《慢性乙型肝炎感染中固有免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用綜述論文》4300字

慢性乙型肝炎感染中固有免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用綜述論文目錄TOC\o"1-2"\h\u25579慢性乙型肝炎感染中固有免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用綜述論文 1201871、自然殺傷細(xì)胞(Naturalkiller，NK) 1235702、樹突狀細(xì)胞(dendriticcell,DC) 23785小結(jié) 423101參考文獻(xiàn) 4細(xì)胞免疫療法作為一種重要的生物治療技術(shù)，越來越受到人們的關(guān)注。指根據(jù)免疫學(xué)原理使用自身免疫細(xì)胞治療HBV。在人體中，自然殺傷細(xì)胞（NK）、樹突狀細(xì)胞（DC）、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）、嵌合抗原受體T細(xì)胞（CAR-T）和其他細(xì)胞與細(xì)胞免疫有關(guān)。本文主要針對(duì)細(xì)胞免疫治療HBV的研究近況展開論述。自然殺傷細(xì)胞(Naturalkiller，NK)20世紀(jì)70年代，發(fā)現(xiàn)了一種CD3-CD56+細(xì)胞，被命名為NK細(xì)胞。進(jìn)一步的研究表明，NKs是身體的天然防線，是先天免疫的重要成員。與T淋巴細(xì)胞不同，NKs具有直接作用：它們不需要被腫瘤特異性抗原致敏，它們可以直接釋放穿孔素和顆粒酶來殺死腫瘤細(xì)胞，它們是腫瘤免疫治療的重要效應(yīng)細(xì)胞，同時(shí)，NKs還可以產(chǎn)生TNF-、IFN-等，從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。由于上述特點(diǎn)，基于NKs的免疫療法已成為HBV的新治療方法。目前，基于NK細(xì)胞的抗腫瘤免疫治療主要包括以下方案：1、通過基因工程等技術(shù)手段將特定基因片段導(dǎo)入NK細(xì)胞，增強(qiáng)NK細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的功能；2.使用外源化合物直接刺激NK細(xì)胞以增強(qiáng)NK細(xì)胞功能。一些研究表明，在HBV患者的肝移植過程中，使用IL-2刺激患者肝臟中的NK細(xì)胞可以增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性，同時(shí)分泌IFN-r，并表達(dá)腫瘤壞死因子[1]。周智鋒等人研究了IL-12誘導(dǎo)的NK細(xì)胞活化的抗腫瘤作用。他們使用肝癌小鼠模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，向小鼠注射IL-12，發(fā)現(xiàn)NKs激活受體的表達(dá)上調(diào)，抑制小鼠腫瘤生長的效果明顯[2].Jiang等人通過使用基因工程技術(shù)構(gòu)建NKL-IFN-a細(xì)胞，成功將IFN-a基因轉(zhuǎn)入NK細(xì)胞系[3]。為了觀察NKL-IFN細(xì)胞對(duì)HBV的作用，發(fā)現(xiàn)NKL-IFN-細(xì)胞對(duì)人原發(fā)性肝癌細(xì)胞具有更強(qiáng)的殺傷能力（體外實(shí)驗(yàn)）；將NKL-IFN細(xì)胞引入肝癌小鼠模型中，發(fā)現(xiàn)HBV腫瘤的生長受到抑制，小鼠的存活時(shí)間延長（體內(nèi)實(shí)驗(yàn)）。這可能與NKL-IFN細(xì)胞中一些與細(xì)胞毒性相關(guān)的基因的上調(diào)有關(guān)，如顆粒酶B、Fas配體等。同時(shí)，NKs分泌TNF-和IFN-r，從而增加Fas的表達(dá)，從而增強(qiáng)HBV細(xì)胞對(duì)NKs殺傷效應(yīng)的敏感性。從這一觀察可以看出，用IFN基因修飾的NK細(xì)胞可以增強(qiáng)癌細(xì)胞的敏感性，延長生存期，有望成為未來肝癌細(xì)胞免疫治療的新方案。來自日本的一項(xiàng)研究表明，肝移植后的肝癌患者通過輸注供體肝臟來源的活化NK細(xì)胞進(jìn)行治療。隨訪21個(gè)月后未發(fā)現(xiàn)肝癌復(fù)發(fā)[4]樹突狀細(xì)胞(dendriticcell,DC)1973年，Steinman他們發(fā)現(xiàn)了一種形狀奇怪的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞成熟時(shí)，細(xì)胞膜會(huì)伸出多刺的突起[5]。根據(jù)其特殊形狀，它被命名為樹突狀細(xì)胞（DC）。