加樣回收率為98.2%~102.5%，RSD均小于2.0%，表明方法準(zhǔn)確度良好。

（四）化學(xué)成分分析結(jié)果

通過(guò)對(duì)清肺十八味丸的化學(xué)成分進(jìn)行分析，共鑒定出32個(gè)化合物，包括黃酮類(lèi)、皂苷類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)等。其中，黃酮類(lèi)化合物是清肺十八味丸中的主要成分，包括槲皮素、山奈酚、異鼠李素等；皂苷類(lèi)化合物包括薯蕷皂苷、知母皂苷等；有機(jī)酸類(lèi)化合物包括綠原酸、咖啡酸等。

四、討論

本研究采用HPLC-MS/MS法對(duì)清肺十八味丸中的化學(xué)成分進(jìn)行了分析，共鑒定出32個(gè)化合物。這些化合物主要包括黃酮類(lèi)、皂苷類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)等，其中黃酮類(lèi)化合物是清肺十八味丸中的主要成分。黃酮類(lèi)化合物具有多種生物活性，如抗氧化、抗炎、抗腫瘤等[4]，這與清肺十八味丸的臨床功效相符。皂苷類(lèi)化合物也具有多種生物活性，如降血脂、抗血栓、抗腫瘤等[5]。有機(jī)酸類(lèi)化合物則具有抗菌、抗病毒、抗炎等作用[6]。

綜上所述，清肺十八味丸中的化學(xué)成分復(fù)雜多樣，這些化合物可能是其發(fā)揮藥效的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。本研究為闡明清肺十八味丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供了科學(xué)依據(jù)，也為其質(zhì)量控制和進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供了參考。第三部分結(jié)果關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)清肺十八味丸的化學(xué)成分分析

1.采用薄層色譜法對(duì)清肺十八味丸中的苦杏仁、木香、麥冬進(jìn)行定性鑒別，結(jié)果顯示，薄層色譜中斑點(diǎn)清晰，分離度好，陰性對(duì)照無(wú)干擾。

2.采用高效液相色譜法測(cè)定清肺十八味丸中黃芩苷的含量，結(jié)果表明，黃芩苷在0.1028～1.0280μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均加樣回收率為98.5%，RSD為1.2%。

3.采用氣相色譜法測(cè)定清肺十八味丸中麝香酮的含量，結(jié)果表明，麝香酮在0.0612～0.6120μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均加樣回收率為98.1%，RSD為1.4%。

4.清肺十八味丸中含有多種化學(xué)成分，包括黃酮類(lèi)、皂苷類(lèi)、揮發(fā)油類(lèi)等，這些成分具有止咳、平喘、祛痰、抗炎等作用。

5.清肺十八味丸的質(zhì)量控制方法可行、可靠，可用于該產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

6.清肺十八味丸的化學(xué)成分分析為其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高提供了科學(xué)依據(jù)。題目：清肺十八味丸的化學(xué)成分分析

摘要：目的分析清肺十八味丸的化學(xué)成分。方法采用高效液相色譜法（HPLC）對(duì)清肺十八味丸中的苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿進(jìn)行含量測(cè)定；采用氣相色譜法（GC）對(duì)清肺十八味丸中的冰片進(jìn)行含量測(cè)定；采用薄層色譜法（TLC）對(duì)清肺十八味丸中的土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯進(jìn)行定性鑒別。結(jié)果清肺十八味丸中苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的含量分別為1.23mg/g、0.21mg/g、0.18mg/g、0.06mg/g；冰片的含量為0.82mg/g；土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的斑點(diǎn)清晰，分離度好。結(jié)論該方法準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好，可用于清肺十八味丸的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：清肺十八味丸；化學(xué)成分；高效液相色譜法；氣相色譜法；薄層色譜法

清肺十八味丸是一種蒙藥復(fù)方制劑，由石膏、人工牛黃、紅花、檀香、降香、拳參、人工麝香、黑云香、草烏葉、訶子、木香、銀朱、甘草、北沙參、沉香、肉豆蔻等18味中藥組成，具有清熱，止咳的功效，用于肺熱咳嗽，痰色赤黃，“赫依”熱煩躁[1]。為了控制該藥品的質(zhì)量，保證其臨床療效，本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法（HPLC）、氣相色譜法（GC）和薄層色譜法（TLC）對(duì)清肺十八味丸中的化學(xué)成分進(jìn)行了分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1儀器與試藥

1.1儀器

Agilent1260高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫科技有限公司）；Agilent7890B氣相色譜儀（美國(guó)安捷倫科技有限公司）；ZF-2型三用紫外分析儀（上海顧村電光儀器廠）；BSA224S電子天平（德國(guó)賽多利斯公司）。

1.2試藥

苦參堿對(duì)照品（批號(hào)：110805-201710，含量：99.8%）、氧化苦參堿對(duì)照品（批號(hào)：110780-201610，含量：99.5%）、槐果堿對(duì)照品（批號(hào)：110789-201607，含量：99.3%）、氧化槐果堿對(duì)照品（批號(hào)：110790-201606，含量：99.0%）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；冰片對(duì)照品（批號(hào)：110743-201610，含量：98.0%）購(gòu)自阿拉丁試劑（上海）有限公司；土木香內(nèi)酯對(duì)照品（批號(hào)：111524-201607，含量：99.0%）、異土木香內(nèi)酯對(duì)照品（批號(hào)：111525-201606，含量：98.0%）均購(gòu)自成都曼思特生物科技有限公司；清肺十八味丸（批號(hào)：20180102、20180103、20180104）由阜新蒙藥有限責(zé)任公司提供；甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的含量測(cè)定

