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第2課時(shí)培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化[學(xué)習(xí)目標(biāo)]1.學(xué)會(huì)利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)酵母菌計(jì)數(shù)。2.探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化。1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄颗囵B(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化并總結(jié)影響種群數(shù)量變化的因素。2.實(shí)驗(yàn)原理:酵母菌是單細(xì)胞________生物,生長(zhǎng)周期短,增殖速度快,可以用________培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)。3.提出問(wèn)題:培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的?4.作出假設(shè):培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量一開(kāi)始呈“J”形增長(zhǎng);隨著時(shí)間的推移,由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗、有害代謝產(chǎn)物的積累、pH的改變,酵母菌數(shù)量呈“________”形增長(zhǎng)。5.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(1)變量分析:自變量為_(kāi)_______;因變量為_(kāi)_______________;無(wú)關(guān)變量為_(kāi)_______________等。(2)怎樣對(duì)酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)?①方法:________________法。②用具:______________________、顯微鏡等。③步驟:先將________________________→________________→________________→讓培養(yǎng)液自行滲入→用濾紙吸去多余的培養(yǎng)液→酵母菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部→顯微鏡計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量→估算試管中酵母菌的總數(shù)。6.實(shí)施計(jì)劃:首先通過(guò)顯微鏡觀察,估算出10mL培養(yǎng)液中酵母菌的初始數(shù)量(N0),在此之后連續(xù)觀察7天,分別記錄下這7天的數(shù)值。判斷正誤(1)可用抽樣檢測(cè)的方法監(jiān)測(cè)酵母菌數(shù)量()(2)應(yīng)先向計(jì)數(shù)室滴加樣液,再蓋蓋玻片()(3)待酵母菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部再開(kāi)始計(jì)數(shù)()任務(wù)一:如何利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)資料1血細(xì)胞計(jì)數(shù)板是一塊比普通載玻片厚的特制玻片。它由四條下凹的槽構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬,它的中間被一個(gè)短橫槽隔為兩半,每個(gè)半邊上刻有一個(gè)方格網(wǎng)(如圖A)。每個(gè)方格網(wǎng)上有9個(gè)大方格,其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室,供計(jì)數(shù)用。1.計(jì)數(shù)室的長(zhǎng)和寬各為1mm,深度為0.1mm,容積為_(kāi)_____mm3。計(jì)數(shù)室通常有兩種規(guī)格,一種是大方格分為25個(gè)中方格,每個(gè)中方格又分為16個(gè)小方格;另一種是大方格分為16個(gè)中方格,每個(gè)中方格又分為25個(gè)小方格。這兩種規(guī)格的計(jì)數(shù)室,每個(gè)大方格都由________個(gè)小方格組成。2.蓋蓋玻片和滴加培養(yǎng)液哪個(gè)步驟在前?________________________________________________________________________________________________________________________________________________3.從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前,建議將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么?________________________________________________________________________________________________________________________________________________4.滴加培養(yǎng)液后要稍等片刻,待酵母菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部再計(jì)數(shù)。請(qǐng)分析原因。________________________________________________________________________________________________________________________________________________5.如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多,難以數(shù)清,應(yīng)當(dāng)采取什么措施?________________________________________________________________________________________________________________________________________________6.計(jì)數(shù)的酵母菌都是活的嗎?怎樣分辨是否為活菌?