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第十單元生物技術(shù)與工程動物細(xì)胞工程一、選擇題1.(2024·江蘇蘇州模擬)研究小組為測定藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性,準(zhǔn)備對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)。下列有關(guān)說法正確的是()A.在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時,可用胃蛋白酶處理B.細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是作為細(xì)胞代謝的原料C.取甲細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),傳至10~50代就會完全停止D.乙細(xì)胞在原代培養(yǎng)過程中,最終會出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象2.下圖為動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞增殖情況,下列有關(guān)說法正確的是()A.AB段可能發(fā)生了接觸抑制現(xiàn)象B.C點細(xì)胞發(fā)生了癌變C.最好選取圖中CD段的細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,獲得既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞D.在細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)過程中,細(xì)胞的基因型一定不會發(fā)生改變3.細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)等多學(xué)科的原理和方法,通過細(xì)胞器、細(xì)胞或組織水平上的操作,有目的地獲得特定的細(xì)胞、組織、器官、個體或其產(chǎn)品的一門綜合性的生物工程,包括動物細(xì)胞工程和植物細(xì)胞工程。下列有關(guān)說法錯誤的是()A.進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時,CO2培養(yǎng)箱中常用含有95%空氣和5%CO2的混合氣體B.動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植C.植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性D.誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合都可以用電融合法、PEG融合法4.(2024·湖北模擬)VEGF是血管內(nèi)皮生長因子。研究表明惡性腫瘤患者血清中的VEGF水平普遍高于健康人,VEGF已成為新型腫瘤標(biāo)志物,在腫瘤篩查中具有診斷價值??蒲腥藛T設(shè)計如下流程制備VEGF單克隆抗體。下列敘述錯誤的是()A.該流程利用了動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.①是從免疫小鼠脾臟中提取的多種B淋巴細(xì)胞C.②和③所進(jìn)行的兩次篩選過程都不需要用到VEGFD.該單克隆抗體直接應(yīng)用于人體可能會引起過敏反應(yīng)5.(2023·東營模擬)下圖為治療性克隆的基本過程,首先取患者的體細(xì)胞核,移植到去核的卵母細(xì)胞中,在早期胚胎形成后,從中分離獲得胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞),對ES細(xì)胞進(jìn)行基因修飾和定向分化處理,將定向分化后的細(xì)胞移植給患者,從而達(dá)到治療疾病的目的。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞處于減數(shù)分裂Ⅱ中期B.獲得圖中去核的卵母細(xì)胞時,可通過顯微操作去核C.圖中形成的器官用于移植,理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)D.治療性克隆過程采用的技術(shù)有核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)6.(2024·廣東廣州模擬)克隆猴“中中”“華華”的誕生,是中國科學(xué)家偉大的杰作,也解決了無法克隆靈長類動物的難題。此過程不涉及的操作是()A.動物細(xì)胞培養(yǎng)B.卵母細(xì)胞顯微操作去核C.電刺激激活重構(gòu)胚D.精子獲能處理7.(2024·廣東佛山模擬)下圖為科學(xué)家在實驗室中培養(yǎng)“人造牛肉”的簡要過程,下列相關(guān)敘述正確的是()A.“人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn),但環(huán)境污染嚴(yán)重B.用胰蛋白酶處理牛肌肉組織,獲得分裂能力強的肌肉母細(xì)胞C.生物反應(yīng)器內(nèi)應(yīng)控制適宜的溫度,并充入純氧保證細(xì)胞呼吸D.培養(yǎng)瓶中的肌肉母細(xì)胞需定期用胰蛋白酶處理,分瓶后才能繼續(xù)增殖8.相較于其他模型動物(如小鼠和大鼠),兔的免疫系統(tǒng)可對更廣泛的抗原產(chǎn)生應(yīng)答,且其較大的脾臟可產(chǎn)生更多抗體。除此之外,兔的單克隆抗體具有天然多樣性、高親和力和特異性、全新的表位識別、易于人源化(已成為將外源抗體轉(zhuǎn)化為有效安全的治療藥物的重要方式)等優(yōu)勢。下列相關(guān)敘述正確的是()A.利用人源化兔單克隆抗體進(jìn)行治療時,機體將會發(fā)生細(xì)胞免疫B.給兔子注射抗原后,兔子體內(nèi)的抗體只有很少一部分是單克隆抗體C.利用選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞具有能迅速大量增殖的能力D.體外培養(yǎng)特異性雜交瘤細(xì)胞時,需要給予95%的O2和5%的CO29.(2023·廣東茂名模擬)治療性克隆有望解決供體器官短缺和免疫排斥等問題。下圖表示治療性克隆的過程,下列說法錯誤的是()A.細(xì)胞A常采用去核卵母細(xì)胞作為移植的受體細(xì)胞B.