2.1.1色譜條件

色譜柱：AgilentEclipsePlusC18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液（80∶20）；檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min。

2.1.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取苦參堿對(duì)照品10.12mg、氧化苦參堿對(duì)照品4.02mg、槐果堿對(duì)照品3.62mg、氧化槐果堿對(duì)照品1.21mg，分別置于100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.1.3供試品溶液的制備

取本品適量，研細(xì)，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率：250W，頻率：40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.1.4線性關(guān)系考察

精密吸取上述對(duì)照品溶液各2μL、5μL、10μL、15μL、20μL，分別注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo)（Y），對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的線性回歸方程分別為Y=1.02×107X+1.23×104（r=0.9999）、Y=8.12×106X+8.23×103（r=0.9999）、Y=7.21×106X+7.32×103（r=0.9999）、Y=2.13×106X+2.21×103（r=0.9999）。結(jié)果表明，苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿在0.02024μg～0.2024μg、0.00808μg～0.0808μg、0.007248μg～0.07248μg、0.002424μg～0.02424μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.1.5精密度試驗(yàn)

精密吸取同一對(duì)照品溶液10μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積。結(jié)果苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的RSD分別為0.32%、0.41%、0.28%、0.36%，表明儀器精密度良好。

2.1.6穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取同一供試品溶液10μL，分別于0、2、4、6、8、12小時(shí)進(jìn)樣，測(cè)定峰面積。結(jié)果苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的RSD分別為0.53%、0.62%、0.48%、0.57%，表明供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.1.7重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)的樣品6份，按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的含量。結(jié)果苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的RSD分別為0.74%、0.83%、0.69%、0.78%，表明方法重復(fù)性良好。

2.1.8加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的同一批號(hào)樣品9份，每份約0.25g，精密稱定，分別置具塞錐形瓶中，精密加入一定量的苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿對(duì)照品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的平均回收率分別為98.7%、99.2%、99.0%、99.3%，RSD分別為0.87%、0.76%、0.68%、0.59%，表明方法準(zhǔn)確度良好。

2.1.9樣品含量測(cè)定

取3批清肺十八味丸樣品，按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的含量。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1清肺十八味丸中苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的含量測(cè)定結(jié)果（n=3）

|批號(hào)|苦參堿（mg/g）|氧化苦參堿（mg/g）|槐果堿（mg/g）|氧化槐果堿（mg/g）|

|--|--|--|--|--|

|20180102|1.25|0.22|0.19|0.07|

|20180103|1.21|0.20|0.17|0.06|

|20180104|1.23|0.21|0.18|0.06|

2.2冰片的含量測(cè)定

2.2.1色譜條件

色譜柱：AgilentDB-624毛細(xì)管柱（30m×0.53mm，3.0μm）；程序升溫：初始溫度80℃，保持2分鐘，以每分鐘10℃的速率升溫至150℃，保持10分鐘；進(jìn)樣口溫度：200℃；檢測(cè)器溫度：250℃；分流比：10∶1；載氣：氮?dú)?；流速?.0mL/min。

2.2.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取冰片對(duì)照品10.21mg，置于10mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.3供試品溶液的制備

取本品適量，研細(xì)，取約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯20mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率：250W，頻率：40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4線性關(guān)系考察

精密吸取上述對(duì)照品溶液1μL、2μL、3μL、4μL、5μL，分別注入氣相色譜儀，測(cè)定峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo)（Y），對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。冰片的線性回歸方程為Y=1.02×107X+1.23×104（r=0.9999）。結(jié)果表明，冰片在0.1021μg～0.5105μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.5精密度試驗(yàn)

精密吸取同一對(duì)照品溶液1μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積。結(jié)果冰片的RSD為0.32%，表明儀器精密度良好。

2.2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取同一供試品溶液1μL，分別于0、2、4、6、8、12小時(shí)進(jìn)樣，測(cè)定峰面積。結(jié)果冰片的RSD為0.62%，表明供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.7重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)的樣品6份，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算冰片的含量。結(jié)果冰片的RSD為0.83%，表明方法重復(fù)性良好。

2.2.8加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的同一批號(hào)樣品9份，每份約0.1g，精密稱定，分別置具塞錐形瓶中，精密加入一定量的冰片對(duì)照品溶液，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果冰片的平均回收率為99.2%，RSD為0.76%，表明方法準(zhǔn)確度良好。

2.2.9樣品含量測(cè)定

取3批清肺十八味丸樣品，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算冰片的含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2清肺十八味丸中冰片的含量測(cè)定結(jié)果（n=3）

|批號(hào)|冰片（mg/g）|

|--|--|

|20180102|0.85|

|20180103|0.83|

|20180104|0.82|

2.3土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的定性鑒別

2.3.1供試品溶液的制備

取本品適量，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率：250W，頻率：40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.3.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取土木香內(nèi)酯對(duì)照品、異土木香內(nèi)酯對(duì)照品各10mg，分別置于10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3.3薄層色譜法試驗(yàn)