DC被稱為體內(nèi)最強(qiáng)大的抗原呈遞細(xì)胞（APC），是激活和初始化T細(xì)胞最有效的APC[6]。DC表面的MHC-I和MHC-II分子高度表達(dá)，DC表面的CD80/CD86與T細(xì)胞表面的相關(guān)受體結(jié)合，從而激活初始T細(xì)胞。目前，已開發(fā)出負(fù)載特異性腫瘤抗原的DC細(xì)胞疫苗。這種DC疫苗可以特異性刺激T細(xì)胞，促進(jìn)其遷移和聚集到腫瘤部位，并發(fā)揮其免疫功能[25]。以DC細(xì)胞為基礎(chǔ)的細(xì)胞治療具有很強(qiáng)的特異性，能夠在體內(nèi)長時(shí)間的存在，作為目前新興的一種腫瘤疫苗治療技術(shù)，已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)工作者的研究重點(diǎn)，并且在HBV的治療中已經(jīng)表現(xiàn)出了很好的前景。據(jù)報(bào)道，DC疫苗是從1995年開始應(yīng)用于臨床試驗(yàn)的[7]，目前，DC疫苗在治療某些惡性腫瘤(如:淋巴瘤、肺癌等)上取得了很好的效果。HBV患者在接種了DC疫苗后，能夠使自身的NK細(xì)胞的活性得到增強(qiáng)，并且能夠降低調(diào)節(jié)性T(Treg)細(xì)胞的比例[8]。Lee等針對(duì)HBV晚期患者的治療，采用的是一種被破裂的HBV細(xì)胞產(chǎn)物負(fù)載的DC細(xì)胞疫苗治療的方法，結(jié)果，患者的自身免疫得到強(qiáng)化，生存期相對(duì)增長[9]。與Lee的技術(shù)手法相同，董春帆等將患者自身的肝癌細(xì)胞裂解物負(fù)載DC細(xì)胞進(jìn)行治療HBV，臨床觀察可見，該患者的無瘤生存率提高了大約20%左右，這種DC細(xì)胞疫苗能夠延緩HBV腫瘤的復(fù)發(fā)、防止瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[10]。目前，國際上已經(jīng)利用DC細(xì)胞負(fù)載多種腫瘤抗原膚靶點(diǎn)，使CTL細(xì)胞得到活化，治療肝癌。尤其是在我國，該項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)率先開始入組病例，這項(xiàng)新技術(shù)可以用于肝癌臨床治療，成為肝癌綜合治療中有力的補(bǔ)充。3、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokine-inducedkiller,CIK)CIK細(xì)胞是一種表型為CD3+CD56+的異質(zhì)細(xì)胞，人體PBMC在體外培養(yǎng)過程中經(jīng)過多重刺激能夠得到。CIK細(xì)胞即具有T細(xì)胞的標(biāo)志(CD3+)，又具NK細(xì)胞的標(biāo)志(CD56+)[30]，同時(shí)，CIKS還同時(shí)具有兩種細(xì)胞的功能。根據(jù)以上理論，CIKS具有較強(qiáng)的殺傷機(jī)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的功能。因此，給機(jī)體回輸CIK細(xì)胞，能夠增強(qiáng)機(jī)體的免疫調(diào)劑功能，殺傷自身的腫瘤細(xì)胞，同時(shí)，也不會(huì)對(duì)自身的免疫系統(tǒng)造成損傷[11]。研究顯示，在每各療程回輸約(3-5)X109有以上內(nèi)容可以知道，CIK細(xì)胞與DC細(xì)胞相同，都是腫瘤的免疫治療的重要組成部分，DCs識(shí)別病原體，激活免疫系統(tǒng);CIKs可以間接殺傷瘤細(xì)胞，或者直接殺傷瘤細(xì)胞[13].DC細(xì)胞與CIK細(xì)胞聯(lián)合回輸不僅可以提高機(jī)體的自身免疫功能，延長生存期，同時(shí)還可以增加患者對(duì)于化療的敏感性，從而可以使用多種方法共同治療HBV?，F(xiàn)階段，已經(jīng)有研究證實(shí)，DCs與CIKs聯(lián)合培養(yǎng)獲得DC-CIKs,DC-CIKs回輸入患者體內(nèi)，與僅僅回輸單純的CIKs相比，抗瘤活性增強(qiáng)[14]。到目前，應(yīng)用DC-CIK免疫治療肝癌在我國已經(jīng)進(jìn)入臨床研究階段，并且，一部分取得較好的效果。陳寶安等分別使用CIKs和DC-CIK殺傷SMC-772肝癌細(xì)胞珠，發(fā)現(xiàn)，DC-CIK不光增殖活性比CIKS強(qiáng)，殺傷能力也明顯高于CIKS[15].鐘國成、張小玉等在研究DC-CIK過程中，直接利用DCS負(fù)載患者癌細(xì)胞裂解物，獲得的DCS與CIKs共培養(yǎng)[16]。