氯胺酮頭發(fā)檢測(cè)試劑盒（熒光免疫層析法）（CSZ2200345）

一、申請(qǐng)人名稱杭州萊和生物技術(shù)有限公司浙江省杭州市濱江區(qū)西興街道廟后王路425號(hào)1號(hào)樓1層、401-406室杭州市濱江區(qū)西興街道廟后王路425號(hào)1號(hào)樓1-3層、401-404室一、產(chǎn)品概述（一）產(chǎn)品主要組成成分試劑盒包含測(cè)試卡、毛發(fā)處理液，還包含ID卡、一次性滴管、干燥劑。（具體內(nèi)容詳見產(chǎn)品說(shuō)明書）說(shuō)明：不同批次試劑中ID卡、測(cè)試卡和毛發(fā)處理液不能夠互換使用，以免產(chǎn)生錯(cuò)誤結(jié)果。（二）產(chǎn)品預(yù)期用途本產(chǎn)品用于體外定性檢測(cè)人體頭發(fā)樣本中最低檢出限為0.2ng/mg的氯胺酮。用于在有資質(zhì)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)中對(duì)6個(gè)月內(nèi)是否有氯胺酮藥物濫用的初篩檢測(cè)。需要進(jìn)一步確認(rèn)及評(píng)價(jià)的樣本應(yīng)采用靈敏度和特異性更高的檢測(cè)方法進(jìn)行。（三）產(chǎn)品包裝規(guī)格卡型：20人份/盒，25人份/盒，40人份/盒，50人份/盒，（四）產(chǎn)品檢驗(yàn)原理采用特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)，通過(guò)抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗原和頭發(fā)中可能含有的被檢測(cè)物的原理。試紙條含有被事先固定于膜上測(cè)試區(qū)（KET）的特異性氯胺酮合成抗原，毛發(fā)處理液中含有抗特異性小鼠抗氯胺酮IgG單克隆抗體熒光標(biāo)記物和兔IgG多克隆抗體熒光標(biāo)記物。測(cè)試時(shí)，將待測(cè)樣本用毛發(fā)處理液充分裂解后加入試劑盒加樣孔（S）內(nèi)，隨之在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析。如樣本中的藥物濃度低于臨界值或者沒(méi)有待測(cè)藥物時(shí)，熒光標(biāo)記的特異性抗體不能被樣本中的藥物全部結(jié)合，熒光標(biāo)記的特異性抗體在層析過(guò)程中會(huì)被固定在測(cè)試區(qū)（T）上的特異性抗原結(jié)合，則在測(cè)試區(qū)(T)內(nèi)出現(xiàn)較強(qiáng)的熒光信號(hào)。如樣本中的藥物濃度高于臨界值時(shí)，熒光標(biāo)記的特異性抗體被樣本中的藥物結(jié)合，在測(cè)試區(qū)內(nèi)（T）上的特異性抗原結(jié)合部分或沒(méi)有可以結(jié)合的特異性抗體，則測(cè)試區(qū)內(nèi)（T）出現(xiàn)微弱的熒光信號(hào)或者沒(méi)有熒光信號(hào)。無(wú)論待測(cè)樣本中是否存在待測(cè)藥物，層析過(guò)程都會(huì)將毛發(fā)處理液中的兔IgG多克隆抗體熒光標(biāo)記物帶到質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C）與山羊抗兔IgG多克隆抗體結(jié)合。通過(guò)干式熒光免疫分析儀讀數(shù)，可檢測(cè)出樣本中是否存在待檢測(cè)藥物。二、臨床前研究概述（一）主要原材料1.主要原材料的選擇本產(chǎn)品的主要原材料包括包被用氯胺酮抗原(KET-BSA)、熒光標(biāo)記氯胺酮抗原單克隆抗體、羊抗兔IgG、熒光標(biāo)記兔IgG、硝酸纖維素膜等。主要原材料均為外購(gòu)。申請(qǐng)人對(duì)主要原材料進(jìn)行了供應(yīng)商的選擇，通過(guò)功能性試驗(yàn)，篩選出合格供應(yīng)商，制定了主要原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并經(jīng)檢驗(yàn)合格。2.企業(yè)參考品的設(shè)置情況申請(qǐng)人設(shè)計(jì)了完整的企業(yè)參考品，包括陽(yáng)性參考品、陰性參考品、重復(fù)性參考品和最低檢出限參考品。企業(yè)參考品由未吸毒人員頭發(fā)、標(biāo)準(zhǔn)品制備而成。