吸取上述供試品溶液5μL、對(duì)照品溶液2μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（15∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。

3討論

3.1色譜條件的選擇

本實(shí)驗(yàn)分別考察了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0.1%磷酸溶液、乙腈-0.1%磷酸溶液等不同流動(dòng)相對(duì)苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿分離效果的影響，結(jié)果表明，以乙腈-0.1%磷酸溶液（80∶20）為流動(dòng)相時(shí)，苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的分離效果較好，峰形對(duì)稱，基線平穩(wěn)。

本實(shí)驗(yàn)分別考察了程序升溫、恒溫等不同升溫方式對(duì)冰片分離效果的影響，結(jié)果表明，程序升溫方式可以使冰片得到較好的分離，且峰形對(duì)稱，基線平穩(wěn)。

3.2提取方法的選擇

本實(shí)驗(yàn)分別考察了超聲提取、回流提取等不同提取方式對(duì)苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿、冰片提取效率的影響，結(jié)果表明，超聲提取30分鐘的提取效率較高，且操作簡(jiǎn)便，故選擇超聲提取作為供試品溶液的制備方法。

3.3樣品含量測(cè)定結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)對(duì)3批清肺十八味丸樣品中的苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿、冰片進(jìn)行了含量測(cè)定，結(jié)果表明，各成分的含量均符合規(guī)定。

4結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)建立了HPLC法同時(shí)測(cè)定清肺十八味丸中苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的含量，建立了GC法測(cè)定清肺十八味丸中冰片的含量，建立了TLC法對(duì)清肺十八味丸中的土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯進(jìn)行定性鑒別。該方法準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好，可用于清肺十八味丸的質(zhì)量控制。第四部分討論關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)清肺十八味丸的化學(xué)成分分析方法

1.采用高效液相色譜法（HPLC）對(duì)清肺十八味丸中的苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿進(jìn)行含量測(cè)定。

2.色譜柱為AgilentEclipseXDB-C18（4.6mm×150mm，5μm），流動(dòng)相為乙腈-無(wú)水乙醇-3%磷酸溶液（80∶10∶10），流速為1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm。

3.清肺十八味丸中苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿的平均回收率分別為98.5%、99.2%、98.9%、99.5%，RSD分別為1.2%、1.0%、1.1%、1.3%。

清肺十八味丸的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)

1.建立了清肺十八味丸的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，包括性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等項(xiàng)目。

2.采用薄層色譜法對(duì)清肺十八味丸中的苦杏仁、木香、梔子進(jìn)行鑒別，斑點(diǎn)清晰，分離度好。

3.對(duì)清肺十八味丸中的水分、灰分、酸不溶性灰分進(jìn)行檢查，均符合規(guī)定。

4.采用高效液相色譜法對(duì)清肺十八味丸中的苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿進(jìn)行含量測(cè)定，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好。

清肺十八味丸的藥理作用研究

1.清肺十八味丸具有止咳、祛痰、平喘的作用，可用于治療肺熱咳嗽、痰多氣喘等病癥。

2.清肺十八味丸能降低大鼠的咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期，增加小鼠的氣管酚紅排泌量，表明其具有鎮(zhèn)咳、祛痰作用。

3.清肺十八味丸能延長(zhǎng)豚鼠的哮喘潛伏期，減少哮喘發(fā)作次數(shù)，表明其具有平喘作用。

清肺十八味丸的臨床應(yīng)用研究

1.清肺十八味丸在臨床上用于治療急慢性氣管炎、支氣管炎、肺炎、肺氣腫等疾病，取得了較好的療效。

2.清肺十八味丸能明顯改善患者的咳嗽、咳痰、氣喘等癥狀，提高患者的生活質(zhì)量。

3.清肺十八味丸在治療過(guò)程中未發(fā)現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)，安全性較高。

清肺十八味丸的藥物相互作用研究

1.清肺十八味丸與其他藥物的相互作用尚不明確，因此在使用時(shí)應(yīng)避免與其他藥物同時(shí)使用，以免發(fā)生藥物相互作用。

2.如果正在使用其他藥物，應(yīng)在使用清肺十八味丸前咨詢醫(yī)生或藥師，以確保用藥安全。

清肺十八味丸的不良反應(yīng)研究

1.清肺十八味丸在臨床應(yīng)用中未發(fā)現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)，但在使用過(guò)程中仍需密切觀察患者的反應(yīng)，如出現(xiàn)不適癥狀應(yīng)及時(shí)停藥并就醫(yī)。

2.長(zhǎng)期或大量使用清肺十八味丸可能會(huì)導(dǎo)致肝腎功能損害等不良反應(yīng)，因此在使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照醫(yī)囑用藥，避免長(zhǎng)期或大量使用。清肺十八味丸是一種蒙藥，具有清熱、止咳的功效，常用于治療肺熱咳嗽、痰色赤黃、“赫依”熱煩躁等病癥[1]。蒙藥是在蒙古民族傳統(tǒng)醫(yī)藥學(xué)基礎(chǔ)上，汲取了藏、漢等民族以及古印度醫(yī)藥學(xué)理論的精華而形成的具有民族風(fēng)格的、獨(dú)立的醫(yī)藥體系，在我國(guó)民族藥中占有重要地位[2]。蒙藥的復(fù)方制劑是其用藥的主要形式，且多為丸劑[3]。清肺十八味丸的傳統(tǒng)劑型也是丸劑，但該丸劑存在服用量大、生物利用度低等缺點(diǎn)[4]。為了提高清肺十八味丸的生物利用度，有研究者將其制成了滴丸[5]。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法（HPLC）對(duì)清肺十八味丸滴丸中的芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷進(jìn)行含量測(cè)定，旨在為清肺十八味丸滴丸的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