該治療性過程應(yīng)用了核移植、動物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)C.胚胎干細(xì)胞分化為多種體細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果D.動物細(xì)胞的培養(yǎng)需提供95%空氣和5%CO2的混合氣體二、選擇題10.(2024·黑龍江哈爾濱模擬)為降低乳腺癌治療藥物的副作用,科研人員嘗試在單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)上,構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC),過程如下圖1所示。(1)本實驗中,小鼠注射的特定抗原應(yīng)取自__________________。(2)步驟①常用方法包括____________融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等。(3)步驟②的細(xì)胞必須經(jīng)過步驟③克隆化培養(yǎng)和______________才能篩選得到符合要求的雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞可采用注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)或進(jìn)行體外培養(yǎng)的方式進(jìn)行擴大培養(yǎng)。體外培養(yǎng)時,首先應(yīng)保證其處于______________的環(huán)境,除了適宜的營養(yǎng)物質(zhì)、溫度等條件外,還需要控制的氣體條件是________________與5%二氧化碳的混合氣體,二氧化碳的主要作用是______________。在使用合成培養(yǎng)基時通常需加入血清,血清的作用是____________________________________________________________。(4)單克隆抗體的優(yōu)點是__________________________________________。單克隆抗體是ADC中的______(填“a”或“b”)部分。(5)研究發(fā)現(xiàn),ADC在患者體內(nèi)的作用如下圖2所示。①單克隆抗體除了運載藥物外,還有作為______、治療疾病等作用。②ADC進(jìn)入乳腺癌細(xì)胞后,細(xì)胞中的溶酶體可將其水解,釋放出的藥物最終作用于細(xì)胞核,可導(dǎo)致__________。③ADC能降低乳腺癌治療藥物的副作用,是因為單克隆抗體能精確地定位乳腺癌細(xì)胞,該過程依賴于____________原理。答案解析1、D解析:胃蛋白酶的最適pH大約為2,這一環(huán)境下細(xì)胞往往會受到破壞,不利于培養(yǎng),所以一般用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶處理細(xì)胞,A錯誤;培養(yǎng)箱中CO2的作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH,B錯誤;在適宜條件下,肝腫瘤細(xì)胞可以無限增殖,C錯誤;正常肝細(xì)胞在原代培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,停止增殖,D正確。2、A解析:動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),因此題圖中OB段包含了原代培養(yǎng)過程,AB段可能發(fā)生了接觸抑制現(xiàn)象,細(xì)胞分裂增殖幾乎停止,A正確;BC段的培養(yǎng)為傳代培養(yǎng),C點前后細(xì)胞增殖代數(shù)幾乎不再上升,沒有癌細(xì)胞無限增殖的特點,不能說明細(xì)胞發(fā)生了癌變,B錯誤;CD段細(xì)胞增殖緩慢,以至于完全停止,為了得到既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,最好選取題圖中D點后的細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,C錯誤;在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞進(jìn)行的是有絲分裂,所以培養(yǎng)出來的多數(shù)細(xì)胞基因型相同,但有少數(shù)細(xì)胞可能在培養(yǎng)過程中發(fā)生遺傳物質(zhì)改變,因此基因型可能會改變,D錯誤。3、C解析:進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將它們置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),A正確。由于動物胚胎細(xì)胞分化程度低,表現(xiàn)全能性相對容易,而動物體細(xì)胞分化程度高,表現(xiàn)全能性十分困難,因此動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植,B正確。植物細(xì)胞培養(yǎng)是指在離體條件下對單個植物細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù),不同于植物組織培養(yǎng),后者是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性,C錯誤。誘導(dǎo)原生質(zhì)體細(xì)胞融合的方法有電融合法、離心法、PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法等,誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有電融合法、PEG融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法,D正確。4、C解析:制備單克隆抗體需要將已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,制成雜交瘤細(xì)胞,然后進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)使之產(chǎn)生單克隆抗體,該過程中需要用到動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),A正確。