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CIKs與這種DCS(Ag-DC)共同培養(yǎng)后，其殺傷腫瘤細(xì)胞的能力也明顯增強(qiáng)(體外實(shí)驗(yàn));而使用Ag-DC-CIK回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，發(fā)現(xiàn)HBV患者的免疫功能獲得顯著改善，臨床療效顯著提高。王娟等體外聯(lián)合培養(yǎng)DC-CIKs回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，1例患有肝癌且伴隨骨轉(zhuǎn)移的患者治療宣告無效，其余12例惡性腫瘤患者病情均有所好轉(zhuǎn)[17].目前，回輸自體DC-CIKs治療HBV，同時(shí)聯(lián)合其他技術(shù)手段，如肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)、射頻消融等，也取得了較好的成績。程小珍、彭大為等采用兩種技術(shù)治療中晚期HBV患者，將患者分為兩組，一組聯(lián)合治療，即接受TALE治療又回輸DC-CIKs，該組共32人，一組只接受TALE治療，該組共28人[18]。治療后發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合治療不僅能夠降低患者AFP,還能夠控制患者腫瘤的大小。尤振宇、蘇曉輝等將研究對(duì)象確定為肝癌患者，且在治療過程中均沒有手術(shù)適應(yīng)癥的出現(xiàn)[19]。將研究對(duì)象分為兩組，分別為試驗(yàn)組(介入治療+D治療)和對(duì)照組(只包含介入治療)。比較兩組患者治療后的效果，發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組的患者有效率比對(duì)照組高，同樣，疾病控制率也比對(duì)照組高。試驗(yàn)組AFP明顯下降，體重顯著增加。最后得出結(jié)果，DC-CIK治療雖然無法提高肝癌患者接受介入治療的短期內(nèi)的療效，但是能夠提高患者的生存質(zhì)量。4、嵌合抗原受體(chimericantigenreceptor,CAR)的T細(xì)胞(CAR-T)最近Science雜志將腫瘤免疫治療列在2013年十大科技突破的首位，嵌合抗原受體T細(xì)胞(CAR-T)的免疫細(xì)胞治療是其中的一個(gè)最為熱門的領(lǐng)域[20].CAR-T細(xì)胞是一種特殊的T淋巴細(xì)胞，它是利用基因工程技術(shù)手段在T淋巴細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入了一段單鏈抗體，而這個(gè)單鏈抗體能夠與T細(xì)胞的活化基序結(jié)合，具有特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞的作用。這種細(xì)胞不僅具有T淋巴細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的能力，還能夠特異性的識(shí)別腫瘤抗原[21].CAR-T細(xì)胞不會(huì)受到免疫逃逸的影響就可以發(fā)揮其抗腫瘤效應(yīng)，它能夠與腫瘤細(xì)胞特異性的結(jié)合，進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)[22]。CAR-T細(xì)胞能夠產(chǎn)生顆粒酶、穿孔素直接介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞溶解，也可以分泌細(xì)胞因子，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌IL-6等，間接影響腫瘤細(xì)胞的生長[23]。CAR-T細(xì)胞還能夠上調(diào)表達(dá)NIFIC-II,INF-γ和CD86，改變腫瘤微環(huán)境，進(jìn)而影響腫瘤的生長[24]。近幾年來，關(guān)于CAR-T細(xì)胞的研究有了很多令人振奮的突破，得到了很多好的結(jié)果。在ASH第55屆年會(huì)上3個(gè)課題組分別報(bào)道了抗CD19的CAR-T細(xì)胞在治療慢性、急性淋巴細(xì)胞性白血病和B細(xì)胞淋巴瘤的早期臨床治療效果，CAR-T細(xì)胞治療反應(yīng)的有效率達(dá)到60%~80%.研究者構(gòu)建不同結(jié)構(gòu)的CAR-T細(xì)胞，如，F(xiàn)AP特異性CAR-T細(xì)胞[25]、抗PSMA-CAR-T細(xì)胞[26],FR-CAR-T細(xì)胞[47],EGFRvIII-ICOS-CAR-T細(xì)胞[27],GD2-CAR-T細(xì)胞[28]，并證實(shí)CAR-T細(xì)胞對(duì)于肺癌、卵巢癌等其他腫瘤中發(fā)揮強(qiáng)烈的抗腫瘤效應(yīng)，延長患者的生存期。小結(jié)在我國，原發(fā)性肝癌的細(xì)胞免疫治療發(fā)展了十多年，己進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，并在不斷的改革、完善。