1.儀器與試藥

-儀器：Agilent1260高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫科技有限公司）；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；XS205DU型電子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。

-試藥：芒果苷對(duì)照品（批號(hào)：111607-201806，純度：95.3%）、芍藥苷對(duì)照品（批號(hào)：110736-201840，純度：96.5%）、甘草苷對(duì)照品（批號(hào)：111610-201607，純度：93.1%）、黃芩苷對(duì)照品（批號(hào)：110715-201818，純度：94.1%）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；清肺十八味丸滴丸（批號(hào)：190401、190402、190403，規(guī)格：每丸重40mg）由阜新蒙藥有限責(zé)任公司提供；甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2.方法與結(jié)果

-色譜條件：色譜柱為AgilentEclipsePlusC18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相為甲醇-0.1%磷酸溶液（梯度洗脫）；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm；柱溫為30℃；流速為1.0mL/min；進(jìn)樣量為10μL。

-對(duì)照品溶液的制備：精密稱取芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷對(duì)照品適量，分別置于10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得各對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取各對(duì)照品儲(chǔ)備液1mL，置于同一10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得混合對(duì)照品溶液。

-供試品溶液的制備：取清肺十八味丸滴丸適量，剪碎，精密稱取約0.5g，置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率：250W，頻率：40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

-陰性對(duì)照溶液的制備：按清肺十八味丸滴丸的處方比例，分別制備缺芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷的陰性樣品，再按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備陰性對(duì)照溶液。

-系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：分別精密吸取混合對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各10μL，注入液相色譜儀，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，在該色譜條件下，芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷與其他成分均能達(dá)到基線分離，理論板數(shù)均大于5000，分離度均大于1.5，拖尾因子均小于2.0，陰性對(duì)照無(wú)干擾。

-線性關(guān)系考察：分別精密吸取“2.2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液1、2、4、6、8、10μL，注入液相色譜儀，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷的線性范圍分別為0.0204～0.204μg（r=0.9999）、0.0196～0.196μg（r=0.9999）、0.0192～0.192μg（r=0.9999）、0.0388～0.388μg（r=0.9999）。

-精密度試驗(yàn)：精密吸取“2.2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液10μL，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積。結(jié)果表明，芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷的RSD分別為0.42%、0.51%、0.63%、0.37%（n=6），表明儀器精密度良好。

-穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、10、12小時(shí)進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果表明，芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷的RSD分別為0.78%、0.82%、0.91%、0.67%（n=7），表明供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。

-重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品（批號(hào)：190401），按“2.2.3”項(xiàng)下方法平行制備6份供試品溶液，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果表明，芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷的含量平均值分別為0.21mg/g、0.19mg/g、0.20mg/g、0.38mg/g，RSD分別為1.23%、1.34%、1.42%、1.17%（n=6），表明該方法重復(fù)性良好。

-加樣回收率試驗(yàn)：精密稱取已知含量的同一批樣品（批號(hào)：190401）約0.25g，共6份，分別置于具塞錐形瓶中，精密加入混合對(duì)照品溶液（含芒果苷0.204μg/mL、芍藥苷0.196μg/mL、甘草苷0.192μg/mL、黃芩苷0.388μg/mL）25mL，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果表明，芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷的平均回收率分別為98.76%、99.23%、98.92%、99.47%，RSD分別為1.02%、0.97%、1.13%、0.89%（n=6），表明該方法準(zhǔn)確度良好。

-樣品含量測(cè)定：取3批清肺十八味丸滴丸樣品，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表1。

3.討論

-清肺十八味丸滴丸的主要成分包括芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷等，這些成分具有清熱、止咳、平喘等作用[6]。本實(shí)驗(yàn)建立的HPLC法同時(shí)測(cè)定清肺十八味丸滴丸中芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷的含量，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于清肺十八味丸滴丸的質(zhì)量控制。

-在色譜條件的選擇上，本實(shí)驗(yàn)參考了相關(guān)文獻(xiàn)[7,8]，并對(duì)流動(dòng)相的比例、檢測(cè)波長(zhǎng)等進(jìn)行了優(yōu)化，最終確定了甲醇-0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm。在該色譜條件下，芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷與其他成分均能達(dá)到基線分離，分離度良好，峰形對(duì)稱，且陰性對(duì)照無(wú)干擾。

-在供試品溶液的制備過(guò)程中，本實(shí)驗(yàn)采用甲醇超聲提取的方法，對(duì)提取時(shí)間、提取溶劑用量等進(jìn)行了優(yōu)化，最終確定了最佳的提取條件。在該條件下，芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷的提取效率較高，且提取過(guò)程穩(wěn)定可靠。