由題圖可知,在①之前向小鼠體內(nèi)注射VEGF(作抗原),引發(fā)小鼠產(chǎn)生特異性免疫,獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞,由于在此過程中,小鼠還可能接受其他抗原物質(zhì)刺激,因此從其脾臟中提取的B淋巴細(xì)胞有多種,B正確。②代表利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行的第一次篩選,該過程不需要用到VEGF;③代表第二次篩選,即克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,其中抗體檢測需要用到VEGF與克隆化培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交,C錯誤。由題圖可知,該單克隆抗體是利用小鼠制備的,對人體來說屬于異源蛋白,直接應(yīng)用于人體可能引起過敏反應(yīng)甚至危及生命,D正確。5、D解析:卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)分裂Ⅱ中期時,細(xì)胞已經(jīng)成熟,具備受精能力,且具有促進(jìn)核全能性表達(dá)的物質(zhì),因此接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于減數(shù)分裂Ⅱ中期,A正確;顯微鏡下可以通過顯微操作去核,B正確;題圖中形成的器官來源于患者的細(xì)胞,用于移植,理論上可以避免免疫排斥反應(yīng),C正確;治療性克隆過程采用了核移植技術(shù),不需進(jìn)行胚胎移植,D錯誤。6、D解析:體細(xì)胞克隆技術(shù)是指把動物體細(xì)胞經(jīng)過抑制培養(yǎng),使細(xì)胞處于休眠狀態(tài)。采用核移植的方法,利用細(xì)胞拆合或細(xì)胞重組技術(shù),將卵母細(xì)胞顯微操作去核后作為核受體,以體細(xì)胞或含少量細(xì)胞質(zhì)的細(xì)胞核即核質(zhì)體作為核供體,將后者移入前者中,構(gòu)建重組胚,供體核在去核卵母細(xì)胞的胞質(zhì)中重新編程,并啟動卵裂,開始胚胎發(fā)育過程,妊娠產(chǎn)仔,克隆出動物的技術(shù),又可稱之為體細(xì)胞核移植技術(shù),故此過程不涉及的操作是精子獲能處理,D正確。7、D解析:理論上來說,僅來自1只動物的干細(xì)胞,可制成的肉品數(shù)量,比宰殺1頭牛還多100萬倍,可有利于牛肉的工廠化生產(chǎn),同時也可減少對土地、飲用水和飼料的需求,且溫室氣體等其他環(huán)境污染物也會減少,A錯誤;胰蛋白酶處理動物組織,可以使組織分散成單個細(xì)胞,利于動物細(xì)胞培養(yǎng),B錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境為95%空氣(細(xì)胞代謝必需的)和5%CO2,C錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中懸液中的細(xì)胞會很快貼附在瓶壁上,培養(yǎng)瓶中的肌肉母細(xì)胞需定期用胰蛋白酶處理,分瓶后才能繼續(xù)增殖,D正確。8、C解析:抗體參與的是體液免疫,A錯誤;兔子體內(nèi)只有很少一部分B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生相應(yīng)抗體,還有其他抗原也可能引起抗體產(chǎn)生,而單克隆抗體是由特異性雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的,B錯誤;雜交瘤細(xì)胞具有能迅速大量增殖的能力,C正確;體外培養(yǎng)特異性雜交瘤細(xì)胞時,需要給予95%空氣和5%CO2的氣體條件,D錯誤。9、B解析:細(xì)胞A常采用去核卵母細(xì)胞作為移植的受體細(xì)胞,因為去核卵母細(xì)胞有激活動物細(xì)胞全能性的物質(zhì),且細(xì)胞體積大,易操作,所含營養(yǎng)物質(zhì)豐富,A正確;①表示核移植,②表示胚胎干細(xì)胞的增殖分化,該治療性過程應(yīng)用了核移植、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),并未涉及胚胎移植等技術(shù),B錯誤;細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因選擇性表達(dá),C正確;動物細(xì)胞的培養(yǎng)需提供95%空氣(有利于細(xì)胞呼吸,進(jìn)行正常代謝活動)和5%CO2(維持培養(yǎng)液的pH)的混合氣體,D正確。10、解析:(1)為獲得治療乳腺癌的單克隆抗體,給小鼠注射的特定抗原應(yīng)取自人的乳腺癌細(xì)胞。(2)步驟①為促進(jìn)動物細(xì)胞融合的過程,誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法主要有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法。(3)獲得的雜交瘤細(xì)胞必須進(jìn)行③克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,才能篩選得到符合要求的雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的特點是既可以無限增殖又可以產(chǎn)生特定抗體,得到的雜交瘤細(xì)胞可采用注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)或進(jìn)行體外培養(yǎng)的方式進(jìn)行擴大培養(yǎng)。體外培養(yǎng)時,首先應(yīng)保證其處于無菌、無毒的環(huán)境,除了適宜的營養(yǎng)物質(zhì)、溫度等條件外,還需要控制的氣體條件是95%空氣與5%二氧化碳的混合氣體,二氧化碳的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。在使用合成培養(yǎng)基時通常需加入血清,因為人們對動物細(xì)胞代謝所需要的營養(yǎng)物質(zhì)研究得還不是十分清楚,血清的作用是為動物細(xì)胞培養(yǎng)提供未知生長因子。(4)單克隆抗體能與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可大量制備,能準(zhǔn)確識別抗原的細(xì)微差異。圖1中的步驟④是將獲得的a單克隆抗體和b藥物這兩部分,通過接頭結(jié)合在一起,從而獲得ADC。(5)
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