細(xì)胞免疫治療并不是完美無缺的，現(xiàn)階段要更加認(rèn)真的研究集體的免疫應(yīng)答，彌補(bǔ)細(xì)胞免疫治療存在的不足，設(shè)計(jì)出新的免疫治療或者聯(lián)合治療的方案，從而為HBV的治療提供新的方法。參考文獻(xiàn)[1]NishidaS,LeviDM,TzakisAG.Livernaturalkillercellinoculumforlivertransplantationwithhepatocellularcarcinoma[J].CurrOpinOrganTransplant,2017,18(6):690-694.[2]周智鋒，江金華，李潔羽，等.IL-12誘導(dǎo)肝癌微環(huán)境中NK細(xì)胞活化發(fā)揮抗腫瘤作用.中國腫瘤生物治療雜志，2013,20(1):93-98.[3]NishidaS,LeviDW,TzakisAG.Livernaturalcellinoculumforlivertransplanttationwithhepatocellularcarcinoma[J].CurrOpinOrganTrandplant,2017,18(6):690-694.[4]崔瑩瑩,徐光福.加味參苓白術(shù)散對(duì)慢性乙型肝炎患者療效及免疫細(xì)胞功能的影響[J].2021.[5]SteinmanRM,CohnZA.Idetificationofanovelcelltypeinperipherallymphoidorgansofmice.Morphology,quantitation,tissuedistribution[J].JExpMED,1973,137(5):1142-1162.[6]王炳然,張立平,郭子寧,等.扶正祛毒方對(duì)慢性乙型肝炎病毒攜帶小鼠細(xì)胞免疫水平的調(diào)節(jié)作用[J].2020.[7]高慧,劉守勝,趙真真,等.腸道菌群介導(dǎo)的免疫反應(yīng)在慢性HBV感染中的作用[J].臨床肝膽病雜志,2019,35(11):4.[8]魏金剛,石統(tǒng)東,鄒麗云.Th9細(xì)胞在慢性乙型肝炎病毒感染不同階段中的作用[J].免疫學(xué)雜志,2019(10):6.[9]LeeWC,WangHC,HungCF,eta1.Vaccinationofadvancedhepatocellularcarcinomapatientswithtumorlysate-pulseddendriticcells:atrial.[J]Immunother,2005,28(5):496-504.[10]陳成聰.乙肝核心抗體在慢性HBV感染過程中的免疫調(diào)節(jié)和作用機(jī)制研究[D].南方醫(yī)科大學(xué),2019.[11]肖軍.乙型肝炎患者外周血中免疫細(xì)胞檢測的臨床意義[J].2021.[12]劉嬌,戢敏,陳星,等.PD-1/PD-L1信號(hào)通路在慢性乙型肝炎患者免疫調(diào)節(jié)中作用的研究進(jìn)展[J].山東醫(yī)藥,2020,060(001):90-94.[13]張沛欣,張穎.慢性乙型肝炎患者影響CD8+T細(xì)胞衰老的初討[C]//第十屆全國疑難及重癥肝病大會(huì)論文匯編.2019.[14]劉文林.乙型肝炎病毒慢性感染的臨床免疫學(xué)檢測的重要性[J].大家健康(上旬版),2017(3).[15]劉佳.慢性乙型肝炎病毒感染對(duì)外周血單個(gè)核細(xì)胞中凋亡分子表達(dá)的影響及其與免疫功能的相關(guān)性[J].安徽醫(yī)藥,2017,21(10):4.[16]鐘國成，張小玉，孫慧，等.抗原致敏DC聯(lián)合CIK在原發(fā)性肝癌治療中的應(yīng)用[J].中國腫瘤臨床，2019,36(24):1404-1408.[17]王娟，陶貞霞，宋榮英，等.DC-CIK細(xì)胞免疫治療惡性腫瘤的臨床研究[J].免疫學(xué)雜志，2019,25(1):71-74.[18]程小珍，彭大為，王美清，等.自體DC-CIK聯(lián)合肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)治療中晚期肝癌療效觀察[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志.2014,30(9):1401-1404[19]尤振宇，蘇曉輝，劉洋，等.DC-CIK生物治療聯(lián)合肝動(dòng)脈灌注化療治療肝癌的短期臨床觀察[Jl]河北醫(yī)藥.2019.35(11):1626-1628.[20]馬海霞,李嘉,劉勇鋼,等.肝內(nèi)調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞與輔助性T淋巴細(xì)胞17平衡在不同階段慢性乙型肝炎病毒感染者中的作用[J].中華傳染病雜志,2018,36(3):6.[21]金茜夏妍李興庫王