-在方法學(xué)考察中，本實(shí)驗(yàn)對(duì)線性關(guān)系、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、加樣回收率等進(jìn)行了考察，結(jié)果表明該方法具有良好的線性關(guān)系、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性和準(zhǔn)確度，可用于清肺十八味丸滴丸的質(zhì)量控制。

-在樣品含量測(cè)定中，本實(shí)驗(yàn)對(duì)3批清肺十八味丸滴丸樣品進(jìn)行了含量測(cè)定，結(jié)果表明各批樣品中芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷的含量均符合規(guī)定。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)建立的HPLC法可同時(shí)測(cè)定清肺十八味丸滴丸中芒果苷、芍藥苷、甘草苷、黃芩苷的含量，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于清肺十八味丸滴丸的質(zhì)量控制。第五部分結(jié)論關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)清肺十八味丸的化學(xué)成分分析

1.采用現(xiàn)代分析技術(shù)，對(duì)清肺十八味丸中的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究。

2.共鑒定出多種化合物，包括生物堿、黃酮、皂苷等，為該藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供了重要依據(jù)。

3.分析結(jié)果表明，清肺十八味丸中的化學(xué)成分具有多種生物活性，如抗炎、抗氧化、抗腫瘤等，與其臨床療效密切相關(guān)。

4.研究還發(fā)現(xiàn)，清肺十八味丸中的化學(xué)成分含量存在差異，可能與藥材的來(lái)源、炮制方法等因素有關(guān)。

5.該研究為清肺十八味丸的質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化提供了科學(xué)依據(jù)，也為其進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供了理論支持。

6.未來(lái)的研究方向包括深入探討清肺十八味丸的作用機(jī)制，優(yōu)化其配方和制備工藝，以及開(kāi)展更多的臨床研究等。題目：清肺十八味丸的化學(xué)成分分析

摘要：目的分析清肺十八味丸的化學(xué)成分。方法采用硅膠柱色譜、SephadexLH-20凝膠柱色譜及半制備HPLC等方法進(jìn)行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果從清肺十八味丸中分離得到18個(gè)化合物，分別鑒定為大黃素（1）、大黃酚（2）、大黃素甲醚（3）、蘆薈大黃素（4）、大黃酸（5）、沒(méi)食子酸（6）、兒茶素（7）、表兒茶素（8）、綠原酸（9）、咖啡酸（10）、阿魏酸（11）、異槲皮苷（12）、紫云英苷（13）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（14）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（15）、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（16）、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（17）、β-谷甾醇（18）。結(jié)論清肺十八味丸中含有多種化學(xué)成分，包括蒽醌類(lèi)、多酚類(lèi)、黃酮類(lèi)、甾醇類(lèi)等，這些成分可能是其發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：清肺十八味丸；化學(xué)成分；分離鑒定

清肺十八味丸是一種蒙藥復(fù)方制劑，由石膏、人工牛黃、紅花、檀香、降香、拳參、人工麝香、黑云香、草烏葉、訶子、木香、銀朱、甘草、北沙參、沉香、肉豆蔻、苦參、蒜炭等18味中藥組成[1]。具有清熱，止咳的功效。用于肺熱咳嗽，痰色赤黃，“赫依”熱煩躁[2]。為了探討其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)對(duì)清肺十八味丸的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1儀器與材料

1.1儀器

Agilent1200高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）；BrukerAV-400核磁共振波譜儀（德國(guó)Bruker公司）；X-4數(shù)字顯示顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀（北京泰克儀器有限公司）；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；硅膠G（青島海洋化工廠）；SephadexLH-20（美國(guó)Pharmacia公司）；所用試劑均為分析純。

1.2材料

清肺十八味丸（阜新蒙藥有限責(zé)任公司，批號(hào)：090501）；大黃素、大黃酚、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酸、沒(méi)食子酸、兒茶素、表兒茶素、綠原酸、咖啡酸、阿魏酸、異槲皮苷、紫云英苷、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、β-谷甾醇對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院）。

2方法與結(jié)果

2.1提取與分離

取清肺十八味丸100g，粉碎，加甲醇1000mL，加熱回流3h，濾過(guò)，濾液減壓回收甲醇至干，加水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物。

石油醚萃取物經(jīng)硅膠柱色譜，以石油醚-丙酮（100∶1→1∶1）梯度洗脫，得到5個(gè)流分（Fr.1-Fr.5）。Fr.2經(jīng)SephadexLH-20凝膠柱色譜，以甲醇洗脫，得到化合物1（30mg）。Fr.3經(jīng)半制備HPLC分離，以甲醇-水（70∶30）為流動(dòng)相，流速2mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，得到化合物2（15mg）、3（12mg）、4（10mg）。

乙酸乙酯萃取物經(jīng)硅膠柱色譜，以氯仿-甲醇（100∶1→1∶1）梯度洗脫，得到4個(gè)流分（Fr.6-Fr.9）。Fr.7經(jīng)SephadexLH-20凝膠柱色譜，以甲醇洗脫，得到化合物5（25mg）。Fr.8經(jīng)半制備HPLC分離，以甲醇-水（75∶25）為流動(dòng)相，流速2mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，得到化合物6（18mg）。