陽(yáng)性參考品P1、P2均使用陰性頭發(fā)萃取液作為基質(zhì)，添加相應(yīng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品制備而成；陰性參考品N1～N19、N21、N22涵蓋未吸毒人員頭發(fā)及使用陰性頭發(fā)萃取液作為基質(zhì)、添加相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品制備成的樣本，其中包含易引起干擾的結(jié)構(gòu)類似物、常見濫用藥物等的樣本；重復(fù)性參考品R1、R2均使用陰性頭發(fā)萃取液作為基質(zhì)，添加相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品制備而成；最低檢出限參考品C1～C3均使用陰性頭發(fā)萃取液作為基質(zhì)，添加相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品制備而成，（二）生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系研究申請(qǐng)人對(duì)試劑盒反應(yīng)體系的研究包括加樣體積的研究、毛發(fā)樣本量的研究、萃取時(shí)間的研究、反應(yīng)時(shí)間的研究、毛發(fā)處理液體積的研究等。通過(guò)功能性試驗(yàn)，最終確定了最佳的反應(yīng)申請(qǐng)人根據(jù)試劑盒中試劑及組件的主要生產(chǎn)工藝的研究結(jié)果，確定了最佳的生產(chǎn)工藝。（三）分析性能評(píng)估本產(chǎn)品分析性能評(píng)估內(nèi)容主要包括：適用的樣本類型、與參考方法的比對(duì)、精密度、最低檢出限、分析特異性、高劑量鉤狀效應(yīng)研究等。申請(qǐng)人提交了有效運(yùn)行的質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的三批產(chǎn)品在適用機(jī)型上的性能評(píng)估資料。在適用的樣本類型研究中，申請(qǐng)人對(duì)氯胺酮陽(yáng)性頭發(fā)樣本和陰性頭發(fā)樣本進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)與參考方法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，表明頭發(fā)樣本適用于本產(chǎn)品的檢測(cè)。在與參考方法的比對(duì)中，申請(qǐng)人采用三批成品試劑盒，對(duì)臨床陰性和陽(yáng)性樣本進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)還檢測(cè)了添加易引起交叉的類似物的樣本，結(jié)果與對(duì)比方法的符合率均大于90%，表明萊和試劑檢測(cè)結(jié)果與對(duì)比方法LC-MS/MS的一致性好。精密度研究是通過(guò)使用三批產(chǎn)品對(duì)企業(yè)陽(yáng)性參考品（P1）、企業(yè)最低檢出限參考品（C1-C3）、企業(yè)陰性參考品（N1、N2、臨床樣本每份重復(fù)3次，以及由三位操作者在不同的試驗(yàn)地點(diǎn)用不同批次的試劑分別對(duì)上述樣品進(jìn)行連續(xù)20天的檢測(cè)。結(jié)果表明：本產(chǎn)品的重復(fù)性、再現(xiàn)性滿足CV≤15％的要求。在最低檢出限研究中，申請(qǐng)人采用三批成品試劑盒，檢測(cè)陰性頭發(fā)樣本和不同濃度梯度的氯胺酮標(biāo)準(zhǔn)品，分別重復(fù)檢測(cè)20次，將檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性的最低濃度定為本產(chǎn)品的最低檢出限，并使用臨床樣本進(jìn)行最低檢出限驗(yàn)證。最終確定該產(chǎn)品的最低檢出限為0.2ng/mg氯胺酮。在分析特異性中，申請(qǐng)人采用三批成品試劑盒，對(duì)企業(yè)陰性參考品、陽(yáng)性參考品進(jìn)行檢測(cè)，每份樣本檢測(cè)10次，所有在干擾試驗(yàn)中，分別使用陰性和陽(yáng)性頭發(fā)樣本，對(duì)市面上主流的28種洗護(hù)美發(fā)產(chǎn)品、染發(fā)、燙發(fā)、漂發(fā)劑的干擾、內(nèi)源性物質(zhì)（如：頭皮屑、油脂）的干擾以及36種常見心血管治療藥物、降糖藥、抗生素、抗病毒和解熱鎮(zhèn)痛藥物的干擾進(jìn)行研究。