生物化學(xué) 課件 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的分離、純化與鑒定_第1頁
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第二章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能第四節(jié)

蛋白質(zhì)的分離、純化與鑒定

一、蛋白質(zhì)分離純化的一般步驟1.蛋白質(zhì)樣品的前處理2.蛋白質(zhì)粗提液的粗分級分離3.濃縮蛋白質(zhì)的細(xì)分級分離4.蛋白質(zhì)結(jié)晶二、蛋白質(zhì)分離純化方法主要是根據(jù)蛋白質(zhì)在溶液中的性質(zhì)不同對蛋白質(zhì)進(jìn)行分離純化分子大小溶解度電荷吸附性質(zhì)對配體分子的生物學(xué)親和力高效液相層析和快速蛋白質(zhì)液相層析三、蛋白質(zhì)含量的測定及純度鑒定1.蛋白質(zhì)含量的測定

測定蛋白質(zhì)總量常用的方法有：凱氏定氮法、雙縮脲法、Folin-酚試劑法、紫外吸收法、染料結(jié)合法和膠體金測定法等。2.蛋白質(zhì)純度鑒定

蛋白質(zhì)純度鑒定通常采用物理化學(xué)的方法，如電泳、沉降、HPLC和溶解度分析等。目前采用的電泳分析有等電聚集、聚丙烯酰胺凝膠電泳和SDS、毛細(xì)管電泳等。

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