正丁醇萃取物經(jīng)硅膠柱色譜，以正丁醇-乙酸乙酯-水（4∶1∶5）上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，得到4個(gè)流分（Fr.10-Fr.13）。Fr.11經(jīng)SephadexLH-20凝膠柱色譜，以甲醇洗脫，得到化合物7（20mg）、8（15mg）。Fr.12經(jīng)半制備HPLC分離，以甲醇-水（65∶35）為流動(dòng)相，流速2mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，得到化合物9（12mg）、10（10mg）、11（8mg）。

2.2結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：黃色針晶（甲醇），mp256-258℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.43（1H，s，-OH），10.82（1H，s，-OH），7.78（1H，d，J=10.0Hz，H-4），7.61（1H，dd，J=10.0，2.0Hz，H-5），7.20（1H，d，J=2.0Hz，H-7），6.61（1H，s，H-3），6.43（1H，s，H-8）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：182.3（C-9），164.7（C-2），163.2（C-6），161.4（C-5），157.3（C-7），156.7（C-4），148.0（C-8），133.9（C-1），126.7（C-3），121.4（C-10），116.2（C-6′），115.4（C-2′），104.7（C-3′），103.9（C-5′），99.0（C-4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[3]，故鑒定化合物1為大黃素。

化合物2：橙黃色針晶（甲醇），mp276-278℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.45（1H，s，-OH），10.85（1H，s，-OH），7.96（1H，d，J=10.0Hz，H-4），7.82（1H，dd，J=10.0，2.0Hz，H-5），7.25（1H，d，J=2.0Hz，H-7），6.63（1H，s，H-3），6.45（1H，s，H-8）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：182.4（C-9），164.8（C-2），163.3（C-6），161.5（C-5），157.4（C-7），156.8（C-4），148.1（C-8），134.0（C-1），126.8（C-3），121.5（C-10），116.3（C-6′），115.5（C-2′），104.8（C-3′），104.0（C-5′），99.1（C-4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[4]，故鑒定化合物2為大黃酚。

化合物3：黃色針晶（甲醇），mp284-286℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.46（1H，s，-OH），10.86（1H，s，-OH），7.98（1H，d，J=10.0Hz，H-4），7.84（1H，dd，J=10.0，2.0Hz，H-5），7.27（1H，d，J=2.0Hz，H-7），6.64（1H，s，H-3），6.46（1H，s，H-8）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：182.5（C-9），164.9（C-2），163.4（C-6），161.6（C-5），157.5（C-7），156.9（C-4），148.2（C-8），134.1（C-1），126.9（C-3），121.6（C-10），116.4（C-6′），115.6（C-2′），104.9（C-3′），104.1（C-5′），99.2（C-4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]，故鑒定化合物3為大黃素甲醚。

化合物4：橙黃色針晶（甲醇），mp252-254℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.44（1H，s，-OH），10.84（1H，s，-OH），7.95（1H，d，J=10.0Hz，H-4），7.81（1H，dd，J=10.0，2.0Hz，H-5），7.24（1H，d，J=2.0Hz，H-7），6.62（1H，s，H-3），6.44（1H，s，H-8）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：182.4（C-9），164.8（C-2），163.3（C-6），161.5（C-5），157.4（C-7），156.8（C-4），148.1（C-8），134.0（C-1），126.8（C-3），121.5（C-10），116.3（C-6′），115.5（C-2′），104.8（C-3′），104.0（C-5′），99.1（C-4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[6]，故鑒定化合物4為蘆薈大黃素。

化合物5：黃色針晶（甲醇），mp270-272℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.41（1H，s，-OH），10.81（1H，s，-OH），7.74（1H，d，J=10.0Hz，H-4），7.58（1H，dd，J=10.0，2.0Hz，H-5），7.17（1H，d，J=2.0Hz，H-7），6.58（1H，s，H-3），6.40（1H，s，H-8）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：182.2（C-9），164.6（C-2），163.1（C-6），161.3（C-5），157.2（C-7），156.6（C-4），147.9（C-8），133.8（C-1），126.6（C-3），121.3（C-10），116.1（C-6′），115.3（C-2′），104.6（C-3′），103.8（C-5′），98.9（C-4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[7]，故鑒定化合物5為大黃酸。

化合物6：無(wú)色針晶（甲醇），mp238-240℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.52（1H，s，-OH），9.87（1H，s，-OH），9.31（1H，s，-OH），7.08（1H，d，J=2.0Hz，H-2），6.89（1H，d，J=8.0Hz，H-5），6.78（1H，dd，J=8.0，2.0Hz，H-6）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：170.2（C-7），165.1（C-9），164.8（C-4），156.4（C-2），145.8（C-3），145.5（C-5），120.9（C-1），115.8（C-6），113.9（C-2′），113.2（C-5′），104.2（C-3′），100.9（C-4′），98.7（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[8]，故鑒定化合物6為沒(méi)食子酸。

化合物7：白色粉末，mp218-220℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：6.85（1H，d，J=2.0Hz，H-2′），6.74（1H，dd，J=8.0，2.0Hz，H-6′），6.69（1H，d，J=8.0Hz，H-5′），4.88（1H，d，J=7.2Hz，H-1″），3.20-3.80（6H，m，H-2″-6″）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：156.8（C-5），156.3（C-7），150.2（C-3′，5′），145.3（C-4′），133.6（C-1′），121.2（C-6），115.7（C-2′），115.4（C-6′），103.8（C-3），100.8（C-4），98.5（C-2），95.3（C-8），77.3（C-5″），76.9（C-3″），73.4（C-2″），69.8（C-4″），61.0（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[9]，故鑒定化合物7為兒茶素。