結(jié)果表明：國(guó)內(nèi)常見洗發(fā)美發(fā)用品，如潘婷、海飛絲、蜂花等洗發(fā)乳、護(hù)發(fā)素、發(fā)膠、發(fā)蠟、染發(fā)劑、燙發(fā)劑、漂發(fā)劑等對(duì)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果均無(wú)影響，迷浪彈力素濃度大于3mg/ml時(shí)可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果陽(yáng)性，染發(fā)、燙發(fā)、漂發(fā)劑、內(nèi)源性物質(zhì)及常見藥物對(duì)試劑盒的檢測(cè)無(wú)影響。在交叉反應(yīng)研究中，申請(qǐng)人采用三批成品試劑盒，對(duì)常見的地西泮、苯巴比妥、曲馬多、美沙酮、普魯卡因、雷尼替丁、甲基安非他明、嗎啡、偽麻黃堿、苯甲酰愛康寧、加替沙星、四氫大麻酚酸、丁丙諾啡、納洛酮、苯丙胺、麻黃堿無(wú)交叉。在高劑量鉤狀效應(yīng)研究中，申請(qǐng)人采用三批成品試劑盒，對(duì)一系列濃度的氯胺酮標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢測(cè)，每個(gè)濃度點(diǎn)檢測(cè)3次，結(jié)果表明：直至標(biāo)準(zhǔn)品濃度為1mg/mL，試劑檢測(cè)結(jié)果仍正常，未出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。（四）陽(yáng)性判斷值研究本研究分為陽(yáng)性判斷值建立和驗(yàn)證兩部分。陽(yáng)性判斷值的建立是根據(jù)55例氯胺酮陽(yáng)性頭發(fā)樣本、200例陰性頭發(fā)樣本的檢測(cè)結(jié)果，通過(guò)建立ROC曲線，來(lái)確定試劑盒的陽(yáng)性判斷值。然后再使用三批成品試劑盒，檢測(cè)氯胺酮陽(yáng)性頭發(fā)樣本和陰性頭發(fā)樣本，經(jīng)驗(yàn)證，萊和試劑檢測(cè)結(jié)果與對(duì)比方法檢測(cè)結(jié)果具有高度一致性，本產(chǎn)品檢測(cè)氯胺酮的陽(yáng)性判斷值為0.2ng/mg。（五）穩(wěn)定性研究申請(qǐng)人對(duì)產(chǎn)品的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性、及樣本穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。6、9、12、18、24、30、31個(gè)月，毛發(fā)處理液保存在2-8℃的條件下，每一時(shí)間節(jié)點(diǎn)使用陰、陽(yáng)性對(duì)照品及陰、陽(yáng)性頭發(fā)樣本，對(duì)試劑盒的性能進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明產(chǎn)品測(cè)試卡和ID卡在4～30℃儲(chǔ)存的有效期為24個(gè)月，毛發(fā)處理液在2～8℃存放的有效期為24個(gè)月。此外，申請(qǐng)人對(duì)產(chǎn)品的運(yùn)輸穩(wěn)定性、使用穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性分別進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示，產(chǎn)品的性能均能滿足產(chǎn)品說(shuō)三、臨床評(píng)價(jià)概述申請(qǐng)人在武漢市精神衛(wèi)生中心、桂林市人民醫(yī)院、湖南省腦科醫(yī)院（湖南省第二人民醫(yī)院）共3家機(jī)構(gòu)完成了臨床試驗(yàn)。采用試驗(yàn)體外診斷試劑與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）進(jìn)行比較研究試驗(yàn)，確認(rèn)本產(chǎn)品的臨床性能。共納入病例709例，入組人群應(yīng)為疑似藥物濫用人群，同時(shí)納入其他藥物濫用的交叉反應(yīng)病例以及服用常見藥物的潛在干擾病例，樣本類型為頭發(fā)。