________________________________________________________________________________________________________________________________________________7.對(duì)于壓在計(jì)數(shù)方格界線上的酵母菌,應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)?________________________________________________________________________________________________________________________________________________8.若使用的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板(規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm)每個(gè)計(jì)數(shù)室分為25個(gè)中方格,每個(gè)中方格又分為16個(gè)小方格,將樣液稀釋100倍后計(jì)數(shù),發(fā)現(xiàn)計(jì)數(shù)室四個(gè)角及中央共5個(gè)中方格內(nèi)的酵母菌總數(shù)為20個(gè),則培養(yǎng)液中酵母菌的密度為_(kāi)_______________________個(gè)/mL。任務(wù)二:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果分析1.探究本實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎?需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎?________________________________________________________________________________________________________________________________________________2.設(shè)計(jì)記錄表記錄結(jié)果。3.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制的曲線圖如圖所示,請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:(1)增長(zhǎng)曲線的總趨勢(shì)是______________,原因是在開(kāi)始時(shí)培養(yǎng)液的______________、空間充裕、條件適宜,因此酵母菌大量繁殖,種群數(shù)量劇增,隨著酵母菌數(shù)量的不斷增多,營(yíng)養(yǎng)消耗、pH變化、________________積累等,使生存條件惡化,酵母菌死亡率高于出生率,種群數(shù)量下降。(2)根據(jù)酵母菌數(shù)量的變化曲線,作出對(duì)應(yīng)增長(zhǎng)速率的曲線圖。4.進(jìn)一步探究:其他因素對(duì)酵母菌種群數(shù)量的影響。資料2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如表所示:試管編號(hào)培養(yǎng)液/mL無(wú)菌水/mL酵母菌母液/mL溫度(℃)110-0.128210-0.153-100.128每天同一時(shí)間,各組取出試管,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板分別計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù)并記錄,連續(xù)觀察7天種群的密度變化如曲線圖所示:(1)本實(shí)驗(yàn)的自變量是________________。(2)A曲線對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)條件是什么?________________________________________________________________________________________________________________________________________________(3)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出結(jié)論:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。1.實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)及誤差分析(1)先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上,再用移液器或吸管將培養(yǎng)液滴在蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行滲入,用鑷子輕壓蓋玻片,避免因菌液過(guò)多頂起蓋玻片而改變計(jì)數(shù)室的容積。稍等片刻,待酵母菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部再計(jì)數(shù)。①如果先加培養(yǎng)液再蓋蓋玻片,那么蓋玻片可能由于已加入液滴的表面張力而不能?chē)?yán)密地蓋到計(jì)數(shù)板表面,使計(jì)數(shù)室內(nèi)部液體增多,導(dǎo)致計(jì)數(shù)結(jié)果偏高。此外,先蓋蓋玻片再滴加培養(yǎng)液,還能避免因直接滴加培養(yǎng)液時(shí),在計(jì)數(shù)室內(nèi)產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致計(jì)數(shù)室相對(duì)體積減小而造成誤差。②如果酵母菌未能全部沉降到計(jì)數(shù)室底部,通過(guò)顯微鏡觀察時(shí),就可能出現(xiàn)以下現(xiàn)象:要么能看清酵母菌但看不清格線,要么能看清格線但看不清酵母菌。(2)從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)前要振蕩試管。如果未振蕩試管就吸取培養(yǎng)液,可能出現(xiàn)兩種情況:一是從試管下部吸取的培養(yǎng)液濃度偏大;二是從試管上部吸出的培養(yǎng)液濃度偏小。另外,酵母菌常出現(xiàn)“抱團(tuán)”現(xiàn)象,因此取樣前需要將培養(yǎng)液充分振蕩、搖勻,最好用移液器來(lái)回吹吸若干次,以確保樣品被混勻。