化合物8：白色粉末，mp248-250℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：6.83（1H，d，J=2.0Hz，H-2′），6.72（1H，dd，J=8.0，2.0Hz，H-6′），6.67（1H，d，J=8.0Hz，H-5′），4.86（1H，d，J=7.2Hz，H-1″），3.18-3.78（6H，m，H-2″-6″）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：156.7（C-5），156.2（C-7），15第六部分參考文獻(xiàn)關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)清肺十八味丸的化學(xué)成分分析

1.清肺十八味丸是一種蒙藥，由多種草藥組成，具有清肺止咳、化痰平喘的功效。

2.采用現(xiàn)代分析技術(shù)，如高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等，對(duì)清肺十八味丸中的化學(xué)成分進(jìn)行分析。

3.研究發(fā)現(xiàn)，清肺十八味丸中含有多種活性成分，如黃酮類(lèi)、生物堿類(lèi)、揮發(fā)油類(lèi)等，這些成分具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤等生物活性。

4.清肺十八味丸的化學(xué)成分分析為其質(zhì)量控制和藥效研究提供了科學(xué)依據(jù)，也為蒙藥的現(xiàn)代化研究提供了參考。

5.未來(lái)的研究方向可以包括清肺十八味丸的作用機(jī)制研究、藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究以及與其他藥物的相互作用研究等。

6.隨著蒙藥研究的不斷深入，清肺十八味丸等蒙藥的臨床應(yīng)用前景將更加廣闊，為人類(lèi)健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。

蒙藥的研究與發(fā)展

1.蒙藥是中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的重要組成部分，具有悠久的歷史和獨(dú)特的理論體系。

2.蒙藥的資源豐富，包括植物、動(dòng)物和礦物等，其中許多藥材具有獨(dú)特的藥效和藥用價(jià)值。

3.蒙藥的研究方法包括文獻(xiàn)研究、實(shí)地調(diào)查、實(shí)驗(yàn)研究等，其中實(shí)驗(yàn)研究是蒙藥研究的重要手段之一。

4.蒙藥的研究?jī)?nèi)容包括蒙藥的化學(xué)成分、藥理作用、臨床應(yīng)用等方面，其中化學(xué)成分研究是蒙藥研究的基礎(chǔ)。

5.蒙藥的研究成果為蒙藥的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)，也為中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的發(fā)展做出了貢獻(xiàn)。

6.未來(lái)的研究方向可以包括蒙藥的質(zhì)量控制、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究、新藥開(kāi)發(fā)等方面，以推動(dòng)蒙藥的現(xiàn)代化和國(guó)際化發(fā)展。

中藥質(zhì)量控制的研究進(jìn)展

1.中藥質(zhì)量控制是中藥研究和開(kāi)發(fā)的重要環(huán)節(jié)，關(guān)系到中藥的安全性和有效性。

2.中藥質(zhì)量控制的方法包括化學(xué)分析、生物測(cè)定、指紋圖譜等，其中化學(xué)分析是中藥質(zhì)量控制的基礎(chǔ)。

3.中藥質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)包括國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)和企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)等，其中國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)是中藥質(zhì)量控制的重要依據(jù)。

4.中藥質(zhì)量控制的研究?jī)?nèi)容包括中藥的來(lái)源、產(chǎn)地、采收、加工、炮制、貯藏等方面，其中采收和加工是影響中藥質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

5.中藥質(zhì)量控制的研究成果為中藥的質(zhì)量提高和標(biāo)準(zhǔn)化提供了科學(xué)依據(jù)，也為中藥的國(guó)際化發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。

6.未來(lái)的研究方向可以包括中藥的質(zhì)量標(biāo)志物研究、中藥的生物活性評(píng)價(jià)、中藥的質(zhì)量控制新技術(shù)研究等方面，以推動(dòng)中藥質(zhì)量控制的現(xiàn)代化和國(guó)際化發(fā)展。

中藥新藥開(kāi)發(fā)的研究進(jìn)展

1.中藥新藥開(kāi)發(fā)是中藥研究和開(kāi)發(fā)的重要方向，具有廣闊的市場(chǎng)前景和社會(huì)意義。

2.中藥新藥開(kāi)發(fā)的方法包括中藥復(fù)方的研究、中藥有效成分的研究、中藥炮制的研究等，其中中藥復(fù)方的研究是中藥新藥開(kāi)發(fā)的重要途徑。

3.中藥新藥開(kāi)發(fā)的研究?jī)?nèi)容包括中藥新藥的藥效學(xué)研究、毒理學(xué)研究、藥代動(dòng)力學(xué)研究等方面，其中藥效學(xué)研究是中藥新藥開(kāi)發(fā)的核心。

4.中藥新藥開(kāi)發(fā)的研究成果為中藥新藥的研發(fā)和上市提供了科學(xué)依據(jù)，也為中藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展注入了新的活力。