其中，353例陽(yáng)性樣本，356例陰性樣本。試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)體外診斷試劑與對(duì)比方法對(duì)于氯胺酮檢測(cè)的陽(yáng)性符合率為98.9%（95%CI：97.1%，99.7%），陰性符合率為98.3%99.3%）。以上結(jié)果顯示兩者檢測(cè)結(jié)果之間具有良好的一致性。綜上所述，申報(bào)產(chǎn)品的臨床試驗(yàn)資料符合技術(shù)審評(píng)要求。四、產(chǎn)品受益風(fēng)險(xiǎn)判定根據(jù)YY/T0316-2016《醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用》對(duì)氯胺酮頭發(fā)檢測(cè)試劑盒（熒光免疫層析法）進(jìn)行產(chǎn)品受益風(fēng)險(xiǎn)分析。本產(chǎn)品用于體外定性檢測(cè)人體頭發(fā)樣本中最低檢出限為0.2ng/mg的氯胺酮，用于氯胺酮的初篩檢測(cè)，為臨床提供了一種更多的氯胺酮初篩檢測(cè)方法。（二）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估申請(qǐng)人對(duì)已知危險(xiǎn)（源）進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)，按照風(fēng)險(xiǎn)可接受準(zhǔn)則判斷每個(gè)危險(xiǎn)（源）的風(fēng)險(xiǎn)是否達(dá)到可接受水平，對(duì)合理可行降低的風(fēng)險(xiǎn)、不經(jīng)過(guò)風(fēng)險(xiǎn)/收益分析既判定為不可接受的風(fēng)險(xiǎn)采取控制措施，并對(duì)具體措施進(jìn)行實(shí)施驗(yàn)證，同時(shí)重新對(duì)采取措施后的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行估計(jì)，確認(rèn)其風(fēng)險(xiǎn)水平是否可接受。為保證產(chǎn)品使用安全，基于對(duì)主要剩余風(fēng)險(xiǎn)的規(guī)避，需要在產(chǎn)品說(shuō)明書中提示以下信息：（1）本產(chǎn)品僅用于在有資質(zhì)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)中對(duì)6個(gè)月內(nèi)是否有氯胺酮藥物濫用的初篩檢測(cè)。需要進(jìn)一步確認(rèn)及評(píng)價(jià)的樣本應(yīng)采用靈敏度和特異性更高的檢測(cè)方法進(jìn)行。（2）產(chǎn)品說(shuō)明書中介紹了該產(chǎn)品檢驗(yàn)方法的局限性及使用本申報(bào)項(xiàng)目為境內(nèi)第三類體外診斷試劑產(chǎn)品注冊(cè)。申請(qǐng)人的注冊(cè)申報(bào)資料符合現(xiàn)行要求，依據(jù)《醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例》（國(guó)務(wù)院令第739號(hào)）、《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》（國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局令第48號(hào)）等相關(guān)醫(yī)療器械法規(guī)與配套規(guī)章，經(jīng)系統(tǒng)評(píng)價(jià)后，建議準(zhǔn)予注冊(cè)。附件：產(chǎn)品說(shuō)明書【產(chǎn)品名稱】【包裝規(guī)格】場(chǎng)所濫用日趨嚴(yán)重，嚴(yán)重威脅健康。氯胺酮通常的使用方式為香煙吸服、鼻吸、靜脈注射或?qū)⒎勰┤芙怙嬘茫煤髸?huì)產(chǎn)生意識(shí)與感覺(jué)的分離狀態(tài)，導(dǎo)致神經(jīng)中毒反毒品進(jìn)入人體后在血脂酶的作用下代謝，進(jìn)入肝臟后進(jìn)一步代謝，有相當(dāng)量的液中的毒品基本代謝干凈，頭發(fā)相比體液分析有更多的優(yōu)點(diǎn)：樣本收集容易，不受【檢驗(yàn)原理】采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)，通過(guò)抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗原和頭發(fā)中可能含有的被檢測(cè)物的原理。