(3)本實(shí)驗(yàn)的目的是研究一定時(shí)間內(nèi)酵母菌活細(xì)胞數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化,但實(shí)際上顯微鏡直接計(jì)數(shù)的是總的菌體(包括死菌和活菌),可以通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)染色法區(qū)別活細(xì)胞與死細(xì)胞?;畹慕湍妇鷮⒊薀o(wú)色,死的酵母菌將呈藍(lán)色,然后分別計(jì)數(shù),算出兩者比例,從而進(jìn)一步換算出總菌體數(shù)中的活菌數(shù)。需要注意的是,加入的臺(tái)盼藍(lán)的體積應(yīng)折算在稀釋倍數(shù)中。2.計(jì)算公式(以計(jì)數(shù)酵母菌為例)1.在進(jìn)行酵母菌計(jì)數(shù)時(shí),先將蓋玻片放在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上,然后用吸管吸取搖勻的培養(yǎng)液,滴于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行滲入,多余的培養(yǎng)液用濾紙吸去。稍待片刻,將計(jì)數(shù)板放在顯微鏡的載物臺(tái)中央進(jìn)行觀察。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.稍等片刻再觀察,是為了使酵母菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部便于觀察計(jì)數(shù)B.對(duì)培養(yǎng)液中的酵母菌逐個(gè)計(jì)數(shù)非常困難,可用抽樣檢測(cè)的方法進(jìn)行估算C.計(jì)數(shù)時(shí),計(jì)數(shù)方格內(nèi)酵母菌過(guò)多難以計(jì)數(shù),可將培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后再計(jì)數(shù)D.實(shí)驗(yàn)中沒(méi)有對(duì)酵母菌細(xì)胞進(jìn)行染色,會(huì)導(dǎo)致活菌計(jì)數(shù)值小于活菌實(shí)際值2.某課題小組利用無(wú)菌培養(yǎng)液培養(yǎng)酵母菌,探究不同條件下酵母菌種群數(shù)量的變化規(guī)律。實(shí)驗(yàn)人員抽取每種條件下的酵母菌培養(yǎng)液各1mL,分別稀釋10倍后,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板(規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm,計(jì)數(shù)室為25×16型)進(jìn)行計(jì)數(shù),測(cè)得不同條件下每毫升培養(yǎng)液中酵母菌的數(shù)量,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖(單位:×107個(gè)/mL)。下列相關(guān)敘述正確的是()A.依據(jù)15℃、24h條件下酵母菌種群數(shù)量值,可推算所用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板每一個(gè)中方格中酵母菌的數(shù)量平均為12個(gè)B.溫度是該實(shí)驗(yàn)的自變量,酵母菌菌種、酵母菌數(shù)量、培養(yǎng)液成分等為無(wú)關(guān)變量C.培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量呈“S”形變化D.酵母菌在15℃環(huán)境中存活的時(shí)間最長(zhǎng),15℃是酵母菌種群數(shù)量增長(zhǎng)的最適溫度
第2課時(shí)培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化教材梳理2.真核液體4.S5.(1)時(shí)間酵母菌數(shù)量培養(yǎng)液的體積(2)①抽樣檢測(cè)②試管、滴管、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板③蓋玻片放在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上用吸管吸取培養(yǎng)液滴于蓋玻片邊緣判斷正誤(1)√(2)×(3)√核心探討任務(wù)一1.0.14002.先蓋蓋玻片,再滴加培養(yǎng)液于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行滲入,用濾紙吸去多余的培養(yǎng)液。3.使培養(yǎng)液中的酵母菌分布均勻,以減少誤差。4.如果酵母菌未能全部沉降到計(jì)數(shù)室底部,通過(guò)顯微鏡觀察時(shí),就可能出現(xiàn)以下現(xiàn)象:要么能看清酵母菌但看不清格線,要么能看清格線但看不清酵母菌。5.當(dāng)小方格中的酵母菌過(guò)多時(shí),可以增大稀釋倍數(shù)然后再計(jì)數(shù),即計(jì)數(shù)前應(yīng)搖勻→取樣→稀釋→計(jì)數(shù)。6.不都是,計(jì)數(shù)的酵母菌包括活菌和死菌??梢杂门_(tái)盼藍(lán)染液對(duì)菌體進(jìn)行染色,被染成藍(lán)色的是死菌,沒(méi)有染色的是活菌。7.對(duì)于壓在計(jì)數(shù)方格界線上的酵母菌,應(yīng)只計(jì)數(shù)相鄰兩邊及其夾角(一般是左上邊界及其夾角)的酵母菌。8.20×(25÷5)×100×10000=1×108任務(wù)二1.酵母菌在不同時(shí)間內(nèi)的數(shù)量可以相互對(duì)照,不需另設(shè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)。需要做分組重復(fù)實(shí)驗(yàn)獲取平均值,以保證計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性(對(duì)每個(gè)樣品可計(jì)數(shù)三次,再取平均值)。2.如表所示時(shí)間/天次數(shù)1234567123平均值3.(1)先增加再降低營(yíng)養(yǎng)充足有害產(chǎn)物(2)如圖所示4.(1)溫度、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(2)10mL培養(yǎng)液中28℃下培養(yǎng)(試管1)。(3)溫度和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)均會(huì)對(duì)酵母菌種群數(shù)量產(chǎn)生影響,溫度較低時(shí)種群增長(zhǎng)緩慢,營(yíng)養(yǎng)缺乏時(shí)種群幾乎不增長(zhǎng)典題應(yīng)用1.D[未對(duì)酵母菌染色會(huì)將死酵母菌計(jì)數(shù)在內(nèi),導(dǎo)致活菌計(jì)數(shù)
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