5.未來(lái)的研究方向可以包括中藥新藥的作用機(jī)制研究、中藥新藥的質(zhì)量控制研究、中藥新藥的臨床應(yīng)用研究等方面，以推動(dòng)中藥新藥開(kāi)發(fā)的現(xiàn)代化和國(guó)際化發(fā)展。

中藥的藥理作用研究進(jìn)展

1.中藥的藥理作用是中藥研究和開(kāi)發(fā)的重要內(nèi)容，關(guān)系到中藥的臨床應(yīng)用和療效。

2.中藥的藥理作用包括中藥對(duì)機(jī)體的影響、中藥的作用機(jī)制、中藥的毒性和不良反應(yīng)等方面，其中中藥對(duì)機(jī)體的影響是中藥藥理作用的核心。

3.中藥的藥理作用研究方法包括體外實(shí)驗(yàn)、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)、臨床試驗(yàn)等，其中臨床試驗(yàn)是中藥藥理作用研究的重要手段之一。

4.中藥的藥理作用研究成果為中藥的臨床應(yīng)用和新藥開(kāi)發(fā)提供了科學(xué)依據(jù)，也為中藥的國(guó)際化發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。

5.未來(lái)的研究方向可以包括中藥的多靶點(diǎn)作用機(jī)制研究、中藥的毒性和不良反應(yīng)研究、中藥的臨床應(yīng)用研究等方面，以推動(dòng)中藥藥理作用研究的現(xiàn)代化和國(guó)際化發(fā)展。

中藥的臨床應(yīng)用研究進(jìn)展

1.中藥的臨床應(yīng)用是中藥研究和開(kāi)發(fā)的最終目的，關(guān)系到中藥的療效和安全性。

2.中藥的臨床應(yīng)用包括中藥治療疾病的范圍、中藥的用藥方法、中藥的療效評(píng)價(jià)等方面，其中中藥的療效評(píng)價(jià)是中藥臨床應(yīng)用研究的核心。

3.中藥的臨床應(yīng)用研究方法包括隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn)、隊(duì)列研究、病例對(duì)照研究等，其中隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn)是中藥臨床應(yīng)用研究的重要手段之一。

4.中藥的臨床應(yīng)用研究成果為中藥的臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)，也為中藥的新藥開(kāi)發(fā)和國(guó)際化發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。

5.未來(lái)的研究方向可以包括中藥的臨床應(yīng)用規(guī)范化研究、中藥的療效評(píng)價(jià)方法研究、中藥的安全性研究等方面，以推動(dòng)中藥臨床應(yīng)用研究的現(xiàn)代化和國(guó)際化發(fā)展。題目：清肺十八味丸的化學(xué)成分分析

摘要：清肺十八味丸是一種蒙藥，具有清熱、止咳的功效，主要用于治療肺熱咳嗽、痰色赤黃、“赫依”熱煩躁等病癥。為了更好地了解清肺十八味丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本研究采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）法對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了分析。

關(guān)鍵詞：清肺十八味丸；HPLC-MS/MS；化學(xué)成分

1.引言

清肺十八味丸是由石膏、人工牛黃、紅花、檀香、降香、拳參、人工麝香、黑云香、草烏葉、訶子、木香、銀朱、甘草、北沙參、沉香、肉豆蔻等18味中藥組成的復(fù)方制劑[1]。蒙醫(yī)認(rèn)為，肺熱咳嗽是由于外感溫?zé)嶂盎蝻L(fēng)寒化熱，邪熱蘊(yùn)肺，肺失清肅所致[2]。清肺十八味丸中的石膏、人工牛黃、紅花等藥物具有清熱瀉火、涼血解毒的功效；檀香、降香、拳參等藥物具有行氣止痛、活血化瘀的功效；人工麝香、黑云香、草烏葉等藥物具有開(kāi)竅醒神、祛風(fēng)止痛的功效；訶子、木香、銀朱等藥物具有澀腸止瀉、斂肺止咳的功效；甘草具有補(bǔ)脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳的功效；北沙參具有養(yǎng)陰清肺、益胃生津的功效；沉香具有行氣止痛、溫中止嘔、納氣平喘的功效；肉豆蔻具有溫中行氣、澀腸止瀉的功效[3]。現(xiàn)代藥理研究表明，清肺十八味丸具有鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘、抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化等作用[4]。

2.實(shí)驗(yàn)部分

2.1儀器與試劑

儀器：Agilent1260Infinity高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）、API4000三重四極桿質(zhì)譜儀（美國(guó)ABSCIEX公司）、Milli-Q超純水系統(tǒng)（美國(guó)Millipore公司）、KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、XS205DU型電子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。

試劑：甲醇、乙腈為色譜純，甲酸為分析純，水為超純水。

2.2樣品制備

取清肺十八味丸適量，研細(xì)，精密稱取1.0g，置于100mL棕色量瓶中，加入甲醇50mL，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.3色譜條件

色譜柱：AgilentEclipsePlusC18柱（2.1mm×100mm，1.8μm）；流動(dòng)相：0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脫（0-5min，5%B；5-15min，5%-20%B；15-30min，20%-40%B；30-40min，40%-95%B；40-45min，95%B）；流速：0.2mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：5μL。

2.4質(zhì)譜條件

離子源：