試紙條含有被事先固定于膜上測(cè)試區(qū)（KET）的特異性氯胺酮合成抗原，毛發(fā)處理液中含有抗特異性小鼠抗氯胺酮IgG在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析。如樣本中的藥物濃度低于臨界值或者沒(méi)有待測(cè)藥物時(shí)，熒光標(biāo)記的特異性抗體不能被樣本中的藥物全部結(jié)合，熒光標(biāo)記的特異性抗體在層析過(guò)程中會(huì)被固定在測(cè)試區(qū)（T）上的特異性抗原結(jié)合，則在測(cè)試區(qū)(T)內(nèi)出現(xiàn)較強(qiáng)的熒光信號(hào)。如樣本中的藥物濃度高于臨界值時(shí)，熒光標(biāo)記的特異性抗體被樣本中的【主要組成成分】吸水紙、塑料片材及其他試紙條支持物；硝酸纖維素膜上包被有合成氯【儲(chǔ)存條件及有效期】測(cè)試卡于4～30℃避光保存，禁止冷凍，有效期24個(gè)月；毛發(fā)處理液于2～8℃檢測(cè)前先將檢測(cè)試劑、冷藏的毛發(fā)處理液、ID卡和待測(cè)樣本恢復(fù)到室溫【適用儀器】【樣本要求】通風(fēng)、潔凈的環(huán)境中保存，不得和易揮發(fā)的試劑和藥品在同一房間內(nèi)保存，保存時(shí)1.因枕部的頭發(fā)生長(zhǎng)速率變化小，處于生長(zhǎng)期的頭發(fā)多，且較少受到2.所采頭發(fā)平放于清潔紙上，標(biāo)記發(fā)根位置及來(lái)源部位，以便對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行3.采集不同人員頭發(fā)時(shí)，應(yīng)當(dāng)分別采集，獨(dú)立包裝，統(tǒng)一編號(hào)，并及時(shí)清理采【檢驗(yàn)方法】使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本使用說(shuō)明書以及杭州萊和生物技術(shù)有限公司的干式熒光免①標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試：試劑卡加樣后立即將插入儀器中，然后點(diǎn)擊“測(cè)試”按鈕，系統(tǒng)自注意：本產(chǎn)品只用于初篩檢測(cè)使用，檢測(cè)結(jié)果不能作為確診依據(jù)，必須使用第二種分析方法以確定結(jié)果，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）是目前較好的確認(rèn)【陽(yáng)性判斷值】檢驗(yàn)方法》（SF/ZJD0107025-2018）的描述：非吸毒人群：毛發(fā)中氯胺酮的濃度<【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】3.試劑及其組件僅適用于杭州萊和生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的干式熒光免疫分析儀，6.檢測(cè)結(jié)果為陰性不代表被測(cè)者沒(méi)有氯胺酮藥物濫用，可能因?yàn)楸粶y(cè)者藥物濫用時(shí)【檢驗(yàn)方法的局限性】2.本試劑只用于初篩檢測(cè)使用，檢測(cè)結(jié)果不能作為確認(rèn)藥物濫用的依據(jù)。為確保結(jié)【產(chǎn)品性能指標(biāo)】3、精密度：使用三批試劑，對(duì)陰、陽(yáng)性及最低檢出限參考伐他汀、阿司匹林、尿激酶、維拉帕米、阿托品、去甲腎上腺素、瑞格列萘、胰島素、格列本脲、阿卡波糖、鹽酸二甲雙胍、羅格列酮、青霉素鈉、螺旋霉素、鏈霉素、頭孢菌素、阿奇霉素、林可霉素、兩性霉素B、放線菌素沙星、無(wú)環(huán)蔦苷、金剛烷胺、左旋咪唑、轉(zhuǎn)移因子、對(duì)乙酰氨基酚、吲哚美辛、布洛芬、美洛昔康、保泰松，這些常見心血管治療藥物、降糖藥、抗生素、抗病毒和國(guó)內(nèi)常見洗發(fā)美發(fā)用品，如潘婷、多芬、海飛絲、蜂花等洗發(fā)乳、護(hù)發(fā)素、發(fā)膠、發(fā)蠟等對(duì)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果均無(wú)